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Ethylene Production and 1-Aminocyclopropane-l-Carboxylate (ACC) Synthase Gene Expression in Tomato ( L ycopsicon esculentum Mill.) Leaves Under Enhanced UV-B Radiation 被引量:2
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作者 Lizhe An Xiaofeng Xu +7 位作者 Hongguan Tang Manxiao Zhang Zongdong HOU Yanhong Liu Zhiguang Zhao Huyuan Feng Shijian Xu Xunling Wang 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2006年第10期1190-1196,共7页
Tomato (Lycopslcon esculentum Mill.) plants grown in a greenhouse were irradiated with two different levels of UV-B, namely 8.82 (T1) and 12.6 kJ/m^2 per day (T2). Ethylene production, 1-aminocyclopropane-1-carb... Tomato (Lycopslcon esculentum Mill.) plants grown in a greenhouse were irradiated with two different levels of UV-B, namely 8.82 (T1) and 12.6 kJ/m^2 per day (T2). Ethylene production, 1-aminocyclopropane-1-carboxylate (ACC) content, 1-(malonylamino) cyclopvopane-1-carboxylic acid (MACC) content, gene expression of ACC aynthase (EC 4.4.1.14), and ACC oxidase activity in tomato leaves were determined. The results Indicated that ACC content, the activity of ACC synthase and ACC oxidase, and ethylene production Increased continuously under low doses of UV-B radiation, whereas at high doses of radiation these parameters Increased during the first 12 d and then started to decrease. The MACC content increased continuously over 18 d under both doses of UV-B irradiation. The changes in ACC content, ACC synthaae activity, ACC oxidase activity, the transcriptional level of the ACC synthase gene, and ethylene production were consistent with each other, suggesting that ACC synthase was the key enzyme in ethylene biosynthesis and that ethylene production in tomato leaf tissues under UV-B radiation could be regulated by the expression of the ACC synthase gene. The results also indicate that the change in ethylene metabolism may be an adaptive mechanism to enhanced UV-B radiation. 展开更多
关键词 enhanced UV-B radiation ethylene production gene expression of 1-aminocyclopropane-l-carboxylate (ACC) synthase Lycopsicon esculentum
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Inhibition of TGF-β1 by eNOS gene transfer provides cardiac protection after myocardial infarction 被引量:4
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作者 Wei Qin Xin Chen Peisheng Liu 《The Journal of Biomedical Research》 CAS 2010年第2期145-152,共8页
