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Gene therapy and the regeneration of retinal ganglion cell axons 被引量:2
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作者 Alan R. Harvey 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2014年第3期232-233,共2页
Because the adult mammalian central nervous system (CNS) has only limited intrinsic capacity to regenerate connections after injury, due to factors both intrinsic and extrinsic to the mature neuron (Shen et al., 19... Because the adult mammalian central nervous system (CNS) has only limited intrinsic capacity to regenerate connections after injury, due to factors both intrinsic and extrinsic to the mature neuron (Shen et al., 1999; Berry et al., 2008; Lingor et al., 2008; Sun and He, 2010; Moore et al., 2011 ), therapies are required to support the survival of injured neu-rons and to promote the long-distance regrowth of axons back to their original target structures. The retina and optic nerve (ON) are part of the CNS and this system is much used in experiments designed to test new ways of promoting regeneration after injury (Harvey et al., 2006; Benowitz and Yin, 2008; Berry et al., 2008; Fischer and Leibinger, 2012). Testing of therapies designed to improve retinal ganglion cell (RGC) viability also has direct clinical relevance because there is loss of these centrally projecting neurons in many ophthalmic diseases. 展开更多
关键词 RGCS gene gene therapy and the regeneration of retinal ganglion cell axons AAV cell
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Gene32蛋白对PCR产量的影
2
作者 李经忠 孟红 郭进林 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期160-160,共1页
在临床检测和科研中,有时因引物对原因,PCR产量低,不利于结果观察。在PCR检测血清HBV基因的同时,加入Gene32蛋白,提高了PCR产量和灵敏度。1材料与方法1.1基因32蛋白(Gene32protein)(Ph... 在临床检测和科研中,有时因引物对原因,PCR产量低,不利于结果观察。在PCR检测血清HBV基因的同时,加入Gene32蛋白,提高了PCR产量和灵敏度。1材料与方法1.1基因32蛋白(Gene32protein)(Pharmacia),2.5mg/ml... 展开更多
关键词 gene32蛋白 聚合酶链反应 HBV 乙型肝炎
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Nerve factors and retinal ganglial cell regeneration
3
《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第13期1020-1020,共1页
No. 1: Erythropoietin upregulates growth associated protein-43 expression and promotes retinal ganglion cell axonal regeneration in vivo after optic nerve crush Neural Regen Res. 2012;7(4):295-301.Abstract In this... No. 1: Erythropoietin upregulates growth associated protein-43 expression and promotes retinal ganglion cell axonal regeneration in vivo after optic nerve crush Neural Regen Res. 2012;7(4):295-301.Abstract In this study, we established a rat model of optic nerve crush to explore the