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16S rRNA Gene-Based Metagenomic Analysis of Soil Bacterial Diversity in Brazzaville, Republic of the Congo
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作者 Irène Marie Cécile Mboukou Kimbatsa Itsouhou Ngô +4 位作者 Armel Ibala Zamba Faly Armel Soloka Mabika Thantique Moutali Lingouangou Joseph Goma-Tchimbakala Etienne Nguimbi 《Advances in Microbiology》 2023年第9期477-498,共22页
Soil contains a great diversity of microorganisms, among which are bacteria. This study aimed to explore bacterial diversity in soil samples in Brazzaville in the Republic of the Congo. Environmental DNA was extracted... Soil contains a great diversity of microorganisms, among which are bacteria. This study aimed to explore bacterial diversity in soil samples in Brazzaville in the Republic of the Congo. Environmental DNA was extracted. The illumina MiSeq sequencing was held and the diversity indices have been computed. Illumina MiSeq sequencing revealed 21 Phyla, four of which were abundant: Proteobacteria, Acidobacteria, Actinobacteria and Bacteroidetes. Soil microbial communities in the studied samples were phylogenetically diverse but with a stable community structure. 17 classes are represented with relative abundances of Rihzobiales, Bacillales, Actinomycetales and Acidobacteriales. 40 families, the Alphaproteobacteria, the Bacilli and the 12 Actinobacteria. 83 orders among which the Rhizobiales are the most abundant followed by Bacillales and the least abundant followed by the Flavobacteriaceae. Of the 28 genera listed, the Bradyrhizobium is the most dominant in Mw3 and Mw4. 25 listed species, Bradyrhizobium, Bacillus, Actinoplanes, and Candidatu coribacter Acidobacterium are the most abundant species. The Shannon indices of Mw3 and Mw4 are equal, the H’max of Mw4 is greater than the H’max of Mw3. The Simpson index of Mw4 is equal to the Simpson index of Mw3, and the Pielou index (J) of Mw4 is less than the R of Mw3, but very close. This study opens interesting perspectives on the knowledge and exploitation of telluric bacteria in several areas of life. 展开更多
关键词 METAGENOMIC Sequencing 16s rrna gene SOIL Bacteria
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16S rRNA Gene Sequence Analysis of Snow Leopard, Gray Wolf, Horse and Bactrian Camel in Mongolia
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作者 Munkhtuul Tsogtgerel Munkhtogtokh Baljijjnyam +1 位作者 Nansalmaa Suren Lkhagvasuren Sodnom 《Journal of Agricultural Science and Technology(A)》 2017年第5期350-356,共7页