Objective: Endothelial nitric oxide synthase (eNOS) and nitric oxide (NO) have been implicated in protection against myocardial ischemia injury. This study was designed to explore a new method of therapy for myoc... Objective: Endothelial nitric oxide synthase (eNOS) and nitric oxide (NO) have been implicated in protection against myocardial ischemia injury. This study was designed to explore a new method of therapy for myocardial injury by eNOS gene transfection. Methods: A rat model of myocardial infarction (MI) was established by left anterior descending (LAD) coronary artery ligation, eNOS gene in an adenovirus vector was delivered locally into the rat heart and hemodynamic parameters were examined after 3 weeks, Matrix metalloproteinase-2 and 9 (MMP-2, MMP-9) mRNA were measured by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), and the protein levels of eNOS, caspase-3, and transforming grouth factor 131 (TGF-131) were determined by western blot assay. Results: eNOS gene transfer significantly reduced cardiomyocyte apoptosis and improved cardiac function. In addition, eNOS significantly reduced the mRNA levels of MMP-2 and MMP-9. In the eNOS gene transfected group, the activation of caspase-3 and TGF-β1 were decreased. However, the protection was reversed by administration of the NOS inhibitor, N(o))-nitro-l-arginine methyl ester (L-NAME). Conclusion: These results demonstrate that the eNOS provides cardiac protection after myocardial infarction injury through inhibition of cardiac apoptosis and collagen deposition, and suppression of TGF-β1. 展开更多
关键词 endothelial nitric oxide synthase gene myocardial infarction cardiac function cardiomyocyte apoptosis collagen deposition transforming growth factor-β1
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AT_1R基因及CYP基因多态性与妊娠期高血压疾病的相关性 被引量:9
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作者 李宏芬 牛建清 +4 位作者 沈志霞 张蕴霞 代琪 王健 范淑英 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第26期23-25,共3页
目的探讨妊娠期高血压疾病的分子遗传学机制。方法采用聚合酶链反应—限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)分别检测87例妊娠期高血压疾病患者(观察组)和175例正常人(对照组)血管紧张素Ⅱ-1型受体(AT1R)基因A1166-C和醛固酮合成酶(... 目的探讨妊娠期高血压疾病的分子遗传学机制。方法采用聚合酶链反应—限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)分别检测87例妊娠期高血压疾病患者(观察组)和175例正常人(对照组)血管紧张素Ⅱ-1型受体(AT1R)基因A1166-C和醛固酮合成酶(CYP11B2)基因-344 T/C突变位点基因型。基因型及等位基因患妊娠期高血压疾病的风险率以比数比(OR)与95%可信区间(95%CI)表示。结果观察组中AT1R基因的AC基因型频率为33.3%,C等位基因频率为17.2%,相对于AA基因型、A等位基因,OR值分别为1.803、1.711;CYP11B2基因的TC和CC基因型频率分别为40.2%和17.2%,C等位基因频率为37.4%,相对于TT基因型、T等位基因,OR值分别为1.577、6.081、2.114;AT1R和CYP11B2联合基因型分析显示,相对于AA-TT联合基因型,同时携带AC-TC、AA-CC、AC-CC联合基因型的OR值分别为2.407、6.296、7.870。结论AT1R基因1166C和CYP11B2基因-344C点突变的等位基因可能增加妊娠期高血压疾病的遗传易感性;二者可能共同参与妊娠期高血压疾病的发生。 展开更多
关键词 妊娠期高血压疾病 血管紧张素Ⅱ-1型受体基因 醛固酮合成酶基因 基因多态性