effects of erythropoietin on retinal ganglion cell axonal regeneration. At 15 days after injury in erythropoietin treated rats, retinal ganglion cell densities in regions corresponding to the 1/6, 3/6 and 5/6 ratios of the retinal radius were significantly increased. In addition, the number of growth associated protein-43 positive axons was significantly increased at different distances (50,250 and 500 tim) from the crush site after erythropoietin treatment. Erythropoietin significantly increased growth associated protein-43 protein levels in the retina after crush injury, as determined by western blot and immunofluorescence analysis. These results demonstrate that erythropoietin protects injured retinal ganglion cells and promotes axonal regeneration. 展开更多
关键词 cell gene RES RGCS
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Temporal control of the Aux/IAA genes BnIAA32 and BnIAA34 mediates Brassica napus dual shade responses 被引量:1
4
作者 Yafei Li Yiyi Guo +5 位作者 Yue Cao Pengguo Xia Dongqing Xu Ning Sun Lixi Jiang Jie Dong 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2024年第5期928-942,共15页
Precise responses to changes in light quality are crucial for plant growth and development.For example,hypocotyls of shade-avoiding plants typically elongate under shade conditions.Although this typical shade-avoidanc... Precise responses to changes in light quality are crucial for plant growth and development.For example,hypocotyls of shade-avoiding plants typically elongate under shade conditions.Although this typical shade-avoidance response(TSR)has been studied in Arabidopsis(Arabidopsis thaliana),the molecular mechanisms underlying shade tolerance are poorly understood.Here we report that B.napus(Brassica napus)seedlings exhibit dual shade responses.In addition to the TSR,B.napus seedlings also display an atypical shade response(ASR),with shorter hypocotyls upon perception of early-shade cues.Genome-wide selective sweep analysis indicated that ASR is associated with light and auxin signaling.Moreover,genetic studies demonstrated that phytochrome A(BnphyA)promotes ASR,whereas BnphyB inhibits it.During ASR,YUCCA8 expression is activated by early-shade cues,leading to increased auxin biosynthesis.This inhibits hypocotyl elongation,as young B.napus seedlings are highly sensitive to auxin.Notably,two non-canonical AUXIN/INDOLE-3-ACETIC ACID(Aux/IAA)repressor genes,BnIAA32 and BnIAA34,are expressed during this early stage.BnIAA32 and BnIAA34 inhibit hypocotyl elongation under shade conditions,and mutations in BnIAA32 and BnIAA34 suppress ASR.Collectively,our study demonstrates that the temporal expression of BnIAA32 and BnIAA34 determines the behavior of B.napus seedlings following shade-induced auxin biosynthesis. 展开更多