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COⅠ和16S rRNA基因在鱼胶品种鉴别中的适用性研究 被引量:2
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作者 管金梦 毛相朝 +4 位作者 马海霞 邓建朝 胡晓 戚勃 杨贤庆 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期89-94,共6页
为建立准确的鱼胶鉴别技术,该研究从DNA条形码的角度出发,分析了细胞色素氧化酶亚基I基因(cytochrome c oxidase subunitⅠ,COⅠ)和核糖体16S rRNA基因(16S ribosomal RNA,16S rRNA)在鱼胶品种中的鉴别适用性。选用3对通用引物对五大类... 为建立准确的鱼胶鉴别技术,该研究从DNA条形码的角度出发,分析了细胞色素氧化酶亚基I基因(cytochrome c oxidase subunitⅠ,COⅠ)和核糖体16S rRNA基因(16S ribosomal RNA,16S rRNA)在鱼胶品种中的鉴别适用性。选用3对通用引物对五大类鱼胶产品共30个样品的COⅠ基因和16S rRNA基因的序列片段进行PCR扩增和测序,利用DnaSP 6.12、Mega 11软件进行了DNA序列分析和遗传差异分析,最终基于邻接法(neighbor-joining,N-J)构建进化树。结果显示,在基因片段序列分析方面,2种基因片段都表现出核苷酸碱基偏倚性,16S rRNA基因序列变异率远小于COⅠ基因,16S rRNA基因遗传物质更具有稳定性。在遗传距离方面,COⅠ序列和16S rRNA序列种内平均遗传距离分别为0.56%和0.37%,种间平均遗传距离分别为20.26%和13.93%。从建树结果来看,16S rRNA基因在部分同源性较高的物种鉴别中不如COⅠ基因分类明确,但也能区分出五大类鱼胶。因此建议联合使用COⅠ和16S rRNA两种基因作为鱼胶品种鉴别的DNA条形码,鉴别准确率可达100%。 展开更多
关键词 鱼胶 DNA条形码 COⅠ基因 16s rrna基因 物种鉴别 系统进化分析
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Isolation of Pectinase Producing Bacteria from the Rhizosphere of <i>Andrographis paniculata</i>Nees and 16S rRNA Gene Sequence Comparison of Some Potential Strains 被引量:2
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作者 Md. Shahinur Kabir Tahera Tasmim 《Advances in Microbiology》 2019年第1期1-13,共13页
Pectinases, the enzymes which break down pectic substances, have a wide range of applications in food, agriculture and environmental sectors. In the present study, attempts were made to isolate highly efficient pectin... Pectinases, the enzymes which break down pectic substances, have a wide range of applications in food, agriculture and environmental sectors. In the present study, attempts were made to isolate highly efficient pectinase producer from the rhizosphere of a medicinal plant, Andrographis paniculata Nees, known as the “King of bitters”. The total heterotrophic bacterial count of the rhizosphere soil of A. paniculata Nees ranged from 1.53 × 109 to 2.52 × 109 cfu/g. A total of 65 bacterial colonies were randomly selected from the nutrient agar plates, purified and assessed for pectinase activity. Out of the 65 isolates, 62 (95.38%) showed varying degree of pectinase activity in plate assay using pectin as a sole source of carbon. Among the pectinase producing strains, JBST36 showed best pectinase activity which is followed by the JBST22 and JBST27. Morphological characterization, biochemical tests and 16S rRNA gene sequencing were performed to identify the three most potential