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中华稻蝗几丁质合成酶1基因的mRNA表达及功能 被引量:9
4
作者 余志涛 刘晓健 +2 位作者 马恩波 郭亚平 张建珍 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期877-884,共8页
【目的】研究中华稻蝗(Oxya chinensis(Thunberg))几丁质合成酶1(CHS1)基因的表达特性及其在生长发育过程中的作用,从而为实现基于RNAi的蝗虫有效控制提供理论依据。【方法】根据已知中华稻蝗几丁质合成酶1基因(OcCHS1)保守区域部分cDN... 【目的】研究中华稻蝗(Oxya chinensis(Thunberg))几丁质合成酶1(CHS1)基因的表达特性及其在生长发育过程中的作用,从而为实现基于RNAi的蝗虫有效控制提供理论依据。【方法】根据已知中华稻蝗几丁质合成酶1基因(OcCHS1)保守区域部分cDNA序列(GenBank登录号:HM214491)设计特异性表达引物,运用RT-PCR和qPCR研究时空表达特性;采用RNA干扰技术研究其生物学功能。【结果】OcCHS1在中华稻蝗各龄期都有表达,其体表为高表达,其次是气管,其它组织部位表达量低。RNA干扰试验发现,4龄第4天若虫注射OcCHS1的双链RNA(dsRNA)后,与对照组相比,OcCHS1 mRNA表达量被沉默了70.8%,稻蝗出现蜕皮时间延迟、不能完成蜕皮或腹部皱缩死亡等现象,注射dsOcCHS1组死亡率为85.2%,与对照组(7.4%)相比差异显著。【结论】几丁质合成酶1对中华稻蝗的生长发育具有重要作用,其主要参与体表和气管几丁质的合成。采用RNA干扰技术使该基因沉默后可导致中华稻蝗死亡。 展开更多
关键词 中华稻蝗 几丁质合成酶基因1 MRNA表达 RNA干扰
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思茅松1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)基因的克隆及功能分析 被引量:14
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作者 王毅 周旭 +3 位作者 毕玮 杨宇明 李江 王娟 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2015年第6期833-838,共6页
1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)是甲基–D–赤藓醇–4–磷酸(MEP)途径中的第一个酶,也是限速酶。本文根据思茅松(Pinus kesiya var.langbianensis(A.Chev.)Gaussen)树皮转录组数据分析结果,获得思茅松DXS基因片段,然后根据获得的基因... 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)是甲基–D–赤藓醇–4–磷酸(MEP)途径中的第一个酶,也是限速酶。本文根据思茅松(Pinus kesiya var.langbianensis(A.Chev.)Gaussen)树皮转录组数据分析结果,获得思茅松DXS基因片段,然后根据获得的基因片段设计特异引物,运用RT-PCR和RACE技术从思茅松树皮中克隆得到完整的DXS基因(Pk DXS1)。Pk DXS1基因的c DNA全长序列2 888 bp,含有1个2 223 bp的开放阅读框(ORF),编码740个氨基酸,该基因推断的蛋白与赤松(Pinus densiflora Siebold&Zucc)DXS蛋白的相似性为99%,与欧洲云杉(Picea abies(L.)H.Karst.)DXS的相似性为97%;经氨基酸序列比对,推断思茅松DXS具有高等植物DXS酶特有的叶绿体转运肽,二磷酸硫胺结合位点和转酮醇酶结构域。半定量RT-PCR检测表明树皮的创伤促进DXS基因的表达。 展开更多
关键词 思茅松 DXS CDNA克隆 基因功能分析
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丹红注射液对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织ET-1、eNOS和iNOS基因表达的影响 被引量:11
6
作者 范辉 胡雅兵 +1 位作者 王小红 沈云志 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第27期2784-2790,共7页
目的:探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织中内皮素-1(ET-1)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表达与胰腺组织损伤的关系以及中药丹红注射液对其基因表达的影响.方法:96只SD雄性大鼠分为对照组(A组)、SAP模... 目的:探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织中内皮素-1(ET-1)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表达与胰腺组织损伤的关系以及中药丹红注射液对其基因表达的影响.方法:96只SD雄性大鼠分为对照组(A组)、SAP模型组(B组)及丹红治疗组(C组);用RT-PCR分别检测不同时间点各组大鼠胰腺组织中ET-1、eNOS及iNOS基因的表达;分别用放射免疫法、硝酸还原酶法测不同时间点各组大鼠测血液中ET-1、NO浓度;观察各组不同时间点的胰腺组织病理变化,并对胰腺组织损伤进行评分.