Effect of Traditional Chinese Medicine Antiviral Capsules On Animal Model Genital Herpes and HSV-2 in Cell Culture

Objective: To study the effect of traditional Chinese medicine antiviral capsules in the treatment of genital herpes. Methods: Using female guinea pig genital herpes as the animal model, this study used oral administration of two formulations of antiviral capsules (AC) and observed the effect on vaginal HSV-2 titers and vulvar symptoms. Cell cultures were also used to examine the direct inactivation of HSV-2 by the antiviral capsules and the suppression of HSV-2 via three drug administration methods. Results: There was no significant difference of mean vaginal virus titers between the antiviral capsule groups and that of the positive acyclovir (ACV) control (P>0.05). Mean vulvarsymptom scores of the two antiviral capsule groups were also significantly lower than that of the saline negative control group on days 2, 3, 5, 7 and 8 (P<0.05) and similar to that of the ACV control (P>0.05). Cell culture showed the minimum inhibitory concentrations of antiviral capsules No. 1 and No. 2 were 0.390625 mg/ml and 1.5625 mg/ml, respectively. Conclusion: The traditional Chinese medicine antiviral capsules had suppressive effects on HSV-2 in both animal model GH and in vitro cell culture.

中药黄白液对豚鼠生殖器疱疹复发感染模型的影响

目的 从动物实验角度进一步探讨中药黄白液防治复发性生殖器疱疹的疗效与作用机理。方法 5 0只雌性豚鼠以阴道接种建立生殖器疱疹初发模型及紫外线照射法诱导复发皮损 ,观察了黄白液三个剂量 (1.41g/ml,1.12 8g/ml和 0 .90 2 g/ml)对感染豚鼠的外阴皮损、阴道拭子病毒滴度及干扰素效价的影响 ,并以阿昔洛韦及生理盐水作了对照。结果 黄白液对初发及复发感染豚鼠外阴皮损积分的改变与阿昔洛韦相当 (P >0 .0 5 ) ,诱导感染豚鼠干扰素产生的功能则明显优于对照组 (P <0 .0 1) ,其中又以高剂量 (1.41g/ml ,相当于人剂量 12 0g/ 10 0ml)为优。在复发感染中 ,黄白液组有 5只豚鼠未出现皮损。初发感染豚鼠测得的阴道拭子病毒滴度的结果显示阿昔洛韦优于黄白液低剂量组及黄白液中剂量组 (P <0 .0 5 ) ,而复发感染中则以黄白液组为优。结论 黄白液不仅有直接抑制HSV Ⅱ复制与排放的功能 ,还能通过提高机体免疫力 ,持续抗病毒 。

沙眼衣原体感染小鼠生殖道模型的初步研究

目的建立沙眼衣原体（C￡）小鼠生殖道感染模型。方法分别用10。、10‘、10。数量IFU的CtE型株阴道内接种雌性BALB／c小鼠，观察外阴炎症反应，检测排菌情况，PCR检测分泌物及对组织进行病理观察。结果接种后第5d，实验组小鼠即出现感染迹象；在接种后的5～20d均可在小鼠生殖道分离得到具感染性的c≠，但其持续排菌时期与接种的IFU数量成正比；且小鼠生殖道排菌量（IFU）与接种的IFU数量亦成正比，以10。剂量组为高；小鼠生殖道分泌物PCR扩增后电泳，可见与CtMOMP分子量相当的产物；小鼠生殖道组织切片观察证实，c￡E型株感染小鼠生殖道可产生生殖道炎症。结论成功建立了小鼠生殖道E型c￡感染模型；10。IFU是建立模型的适宜感染量。

