HPLC-ELSD法测定硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊中庆大霉素C组分及有关物质含量

目的为硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊中庆大霉素C组分及有关物质建立质控方法。方法采用HPLC-ELSD方法,色谱柱:GRACEApollo C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.2 mol/L三氟乙酸溶液-甲醇(96:4,V/V),流速0.6 mL/min;柱温30℃;进样量20μL;Waters低温分流型蒸发光散射检测器,载气流量40 psi,漂移管温度55℃。结果所建方法通过方法学验证,庆大霉素C组分与各杂质间分离完全,庆大霉素、西索米星和小诺霉素分别在0.5~6 mg/mL、25~100μg/mL和25~100μg/mL的浓度范围内,各浓度的对数值与对应色谱峰面积的对数值呈现出良好的线性。采用所建方法对市售16家生产企业43批次硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊样品进行测定,获得该制剂产品中各组分及有关物质的数据。结论所建方法是在中国药典方法基础上优化并验证适用于硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊C组分及有关物质的含量测定,方法简便准确,专属性强,稳定性好。由获得的实验数据可知,该复方制剂中C组分及有关物质的含量在各厂家间或同厂家不同批次间差异显著,可能存在影响用药安全的潜在隐患,建议在该剂型质量标准中增加相关质控项。

庆大霉素C_(1a)高产菌株的推理育种的研究

已有研究表明在氨基糖苷类抗生素的生物合成途径与细胞壁的合成途径间有一定的相关性。因而如能减小合成细胞壁的代谢流，则可促使氨基糖苷类抗生素高产。已知磷霉素是一种抑制细胞壁合成的抗生素。本文采用筛选对磷霉素敏感的菌株来获得庆大霉素Ｃ１ａ（ＧＭＣ１ａ）的高产株。结果表明在得到的６０株超敏菌株中，正变率为７３．３％。同时用薄层层析法和纸层析—生物显影法检测发酵液的组分情况，得到４株效价、组分均好的菌株（ＳＦ－０１－１、－１１、－１４、－６８）。稳定性试验表明这４株菌株稳定性良好，与亲株相比效价提高７５％～１０１％。用该法筛选可减小工作量，而且有效地提高了ＧＭＣ１ａ的产量已有研究表明在氨基糖苷类抗生素的生物合成途径与细胞壁的合成途径间有一定的相关性。因而如能减小合成细胞壁的代谢流，则可促使氨基糖苷类抗生素高产。已知磷霉素是一种抑制细胞壁合成的抗生素。本文采用筛选对磷霉素敏感的菌株来获得庆大霉素Ｃ１ａ（ＧＭＣ１ａ）的高产株。结果表明在得到的６０株超敏菌株中，正变率为７３．３％。同时用薄层层析法和纸层析—生物显影法检测发酵液的组分情况，得到４株效价、组分均好的菌株（ＳＦ－０１－１、－１１、－１４、－６８）。稳定性试验表明?

高效液相色谱-蒸发光散射检测法分析庆大霉素C组分

目的:建立一种理想的庆大霉素C组分分析方法,为克服现行药典方法的不足提供新思路。方法:应用高效液相色谱-蒸发光散射检测法分析庆大霉素C组分。色谱条件为:Diamonsil(钻石)C_(18)色谱柱,规格:150 mm×4.6 mm,5 μm;流动相:0.2mol·L^(-1)三氟醋酸水溶液-甲醇(94:6),流速为0.6mL·min^(-1);检测器条件:漂移管温度为110℃,载气流速为2.80L·min^(-1)。应用随行标准曲线法确定庆大霉素C组分组成。结果:庆大霉素中的4个主要组分C_(1a),C_2,C_(2a),C_1在上述色谱条件下能完全分离,分析时间仅需30 min;精密度优于1.0％;庆大霉素各组分在蒸发光散射检测器中的响应因子一致。庆大霉素标准品采用本法测定结果(C_(1a):29.4％;C_2:26.5％;C_(2a):13.1％;C_1:31.1％)与BP方法标化结果(C_(1a):30.1％;C_2:24.9％;C_(2a):14.1％;C_1:30.9％)一致。结论:本法操作简单,方法的精密度、准确性、重现性均能很好地满足质量控制的要求,能有效克服现行药典方法的不足,是一种比较理想的庆大霉素C组分分析方法。