关键词 Brassica napus high-density planting IAA32/34 light signal transduction shade response temporal gene expression
原文传递
Response gene to complement 32 (RGC-32) expression on M2-polarized and tumor-associated macrophages is M-CSF-dependent and enhanced by tumor-derived IL-4 被引量:12
5
作者 Peng Zhao Daiqing Gao +7 位作者 Qingjie Wang Bingfeng Song Qianqian Shao Jintang Sun Chunyan Ji Xingang Li Peng Li Xun Qu 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2015年第6期692-699,共8页
Response gene to complement 32 (RGC-32) is a cell cycle regulator involved in the proliferation, differentiation and migration of cells and has also been implicated in angiogenesis. Here we show that RGC-32 expressi... Response gene to complement 32 (RGC-32) is a cell cycle regulator involved in the proliferation, differentiation and migration of cells and has also been implicated in angiogenesis. Here we show that RGC-32 expression in macrophages is induced by IL-4 and reduced by LPS, indicating a link between RGC-32 expression and M2 polarization. We demonstrated that the increased expression of RGC-32 is characteristic of alternatively activated macrophages, in which this protein suppresses the production of pro-inflammatory cytokine IL-6 and promotes the production of the anti-inflammatory mediator TGF-β. Consistent with in vitro data, tumor-associated macrophages (TAMs) express high levels of RGC-32, and this expression is induced by tumor-derived ascitic fluid in an M-CSF- and/or IL-4-dependent manner. Collectively, these results establish RGC-32 as a marker for M2 macrophage polarization and indicate that this protein is a potential target for cancer immunotherapy, targeting tumor-associated macrophages. 展开更多
关键词 macrophage polarization MONOCYTE response gene to complement 32
原文传递
子宫颈鳞状细胞癌及鳞状上皮内病变中RGC32的表达及临床意义 被引量:1
6
作者 田杰 周东华 +4 位作者 平静 秦艳 刘小燕 陈莹 范菊花 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第16期2777-2779,共3页
目的探讨RGC32(response gene to complement 32)在子宫颈鳞状细胞癌及鳞状上皮内病变组织中的表达以及临床意义。方法采用免疫组化法分别检测正常宫颈、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)、鳞状细胞癌组织(SCC)中RG... 目的探讨RGC32(response gene to complement 32)在子宫颈鳞状细胞癌及鳞状上皮内病变组织中的表达以及临床意义。方法采用免疫组化法分别检测正常宫颈、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)、鳞状细胞癌组织(SCC)中RGC32蛋白的表达情况,并且分析RGC32表达与宫颈鳞状细胞癌临床特征的关系。结果宫颈鳞状细胞癌及高度鳞状上皮内病变中RGC32的阳性率显著高于低度鳞状上皮内病变及正常宫颈(P<0.05)。RGC32蛋白在有淋巴结转移组阳性率显著高于无淋巴结转移组(P=0.014)。结论 RGC32在癌前病变及SCC中的阳性率显著高于非癌前病变,同时在发生淋巴结转移组阳性率显著高于无淋巴结转移组,提示RGC32可能参与了宫颈癌的发生、发展过程。 展开更多