中药抗病毒1号、2号胶囊对单纯疱疹病毒-2感染骨髓间充质干细胞Toll样受体9和干扰素表达的影响

【目的】观察中药抗病毒1号、2号胶囊对单纯疱疹病毒(HSV)-2感染骨髓间充质干细胞(BMSCs)Toll样受体9(TLR9)和干扰素(IFN)表达的影响。【方法】培养BMSCs进行HSV-2病毒接种,分别设立抗病毒1号、2号胶囊组,阿昔洛韦组,病毒组与空白对照组,采用Real-Time RT-PCR方法检测TLR9 mRNA表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测其下游产物IFN-α、IFN-β的表达。【结果】抗病毒1号、2号胶囊组TLR9 mRNA表达升高,IFN-α、IFN-β表达较病毒组显著升高(P﹤0.01),且抗病毒2号组作用优于抗病毒1号组(P﹤0.01)。【结论】抗病毒1号、2号胶囊治疗生殖器疱疹等病毒性疾病作用的可能机制与其能诱导TLR9及其下游产物IFN-α、IFN-β表达升高有关。

雄性生殖道衣原体感染动物模型研究进展

沙眼衣原体感染是男性最常见的性传播疾病之一,然而有关衣原体在男性生殖道感染的致病和免疫机制的研究却十分有限。疾病动物模型在研究疾病的致病机制、疾病过程及其治疗转归等方面发挥着十分重要的作用。雄性生殖道衣原体感染模型数量较少并且不是很完善,本文就其衣原体种类、动物种类、感染途径、感染器官、感染过程、生殖影响等方面展开讨论,为男性生殖道衣原体感染的进一步研究提供帮助。

Balb/c小鼠单纯疱疹病毒性脑炎模型的建立

目的:建立稳定的Balb/c小鼠单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)模型。方法:40只Balb/c小鼠颅内(20只)(颅内接种组)或鼻内(20只)(鼻内接种组)接种单纯疱疹病毒1型F株104空斑形成单位(滴度为3.5×105PFU/ml),另20只Balb/c小鼠以生理盐水分别行颅内(10只)和鼻内(10只)假性接种作为对照组,分析小鼠的行为学和病理改变来确定是否建立HSE模型。结果:Balb/c小鼠颅内接种单纯疱疹病毒1型后出现毛发紊乱、活动减少、精神萎靡、激惹、癫痫发作和死亡等;接种后3 d开始发病,6 d开始有小鼠死亡,发病于7～10 d达高峰,14 d以后没有明显的行为学改变;发病小鼠的病理检查可见脑膜和脑实质炎性浸润,脑组织变性坏死、胶质增生及血管周围淋巴套等脑炎的典型改变。鼻内接种组仅1只小鼠出现毛发紊乱。对照组均无行为学及病理改变。颅内接种组小鼠出现病变的阳性率均明显高于鼻内接种组和对照组(P<0.01)。结论:颅内接种104PFU的单纯疱疹病毒1型F株能建立稳定的单纯疱疹病毒性脑炎模型。

中药香菊胶囊对复发性生殖器疱疹豚鼠模型早期干预的实验研究

目的通过观察不同时间给予高剂量的香菊胶囊对治疗复发性生殖器疱疹(RGH)豚鼠复发模型皮损积分和病毒滴度的变化,探讨香菊胶囊防治RGH的疗效。方法构建豚鼠HSV-2初发模型,选取36只初发痊愈的豚鼠随机分为香菊胶囊高剂量组、阿昔洛韦对照组和模型对照组。构建HSV-2复发模型,各组又分成3个亚组,分别在疱疹复发前3 d、疱疹复发后1 d、疱疹复发后3 d采取药物灌胃的方法给予高剂量的香菊胶囊溶液、阿昔洛韦溶液和生理盐水,在给药后不同时间观察各组豚鼠阴道内皮损积分、病毒滴度的变化。结果香菊胶囊对RGH豚鼠复发模型的皮损积分和病毒滴度的影响与阿昔洛韦相当,且药物干预时间越早,皮损积分值越小,病毒滴度越低。结论早期应用香菊胶囊能很好地控制豚鼠RGH复发模型的皮损发展。