结果:与B组比较,C组可明显降低胰腺组织各时间点ET-1、iNOS基因的表达(ET-1:4h:0.31±0.15vs0.58±0.17,8h:0.45±0.16vs0.72±0.31,12h:0.73±0.19vs1.19±0.28,24h:0.64±0.26vs0.92±0.36;iNOS:4h:0.32±0.10vs0.65±0.11,8h:0.36±0.14vs0.73±0.08,12h:0.43±0.07vs0.87±0.15,24h:0.32±0.06vs0.82±0.16,均P<0.05),上调eNOS基因的表达(4h:0.55±0.12vs0.25±0.11,8h:0.53±0.10vs0.27±0.12,12h:0.60±0.12vs0.24±0.10,24h:0.56±0.13vs0.28±0.16,均P<0.05).且可明显降低C组大鼠12、24h时间点胰腺病理评分(12h:4.73±1.29vs7.19±1.28,24h:5.64±1.26vs8.92±2.16,均P<0.05).结论:丹红注射液可下调重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中ET-1与iNOS基因的表达,上调eNOS基因的表达,改善胰腺组织病理损伤. 展开更多
关键词 急性胰腺炎 一氧化氮合酶 一氧化氮 内皮素 基因
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NOS1AP基因非编码区位点多态性与精神分裂症的关联研究 被引量:3
7
作者 胡国芹 吕钦谕 +4 位作者 赵静 朱明环 禹顺英 易正辉 陈健 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期29-34,共6页
目的·明确一氧化氮合成酶1接头蛋白(nitric oxide synthase 1 adaptor protein,NOS1AP)基因与中国汉族人群精神分裂症患者的相关性,并对NOS1AP基因阳性多态性位点变异引起的RNA和蛋白质的二级结构改变进行预测。方法·选择2012... 目的·明确一氧化氮合成酶1接头蛋白(nitric oxide synthase 1 adaptor protein,NOS1AP)基因与中国汉族人群精神分裂症患者的相关性,并对NOS1AP基因阳性多态性位点变异引起的RNA和蛋白质的二级结构改变进行预测。方法·选择2012年10月至2015年12月期间上海交通大学医学院附属精神卫生中心收治的333例早发性精神分裂症(early onset schizophrenia,EOS)患者和491例非早发性精神分裂症(non-early onset schizophrenia,non-EOS)患者,通过招募方式在上海交通大学医学院附属精神卫生中心的职工和复旦大学附属中山医院青浦分院体检中心的受检人群中筛选901名健康对照(health control,HC),用TaqMan探针检测3组人群NOS1AP基因rs12742393、rs4145621和rs1415263位点多态性。使用SHEsis在线软件进行各位点Hardy-Weinberg(H-W)平衡检验,分析等位基因和基因型频率的分布。通过SNPstats在线网站进行最优遗传模型的分析。利用RNAfold软件和DNAstar软件对阳性多态性位点变异引起的RNA和蛋白质的二级结构改变进行预测。结果·3个多态性位点基因型频率在各组中均符合H-W遗传平衡(P>0.05)。经Bonferroni校正后,EOS组与HC组相比,NOS1AP基因rs12742393位点等位基因和基因型频率分布差异均具有统计学意义(P=0.012,P=0.039)。遗传模型分析发现rs12742393位点最优基因型分布符合显性遗传模式(P=0.004)。软件预测发现,rs12742393位点A等位基因变异成C等位基因后,NOS1AP基因编码RNA和蛋白质的二级结构发生重要改变,导致空间稳定性下降。结论·NOS1AP基因非编码区rs12742393位点对EOS易感性存在重要影响。 展开更多
关键词 精神分裂症 一氧化氮合成酶1接头蛋白基因 多态性 二级结构 生物信息学
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外周血中TYMS和ERCC1基因多态性对胃肠道肿瘤患者化疗疗效的评估 被引量:6
8
作者 张凤岐 沈燕 +1 位作者 王珊珊 卫肖 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期906-911,共6页
目的探究外周血TYMS与ERCC1基因多态性在评估胃肠道肿瘤患者化疗疗效中的意义。方法实验分组:(1)未化疗患者标本:外周血组和肿瘤组织组。(2)化疗患者标本:有效组和无效组。PCR和PCR-RFLP检测外周血与肿瘤组织TYMS、ERCC1基因型。结果未... 目的探究外周血TYMS与ERCC1基因多态性在评估胃肠道肿瘤患者化疗疗效中的意义。方法实验分组:(1)未化疗患者标本:外周血组和肿瘤组织组。(2)化疗患者标本:有效组和无效组。PCR和PCR-RFLP检测外周血与肿瘤组织TYMS、ERCC1基因型。结果未化疗患者外周血与肿瘤组织中,TYMS基因3R/3R、(2R/2R、2R/3R)基因型检出率均为72.09%、27.91%(P<0.01);ERCC1基因C/C、(T/T、C/T)基因型检出率均为81.39%、18.61%(P<0.01)。化疗患者外周血TYMS基因3R/3R、(2R/2R、2R/3R)基因型检出率为65.79%和34.21%,ERCC1基因C/C、(T/T、C/T)检出率为63.16%和36.84%;TYMS基因型携带者化疗有效率分别为18%和57.69%,ERCC1基因型携带者化疗有效率为47.91%和3.57%。TYMS、ERCC1各基因型与化疗有效率相关(P<0.01),各基因型间化疗有效率差异有统计学意义(P<0.01)。结论外周血标本可替代肿瘤组织检测TYMS和ERCC1基因多态性,且外周血TYMS和ERCC1基因多态性可用于评估5-Fu和铂类药物疗效。 展开更多