strains. Based on the morphological, biochemical and molecular data, JBST22 was identified as Bacillus flexus and the other two were identified as Bacillus subtilis. Furthermore, nucleotide sequences of the 16S rRNA gene of these 3 strains were compared and a phylogenetic tree was constructed. The study reveals that there are at least 66 base differences in the 16S rRNA gene sequences of B. flexus JBST22 and the B. subtilis JBST36. 展开更多
关键词 16s rrna gene ANDROGRAPHIS paniculata PECTINASE RHIZOSPHERE
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Diversity of Microflora in Colonic Mucus from Severe Ulcerative Colitis Patients Analyzed by Terminal Restriction Fragment Length Polymorphism and Clone Libraries of Bacterial 16S rRNA Gene Sequences 被引量:1
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作者 I-Nung Huang Yuri Sato +8 位作者 Mitsuo Sakamoto Moriya Ohkuma Shinobu Ohnuma Takeshi Naitoh Chikashi Shibata Akira Horii Junko Nishimura Haruki Kitazawa Tadao Saito 《Advances in Microbiology》 2014年第13期857-870,共14页
Although the gut microflora is thought to be an essential factor in the development of ulcerative colitis (UC), the entire gut microflora occurring in UC remains unknown. Most studies use feces to represent the microf... Although the gut microflora is thought to be an essential factor in the development of ulcerative colitis (UC), the entire gut microflora occurring in UC remains unknown. Most studies use feces to represent the microflora distribution;however, here we analyzed the bacterial diversity in colonic mucus from UC patients receiving colectomy surgery and control patients. The diversity of microflora was investigated using a combination of terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP) and clone library analyses of the 16S rRNA gene sequences. In the T-RFLP analysis, the number of terminal restriction fragments (T-RFs) decreased significantly in UC patients when compared to control samples. Also in the clone library analysis, the number of operational taxonomic units (OTU) and the Shannon diversity index were reduced significantly in UC patients. These molecular analyses reveal an overall dysbiosis in UC patients. No specific pathogen was found, and a strong negative correlation in relative abundance of bacterial populations was observed between the phyla Bacteroidetes and Firmicutes in the UC patients. This is the first report showing a significant correlation between these two phyla, which may be important characteristics in the pathogenesis of UC. 展开更多