庆大霉素C组分测定误差的比较分析

中国药典自１９９０版收载庆大霉素Ｃ组分ＨＰＬＣ检查法以来，不同实验室间的测定误差一直相对较大，为此，９个药品检验所协同开展工作，寻找不同实验室间相对误差较大的原因及有效控制不同实验室间测定误差的方案。研究结果表明，Ｃ１组分前后多个不能和Ｃ１峰达到基线分离的小杂质峰组分，可使得在不同条件下积分测得的Ｃ１组分的含量明显不同，导致各实验室利用规一化法测定庆大霉素Ｃ１组分的相对含量结果差异较大。采用英国药典和欧洲药典已收载的相对峰高法测定庆大霉素Ｃ组分的含量。

柱切换HPLC-ELSD法测定硫酸庆大霉素颗粒中庆大霉素C组分的研究

目的建立柱切换高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定硫酸庆大霉素颗粒中庆大霉素C组分含量,并对2017年国家评价性抽验190批次样品进行检测。方法采用配置切换六通阀的高效液相色谱仪,GRACE Apollo C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为0.2mol/L三氟乙酸溶液:甲醇(96:4,V/V),柱温35℃,流速0.6mL/min,进样量25μL,ELSD漂移管温度110℃,载气流量2.5L/min,增益1。结果采用新建的柱切换HPLC-ELSD法可有效去除辅料蔗糖等对测定的干扰,庆大霉素C组分(C1、C1a、C2、C2a)的平均回收率分别为98.9%、102.0%、100.1%和98.6%,RSD(n=9)分别为0.5%、0.4%、0.3%和0.6%,线性范围分别为0.0517~0.6465、0.0538~0.6729、0.0651~0.8136和0.0299~0.3738mg/mL。190批次样品中12批次样品的庆大霉素C1偏低,2批次样品的庆大霉素总C组分含量偏低,3批次样品的庆大霉素总C组分含量偏高。结论新建方法准确简便,专属性良好,可为硫酸庆大霉素颗粒中庆大霉素C组分的控制提供参考。

庆大霉素C组分和有关物质测定的HPLC-柱后衍生化法与脉冲安培电化学法的比较研究

目的：参考《欧洲药典》的HPLC-脉冲安培电化学法建立高效液相色谱-柱后衍生化法测定庆大霉素C组分含量及其有关物质,同时与电化学法进行比较研究。方法：采用亲水性Hydrosphere C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以含0.7%三氟乙酸及0.025%五氟丙酸的50 mmol·L-1氢氧化钠溶液（pH 2.6）-乙腈（98.5∶1.5）为流动相。衍生化法反应温度30℃,荧光激发波长340 nm,发射波长430 nm。电化学法采用脉冲安培检测器,金电极为工作电极,四电位波形工作模式。结果：两种方法测定的庆大霉素C组分（C1a,C2,C2a和C1）分别在5.82~233.00,6.92~277.00,4.00~160.00和6.23~249.00μg·ml-1的浓度范围内线性关系良好（r均≥0.999 3）,检测限和定量限范围分别为0.92~3.28 ng和1.37~5.19 ng。结论：两种方法的检测结果无明显差异。

HPLC-ELSD测定硫酸庆大霉素有关物质及其C组分质量标准改进

目的建立HPLC—ELsD测定硫酸庆大霉素有关物质及改进C组分的测量方法。方法色谱柱采用耐酸的c18柱（pH适应范围0．8-8．0），流动相为0．2mol／L的三氟醋酸-甲醇（92：8）；流速为0．6mL／min；用蒸发光散射检测器检测，漂移管温度110℃，载气为2．8L／min。结果硫酸庆大霉素各组分与有关物质分离完全，可用外标法测定硫酸小诺霉素和西索米星的含量及庆大霉素C组分的含量。结论所用方法准确，灵敏度高，重现性好，可有效地控制药品的质量。

