相同产地3种龙胆属植物根及根茎中化学成分的差异分析

目的 为从龙胆属植物中挖掘坚龙胆可替代资源提供依据。方法 采用高效液相色谱(HPLC)法对3种龙胆属植物(坚龙胆、头花龙胆、微籽龙胆)根及根茎中4种活性成分(龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷)的含量进行测定;采用超高效液相色谱-电喷雾-四极杆飞行时间高分辨质谱联用(UPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对上述植物根及根茎中化学成分进行鉴定,并进行主成分分析(PCA)。结果 头花龙胆与坚龙胆根及根茎中均含有龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷这4种活性成分,其中头花龙胆和坚龙胆根及根茎中龙胆苦苷含量均是2020年版《中国药典》(一部)限量标准的4倍以上;而微籽龙胆根及根茎中仅检测到獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷,其中的獐牙菜苷和苦龙胆酯苷含量分别是坚龙胆的34.12、8.81倍。通过UPLCESI-Q-TOF-MS技术从3种龙胆属植物根及根茎中共鉴定出33种化合物,主要为环烯醚萜类成分;此外,坚龙胆和头花龙胆中还含有酮类成分,微籽龙胆中还含有黄酮类成分。PCA结果显示,头花龙胆和坚龙胆差异较小,而微籽龙胆与坚龙胆差异较大。结论 同一产地头花龙胆与坚龙胆根及根茎的化学成分差异较小,存在可替代性;而微籽龙胆与坚龙胆根及根茎的化学成分差异较大,不能代替坚龙胆入药。

头花龙胆多酚工艺优化及体外生物活性研究

采用响应面法,以超声辅助提取的方式对头花龙胆总多酚提取工艺进行优化,并检测其多酚提取物体外降糖降脂活性。结果显示:最佳提取参数为超声时间78 min,料液比1∶81(g/mL),乙醇体积分数61%。此条件下多酚得率最高,达到2.45%,与预测得率2.42%的相对偏差为1.24%,说明此模型拟合度较好。体外生物活性检测发现,其多酚提取物对葡萄糖吸收有延迟作用,同时对胆酸盐具有结合能力。

超声提取头花龙胆总黄酮的工艺优化

为了综合利用头花龙胆,采用超声法提取头花龙胆总黄酮,在单因素试验基础上,采用L9(34)正交设计对其工艺进行优化。结果表明:各因素对头花龙胆总黄酮提取率的影响大小为料液比>乙醇浓度>超声时间,头花龙胆总黄酮的最佳提取条件为乙醇浓度70%,料液比1∶50,超声提取50min,在该工艺条件下,头花龙胆总黄酮的提取率为2.977%。

四种龙胆的显微结构特征比较

为比较红花龙胆(Gentiana rhodantha)与翼萼龙胆(Gentiana pterocalyx)、滇龙胆(Gentiana rigescens)与头花龙胆(Gentiana cephalantha)的显微结构差异,用石蜡组织切片法及徒手切片法对4种龙胆的显微结构进行了研究。结果表明,红花龙胆与翼萼龙胆、滇龙胆与头花龙胆显微结构特征有明显区别。在根横切面方面,红花龙胆皮层厚,导管细胞横切口径小,无明显射线,翼萼龙胆的特征与红花龙胆的相反;滇龙胆与头花龙胆的表皮和皮层早脱,次生韧皮部发达,但滇龙胆韧皮部薄壁组织细胞较大,而头花龙胆较小。在茎横切面方面,红花龙胆中央髓约占切面的1/3,而翼萼龙胆约占切面的1/2;滇龙胆髓仅外部有散落分布的纤维束,头花龙胆髓部均可见纤维束散落分布。在叶横切面方面,红花龙胆中脉维管束较大,而翼萼龙胆较小;滇龙胆中脉维管束小,未见纤维束,头花龙胆中脉维管束大,纤维束成对位于木质部两侧。在叶表皮方面,4种植物表皮细胞径向壁波曲度与气孔指数有一定差异。根据显微结构特征可以将这4种植物区别开来。