关键词 ULCERATIVE Colitis MICROFLORA Terminal Restriction Fragment Length Polymorphism 16s rrna gene CLONE Library
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Isolation of Swine Corynebacteria and Analysis of 16S rDNA Gene
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作者 Qin Yibin He Pingping +12 位作者 Lu Bingxia He Ying Li Bin Liang Jiaxing Duan Qunpeng Chen Zhongwei Bi Bingfen Zhou Yingning Su Qianlian Jiang Dongfu Li Keyu Lu Jingzhuan Zhao Wu 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2016年第6期339-343,共5页
A strain of gram-positive bacillus was isolated from suppurative lung organs of nursery pigs in a pig farm, which was further characterized by morphological observation, cultivation test, biochemical test, drug sensit... A strain of gram-positive bacillus was isolated from suppurative lung organs of nursery pigs in a pig farm, which was further characterized by morphological observation, cultivation test, biochemical test, drug sensitivity test, pathogenicity test and 16S rDNA gene cloning and sequence analysis. The results showed that the isolate grew well in rabbit blood agar plate and horse serum tryptone soybean agar (TSA) plate under aerobic condition, which could lead to mortality of mice and were susceptible to cephalosporin antibiotics and fluoroquinolone antibiotics. Phylogenetic analysis showed that the isolate had close genetic evolutionary relationships with Corynebacterium bacteria, and the sequence of 16S rRNA gene shared the homology of 91.7% -98.3% with the representative strain of coryne- bacteria, indicating the isolated strain was eorynebactefium. 展开更多
关键词 Coryrtebacterium Isolation and identification 16s rrna gene analysis
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猪附红细胞体16S rRNA基因的序列测定和系统进化分析 被引量:21
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作者 张浩吉 谢明权 +3 位作者 张健騑 覃宗华 顾万军 蔡建平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期596-601,共6页
从确诊为猪附红细胞体感染的猪场,无菌采集血样,抽提猪附红细胞体基因组DNA,采用真细菌的通用引物进行16S rRNA基因扩增,对扩增产物进行克隆和测序。从3 个地理位置不同的猪场均成功地扩增出长度为1 469 bp的核苷酸序列。系统进化分析表... 从确诊为猪附红细胞体感染的猪场,无菌采集血样,抽提猪附红细胞体基因组DNA,采用真细菌的通用引物进行16S rRNA基因扩增,对扩增产物进行克隆和测序。从3 个地理位置不同的猪场均成功地扩增出长度为1 469 bp的核苷酸序列。系统进化分析表明,3个猪场样品所测序列一致性达99 52%以上,具有相同的基因型,但与国外报道的猪附红细胞体Illinois株同源性为95%,属于同一基因群,但基因型不同;所有种类的附红细胞体和血巴尔通氏体组成同一进化分支,这类血营养菌与支原体科,支原体属的病原最靠近(75%),而与立克次氏体目的病原较远(70%)。上述研究证实,广东所流行的猪附红细胞体是一种新基因型的猪附红细胞体,建议命名为猪附红细胞体广东株型;为反映进化关系,猪附红细胞体和其它血营养菌应划归于支原体科的支原体属。 展开更多
关键词 猪附红细胞体 系统进化分析 rrna基因 16s 序列测定 附红细胞体感染 基因组DNA 核苷酸序列 立克次氏体 支原体 基因型 通用引物 基因扩增 扩增产物 地理位置 进化关系 猪场 真细菌 分析表 一致性 同源性 基因群 体组成