关键词 PCR-RFLP 肿瘤化疗敏感基因 TYMS ERCC1 疗效评估
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缺氧诱导因子-1和红细胞生成素3′-增强子调节内皮细胞环氧合酶和血栓素合酶基因转录 被引量:15
9
作者 夏若寒 郝天玲 +1 位作者 于江洲 金咸瑢 《中国应用生理学杂志》 CSCD 2000年第1期48-51,共4页
目的和方法 :将红细胞生成素 (EPO) 3′ 增强子野生片断及点突变片断借脂质体转入人脐静脉内皮细胞株ECV 30 4,用半定量RT PCR测定正常与缺氧诱导因子 1 (HIF 1 )诱导剂氯化钴 (CoCl2 )作用下培养 6h的细胞环氧合酶 2 (COX 2 )和... 目的和方法 :将红细胞生成素 (EPO) 3′ 增强子野生片断及点突变片断借脂质体转入人脐静脉内皮细胞株ECV 30 4,用半定量RT PCR测定正常与缺氧诱导因子 1 (HIF 1 )诱导剂氯化钴 (CoCl2 )作用下培养 6h的细胞环氧合酶 2 (COX 2 )和血栓素合酶 (TXS)的mRNA。结果 :HIF 1诱导剂CoCl2 可诱导ECV 30 4的COX 2和TXS基因转录明显增强 ;向细胞导入野生EPO3′增强子片断可阻断CoCl2 诱导的COX 2和TXS基因转录增强 ,而点突变片断无此作用。结论 :在COX 2和TXS基因序列中 ,可能存在EPO3′ 增强子类似片断中的HIF 1的结合序列 ,HIF 1诱导COX 2和TXS基因表达增强可能主要通过HIF 1与该序列结合实现的。 展开更多
关键词 EPO3'-增强子 TXS 基因转录 HIF-1 COX-2
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小苍兰ACC合成酶FhACS1基因的克隆与序列分析 被引量:1
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作者 袁媛 王月 +1 位作者 唐东芹 连芳青 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期422-428,共7页
以小苍兰品种"上农金皇后"为研究对象,利用PCR技术和染色体步移技术首次克隆到了ACC合成酶FhACS1基因的全长序列和编码序列。结果表明:FhACS1基因全长为2 576 bp,包含长为433 bp的5′端非编码区序列(5′-UTR)以及长为373 bp的... 以小苍兰品种"上农金皇后"为研究对象,利用PCR技术和染色体步移技术首次克隆到了ACC合成酶FhACS1基因的全长序列和编码序列。结果表明:FhACS1基因全长为2 576 bp,包含长为433 bp的5′端非编码区序列(5′-UTR)以及长为373 bp的3′端非编码区序列(3-′UTR);开放读码框(ORF)长度为1 371 bp,推定编码457个氨基酸。分析表明,该基因包含3个内含子和4个外显子。序列分析结果显示,FhACS1推导蛋白具备ACS蛋白的7个保守结构域;在氨基酸水平上,FhACS1与小果芭蕉的同源性最高(85%);系统进化分析表明,FhACS1与孟宗竹BaACS(BAC56949.1)、水稻OsACS1(AAA33888.1)、小果芭蕉MaACS1(AAQ13435)的亲缘关系最近。在其已知启动子区域,发现有多个对脱落酸、赤霉素、细胞分裂素等激素响应的顺式元件,以及对干旱和低温等逆境胁迫响应的顺式元件。 展开更多
关键词 小苍兰 ACC合成酶 基因 序列分析 顺式元件
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拟南芥肌醇-1-磷酸合酶类蛋白基因的克隆表达 被引量:5
11
作者 宋颖琦 杨谦 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1641-1643,1657,共4页
以野生型拟南芥总RNA为模板,逆转录PCR反应获得拟南芥肌醇-1-磷酸合酶类蛋白基因cDNA(AtMIPS1),开放读码框为1533 bp,编码510个氨基酸.与已报道物种MIPS基因氨基酸序列比较分析表明,AtMIPS1与植物MIPS基因的氨基酸同源性和相似性较高达... 以野生型拟南芥总RNA为模板,逆转录PCR反应获得拟南芥肌醇-1-磷酸合酶类蛋白基因cDNA(AtMIPS1),开放读码框为1533 bp,编码510个氨基酸.与已报道物种MIPS基因氨基酸序列比较分析表明,AtMIPS1与植物MIPS基因的氨基酸同源性和相似性较高达86%~90%与95%~96%,并含有MIPS基因的保守区域'334SYNHLGNNDG'.将该cDNA序列不改变阅读框架克隆到pET28a(+)原核表达载体上,SDS-PAGE结果表明:在0.12g/L IPTG诱导2 h的条件下得到最佳的蛋白表达效果,AtMIPS1的成功表达为其功能研究打下基础. 展开更多
关键词 拟南芥 肌醇-1-磷酸合酶类蛋白基因 克隆 原核表达
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东方山羊豆肌醇-1-磷酸合酶基因的克隆与分析 被引量:2
12
作者 李春艳 宋清晓 +1 位作者 刘建宁 高洪文 《家畜生态学报》 2010年第5期17-22,共6页
