基于生态位模型的藏药线叶龙胆适宜性及品质区划研究

目的通过对线叶龙胆药材的潜在分布区的分析及品质区划的研究,为指导藏药线叶龙胆资源保护、可持续利用与野生驯化提供理论依据。方法通过查询网络标本馆和野外实地调查,采用最大熵(MaxEnt)模型和地理信息系统软件ArcGIS10.2对我国线叶龙胆进行生态适宜性区划分析,应用SPSS25.0软件构建指标成分与环境因子之间的关系模型,结合ArcGIS软件空间分析技术,形成线叶龙胆药材品质区划。结果影响线叶龙胆生态适宜性的主要环境因子是海拔、5月份降水量、4月份降水量、12月份降水量和昼夜温差月均值。线叶龙胆最适宜生长区主要集中在甘肃、四川和青海交界处,西藏部分地区及四川部分地区。西藏南部、四川西南部线叶龙胆药材综合品质较高。结论本研究结果可为线叶龙胆的生产布局及质量评价提供参考。

藏药线叶龙胆化学成分的研究

目的对藏药线叶龙胆化学成分进行研究。方法用普通硅胶柱色谱和制备薄层色谱等方法进行分离、纯化,并经核磁共振(NMR)、质谱(MS)、红外(IR)等现代波谱技术鉴定结构。结果从线叶龙胆的乙醇提取物中分离并鉴定了10个化合物,α-香树脂醇(1),β-香树脂醇(2),28-羟基-α-香树脂醇(3),28-羟基-β-香树脂醇(4),3β-棕榈酸酯-28-羟基-α-香树脂醇(5)3,β-棕榈酸酯-28-羟基-β-香树脂醇(6),胡萝卜苷(7),β-谷甾醇(8),28-羟基-羽扇豆醇(9),24-羟基-羽扇豆醇(10)。结论这10个化合物均为首次从该植物中分离得到。

藏药提宗龙胆和线叶龙胆花中四种苦苷类成分的HPLC测定

应用HPLC分析方法同时测定藏药提宗龙胆和线叶龙胆两种植物花中落干酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷4种苦苷类成分的含量。采用Econosphere C18色谱柱(250×4.6mm,5μm),以甲醇-0.5%乙酸为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0mL/min;检测波长为245nm。结果表明,除提宗龙胆中未检出獐牙菜苦苷外,其它成分均在两种植物中存在,但含量存在一定的差异。

青藏高原晚期开花植物线叶龙胆的传粉生态学

线叶龙胆(Gentiana lawrencei var.farreri)主要分布在青藏高原,在晚秋和早冬开花。为了探明线叶龙胆繁育系统特点,探讨其对环境的繁殖适应特征,对其传粉生态学过程进行了连续3年的观察。线叶龙胆自然状态下的结籽率很低,存在严重的花粉限制。雌雄异位和不完全雌雄异熟的花特征表明其结实必须依赖昆虫传粉。繁育系统实验表明,部分套袋花也能结实,这可能主要是由蓟马(Thripidae spp.)和蚂蚁(Formica spp.)等小昆虫协助自交所致。克什米尔熊蜂(Bombus kashmirensis)和苏氏熊蜂(B.sushikini)是线叶龙胆的有效传粉昆虫,但其访花频率非常低,分别为0.006和0.005time.flower-1.h-1。线叶龙胆花持续期和柱头可授能力都长于其他已报道的龙胆类植物,从而在温度低、传粉昆虫少的情况下提供了更多传粉机会。线叶龙胆同时具有协助自交和杂交的繁殖现象,以及较长的花持续期和柱头持续能力,这可能是其在青藏高原地区赖以存活和延续的一个重要原因。

线叶龙胆的胚胎学研究

首次报道了龙胆属华丽组的胚胎发育过程，其代表种线叶龙胆花药四室；药壁发育为双子叶型；绒毡层两型起源，细胞具双核和多核，绒毡层细胞１－３次分裂形成“横格”和“类胎座”，原位退化，属非典型的腺质型；中层细胞两层；药室内壁纤维状加厚。小孢子母细胞减数分裂为同时型，四分体的排列主要为四面体形；成熟花粉为３－细胞型。子房为２心皮，１室，超侧膜胎座。胚珠１０－１５列，腹维管束彼此靠近，并在中下部融合。薄珠心，单珠被，倒生胚珠。大孢子母细胞减数分裂形成的４个大孢子呈直列式排列。胚囊发育为蓼型。成熟胚囊为矩圆形。极核在受精前融合为次生核。雄蕊先熟，异花传粉，珠孔受精。受精作用属于有丝分裂前配子融合类型。胚乳发育为核型。胚胎发育为茄型酸浆Ⅱ变型，当种子散落时胚只发育至球形胚阶段。结合已有的资料，还总结了龙胆属的胚胎学特征。

基于硫酸-蒽酮法对不同产地藏药线叶龙胆多糖的含量测定

研究线叶龙胆药材中多糖含量的测定方法,分析不同产地线叶龙胆药材中多糖的含量。结果表明,采用硫酸-蒽酮法,操作简便,结果准确;样品经硫酸-蒽酮显色后于620 nm处测定吸收度,在此波长处溶液的吸收度与葡萄糖含量呈良好的线性关系;线性范围0.01～0.07 g·L-1（r=0.996 7）,加样回收率99.41%,RSD 2.0%;综合考虑实验条件,确定料液比为1∶60、提取时间为50 min、乙醇浓度为4倍量（体积分数80%）。测得产自甘肃夏河的线叶龙胆中多糖质量分数为0.743%,含量最高,为线叶龙胆多糖的进一步研究奠定良好的基础。

RP-HPLC法测定提宗龙胆和线叶龙胆部位中不同齐墩果酸和熊果酸含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定提宗龙胆和线叶龙胆不同部位中齐墩果酸和熊果酸的含量。方法:采用Kro-masil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.2%磷酸水溶液(90∶10)为流动相,流速0.8 mL·min-1,检测波长205nm,柱温30℃。结果:齐墩果酸和熊果酸均达到基线分离,线性范围分别为0.652～6.52μg(r=0.9998)和0.996～9.96μg(r=0.9997);平均回收率(n=6)分别为101.2%(RSD=1.6%)和98.0%(RSD=1.7%)。结论:采用RP-HPLC法同时测定提宗龙胆和线叶龙胆中齐墩果酸和熊果酸的含量,方法简便、快速、准确,可用于提宗龙胆和线叶龙胆的质量控制。