番茄红素及维生素E和C合用对庆大霉素大鼠肾毒性预防作用的比较

目的比较番茄红素及维生素(Vit)E和VitC合用对庆大霉素大鼠肾毒性的预防作用。方法雄性SD大鼠给予庆大霉素140 mg.kg-1(ip),连续7 d。预防组同时予以番茄红素20 mg.kg-1(ig)或Vit E 50 mg.kg-1和Vit C 200 mg.kg-1(ig)。给药7 d后,测定大鼠血清尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)和尿肌酐含量,计算肌酐清除率(CCr);测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性,肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量;HE染色观察肾脏病理改变。结果与正常对照组比较,庆大霉素组大鼠血清BUN和SCr含量升高,CCr降低,尿NAG活性升高,肾组织MDA水平增加,SOD和CAT活性降低,肾脏病理改变明显。给予番茄红素,或Vit E和Vit C合用明显减轻上述改变,番茄红素的作用较Vit E和Vit C合用更为明显。结论番茄红素及Vit E和Vit C合用均可能通过抗氧化应激作用减轻庆大霉素大鼠肾毒性,番茄红素的作用可能优于Vit E和Vit C合用。

甲硝唑、庆大霉素与维生素C联合局部给药治疗静脉留置导管出口感染的疗效观察

目的 :探讨甲硝唑、庆大霉素与维生素C外用治疗静脉留置导管出口感染的临床疗效。方法 :选取2015年3月—2017年3月我院收治的94例静脉留置导管出口感染患者,按治疗方案的不同分为研究和常规组,各47例。常规组将生理盐水与庆大霉素按3∶1的体积比配制成庆大霉素溶液,伤口冲洗干净后将庆大霉素溶液滴于伤口感染处,并湿敷包扎,qd。研究组给予维生素C溶液冲洗感染伤口,将配制好的抗菌药(甲硝唑与庆大霉素溶液按1∶3配置)滴于出口处皮肤及隧道口处,约2 mL,而后湿敷包扎,qd,比较两组临床总有效率、感染伤口愈合时间及焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)评分。结果 :研究组临床总有效率为97.87%,明显高于常规组的85.11%(P<0.05);研究组感染伤口愈合时间明显短于常规组(P<0.05);研究组SAS、SDS评分明显低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 :甲硝唑、庆大霉素、维生素C联合局部给药治疗静脉留置导管出口感染疗效显著,可促进感染部位愈合,消除患者不良心理,具备临床意义与运用价值。

慢性庆大霉素损伤后豚鼠前庭感觉上皮蛋白激酶C表达和活性

目的 研究庆大霉素慢性损伤后豚鼠前庭终器蛋白激酶 C( PKC)活性的变化及其β ,β ,γ亚型的表达 ,探讨PKC与前庭损伤修复的关系 .方法 采用免疫细胞化学法观察椭圆囊斑、球囊斑和壶腹嵴 PKCβ , ,γ亚型的表达 ;应用γ- 32 P示踪检测前庭终器 PKC活性的变化 .结果 PKCβ , ,γ亚型在前庭感觉上皮细胞均呈阳性表达 ,上皮下结缔组织呈阴性表达 .β ,γ亚型较 β1 亚型表达稍弱 ,不同亚型抗原分布不完全相同 .与对照组相比 ,PKCβ ,γ在停止注射庆大霉素后 1d其表达明显减弱 ,随后其表达逐渐增加 ,至 1wk其表达已高于对照组 ,3 wk仍未恢复 .PKCβ 表达各组变化不明显 .豚鼠前庭终器 PKC活性检测结果与 PKCβ ,γ表达变化规律基本相似 .结论 庆大霉素慢性中毒后豚鼠前庭感觉上皮 PKCβ ,γ亚型表达及 PKC活性均发生变化 ,且不同亚型抗原分布不完全相同 .提示 PKC在前庭感觉上皮损伤修复过程中发挥重要作用 ,不同亚型可能具有不同的作用 .

HPLC测定胃炎合剂中庆大霉素C组分的含量

建立了胃炎合剂中庆大霉素C组分的反相高效液相色谱测定法。利用离子交换树脂柱将庆大霉素和其它成分分离后,用2,4-二硝基氟苯(FDNB)柱前衍生化反相HPLC法测定庆大霉素C组分的含量。色谱条件:固定相为Irregular-H C_(18)柱;流动相为0.005 mol/L十二烷基磺酸钠溶液-高氯酸-甲醇(75:3:22,三乙胺调节pH 3.10);流速:1.0 m1/min;紫外检测波长:365 nm;柱温:20℃。结果:庆大霉素C组分的4个主要成分在20 min 内完全分离,平均方法回收率为99.05％～100.12％,日内、日间精密度RSD均小于5％(n=5)。结论:方法简便、快速、准确,可做为胃炎合剂的质量控制方法。