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奶牛子宫内膜炎化脓隐秘杆菌16SrRNA基因的鉴定与分析 被引量:18
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作者 刘明春 刘耀川 +4 位作者 赵敬翠 杨蕴力 李杰 吴聪明 沈建忠 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期343-345,共3页
对内蒙古呼和浩特地区奶牛子宫内膜炎化脓隐秘杆菌进行了分离鉴定。经生化实验鉴定的化脓隐秘杆菌利用PCR技术扩增其16S rRNA基因,得到1.5 kb目的片段;将目的片段与T载体连接,测定目的片段的基因序列,与GenBank公布的化脓隐秘杆菌16S r... 对内蒙古呼和浩特地区奶牛子宫内膜炎化脓隐秘杆菌进行了分离鉴定。经生化实验鉴定的化脓隐秘杆菌利用PCR技术扩增其16S rRNA基因,得到1.5 kb目的片段;将目的片段与T载体连接,测定目的片段的基因序列,与GenBank公布的化脓隐秘杆菌16S rRNA基因序列进行比较分析,其同源率为93%~100%。本试验共分离到化脓隐秘杆菌32株。 展开更多
关键词 奶牛 子宫内膜炎 化脓隐秘杆菌 鉴定 16s rrna基因
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基于线粒体12S和16S rRNA基因部分序列的角蟾亚科部分属种的系统发育关系 被引量:13
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作者 江建平 袁富蓉 +1 位作者 谢锋 郑中华 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期241-248,共8页
测定了角蟾亚科 2属 8种 (亚种 )和外群 3种的线粒体 12S和 16SrRNA基因部分DNA序列 ,比对后序列长共 94 9bp ,其中变异位点数 32 0 ,简约位点数 2 0 6。邻接法和最大简约法分析的系统关系树一致表明内群为一单系群 ,其中腺角蟾首先与... 测定了角蟾亚科 2属 8种 (亚种 )和外群 3种的线粒体 12S和 16SrRNA基因部分DNA序列 ,比对后序列长共 94 9bp ,其中变异位点数 32 0 ,简约位点数 2 0 6。邻接法和最大简约法分析的系统关系树一致表明内群为一单系群 ,其中腺角蟾首先与其他物种分开 ;沙坪角蟾与宽头短腿蟾聚为一支 ;余下的 5种 (亚种 )角蟾组成一支 ,其中小角蟾短肢亚种的广西种群和香港种群聚为一亚支 ,另一亚支包括峨眉角蟾、小角蟾指名亚种、尾凸角蟾和重庆武隆的角蟾种 ,后两种角蟾进化关系最近。本结果支持短肢角蟾为有效种 ,同时提示腺角蟾、沙坪角蟾与宽头短腿蟾可能隶属 3个不同的亚属或属。 展开更多
关键词 角蟾亚科 角蟾属 短腿蟾属 无耳蟾属 rrna基因 无尾类
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中国沿岸几种鲍线粒体16S rRNA基因片段序列比较及鲍属系统发育 被引量:15
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作者 王鹭骁 柯才焕 +3 位作者 王志勇 刘波 蔡明夷 王艺磊 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期167-173,共7页
用PCR技术克隆耳鲍(Haliolis asinina)、羊鲍(H.ovina)和多变鲍(H.varia)的线粒体16S rRNA基因的片段,并将PCR产物直接进行测序,得到长度530bp左右的片段。将这些序列与杂色鲍(H.diversicolor diversicolor)、九孔鲍(H.d... 用PCR技术克隆耳鲍(Haliolis asinina)、羊鲍(H.ovina)和多变鲍(H.varia)的线粒体16S rRNA基因的片段,并将PCR产物直接进行测序,得到长度530bp左右的片段。将这些序列与杂色鲍(H.diversicolor diversicolor)、九孔鲍(H.diversicolor supertexte)、大鲍(H.gigantea)、盘鲍(H.discus discus)、皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)等5种鲍的相应片段进行序列比较。结果表明,不同种鲍间16S rRNA基因的序列同源性较高,同源性范围为87.36%~90.77%,这说明鲍的这段基因片段在遗传过程中比较保守。序列的A+T含量约为56.68%,G+C含量约为43.32%。8种鲍序列的主要核苷酸变异位点集中在1-25bp、240-290bp和320~370bp3个区域。在序列的变异碱基巾,碱基的转换大大多于碱基的颠换,转换与颠换之比达到2.33:1,遗传距离的范围为0.002-0.128。用UPGMA法和NJ法绘制出8种鲍的系统发育树。结论认为,大鲍、皱纹盘鲍和盘鲍之间的遗传差异水平为亚种间的差异水平,台湾产的九孔鲍与大陆沿岸产的杂色鲍之间的差异仅仅是种群间的差异。 展开更多
关键词 16s rrna基因 序列分析 系统发育
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利用16S rRNA分析传统四川发酵泡菜中的细菌多样性 被引量:29
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作者 田伟 张琦 +5 位作者 邓珍珍 刘森 李明元 车振明 马力 向文良 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第17期215-218,共4页