关键词 rgc32 宫颈鳞状细胞癌 宫颈鳞状上皮内病变 淋巴结转移
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RGC32与转化生长因子β1在肺腺癌细胞增殖过程中调控关系的研究 被引量:3
7
作者 徐然 赵俊刚 石文君 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第5期1009-1011,共3页
目的:探讨RGC32与转化生长因子β1(TGF-β1)在肺腺癌中表达的相关性,明确二者之间调控关系及其对肺腺癌细胞增殖的影响。方法:Real-time PCR检测52例肺腺癌及相应癌旁组织中RGC32与TGF-β1的表达;应用TGF-β1受体特异性抑制剂SB-431542... 目的:探讨RGC32与转化生长因子β1(TGF-β1)在肺腺癌中表达的相关性,明确二者之间调控关系及其对肺腺癌细胞增殖的影响。方法:Real-time PCR检测52例肺腺癌及相应癌旁组织中RGC32与TGF-β1的表达;应用TGF-β1受体特异性抑制剂SB-431542处理A549细胞,检测处理后细胞中RGC32基因的表达,并用MTT法测定细胞增殖活力,双标流式细胞术检测细胞凋亡。结果:RGC32和TGF-β1在肺腺癌组织中表达均呈现显著增加,且二者呈正相关;SB-431542处理后,RGC32蛋白表达显著下调,A549细胞的凋亡增加,增殖活力降低。结论:RGC32和TGF-β1在肺腺癌中均呈现表达上调,二者呈正相关。RGC32是TGF-β1信号通路下游重要的调控基因,能够参与肺腺癌细胞增殖能力的调节。 展开更多
关键词 rgc32 转化生长因子Β1 肺腺癌 增殖
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RGC32在肿瘤中的表达及其临床意义 被引量:1
8
作者 朱凤 徐文 +3 位作者 谢洋洋 周旋 吴泓波 张蕾 《医学与哲学(B)》 2015年第8期60-63,71,共5页
补体应答基因32(RGC32)作为一种重要的补体应答基因在多种正常组织及肿瘤中广泛表达,并发现其具有调控细胞周期、促进细胞分化、调节免疫等生物学功能。近年研究结果显示RGC32在不同肿瘤中的表达及作用具有差异性。在结直肠癌、胰腺癌... 补体应答基因32(RGC32)作为一种重要的补体应答基因在多种正常组织及肿瘤中广泛表达,并发现其具有调控细胞周期、促进细胞分化、调节免疫等生物学功能。近年研究结果显示RGC32在不同肿瘤中的表达及作用具有差异性。在结直肠癌、胰腺癌、非小细胞肺癌等多种肿瘤中RGC32具有正向调控作用,然而在神经胶质瘤和少数非小细胞肺癌中则可作为一种肿瘤抑制因子存在。鉴于RGC32在肿瘤中作用的复杂性,本文将对RGC32在不同肿瘤中的作用及可能机制进行综述,旨在为后来研究者提供研究方向。 展开更多
关键词 补体应答基因32 肿瘤 上皮间质转化 细胞增殖迁移 转化生长因子-Β
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转录因子MZF1对大鼠RGC32基因启动活性的影响及可能的结合部位
9
作者 王璐璐 何风霞 +5 位作者 赵聃 虞天一 张婧 卢燕来 邱文 王迎伟 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期143-148,共6页
目的 :构建大鼠补体应答基因32(response gene to complement,RGC32)启动子(全长和截短)荧光素酶报告质粒,并观察人胚肾细胞(HEK293)过表达髓锌指基因1(myeloid zinc finger gene1,MZF1)对大鼠RGC32基因启动活性的影响。同时,筛选其可能... 目的 :构建大鼠补体应答基因32(response gene to complement,RGC32)启动子(全长和截短)荧光素酶报告质粒,并观察人胚肾细胞(HEK293)过表达髓锌指基因1(myeloid zinc finger gene1,MZF1)对大鼠RGC32基因启动活性的影响。同时,筛选其可能的MZF1结合位点。方法:将RGC32基因启动子全长(-686^-1 nt)插入到荧光素酶报告基因载体p GL3-basic中,获得RGC32基因启动子全长荧光素酶报告质粒(p GL3-RGC32-FL)后,再将p GL3-RGC32-FL与本课题组前期构建的大鼠野生型MZF1表达质粒(p IRES2-EGFP-MZF1)共转染HEK293细胞,检测其荧光素酶活性,以确定MZF1对RGC32基因的启动作用。另用生物信息学软件预测RGC32基因启动子上转录因子MZF1潜在的结合位点,并据此构建3个RGC32基因启动子截短的荧光素酶报告质粒(即p GL3-RGC32-1、p GL3-RGC32-2和p GL3-RGC32-3)。将上述RGC32基因启动子全长和各截短的荧光素酶报告质粒与MZF1过表达质粒共转染HEK293细胞,再行荧光素酶活性测定,以筛选MZF1的结合位点。结果:菌液PCR及核酸测序证实,大鼠RGC32基因启动子(全长和各截短)的荧光素酶报告质粒均构建成功。将p GL3-RGC32-FL和p IRES2-EGFPMZF1共转染HEK293细胞发现,RGC32基因启动子活性显著增加。而将p GL3-RGC32-FL、p GL3-RGC32-1、p GL3-RGC32-2和p GL3-RGC32-3分别与p IRES2-EGFP-MZF1共转染HEK293细胞后显示,p GL3-RGC32-3的启动活性显著低于p GL3-RGC32-FL、p GL3-RGC32-1和p GL3-RGC32-2。提示MZF1可能结合在RGC32基因启动子的-286^-86 nt区域。结论 :成功构建了大鼠RGC32基因启动子全长及截短荧光素酶报告质粒,证实过表达MZF1可促进RGC32基因的启动,并初步筛查出转录因子MZF1在RGC32基因启动子上可能的结合区域。 展开更多