中药抗病毒胶囊对豚鼠生殖器疱疹模型神经节及大脑影响的电镜和定量PCR研究

目的:探讨抗病毒胶囊治疗生殖器疱疹的怍用机理。方法:用雌性豚鼠生殖道单纯疱疹病毒(HSV)2型感染的模型,采取抗病毒胶囊内服,观察豚鼠神经节和大脑组织的超微结构及HSV-DNA含量。结果:透射电镜下见生理盐水对照组神经节超微结构有明显线粒体肿胀和粗面内质网扩张,其它用药组神经节和所有各组的大脑组织超微结构无改变,没有找到完整病毒颗粒。腰骶神经节HSV—2DNA定量PCR检测各组问比较差异有显著性(P<0.0001),各组大脑定量PCR检测均为阴性。结论:中药抗病毒胶囊在动物体内有阻止HSV-2对神经节的感染和破坏作用。

补肾醒脑解毒方对大鼠单纯疱疹病毒脑炎脑内NGF、BDNF表达的影响

目的 :观察补肾醒脑解毒方对大鼠单疱病毒脑炎后脑内神经营养分子如 NGF、BDNF表达的调节作用。方法 :以 HSV- 1悬液经角膜划痕接种结膜囊内复制大鼠 HSV脑炎模型 ,用 Northern杂交与ELISA方法检测实验动物治疗前后脑内 NGF、BDNF的 m RNA与蛋白含量。结果 :HSV脑炎大鼠及正常大鼠服补肾醒脑解毒方后脑内 NGF、BDNF m RNA及蛋白均增高。结论 :补肾醒脑解毒方对 HSV脑炎后大鼠脑内 NGF、BDNF表达有促进作用 ,提示补肾醒脑解毒方对 HSV脑炎后遗症潜在着良好治疗作用。

白细胞介素-2基因与单纯疱疹病毒胸苷激酶基因联合治疗小鼠头颈鳞状细胞癌的研究

目的 观察白细胞介素 2 (interleukin 2 ,IL 2 )基因与单纯疱疹病毒胸苷激酶 (herpessimplexvirusthymidinekinase ,HSV TK)基因联合治疗小鼠头颈鳞状细胞癌的疗效。方法 建立小鼠头颈鳞状细胞癌动物模型后在荷瘤部位分别注射表达小鼠IL 2基因的重组腺病毒(recombinantadenovirus,Ad)和表达HSV TK基因的重组腺病毒AdHSV TK及联合注射组 ,对照组分别注射不带目的基因的腺病毒或磷酸盐缓冲液 (phosphaticbufferedsolution ,PBS)。对注射有AdHSV TK基因组和联合治疗组每日腹腔注射抗病毒药物更西罗韦 (ganciclovir,GCV) 2 5mg/kg体重 ,每日 2次连续 7d。观察肿瘤大小变化并检测脾脏自然杀伤细胞和颈淋巴结细胞毒性T淋巴细胞的活性 ,探讨其抗肿瘤机制。结果 AdIL 2和AdHSV TK联合治疗组 ,肿瘤生长明显受抑制 ,疗效显著优于单独治疗组和对照组 (P <0 0 5 ) ,在注射有AdIL 2基因的治疗组中 ,IL 2蛋白水平明显升高 ,自然杀伤细胞活性和细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性增强 ,肿瘤组织中可见大片坏死 ,并含有大量的CD+ 4 、CD+ 8淋巴细胞浸润。结论 AdIL 2基因治疗可提高肿瘤局部和全身的抗肿瘤免疫应答 ,能加强自杀基因AdHSV TK的抗肿瘤效果 ,两者联合应用能显著抑制小鼠头颈鳞状细胞癌的生长。

补肾毓麟汤对肾虚性生殖功能障碍大鼠生育力影响的实验研究

目的观察补肾毓麟汤对肾虚性生殖功能障碍大鼠生育力的影响。方法用雷公藤多苷造成雌、雄性生殖功能障碍大鼠模型,观察补肾毓麟汤及克罗米芬对雌性模型大鼠动情周期变化,卵巢、子宫重量;雄性模型大鼠睾丸、附睾重量,精子密度与活率。结果补肾毓麟汤使雌性模型大鼠动情周期正常大鼠数量增加,子宫重量明显升高;使雄性模型大鼠睾丸、附睾重量、精子密度与活率明显升高,与模型组相比有显著性差异(P<0.01)。结论本实验成功地复制了雌、雄性大鼠生殖功能障碍模型,补肾毓麟汤能改善雌、雄性模型大鼠生育力,疗效优于克罗米芬。