为了解传统四川发酵泡菜中的细菌多样性,采用构建16S rRNA基因文库的方法,对样品进行研究。结果表明:通过16S rRNA基因序列分析,所得到129个克隆子均鉴定为乳酸菌,分布于Lactobacillus和Pediococcus两个属,所占比例分别为88.4%和10.1%。... 为了解传统四川发酵泡菜中的细菌多样性,采用构建16S rRNA基因文库的方法,对样品进行研究。结果表明:通过16S rRNA基因序列分析,所得到129个克隆子均鉴定为乳酸菌,分布于Lactobacillus和Pediococcus两个属,所占比例分别为88.4%和10.1%。L.pentosus、L.plantarum和P.damnosus是其中的优势菌种分别占50.4%、16.3%和10.1%,L.paralimentarius、L.sunkii、L.brevis、L.kisonensis、L.acetotolerans、L.namurensis分别占7.8%、4.7%、3.1%、1.6%、0.8%和0.8%,且P.damnosus、L.paralimentarius、L.sunkii、L.kisonensis和L.acetotolerans均在泡菜中发现。这些结果揭示四川泡菜中的微生物多样性,反映其中的微生物群落结构,展现很多未知的生物信息。 展开更多
关键词 四川泡菜 细菌多样性 16s rrna基因 克隆文库 系统发育分析
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16S rRNA基因序列分析法鉴定病原细菌 被引量:89
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作者 朱飞舟 陈利玉 陈汉春 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1035-1041,共7页
目的:运用16S rRNA基因序列分析法鉴定14种细菌,为该方法的临床应用奠定基础。方法:提取细菌DNA,采用通用引物PCR扩增16S rRNA基因片段并测序。将测序结果用Blastn在线软件在Nucleotide数据库中进行序列同源性比对,根据序列同源性鉴定... 目的:运用16S rRNA基因序列分析法鉴定14种细菌,为该方法的临床应用奠定基础。方法:提取细菌DNA,采用通用引物PCR扩增16S rRNA基因片段并测序。将测序结果用Blastn在线软件在Nucleotide数据库中进行序列同源性比对,根据序列同源性鉴定病原细菌。结果:12种细菌可以鉴定到"种",2种细菌可以鉴定到"属"。结论:16SrRNA基因序列分析是一种有效的病原细菌鉴定方法。 展开更多
关键词 16s rrna 病原细菌 基因序列分析
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应用16S rRNA基因文库技术分析土壤细菌群落的多样性 被引量:73
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作者 刘玮琦 茆振川 +1 位作者 杨宇红 谢丙炎 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1344-1350,共7页
【目的】土壤微生物在菜田生态系统中具有重要的生态功能,通过16S rRNA基因克隆文库技术分析典型菜田土壤细菌群落结构的组成情况,为揭示典型的菜田土壤微生物的多样性以及土地利用变化与生态环境效应之间的关系奠定基础。【方法】采用... 【目的】土壤微生物在菜田生态系统中具有重要的生态功能,通过16S rRNA基因克隆文库技术分析典型菜田土壤细菌群落结构的组成情况,为揭示典型的菜田土壤微生物的多样性以及土地利用变化与生态环境效应之间的关系奠定基础。【方法】采用未培养技术直接从北京和山东两地典型菜田土壤样品中提取微生物总的DNA,分别构建基于通用引物PCR扩增的土壤细菌16S rRNA基因克隆文库,通过HinfⅠ和HaeⅢ限制性内切酶对两地土壤细菌16S rRNA基因文库中的克隆进行ARDRA(Amplified Ribosomal DNA Rstriction Analysis)分析,将所有阳性克隆分为若干个可操作分类单元(OTU)。【目的】通过构建两地细菌克隆文库的系统发育树,并分析主要种群的组成表明:北京和山东菜田土壤细菌克隆文库的优势种群均为γ、β、α变形细菌亚群。两地的细菌种类组成分别包括124个OTUs和92个OTUs。【结论】北京地区和山东地区典型蔬菜地土壤细菌种群中优势种群均为变形细菌,但是土壤细菌多样性降低,这可能与典型菜田的多年连作,种植蔬菜种类单一直接相关。同时,也可能是造成菜田土壤病害普遍发生,土壤退化的一个重要原因。 展开更多
关键词 土壤细菌群落 16srrna基因 ARDRA 系统发育分析
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4种鳕鱼线粒体16SrRNA、COI和Cytb基因片段序列的比较研究 被引量:50
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作者 毕潇潇 高天翔 +1 位作者 肖永双 李永振 《南方水产》 2009年第3期46-52,共7页