关键词 补体应答基因32 髓锌指基因1 荧光素酶报告质粒 启动子活性
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利用乏氧显像评估针对乳腺癌血管的治疗
10
作者 朱静 孟昕 +2 位作者 付鹏 许鹏 高慧棋 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2023年第1期46-51,共6页
目的应用内皮抑素基因和^(32)P-磷酸铬胶体内照射治疗大鼠乳腺癌种植瘤,并利用乏氧显像剂^(99m)Tc-4,9-二氮-3,3,10,10-四甲基十二烷-2,11-二酮肟(^(99m)Tc-HL91)评估治疗后肿瘤乏氧状况的变化。方法80只雄性Wistar大鼠皮下注射Walker-... 目的应用内皮抑素基因和^(32)P-磷酸铬胶体内照射治疗大鼠乳腺癌种植瘤,并利用乏氧显像剂^(99m)Tc-4,9-二氮-3,3,10,10-四甲基十二烷-2,11-二酮肟(^(99m)Tc-HL91)评估治疗后肿瘤乏氧状况的变化。方法80只雄性Wistar大鼠皮下注射Walker-256乳腺癌细胞,通过瘤内注射的方式给药,建立种植瘤模型并随机分为四组:对照组(0.9%生理盐水)、^(32)P组(^(32)P-磷酸铬胶体)、endo组(含endostatin基因的质粒)和^(32)P+endo组(^(32)P-磷酸铬胶体和含endostatin基因的质粒的混合物),治疗起始和治疗后7天,进行^(99m)Tc-HL91乏氧显像,计算各组大鼠肿瘤部位与对侧正常组织放射性计数比值(T/NT)。每4天测量肿瘤大小,计算肿瘤生长率,治疗20天后取肿瘤组织染色,计算各组大鼠肿瘤微血管密度(MVD)、凋亡指数(AI)、血管内皮生长因子(VEGF)的阳性率。结果^(32)P组和endo组肿瘤生长率低于对照组,^(32)P+endo组最低(P<0.001)。^(32)P组MVD、VEGF高于对照组(P<0.05),endo组和^(32)P+endo组低于对照组(P<0.05)。^(32)P组和endo组AI高于对照组,^(32)P+endo组最高(P<0.001)。endo组和^(32)P+endo组T/NT比值高于对照组和^(32)P组(P<0.05)。结论肿瘤经不同治疗方法后乏氧的改变各不相同,^(99m)Tc-HL91能在体内监测肿瘤的乏氧状况,从而早期评估肿瘤血管抑制剂的治疗效果。 展开更多
关键词 乏氧 HL91 内皮抑素基因 32磷
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纳米级与微米级二氧化硅粉尘对小鼠胚胎毒性的比较研究 被引量:7
11
作者 赵翠霞 金一和 +3 位作者 张颖花 刘冰 王静 董光辉 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期414-416,共3页
目的比较研究纳米级(nm-)与微米级二氧化硅粉尘(μm-SiO2)对小鼠胚胎的影响,并观察胚胎Connexin32(Cx32)和Cx40基因有无点突变改变。方法5个实验组(零剂量粉尘组、μm-SiO250mg/m3组、μm-SiO2200mg/m3组、nm-SiO250mg/m3组、nm-SiO2200... 目的比较研究纳米级(nm-)与微米级二氧化硅粉尘(μm-SiO2)对小鼠胚胎的影响,并观察胚胎Connexin32(Cx32)和Cx40基因有无点突变改变。方法5个实验组(零剂量粉尘组、μm-SiO250mg/m3组、μm-SiO2200mg/m3组、nm-SiO250mg/m3组、nm-SiO2200mg/m3组)共25只雌性小鼠,妊娠0日(E0)至E17日连续呼吸道染尘,观察妊娠期间母鼠体重变化,E18日取出胚胎,观察胚胎发育情况,并采用常规聚合酶链式反应(PCR)、聚合酶链式反应-单链构像多态性(PCR-SSCP)技术对胚胎的Cx32和Cx40基因进行点突变检测。结果E18日,各染尘组的母鼠体重均显著低于对照组;各染尘组的胚胎数、活胎数、胚胎体重显著低于对照组,nm-SiO2200mg/m3组活胎数显著低于nm-SiO250mg/m3组和μm-SiO2200mg/m3组,nm-SiO2200mg/m3组胚胎体重显著低于μm-SiO2200mg/m3组;nm-SiO2200mg/m3组死胎率和吸收胎率均显著高于对照组。Cx32和Cx40基因经检测未发现有突变者。结论SiO2粉尘具有小鼠胚胎毒性,微米级粒子粒径改变为纳米级后,毒性作用增强,且纳米级SiO2粉尘对小鼠胚胎有致死作用。两种粒径的二氧化硅粉体均未发现有致Cx32和Cx40基因点突变。 展开更多
关键词 纳米级 二氧化硅 粉尘 小鼠 胚胎毒性 Cx32 gene CX40 gene
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miR-125b对人心肌细胞HCM的保护作用及机制 被引量:4
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作者 解小霞 孙晓静 +5 位作者 苏文炀 杨柳 李力 王薇 李婷 田永强 《山东医药》 CAS 2020年第5期1-5,共5页