Ⅰ型单纯疱疹病毒致带状疱疹后神经痛小鼠模型的建立

目的探讨采用胫骨局部处用微量加样器皮下接种注射Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)制作稳定、可靠的带状疱疹后神经痛(PHN)小鼠模型的方法。方法将8周龄雄性C57小鼠30只随机分为3组,分别为空白组、实验组和对照组,每组10只。实验组分别于每只小鼠左下肢胫骨局部处用微量加样器皮下接种HSV-Ⅰ10μL(浓度为1×106 PFU/mL),对照组以同等剂量的灭活HSV-Ⅰ进行接种,空白组在相应部位注射同等剂量的生理盐水。在造模前(T 0)和造模后1 d(T 1)、3 d(T 2)、5 d(T 3)、7 d(T 4)分别测定小鼠后爪机械缩足反应阈值(MWT)和热痛阈值(TWL)。结果实验组在T 2~4时的MWT均显著性降低,与空白组及对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);在T 4时MWT达到最低[(1.42±0.22)g]。实验组在T 1~4时的TWL均显著性升高,与空白组及对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);在T 4时TWL达到最高[(17.23±0.70)s]。实验组造模成功率为100%。结论于胫骨局部处用微量加样器皮下接种注射成功诱导小鼠PHN模型是可行的,并贴近疾病发展规律,具有造模成功率高、损伤小、操作简单便捷、可重复性高等优点。

中药香菊胶囊对初发性生殖器疱疹豚鼠模型的影响

目的:探讨中药香菊胶囊对生殖器疱疹(GH)豚鼠模型的影响。方法:选取Hartley雌性豚鼠30只,随机选取其中5只作为正常对照组,其余25只以人工感染单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的方式建立GH动物模型,并随机分为模型对照组、阿昔洛韦组和香菊胶囊高、中、低剂量组,各组分别灌胃给药及给生理盐水后观察豚鼠发病情况和病程变化情况。结果:香菊胶囊治疗后GH豚鼠的皮损严重程度和消退时间较对照组明显降低,其中高剂量组效果最好,类似于阿昔洛韦组的用药效果,低剂量组效果最弱,中剂量组效果居中。香菊胶囊各剂量组豚鼠阴道内病毒滴度与阿昔洛韦组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:香菊胶囊能够抗HSV-2增殖,在豚鼠体内具有良好的抗HSV-2感染所致GH的作用。

简易的豚鼠皮肤单纯疱疹动物模型的建立及应用

为建立简易皮肤单纯疱疹动物模型 ,我们用 1型单纯疱疹病毒 (HSV 1)经皮下注射感染豚鼠背部 ,并用病毒分离和PCR方法检测感染局部组织HSV 1增殖动态和DNA。结果发现在感染的第 3d出现典型的单纯疱疹病变 ,至第 14d疱疹痊愈 ;在感染的第 2dHSV 1滴度最高 ,以后逐渐下降 ,至第 10d降至最低水平 ,2周内均能检出HSV 1DNA。用此模型研究喷昔洛韦对单纯疱疹的疗效。结果证实PCV能明显缩短疱疹的病程 ,且对HSV 1增殖有抑制作用。这些结果表明该模型是简易且有效的。

小鼠单纯疱疹病毒性肝炎动物模型的建立

为建立小鼠病毒性肝炎动物模型，采用单纯疱疹病毒通过小鼠尾静脉注射的方法，成功地建立了小鼠单纯疱疹病毒性坏死性肝炎的动物模型，并用不同剂量的膦甲酸钠进行试验治疗，收到了较满意的疗效。提示小鼠单纯疱疹病毒性坏死性肝炎动物模型完全适用于抗病毒药物的系统性测定。

利用雌孕激素构建小鼠生殖器疱疹动物模型研究

目的研究用外源性雌激素或(和)孕激素构建小鼠生殖器疱疹动物模型的方法。方法利用外源性性激素预处理雌性BALB/c小鼠,用2型单纯疱疹病毒攻击小鼠阴道,观察小鼠生殖周期、外阴病变,并检测病毒滴度。结果孕激素预处理使小鼠进入动情间期并对HSV-2易感;雌激素预处理使小鼠进入动情期并对HSV-2有抵抗力;雌孕激素剂量不影响易感性。结论孕酮联合雌激素预处理,用103PFU/mlHSV-2(333)感染,可以构建稳定易感的小鼠生殖器疱疹动物模型。