壳聚糖、维生素C及庆大霉素对猪精液保存效果的比较分析

随着猪人工授精技术的广泛应用,精液保存技术也迅速发展。为了提高猪精液常温保存的效果,本研究通过向猪精液常温保存稀释液中分别添加0.1 g/L壳聚糖、0.25 g/L庆大霉素、0.068 g/L维生素C,检测1~6 d的精子活力、质膜完整性、顶体完整性和凋亡水平,并与庆大霉素组和维生素C组进行比较。结果表明,在保存6 d后,三组的保存质量显著高于对照组(P<0.05),其中添加庆大霉素组的保存质量显著高于其他组(P<0.05),稀释液中添加壳聚糖组的保存质量显著高于维生素C组(P<0.05),维生素C组的顶体完整率在6 d与对照组无显著差异(P>0.05),而添加壳聚糖组6 d的精子活力、质膜完整率和顶体完整率达到61.67、68.67、72.67。稀释液中添加壳聚糖组和添加庆大霉素组,两者之间在保存2 d内差异不显著(P>0.05)。壳聚糖组合庆大霉素组的质膜完整率和顶体完整率均高于对照组和维生素C添加组(P<0.05)。因此,稀释液中添加0.1 g/L的壳聚糖可达到庆大霉素等传统添加剂的效果,其有效保存时间可达到6 d。

庆大霉素C-6'位氨甲基化修饰基因的研究

探索庆大霉素C-6'位氨甲基化修饰作用的基因。首先构建用于gen T基因缺失的同源重组质粒p FT104,利用接合转移导入绛红色小单孢菌G1008,筛选获得一株gen T基因缺失工程菌GT106(Δgen T)。其次构建用于GT106上gen N基因缺失的重组质粒p FTN203,通过接合转移导入GT106,筛选获得一株工程菌GTN205(Δgen T+gen N)。最后在gen K基因已经明确为C-6'位甲基化酶基因的基础上,在GTN205中敲除gen K基因,筛选获得到一株工程菌GTNK308(Δgen T+gen N+gen K)。工程菌发酵产物经质谱分析结果表明,与出发菌G1008相比,GT106组分未发生变化,而GTN205不再合成庆大霉素C1,产物主要积累在庆大霉素C1a和C2,GTNK308未检测到庆大霉素C2b。结果说明,gen N基因缺失阻断了庆大霉素C1与C2b的合成,表明gen N基因参与修饰绛红糖胺C-6'位氨甲基化,而gen T并不参与修饰绛红糖胺C-6'位氨甲基化。

复合碘联合维生素C溶液冲洗膀胱治疗紫色尿袋综合征的效果分析

目的:评价复合碘联合Vit C溶液冲洗膀胱治疗紫色尿袋综合征的临床效果。方法:选择2013~2017年上海市控江医院收治的长期卧床留置导尿管出现紫色尿袋综合征患者31例为研究对象,其中男12例,女19例,年龄65~89岁。将患者分为试验组16例,给予复合碘溶液50 ml加Vit C注射液4 g溶入0.9%NaCl溶液500 ml冲洗膀胱;对照组15例,给予庆大霉素32万U溶入0.9%NaCl溶液500 ml冲洗膀胱。1次/d,持续两周,同时记录患者治疗前、后尿袋颜色、尿常规、尿培养及pH值的变化,并根据结果判定临床治疗效果。结果:经过两周治疗,试验组患者显效9例、有效5例、无效2例,治疗有效率87.50%;对照组患者显效3例、有效4例、无效8例,治疗有效率46.67%,两组治疗效果比较,差异有统计学意义(P<0.01)。两组患者治疗过程中无不良反应发生。结论:复合碘联合维生素C溶液冲洗膀胱治疗紫色尿袋综合征效果显著。

高效液相色谱-串联质谱法检测水产品中庆大霉素C组分残留量

目的:构建一种准确高效快速检测水产品中庆大霉素C组分的高效液相色谱-串联质谱检测方法。方法:样品用C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,5μm),乙腈-0.1%五氟丙酸梯度洗脱,ESI+离子源,MRM检测模式,外标法定量。结果:在0.005~0.800 mg·L^(-1)浓度与峰面积线性良好,r≥0.9998;在5.0~100.0μg·kg^(-1)加标浓度,平均回收率在71.9%~101.0%,RSD在3.32%~8.55%,方法检出限为5μg·kg^(-1)。结论:该方法可检测水产品中庆大霉素C组分,方法回收率高、准确、灵敏、高效。