目的探讨微小RNA(miR)125b对人心肌细胞HCM的保护作用及其可能的作用机制。方法选取急性心肌梗死(AMI)患者68例为AMI组、体检健康对照者50例作为正常对照组,采集静脉血检测血清miR-125b表达。取对数生长期人心肌HCM细胞,分别采用瞬时转... 目的探讨微小RNA(miR)125b对人心肌细胞HCM的保护作用及其可能的作用机制。方法选取急性心肌梗死(AMI)患者68例为AMI组、体检健康对照者50例作为正常对照组,采集静脉血检测血清miR-125b表达。取对数生长期人心肌HCM细胞,分别采用瞬时转染法转染miR-125b mimics(浓度分别为200、100、50 nmol/L)及NC mimics(浓度分别为200、100、50 nmol/L),培养24 h及48 h,采用CCK-8法测定细胞相对增殖率。分别转染miR-125b mimics终浓度为50、100 nmol/L,转染NC mimics终浓度为100 nmol/L及空白组,采用流式细胞术测定细胞早期凋亡百分比。采用Western blotting法检测细胞免疫、炎症相关蛋白炎性小体(NLRP3)、白细胞介素1β(IL-1β)、趋化因子2(CCL2)、趋化因子C-X3-C-配体1(CX3CL1)、补体应答基因-32(RGC32)表达。结果AMI组血清miR-125b表达水平低于正常对照组(P<0.01)。24、48 h时,转染各浓度miR-125b后HCM细胞相对增殖率均高于转染NC mimics后(P均<0.05)。转染50、100 nmol/L miR-125b mimics后HCM细胞的早期凋亡百分比均低于转染NC mimics后(P<0.05或0.01)。转染miR-125b mimics 200 nmol/L后HCM细胞内NLRP3、IL-1β、CCL2、CX3CL1、RGC32的表达量均较NC mimics组降低(P均<0.05)。结论miR-125b可促进HCM细胞的增殖、抑制HCM细胞凋亡,其机制可能为下调免疫、炎症调节相关因子NLRP3、IL-1β、CCL2、CX3CL1、RGC32的表达,抑制NLRP3/IL-1β通路激活。 展开更多
关键词 心肌梗死 人心肌细胞 miR-125b NLRP3 CCL2 CX3CL1 rgc32
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过表达RGC-32对胰腺癌BxPC-3细胞增殖、凋亡的影响 被引量:3
13
作者 朱亮 赵秋 +1 位作者 李德民 覃华 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2014年第11期1347-1350,共4页
目的探讨RGC-32基因在胰腺癌Bx PC-3细胞增殖、凋亡中的作用。方法常规培养胰腺癌Bx PC-3细胞,构建RGC-32表达质粒pc DNA3.1/myc-His C-RGC-32,并瞬时转染Bx PC-3细胞作为实验组;将转染空质粒pc DNA3.1/myc-His C的Bx PC-3细胞作为对照... 目的探讨RGC-32基因在胰腺癌Bx PC-3细胞增殖、凋亡中的作用。方法常规培养胰腺癌Bx PC-3细胞,构建RGC-32表达质粒pc DNA3.1/myc-His C-RGC-32,并瞬时转染Bx PC-3细胞作为实验组;将转染空质粒pc DNA3.1/myc-His C的Bx PC-3细胞作为对照组;应用实时定量PCR及Western blotting确定转染效率。采用细胞增殖试剂盒CCK-8(cell counting kit-8)法检测转染前后细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡的变化。结果定量PCR及Western blotting检测结果均显示转染实验组较对照组RGC-32mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.05)。细胞增殖实验表明实验组较对照组细胞存活率显著性下降(P<0.05);细胞凋亡实验表明实验组较对照组细胞凋亡率无显著性下降(P>0.05)。结论在胰腺癌Bx PC-3细胞中,过表达RGC-32可抑制细胞增殖,但对细胞凋亡无明显作用。 展开更多
关键词 胰腺癌 RGC-32 增殖 凋亡
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猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR快速鉴定方法的建立 被引量:6
14
作者 王亚宾 陈丽颖 +2 位作者 胡慧 段志刚 崔保安 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第S1期127-131,共5页
粪肠球菌和屎肠球菌是引起猪感染发病的优势肠球菌种,以肠球菌的16 S rRNA基因设计属特异性引物,利用SodA基因多态性设计种特异性引物,同时优化反应条件,建立了能同时测定猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR方法。通过对来源于猪的临床菌株... 粪肠球菌和屎肠球菌是引起猪感染发病的优势肠球菌种,以肠球菌的16 S rRNA基因设计属特异性引物,利用SodA基因多态性设计种特异性引物,同时优化反应条件,建立了能同时测定猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR方法。通过对来源于猪的临床菌株、粪便菌株和鲜猪肉菌株进行测定,均能成功扩增出属特异性片段和种特异性片段。经过与快速生化鉴定试剂盒(Vitek-32)和16 S rRNA测序方法比较,多重PCR与16 S rRNA测序方法对猪的临床菌株、粪便菌株和鲜猪肉菌株的鉴定符合率100%;与Vitek-32鉴定符合率为62.3%,其中,与分离于感染猪的临床菌株符合率仅有46.7%,特别是感染猪的屎肠球菌,符合率仅为22.3%。 展开更多
关键词 肠球菌 多重PCR 16S RRNA VITEK-32 鉴定
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一个定位于7q31-32的鼻咽癌负相关新基因的初步研究 被引量:6
15
作者 王洁如 宾亮华 +5 位作者 钱骏 张小慧 向娟娟 唐珂 李伟芳 李桂源 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第7期688-691,共4页