探索新的基因和基因组合在植物耐盐性的研究中是至关重要的。本试验根据在不同植物中功能相同的同源基因保守序列设计引物,以250 mM NaCl胁迫后东方山羊豆(Galega.orientalis L.)幼嫩叶片中所提取的总RNA为模板,采用RT-PCR及RACE方法从... 探索新的基因和基因组合在植物耐盐性的研究中是至关重要的。本试验根据在不同植物中功能相同的同源基因保守序列设计引物,以250 mM NaCl胁迫后东方山羊豆(Galega.orientalis L.)幼嫩叶片中所提取的总RNA为模板,采用RT-PCR及RACE方法从东方山羊豆中克隆了一种新的肌醇-1-磷酸合成酶基因GoMIPS,cDNA全长1 858 bp,3'非编码区为256 bp,5'非编码区为69 bp,开放阅读框为1 533 bp,编码510个氨基酸。与已报道物种的MIPS基因氨基酸序列比较分析表明,GoMIPS与其他植物MIPS基因氨基酸相似性高达87%~95%,GoMIPS推导的氨基酸序列中含有植物MIPS基因所具有典型的NAD+结合区(GWGGNNG)和底物结合位点(SYNHLGNNDG),且9种植物NAD+结合区位置比较保守,均起始于第68个氨基酸。这一结果暗示功能结构域在进化过程中具有较高的稳定性。 展开更多
关键词 东方山羊豆 肌醇-1-磷酸合成酶 CDNA末端快速扩增 基因克隆
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龙眼胚性愈伤组织ACC合成酶基因(DL-ACS1)的克隆及表达分析 被引量:2
13
作者 李惠华 赖钟雄 +1 位作者 苏明华 林玉玲 《热带作物学报》 CSCD 2011年第5期854-860,共7页
以龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织为材料,采用同源克隆和RACE方法分离得到龙眼胚性愈伤组织乙烯合成限速酶DL-ACS1(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase)基因的cDNA全长序列(GenBank,FJ617537),共1 817 bp,包含了5&... 以龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织为材料,采用同源克隆和RACE方法分离得到龙眼胚性愈伤组织乙烯合成限速酶DL-ACS1(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase)基因的cDNA全长序列(GenBank,FJ617537),共1 817 bp,包含了5'非编码区(73 bp),开放阅读框(1 437 bp),3'非编码区(307 bp)。该cDNA开放阅读框的氨基酸序列(含478个氨基酸)与其它植物ACS具有77%~63%同源性,属于ACC Synthase家族。实时荧光定量PCR分析表明,该基因在龙眼体细胞胚胎(以下简称龙眼体胚)各阶段的表达量存在较大的时期差异,其中,球形胚(Stage 5)的表达量最高,鱼雷形胚(Stage 7)的表达量最低。 展开更多
关键词 龙眼 胚性愈伤组织 ACC合成酶基因 基因克隆 实时荧光定量PCR
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苹果砧木山定子MbNas1的克隆、表达与亚细胞定位 被引量:1
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作者 杨国慧 石岩 +3 位作者 吕冰玉 王冰 于洋 韩德果 《湖北农业科学》 2015年第9期2260-2263,共4页
以苹果砧木山定子(Malus baccata)为试材,根据小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)中克隆得到的尼克烟酰胺合成酶基因Mx Nas1(登录号:DQ403256)的全长序列设计特异引物,通过RT-PCR方法从山定子c DNA中克隆到Nas1基因并命名为Mb... 以苹果砧木山定子(Malus baccata)为试材,根据小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)中克隆得到的尼克烟酰胺合成酶基因Mx Nas1(登录号:DQ403256)的全长序列设计特异引物,通过RT-PCR方法从山定子c DNA中克隆到Nas1基因并命名为Mb Nas1,该基因全长为978 bp。预测该基因可编码325个氨基酸,理论等电点为5.26,相对分子质量为36.09 ku。Real-time PCR结果表明,正常供铁(EDTA-Na Fe,40μmol/L)时,该基因在山定子水培苗的新叶、老叶、根、茎的韧皮部中均有表达,在木质部表达量较低;缺铁处理(4μmol/L)时,该基因在根和新叶中的表达加强,第6天达到最高值,之后开始下降;在老叶中表达逐渐减弱;高铁处理(160μmol/L)时,该基因在根和新叶中的表达减弱,在第9天达到最小值,之后有所上升;在老叶中表达逐渐增强。基因枪亚细胞定位试验表明,Mb Nas1蛋白质定位在细胞质膜上。 展开更多
关键词 山定子(Malus baccata) 尼克烟酰胺合成酶基因(Mb Nas1) 表达分析 亚细胞定位
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Gax基因对低氧性肺动脉内皮细胞增殖与ET-1、VEGF和eNOS蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 夏世金 吴俊珍 +5 位作者 万文斌 孙涛 彭正羽 吴金峰 胡明冬 钱桂生 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期6170-6172,共3页