头花龙胆种子形态及萌发特性初探

以贵州水城产野生头花龙胆Gentiana cephalantha种子为材料,将之分成60目与80目两个等级,研究其在不同温度下贮藏;不同温度、不同试剂及其不同浓度浸种的萌发特性。结果表明:60目种子长径为0.718±0.0669mm,短径为0.430±0.0297mm,千粒重为0.0287±0.0010;80目种子长径为0.558±0.0412mm,短径为0.320±0.0297mm;千粒重为0.0198±0.0008g。60目种子的萌发率、萌发势及萌发指数大于80目种子,差异不显著(P>0.05);在4℃和室温下贮藏的种子,其萌发率、萌发势和萌发指数差异不显著(P>0.05);恒温与变温浸种,其萌发率、萌发势和萌发指数差异也不显著(P>0.05);赤霉素与硝酸钾浸种,能提高种子萌发率。赤霉素浸种最佳浓度为100 mg/L,其萌发率最高为81.5%,硝酸钾浸种最佳浓度为2%,其萌发率最高为76%。

白族药用植物头花龙胆品质评价的初步探讨

目的:对大理州不同居群白族药用植物头花龙胆进行品质评价初步探讨。方法:采用HPLC法测定大理州不同居群头花龙胆根及根茎中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、獐芽菜苷、苦龙胆酯苷的含量,并建立其HPLC指纹图谱,用单因素方差分析、聚类分析、主成分分析等方法对头花龙胆根及根茎中主要活性成分进行品质评价。结果:大理州不同居群头花龙胆根及根茎中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、獐芽菜苷、苦龙胆酯苷含量(P<0.01)具有极显著差异,龙胆苦苷含量超过中国药典坚龙胆限量标准的5倍;头花龙胆HPLC指纹图谱中有19个共有峰,相似度均在0.995以上,同时与其相同居群的坚龙胆指纹图谱共有模式有15个共有峰;不同居群头花龙胆中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、獐芽菜苷、苦龙胆酯苷总含量聚类分析和HPLC指纹图谱主成分分析结果一致。结论:大理州不同居群头花龙胆根及根茎中龙胆苦苷含量高、品质好,为白族民间长期用头花龙胆替代坚龙胆入药提供重要的依据。

3种龙胆属药用植物叶中主要有效成分的积累

采用高效液相色谱法测定同一产地的坚龙胆、头花龙胆和微籽龙胆叶中的龙胆苦苷(1)、獐芽菜苦苷(2)、獐芽菜苷(3)和苦龙胆酯苷(4),并将其叶的HPLC指纹图谱与坚龙胆根及根茎的指纹图谱进行对比,以单因素方差分析法分析其叶中主要有效成分的积累。结果表明坚龙胆和头花龙胆叶中的1、2含量极显著高于微籽龙胆(P<0.01),微籽龙胆叶中3、4含量极显著高于坚龙胆和头花龙胆(P<0.01)。坚龙胆根及根茎与坚龙胆、头花龙胆叶的指纹图谱相似度较高(0.999和0.991),成分差异较小;而与微籽龙胆叶指纹图谱相似度极低,成分差异较大。

三种龙胆属白族药用植物的品质评价及质量等同性

以坚龙胆、头花龙胆、微籽龙胆为试材,采用HPLC法,测定了坚龙胆、头花龙胆、微籽龙胆根及根茎中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、獐芽菜苷、苦龙胆酯苷的含量,并用单因素方差分析、聚类分析、色谱法分析对其品质及质量等同性进行评价。结果表明:微籽龙胆根及根茎中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、獐芽菜苷、苦龙胆酯苷含量(P<0.01)与坚龙胆、头花龙胆具有极显著差异,而坚龙胆与头花龙胆无显著差异且龙胆苦苷含量均超过国家药典标准的5倍,微籽龙胆根及根茎中未检测到龙胆苦苷;坚龙胆和头花龙胆根及根茎HPLC色谱图相似度均达0.997,微籽龙胆相似度仅为0.015;坚龙胆、头花龙胆、微籽龙胆根及根茎中主要活性成分含量及其总含量聚类分析结果相同,坚龙胆和头花龙胆聚为一类,微籽龙胆单独为一类。头花龙胆可以替代坚龙胆入药,但其药理性、毒理性等还需进一步的研究;微籽龙胆不能替代坚龙胆入药。