目的:克隆染色体7q31-32区域D7S495附近鼻咽癌相关的候选抑瘤基因,并研究其在鼻咽癌发生发展中的作用。方法:应用定位-候选克隆策略结合生物信息学手段筛选鼻咽癌负相关的EST(Expressed Sequence Tags),cDNA克隆测序和5′RACE扩增... 目的:克隆染色体7q31-32区域D7S495附近鼻咽癌相关的候选抑瘤基因,并研究其在鼻咽癌发生发展中的作用。方法:应用定位-候选克隆策略结合生物信息学手段筛选鼻咽癌负相关的EST(Expressed Sequence Tags),cDNA克隆测序和5′RACE扩增获取候选EST的cDNA序列。Northern杂交和RT-PCR检测其组织表达谱及其在正常人胚鼻咽上皮与鼻咽癌细胞株和活检组织中的表达差异。Southern杂交和甲基化分析表达差异的机制。结果:克隆到一个位于7q31-32的与鼻咽癌负相关的新基因(GenBank登录号:AF196976,命名为NAG-14),该基因编码649AA,含有LRR和IgC2结构域。Multiple Tissue Northern(MTNTM) Blot杂交结果显示该基因在脑组织中表达较强,而在心、肝、肾、肺、脾、骨骼肌和胎盘等多种组织中检测不到表达。RT-PCR检测发现其在鼻咽癌细胞株和75%活检组织表达缺失或下调,Southern 和甲基化分析表明其在鼻咽癌细胞株中某些位点发生甲基化修饰,鼻咽癌活检组织中存在遗传物质丢失。结论:NAG_14可能是定位于7q31-32的一个与鼻咽癌相关的抑瘤基因候选者。 展开更多
关键词 鼻咽癌 负相关新基因 7q31-32
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OY—TES-1在肿瘤组织中的表达及生物信息学分析 被引量:4
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作者 范蓉 黄巍 +5 位作者 肖绍文 罗彬 李颀 何少健 罗国容 谢小薰 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期603-606,共4页
目的:了解OY-TES-1mRNA及其蛋白在肿瘤组织中的表达情况,初步探讨其结构与功能。方法:利用定量PCR和免疫组织化学技术检测肿瘤组织中OY—TES-1的表达,结合生物信息学技术分析其结构和功能。结果:肿瘤与瘤旁组织中目的基因mRNA的表... 目的:了解OY-TES-1mRNA及其蛋白在肿瘤组织中的表达情况,初步探讨其结构与功能。方法:利用定量PCR和免疫组织化学技术检测肿瘤组织中OY—TES-1的表达,结合生物信息学技术分析其结构和功能。结果:肿瘤与瘤旁组织中目的基因mRNA的表达频率分别为61.95%和59.57%,其中肝细胞癌72.97%、脑膜瘤55.5s%、胶质瘤57.50%,肿瘤组织中该基因mRNA的表达量明显高于瘤旁组织。目的蛋白在胃癌的阳性率为25.00%,肝细胞癌40.00%,结肠癌46.67%,而瘤旁组织与肺癌均为阴性反应。生物信息学分析提示目的蛋白富含螺旋结构,具有一个信号肽、多种修饰位点及sp32结构域,存在较多T、B细胞表位且主要位于目的蛋白的羧基端。结论:OY-TES-1mRNA及其蛋白均可在肿瘤组织中表达,生物信息学分析结果提示该蛋白功能的多样性。 展开更多
关键词 精子蛋白32 基因表达 肿瘤 生物信息学分析
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过表达连接蛋白32对人肝癌细胞株MHCC-97H体外侵袭能力的影响 被引量:2
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作者 朱倩 夏羽佳 +6 位作者 涂炜 罗敏 周珍珍 晏维 林海华 邓欢 田德安 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期439-441,共3页
目的探讨过表达连接蛋白32(Cx32)对人肝癌细胞株MHCC-97H体外侵袭能力的影响。方法应用Lipo-fectamine 2000将pcDNA 3.1(-)/Cx32重组质粒转染至MHCC-97H细胞,G418稳定筛选。采用Western blot法检测Cx32蛋白表达,划痕标记荧光传输实验显... 目的探讨过表达连接蛋白32(Cx32)对人肝癌细胞株MHCC-97H体外侵袭能力的影响。方法应用Lipo-fectamine 2000将pcDNA 3.1(-)/Cx32重组质粒转染至MHCC-97H细胞,G418稳定筛选。采用Western blot法检测Cx32蛋白表达,划痕标记荧光传输实验显示细胞通讯功能的变化,Transwell实验检测细胞侵袭能力的改变。结果转染pcDNA 3.1(-)/Cx32重组质粒使得MHCC-97H细胞过表达Cx32蛋白。与正常对照组和转染空质粒组细胞相比,转染pcDNA 3.1(-)/Cx32重组质粒并过表达Cx32的细胞胞间通讯功能增强,细胞侵袭能力减弱。结论 Cx32在人原发性肝癌的侵袭过程中可能起抑制作用。 展开更多
关键词 连接蛋白32 肝细胞癌 细胞侵袭
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人白细胞介素32基因的克隆表达及其生物学活性的研究 被引量:2
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作者 田兆菊 江新泉 +4 位作者 陈强 徐希柱 马玉红 焦凤萍 叶文静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1284-1287,共4页