对狭鳕(Theragra chalcogramma)、太平洋鳕(Gadus macrocephalus)、蓝鳕(Micromesistius poutassou)和远东宽突鳕(Eleginus gracilis)4种不同属鳕鱼的线粒体16S rRNA、Cytochrome oxidase subunit I(COI)和细胞色素b(Cytb)基因片段序列... 对狭鳕(Theragra chalcogramma)、太平洋鳕(Gadus macrocephalus)、蓝鳕(Micromesistius poutassou)和远东宽突鳕(Eleginus gracilis)4种不同属鳕鱼的线粒体16S rRNA、Cytochrome oxidase subunit I(COI)和细胞色素b(Cytb)基因片段序列进行了测定,分析比较了不同鳕鱼种间的序列差异。通过PCR扩增和序列测定,得到4种鳕鱼线粒体3个基因片段的总长度分别为539bp(16S rRNA)、601bp(COI)和385bp(Cytb),其基因片段的A+T含量都较高。4种鳕鱼种内个体间序列变异较小,3个基因片段的核苷酸替代速率依次为Cytb>COI>16S rRNA。Cytb基因片段序列的分析结果显示太平洋鳕和狭鳕间分歧时间约为219万年,发生于中新世(Mio-cene);宽突鳕与蓝鳕间分歧时间约为653万年,发生在上新世(Pliocene)。根据遗传距离构建的NJ系统树表明,狭鳕与太平洋鳕的亲缘关系较近,与蓝鳕的亲缘关系较远。 展开更多
关键词 鳕鱼 16s rrna基因 COI基因 CYT b基因 序列分析
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猪源嗜麦芽窄食单胞菌16S rRNA基因的克隆和序列分析 被引量:15
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作者 张浩吉 谢明权 +3 位作者 张健騑 覃宗华 蔡建平 顾万军 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2004年第6期3-5,共3页
从临床病猪无菌采集抗凝血 ,抽提全血基因组DNA ,用能够扩增大多数真细菌 16SrRNA基因的通用引物 ,扩增出长度为 15 0 2bp的嗜麦芽窄食单胞菌的 16SrRNA基因 ;该基因与国外报道的嗜麦芽窄食单胞菌部分临床和环境分离株核苷酸序列的同源... 从临床病猪无菌采集抗凝血 ,抽提全血基因组DNA ,用能够扩增大多数真细菌 16SrRNA基因的通用引物 ,扩增出长度为 15 0 2bp的嗜麦芽窄食单胞菌的 16SrRNA基因 ;该基因与国外报道的嗜麦芽窄食单胞菌部分临床和环境分离株核苷酸序列的同源性达 99%以上。证实嗜麦芽窄食单胞菌可感染猪。 展开更多
关键词 嗜麦芽窄食单胞菌 16 S rrna基因
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16SrRNA基因序列分析用于诊断病原性细菌感染初步研究 被引量:12
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作者 周永运 戎建荣 +4 位作者 白雪梅 叶长芸 邵祝军 王艳华 徐建国 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期639-642,共4页
目的建立一种可适用于多种病原菌检测的方法,以提高病原学诊断率,有利于传染病的病原学监测。方法细菌16SrRNA基因通用引物对直接从血液、尿液、脑脊液标本中提取的细菌DNA进行PCR扩增,并对16SrRNA基因扩增产物进行克隆和序列分析。结... 目的建立一种可适用于多种病原菌检测的方法,以提高病原学诊断率,有利于传染病的病原学监测。方法细菌16SrRNA基因通用引物对直接从血液、尿液、脑脊液标本中提取的细菌DNA进行PCR扩增,并对16SrRNA基因扩增产物进行克隆和序列分析。结果检测了28份临床标本,16SrRNA基因序列分析与尿液细菌培养结果不完全吻合;血液和脑脊液的16SrRNA的检出率均高于细菌培养。结论16SrRNA基因检测分析和细菌培养均具有良好的诊断效果,而针对16SrRNA基因的PCR直接扩增核酸并进行序列分析可对分离培养阴性的标本进行有效的补充诊断,可检测到多种病原菌如肠球菌,大肠杆菌,表皮葡萄球菌,牛链球菌,猪链球菌,布鲁氏菌,表皮葡萄球菌和脑膜炎球菌等,为疾病的诊断提供良好的线索。 展开更多
关键词 病原性细菌 16s rrna序列同源性比较
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中华虎头蟹线粒体16S rRNA和 COⅠ基因的序列比较及其系统进化分析 被引量:8
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作者 刘萍 段亚飞 +3 位作者 毛智超 李吉涛 高保全 李健 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1441-1451,共11页
为研究中华虎头蟹野生群体的种质资源及遗传多样性状况,采用PCR扩增获得中华虎头蟹线粒体DNA的16S rRNA和COⅠ基因片段,分别对其进行序列比较及系统进化分析。16S rRNA和COⅠ基因片段的A+T平均含量分别为67.7%和61.4%,A+T含量显著高于G+... 为研究中华虎头蟹野生群体的种质资源及遗传多样性状况,采用PCR扩增获得中华虎头蟹线粒体DNA的16S rRNA和COⅠ基因片段,分别对其进行序列比较及系统进化分析。16S rRNA和COⅠ基因片段的A+T平均含量分别为67.7%和61.4%,A+T含量显著高于G+C含量。长度为515 bp的16S rRNA基因片段共检测出单倍型4种,多态性位点4个,均为单一变异位点;长度为653 bp的COⅠ基因片段共检测出单倍型11种,多态性位点23个,其中简约信息位点5个和单一变异位点18个。COⅠ基因片段比16S rRNA基因片段具有较大的变异,更适于中华虎头蟹种群的遗传多样性分析。基于16S rRNA和COⅠ基因片段的遗传距离与系统进化分析结果一致,表明中华虎头蟹与梭子蟹科的蟹类亲缘关系最近,方蟹科与沙蟹科的蟹类聚为一支,与传统分类结果基本一致;而脊椎动物2个基因片段的系统进化分析结果不一致。根据16S rRNA基因片段的遗传距离推测出4科7种蟹的大致分化时间发生在古新世至始新世。 展开更多