目的观察Gax基因对低氧性肺动脉内皮细胞(PAEC)增殖及内皮素(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达的影响。方法取大鼠肺动脉,用酶消化法获取PAEC并进行原代培养;分4组:未转染常氧对照组(常氧组)、未转染... 目的观察Gax基因对低氧性肺动脉内皮细胞(PAEC)增殖及内皮素(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达的影响。方法取大鼠肺动脉,用酶消化法获取PAEC并进行原代培养;分4组:未转染常氧对照组(常氧组)、未转染低氧处理组(低氧组)、Ad-βGal转染再行低氧处理对照组(Ad-βGal+低氧组)、Ad-Gax转染再行低氧处理组(Ad-Gax+低氧组)。分别在常氧(21%O2)和低氧(2.5%O2)6 h后,采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测PAECs增殖和培养上清液中ET-1、VEGF和eNOS蛋白水平。结果与常氧组比较,低氧组和Ad-βGal+低氧组PAEC的3H-TdR掺入量均显著升高(P<0.01);与低氧组比较,Ad-Gax+低氧组PAEC的3H-TdR掺入量均明显降低(P<0.01)。与常氧组比较,低氧组和Ad-βGal+低氧组PAEC上清中的VEGF和ET-1水平均显著升高(P<0.01),而eNOS含量明显降低(P<0.01);与低氧组比较,Ad-Gax+低氧组PAEC上清中VEGF和ET-1水平均明显降低(P<0.01),而eNOS水平显著升高(P<0.01)。结论低氧诱导PAEC异常增殖加速,而此时增强Gax基因表达可抑制细胞异常增殖;低氧上调PAEC中VEGF和ET-1含量,下调eNOS含量,而增强Gax表达可以逆转这种现象。 展开更多
关键词 GAX基因 低氧 肺动脉高压 内皮细胞 增殖 血管内皮生长因子 内皮素-1 内皮型一氧化氮合酶
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PAI-1基因启动子区4G/5G基因多态和eNOS第4内含子a/b基因多态与糖尿病肾病的相关性研究 被引量:1
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作者 李长贵 杨乃龙 《山东医药》 CAS 北大核心 2002年第17期16-18,共3页
为探讨 PAI- 1基因启动子区 4 G/ 5 G基因多态性、一氧化氮合酶 (e NOS)第 4内含子 2 7bp插入 /缺失 (a/b)多态性与糖尿病肾病 (DN)的相关性 ,采用发色底物法测定 PAI- 1活性 ;等位基因特异性引物 PCR扩增技术测定 PAI- 1基因 4 G/ 5 G... 为探讨 PAI- 1基因启动子区 4 G/ 5 G基因多态性、一氧化氮合酶 (e NOS)第 4内含子 2 7bp插入 /缺失 (a/b)多态性与糖尿病肾病 (DN)的相关性 ,采用发色底物法测定 PAI- 1活性 ;等位基因特异性引物 PCR扩增技术测定 PAI- 1基因 4 G/ 5 G多态性 ;聚合酶链反应测定 e NOS基因第 4内含子 2 7bp的 a/ b多态性。结果显示 ,Hb A1c、SBP、TC、e NOS基因第 4内含子 a/ b多态均属 DN的独立危险因素。早期糖尿病肾病组 (DN+组 ) a等位基因及 ab基因型频率显著高于糖尿病非肾病组 (DN-组 ) (P<0 .0 5 )。DN+组血浆 PAI- 1活性明显高于 DN-组 (P<0 .0 5 ) ;4 G纯合子组 PAI- 1活性明显高于 4 G/ 5 G杂合子及 5 G纯合子组 (P<0 .0 0 5 )。2型糖尿病患者中 ,4 G纯合子和a/ b杂合子携带者 DN的相对风险明显增加 (P<0 .0 5 ) ,4 G杂合子携带者 DN的相对风险增加不明显 (P>0 .0 5 )。当 a/ b杂合子和 4 G纯合子基因多态并存时 DN的发病风险明显增加。认为 PAI- 1基因启动子区 4 G/ 5 G基因多态、e NOS基因第 4内含子 a/ b多态与 DN的发生、发展有关。两种基因多态同时存在时 。 展开更多
关键词 2型糖尿病 内皮细胞型NO合酶 血浆纤溶酶原激活物抑制物-1 基因多态性 糖尿病肾病
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痤疮丙酸杆菌诱导人单核细胞iNOS、NO及Nramp1表达的研究 被引量:1
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作者 高剑 齐显龙 +2 位作者 孙东杰 刘玲 高天文 《中国麻风皮肤病杂志》 2007年第1期15-18,共4页
目的:观察人源性单核细胞系THP-1在痤疮丙酸杆菌(P.acnes)活菌刺激后,不同时段诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、自然抗性相关巨噬细胞蛋白1(Nramp1)的表达水平和细胞培养液上清中一氧化氮(NO)的含量,初步探讨天然免疫过程中单... 目的:观察人源性单核细胞系THP-1在痤疮丙酸杆菌(P.acnes)活菌刺激后,不同时段诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、自然抗性相关巨噬细胞蛋白1(Nramp1)的表达水平和细胞培养液上清中一氧化氮(NO)的含量,初步探讨天然免疫过程中单核-巨噬细胞反应氮中间产物(RNI)系统对PP.acnes感染的反应机制。方法:使用实时荧光定量PCR技术检测iNOS、Nramp1表达量,Griess法检测培养液上清NO含量。结果:P.acnes活菌可以有效诱导人源性单核细胞系THP-1 iNOS、NO和Nramp1的显著表达,表达量在刺激后6~24h达到高峰。结论:天然免疫中的RNI系统在P.acnes感染的初期即参加免疫反应,同时Nramp1也开始表达,对RNI系统起到辅助作用。 展开更多
关键词 痤疮丙酸杆菌 单核细胞 诱导型一氧化氮合成酶 一氧化氮 NRAMP 1基因
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S组山羊草属Psy1基因片段的克隆与序列分析
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作者 王建武 何心尧 +2 位作者 王辉 夏先春 何中虎 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期429-437,共9页