药物抗单纯疱疹病毒的实验研究

本实验使用细胞培养技术对638种中草药水提取物及部位组分提取物与化学合成药物进行抗Ⅰ、Ⅱ型单纯疱疹病毒的粗、复、细筛实验研究以及采取3种滴眼剂对家兔实验性单纯疱疹病毒性角膜炎进行治疗观察。初筛出抗Ⅰ型单纯疱疹病毒有效药物49种,复筛出30种。若按综合药效指数判结果时,国产膦甲酸钠(PFA)、香薷草、甘薯花与犁头草是复筛出的佳效抗 HSV-Ⅰ药物以及2%蒲公英甲素滴眼剂优于庐山石韦滴眼剂。3种滴眼剂对实验性家兔感染单纯疱疹病毒性角膜炎的疗效观察时,国产膦甲酸钠滴眼剂优于庐山石韦和蒲公英甲素滴眼剂,电子显微镜超微结构的动态观察亦支持3种滴眼剂的药效。

雪芪通肾汤对糖尿病肾病大鼠肾功能及肾脏p38丝裂原活化蛋白激酶mRNA表达的影响

目的探讨雪芪通肾汤对糖尿病肾病大鼠肾功能及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)mRNA表达的影响。方法将46只大鼠随机分为4组,即正常组10只,模型组、贝那普利组和雪芪通肾组各12只。模型组、贝那普利组、雪芪通肾组用采用链脲佐菌素(STZ)造模。造模成功后,各治疗组均给药24周。取动脉血测肾功能,取左侧肾脏,检测p38MAPK mRNA在肾组织中的表达。结果贝那普利组、雪芪通肾组较模型组的血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)均降低(P<0.01)。雪芪通肾组较正常组Cr无明显变化(P>0.05)。半定量分析结果表明贝那普利组、雪芪通肾组p38MAPK mRNA的表达比模型组有所降低(P<0.01),比正常组有所升高(P<0.01)。结论雪芪通肾汤可降低糖尿病大鼠肾脏p38MAPK mRNA表达,保护肾功能,延缓糖尿病肾病进程。

单纯疱疹病毒Ⅰ型潜伏感染的研究——兔角膜HSV-1抗原的检测

通过使用HSV-1 Mckrae株在角膜上建立HSK感染的动物模型,应用辣根过氧化物酶免疫组织化学染色技术检测HSV-1抗原在角膜组织内存在的时间,结果发现,在角膜病变消失后5、10、20、30、45天的角膜基质组织内均有HSV-1抗原存在,但在60、80天的切片上抗原阴性。表明HSV-1原发感染消失后抗原在角膜基质内存在45天后转为阴性。说明角膜基质细胞是对HSV-1感染的最敏感细胞。

重组人干扰素α2a凝胶对单纯疱疹病毒感染的疗效

目的研究重组人干扰素α2a(rhIFNα2a)凝胶对动物体内单纯疱疹病毒(HSV)感染的疗效。方法建立HSV-1型豚鼠皮肤感染模型和HSV-2型小鼠阴道炎模型,考察rhIFNα2a凝胶抗HSV作用。将模型豚鼠与小鼠各自分为3个试验组,分别用3×105、2×105和1×105IU/g的rhIFNα2a凝胶治疗,并设平行对照(阿昔洛韦)与空白对照(未治疗)组。评价各组的疗效。结果与空白对照组比较,rhIFNα2a凝胶2×105和3×105IU/g剂量组可明显减少豚鼠皮肤组织中病毒含量,降低小鼠的死亡率,延长生存期。rhIFNα2a凝胶与阿昔洛韦的疗效差异无显著意义。结论rhIFNα2a凝胶具有抑制HSV-1致皮肤病变作用,可缩短病程,对HSV-2所致小鼠阴道炎有较好疗效。