关键词 中华虎头蟹 线粒体DNA 16s rrna基因 COⅠ基因 序列分析
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一株芽孢杆菌16SrRNA的基因序列测定和系统进化分析 被引量:11
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作者 李瑞芳 赵玉峰 +2 位作者 薛雯雯 田泱源 张长付 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期121-122,125,共3页
从河南黄河稻区土壤中分离出一株具有较强稻瘟病菌拮抗活性的芽孢杆菌菌株BS501,经过形态观察、生理生化特性检测和电镜技术,确定其为芽孢杆菌属细菌。为进一步确定其分类学地位,扩增了BS501基因组的16S rDNA,并将测序结果提交GenBank... 从河南黄河稻区土壤中分离出一株具有较强稻瘟病菌拮抗活性的芽孢杆菌菌株BS501,经过形态观察、生理生化特性检测和电镜技术,确定其为芽孢杆菌属细菌。为进一步确定其分类学地位,扩增了BS501基因组的16S rDNA,并将测序结果提交GenBank数据库(登录号:FJ755787)。利用BLAST软件将该序列与枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等芽孢菌属细菌及大肠杆菌16S rDNA序列进行同源性比对。系统进化树表明,BS501与芽孢菌属细菌在进化关系上组成一个大的分支,与枯草芽孢杆菌最为接近,与大肠杆菌较远。同源性分析表明该序列与枯草芽孢杆菌PRE23同源性达99%,证实该菌株的分类学地位为枯草芽孢杆菌。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 16srDNA 基因测序 系统进化分析
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拟诺卡氏菌16S rRNA,gyrB,sod和rpoB基因的系统发育分析 被引量:15
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作者 杨玲玲 职晓阳 李文均 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期951-955,共5页
为了更好地了解拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)各物种间的系统发育关系,该属现有有效描述种的gyrB,sod和rpoB基因的部分序列被测定,结合16S rRNA基因,对拟诺卡氏菌属进行了系统发育重建。研究发现拟诺卡氏菌属gyrB,sod和rpoB基因的平均相... 为了更好地了解拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)各物种间的系统发育关系,该属现有有效描述种的gyrB,sod和rpoB基因的部分序列被测定,结合16S rRNA基因,对拟诺卡氏菌属进行了系统发育重建。研究发现拟诺卡氏菌属gyrB,sod和rpoB基因的平均相似性分别为87.7%、87.3%和94.1%,而16S rRNA基因的平均相似性则达到96.65%,3个看家基因均比16S rRNA具有更高的分歧度。比较基于不同基因的系统树发现,由gyrB基因得到的系统树拓扑结构与16S rRNA得到的结构在亚群上基本一致。因此,gyrB基因在拟诺卡氏菌属的系统分类上比16S rRNA基因更具优越性。 展开更多
关键词 拟诺卡氏菌属 系统发育分析 16s rrna基因 看家基因
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16S rRNA基因克隆文库用于菌群分析的效能研究和评价 被引量:8
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作者 张守印 郭学青 +3 位作者 李振军 叶长芸 赵爱兰 徐建国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第16期1549-1552,共4页
目的建立16S rRNA基因克隆文库进行菌群相对定量的方法,评价其对细菌的检测效率以及对混合菌群中低含量细菌的分析能力。方法取脆弱类杆菌等9种细菌以相同及级差比例制备细菌悬液,分别用或不用变溶菌素处理后,用试剂盒提取核酸,16S rRN... 目的建立16S rRNA基因克隆文库进行菌群相对定量的方法,评价其对细菌的检测效率以及对混合菌群中低含量细菌的分析能力。方法取脆弱类杆菌等9种细菌以相同及级差比例制备细菌悬液,分别用或不用变溶菌素处理后,用试剂盒提取核酸,16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增、纯化、连接、克隆和测序,建立16S rRNA基因克隆文库,将序列与数据库进行比对分析。结果相同比例制备的菌悬液,加或不加变溶菌素提取的核酸,掺入的9种细菌均可检出。级差比例制备的菌悬液,加变溶菌素提取核酸,掺入的9种细菌均可检出;不加变溶菌素提取核酸,数量少难裂解的革兰阳性菌双歧杆菌未能检出。混合菌悬液中各种细菌的比例与文库反映的各种细菌的比例有数量对应关系,但不是线性对应关系。结论16S rRNA基因序列分析是一种较好的细菌菌群分析方法,它可以同时检出多种细菌,并能对混合细菌标本进行菌群相对定量,反映菌群中各种细菌的丰度,但不能准确定量菌群中各种细菌的数量。 展开更多
关键词 16s rrna基因 序列分析 菌群分析
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