类胡萝卜素含量是影响小麦面制品色泽的主要因素,而Psy1基因则是类胡萝卜素生物合成中的关键基因。为了了解小麦近缘种S组山羊草的Psy1基因多样性分布规律,以高大山羊草、双角山羊草及西尔斯山羊草为材料,应用同源基因克隆技术对其进行P... 类胡萝卜素含量是影响小麦面制品色泽的主要因素,而Psy1基因则是类胡萝卜素生物合成中的关键基因。为了了解小麦近缘种S组山羊草的Psy1基因多样性分布规律,以高大山羊草、双角山羊草及西尔斯山羊草为材料,应用同源基因克隆技术对其进行Psy1基因克隆。结果表明,利用分子标记YP7B-5检测获得的8个新Psy1-S1等位变异的部分序列覆盖了Psy1基因的第二外显子和第二内含子的全部以及第三外显子93.1%的区域。在与包括来自普通小麦的Psy1-B1d、栽培二粒小麦的Psy1-B1k以及拟斯卑尔脱山羊草的Psy1-S1a、Psy1-S1b、Psy1-S1c对应部分的序列综合分析发现一致性高达93.4%~98.5%,而且编码区序列差异均为同义突变,没有造成编码氨基酸的变化。而第二内含子序列则存在数个SNP及InDel,尤其是Psy1-S1h的161bp大片段插入和Psy1-S1i的177bp大片段缺失,导致与其他Psy1-B1/Psy1-S1等位变异产生较大的长度差异。分析表明,内含子的差异是造成Psy1基因多样性的主要原因。 展开更多
关键词 小麦籽粒黄色素 山羊草 八氢番茄红素合成酶基因Psy1 基因片段克隆
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牛磺酸上调基因1在舌鳞状细胞癌中的作用研究
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作者 李志强 邹瑞 +2 位作者 欧阳可雄 白植宝 艾伟健 《口腔疾病防治》 2016年第9期511-514,共4页
目的研究长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(taurine upregulated gene 1,TUG1)在舌鳞状细胞癌及癌旁组织中的表达差异,探讨TUG1在舌鳞状细胞癌中可能的作用机理。方法荧光实时定量PCR法检测19例患者舌鳞状细胞癌组织及其对应的癌旁组织中T... 目的研究长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(taurine upregulated gene 1,TUG1)在舌鳞状细胞癌及癌旁组织中的表达差异,探讨TUG1在舌鳞状细胞癌中可能的作用机理。方法荧光实时定量PCR法检测19例患者舌鳞状细胞癌组织及其对应的癌旁组织中TUG1的表达差异,利用小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)技术在舌鳞状细胞癌细胞系CAL27中沉默TUG1的表达,并用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞增殖能力变化,荧光实时定量PCR法检测下游相关基因诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)基因的表达改变。结果 TUG1在舌鳞状细胞癌组织标本中相对癌旁组织呈高表达状态(P<0.001)。利用si RNA技术沉默TUG1的表达后,舌鳞状细胞癌细胞系CAL27细胞增殖能力显著下降,转染si RNA后24 h、48 h、72 h,细胞增殖抑制率分别为14.16%、16.96%、21.40%。实验组、空白对照组和阴性对照组i NOS基因的相对表达量为1.000±0.034、0.974±0.045、0.729±0.039,沉默TUG1的实验组的i NOS基因表达受到了明显抑制(P=0.002)。结论长链非编码RNA TUG1在舌鳞状细胞癌中可能起到致癌基因的作用,且其可能通过促进i NOS的表达调控舌鳞状细胞癌的生长。 展开更多
关键词 鳞状细胞癌 长链非编码RNA 牛磺酸上调基因1 诱导型一氧化氮合酶
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NOS1AP基因rs348624多态性与中国汉族早发性精神分裂症的关联分析
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作者 胡国芹 杨程青 +10 位作者 吕钦谕 赵静 朱明环 郭向晴 徐阿红 介勇 姜雅琴 汪作为 张晨 禹顺英 易正辉 《临床精神医学杂志》 2015年第5期289-291,共3页
目的:探讨中国汉族人群一氧化氮合酶1接头蛋白(NOS1AP)基因rs348624多态性与早发性精神分裂症的易感性及其首发年龄的关联性。方法:选取285例早发性精神分裂症患者为研究组和826名正常对照组,采用Taq Man法,检测NOS1AP基因rs348624位点... 目的:探讨中国汉族人群一氧化氮合酶1接头蛋白(NOS1AP)基因rs348624多态性与早发性精神分裂症的易感性及其首发年龄的关联性。方法:选取285例早发性精神分裂症患者为研究组和826名正常对照组,采用Taq Man法,检测NOS1AP基因rs348624位点多态性,并分析研究组危险等位基因的频率与首发年龄的关联性。结果:研究组与对照组rs348624等位基因和基因型频率分布比较差异有统计学意义[χ2=149.17,自由度(df)=1,P=0.00;χ2=137.25,自由度(df)=2,P=0.00];Kaplan-Meier分析显示,rs348624等位基因T的频率与早发性精神分裂症首发年龄显著相关(Kaplan-Meier log rank检验P=0.00)。结论:在中国汉族人群中NOS1AP基因与早发性精神分裂症存在关联,其rs348624多态性可能是导致早发性精神分裂症患者发病年龄提前的重要因素。 展开更多
关键词 精神分裂症 一氧化氮合酶1接头蛋白基因 多态性 单核苷酸
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