目的:克隆人白细胞介素32(hIL-32)基因,构建高效稳定的hIL-32大肠杆菌表达菌株,并对纯化的目的蛋白进行生物学活性的初步测定。方法:将人外周血单个核细胞(PBMC)经刀豆素A(Con A)刺激60 h后提取细胞的总RNA,通过逆转录聚合酶链式反应(RT... 目的:克隆人白细胞介素32(hIL-32)基因,构建高效稳定的hIL-32大肠杆菌表达菌株,并对纯化的目的蛋白进行生物学活性的初步测定。方法:将人外周血单个核细胞(PBMC)经刀豆素A(Con A)刺激60 h后提取细胞的总RNA,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从刺激的PBMC中扩增出hIL-32的基因,通过基因克隆技术,构建hIL-32在pET-30 a(+)中的重组质粒pET30a-hIL32,用IPTG进行诱导,得到hIL-32的原核表达蛋白;采用Ni2+-NTA亲和层析方法纯化目的蛋白;应用ELISA方法检测纯化蛋白诱导人PBMC产生IL-6的情况。结果:序列测定表明,hIL-32基因核苷酸长度为567 bp,编码189个氨基酸。重组质粒pET30-hIL32转化至大肠杆菌BL21(DE3),重组菌菌体裂解物SDS-PAGE可检测到相对分子质量(Mr)为28 000的重组蛋白,表达的重组蛋白IL-32可促进人PBMC产生IL-6,浓度达到(127±4.8)ng/L,而对照组IL-6的浓度仅为(25±2.3)ng/L。结论:成功克隆了hIL-32基因并构建了高效且稳定表达hIL-32基因的大肠杆菌菌株,且表达的目的蛋白能诱导IL-6细胞因子的产生。 展开更多
关键词 白细胞介素-32 基因克隆与表达 大肠杆菌 生物学活性
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苦瓜总皂苷对IgA肾病大鼠免疫调节因子TGF-β_1表达影响 被引量:2
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作者 陈明喆 李易 +1 位作者 陈伟 何伟 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2017年第7期46-49,共4页
目的:研究苦瓜总皂苷对IgA肾病大鼠转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)表达的影响。方法:随机选取48只雄性SD大鼠,所有大鼠均于适应性喂养1周后随机分为空白对照组、IgA肾病组以及苦瓜总皂苷治疗组,n=16,经典造模... 目的:研究苦瓜总皂苷对IgA肾病大鼠转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)表达的影响。方法:随机选取48只雄性SD大鼠,所有大鼠均于适应性喂养1周后随机分为空白对照组、IgA肾病组以及苦瓜总皂苷治疗组,n=16,经典造模法造模成功后,治疗组给予苦瓜总皂苷20 mg/(kg·d)治疗,IgA肾病组和空白组给予等量生理盐水灌胃1 m L/(kg·d),分别在治疗4周和8后,每组处死一半大鼠,观察血清尿素氮、血肌酐、24 h蛋白尿和血清中白介素-2(IL-2)的白介素-6(IL-6)的含量,此外HE染色分析其病理学,Western Blot和RT-PCR检测TGF-β_1和RGC-32表达。结果:IgA肾病组和治疗组所有大鼠均造模成功,主要表现为有明显肉眼或镜下血尿;此外与空白组相比,IgA肾病组和治疗组血清中BUN、24 h尿蛋白、SCr、IL-2和IL-6明显升高(P<0.05),苦瓜总皂苷治疗4周后,上述指标均明显降低(P<0.05),治疗8周后进一步降低;病理学检查显示空白组纹理结构清晰,而IgA肾病组有明显增生反应,苦瓜总皂苷对其有一定的改善。Western Blot和RT-PCR结果显示与空白组相比,IgA肾病组肾脏组织中TGF-β_1表达明显降低(P<0.05),治疗8周后进一步降低,但其对RGC-32基本没有改善作用。结论:苦瓜总皂苷可通过降低肾脏组织中TGF-β_1的表达,进而有助于炎性因子和肾功能的改善,防止其疾病的进一步进展。 展开更多
关键词 苦瓜总皂苷 IGA肾病大鼠 白介素-6 转化生长因子-Β1 补体应答基因-32
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安徽省4个地方鸡品种OCX-32基因外显子4的多态性及其与淮南麻黄鸡蛋品质的相关分析 被引量:5
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作者 李俊营 詹凯 +3 位作者 毕善辉 刘伟 韩涛 李绍全 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2014年第5期1-5,共5页
【目的】研究OCX-32基因在淮南麻黄鸡、五华鸡、淮北麻鸡和皖南三黄鸡等4个安徽省地方鸡品种中的遗传多态性及OCX-32基因与淮南麻黄鸡蛋品质的相关性,为揭示这些群体的遗传特征提供基础数据。【方法】采用PCR-RFLP技术,对淮南麻黄鸡、... 【目的】研究OCX-32基因在淮南麻黄鸡、五华鸡、淮北麻鸡和皖南三黄鸡等4个安徽省地方鸡品种中的遗传多态性及OCX-32基因与淮南麻黄鸡蛋品质的相关性,为揭示这些群体的遗传特征提供基础数据。【方法】采用PCR-RFLP技术,对淮南麻黄鸡、五华鸡、淮北麻鸡和皖南三黄鸡4个地方鸡品种的OCX-32基因外显子4进行遗传多态性研究,并对外显子4遗传多态性与淮南麻黄鸡蛋品质的相关性进行分析。【结果】OCX-32基因外显子4存在A494C1个单核苷酸多态性位点。该位点在安徽省4个地方鸡品种中的基因频率和基因型频率分布差异不大,C等位基因频率较高。4个地方鸡品种群体在A494C位点处于Hardy-Weinberg平衡状态,均表现为中度多态。相关分析结果表明,OCX-32基因外显子4的A494C位点基因多态性与淮南麻黄鸡的开产蛋质量、30周龄蛋质量、蛋白高度和哈氏单位显著相关(P<0.05);CC基因型的开产蛋质量和30周龄蛋质量显著高于AA基因型,AA和CC基因型的蛋白高度显著高于AC基因,AA基因型的哈氏单位显著高于AC基因型(P<0.05)。【结论】OCX-32基因与淮南麻黄鸡蛋品质存在一定的相关性,可作为发掘淮南麻黄鸡蛋品质的分子育种标记。 展开更多
关键词 OCX-32基因 淮南麻黄鸡 蛋品质 安徽省
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