硫酸庆大霉素滴眼液质量评价

目的对国产硫酸庆大霉素滴眼液的质量现状进行评价。方法采用法定标准检验与探索性研究相结合,对国家药品计划抽验的23批次样品与调研企业收集的样品进行检验与统计分析。结果法定标准检验结果显示,23批次硫酸庆大霉素滴眼液合格率为100%。探索性研究揭示,硫酸庆大霉素滴眼液的处方仍有进一步优化的空间,优化硫酸庆大霉素滴眼液的黏度和表面张力可改善其治疗效果,选择合理的抑菌剂可减少其刺激性。同时,现行标准中缺失有关物质、庆大霉素C组分、抑菌剂含量测定及不溶性微粒等检查项;对贮藏条件的要求也不十分合理。结论目前国产硫酸庆大霉素滴眼液整体质量一般,质量标准有待提高,建议企业关注处方合理性。

硫酸庆大霉素片的质量评价

目的评价硫酸庆大霉素片的质量,并对质量标准进行完善。方法按法定标准检验与探索性研究相结合,对国家药品计划抽验的156批次样品与调研企业所得样品进行检验,通过对稳定性、有关物质、庆大霉素C组分与溶出行为的考察,对硫酸庆大霉素片的质量进行分析评价。结果法定标准检验结果显示156批次硫酸庆大霉素片合格率100.0%。探索性研究结果显示两家生产企业共8批次样品有关物质过高,同时庆大霉素C组分偏低,分析原因为企业采用不合格原料;稳定性实验结果表明本品稳定;企业间产品溶出行为差异较大,糖衣片批内溶出度RSD较大。结论综合法定标准检验与探索性研究实验,硫酸庆大霉素片质量总体一般。建议相关企业加强原料控制;建议糖衣片生产企业考察并优化处方生产工艺,改善药物溶出度。建议质量标准增订有关物质与庆大霉素C组分检查项,确保标准可控,以及用药安全有效。

庆大霉素标准品制备中效价测定及原材料选择的研究

在近期庆大霉素标准品制备过程中遇到两个问题——双圈与可靠性测验不符合规定。通过调整菌悬液浓度、抗生素浓度及上层菌液加入量使双圈现象得以抑制,以保证测量结果准确可靠。C组分测定结果显示原料药与标准品C组分差异较大,容易导致二者剂量反应直线不平行,进而影响可靠性测验结果。通过更换与标准品C组分更为相近的原料药使可靠性测验符合规定。上述改进措施保证了国家标准品赋值的准确性,以期为同业人员效价测定遇到类似问题提供借鉴。

庆大霉素组分差异对效价测定可靠性测验的影响

目的对庆大霉素组分差异与效价测定可靠性测验的关系进行探究,以期得到导致可靠性测验不符合规定的组分差异限值。方法按照《中国药典》2015版二部庆大霉素品种下庆大霉素C组分检查项的液相色谱-蒸发光散射检查法进行组分含量测定,按照《中国药典》2015版四部微生物检定法进行管碟法与浊度法的测定。结果庆大霉素供试品与标准品C_2+C_(2a)相对百分含量差异超过4%时,即会导致三剂量法可靠性测验不符合规定。结论应关注多组分抗生素组分差异对效价测定准确性的影响,并在相应质量标准中对允许的组分含量范围进行进一步细化。

不同方法治疗感染伤口的换药体会

[目的]寻找好的治疗感染伤口的换药方法。[方法]将60例感染伤口病人随机分为观察组和对照组各30例。两组病人均先用3％过氧化氢和生理盐水彻底清洗伤口后，对照组用0．1％依沙吖啶纱布湿敷；观察组用庆大霉素、维生素C直接涂在创面上，并用红外线照射20min～30min后，再外敷湿润烧伤膏。[结果]观察组的换药次数和愈合天数比对照组要少，治愈率和有效率比对照组高。[结论]采用庆大霉素、维生素C、湿润烧伤膏辅以红外线照射治疗感染伤口，可缩短伤口愈合时间．提高换药效果。