17β-雌二醇抗BALB/c与C57BL/6小鼠视网膜光照损伤的比较

目的:通过建立BALB/c与C57BL/6小鼠视网膜光损伤模型,研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)的视网膜神经保护作用,为成功构建E2抗视网膜光损伤模型提供实验数据。方法:成年雌性BALB/c、C57BL/6小鼠各40~45只,实验分组如下:正常对照组,去势手术对照组,去势光照组(小鼠去势手术14d后进行持续10000lx白光光照刺激4、8、12、16、24h组),玻璃体腔注射假手术组,生理盐水组和E2预处理组(去势手术14d后暗适应24h后分别行玻璃体腔注射2μL生理盐水或10-5 mol/L E2),每组各6只。通过石蜡切片HE染色、TUNEL染色、视网膜电图检测视网膜形态及功能变化。结果:去势光损组视网膜内核层/外核层厚度从白光10000lx光照4h组开始显著减小;玻璃体腔注射E2预处理可显著抑制两种品系小鼠视网膜各层细胞的凋亡(P<0.01)以及C57BL/6小鼠视网膜电图检测中最大混合反应a波和b波波幅的下降(P<0.05)。结论:相同光照条件对两种品系小鼠光损敏感性存在差异;E2对BALB/c小鼠无论是视网膜形态学及功能学上都产生了保护作用,而对C57BL/6小鼠功能学保护作用显著。

日本血吸虫感染小鼠肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答

目的观察C57BL／6小鼠感染日本血吸虫后肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答。方法20只C57BU6小鼠随机分为感染组和对照组．每组10只，感染组小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴，每鼠（40＋5）条。感染后5-6周分离小鼠肠系膜淋巴结的淋巴细胞，分别用抗小鼠CD3单克隆抗体（anti-CD3，1μg／m1）和抗小鼠CD28单克隆抗体（anti-CD28，1μg/ml）刺激，培养4h后收集细胞，RT-PCR检测小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞中自细胞介素17（IL-17）和维甲酸相关孤独受体（ROR-γt）mRNA的转录水平；培养72h后，ELISA检测细胞培养上清液IL-17和1干扰素（IFN-1）的含量。同时用佛波酯（PMA，10ng／m1）和离子霉素（1μg／ml）刺激淋巴细胞5h后，胞内细胞因子染色，流式细胞术检测Th17细胞的含量和其他细胞因子的产生。结果ELISA检测结果显示，感染小鼠肠系膜淋巴结培养物上清液中IFN-γ[（214．3±62．6）pg／ml]和IL-17[（176．8±62．1）pg／ml]的含量明显高于健康小鼠[（46．7±13．9）和0pg／ml]（P〈0．05）。RT-PCR检测结果显示，IL-17和ROR-γt mRNA转录水平也明显高于健康小鼠。感染小鼠肠系膜淋巴细胞CD4＋T细胞中，Th17细胞的比例为（0．55±0．03）％，明显高于健康小鼠[（0．16±0．01）％]（只以05）。在CD4＋T细胞中，IL-17＋ IL4＋细胞占0．06％，IL-17＋IFNγt和IL-17＋IL5＋细胞各占0．02％，IL-17＋ IL-9＋细胞占0.01％，未检测到Tl-17＋IL-10＋和IL-17＋Foxp3＋细胞。结论日本血吸虫感染C57BIJ6小鼠的肠系膜淋巴结能诱导Th17细胞产生。Th17细胞能分泌IL-4，及少量的IFN-γ、IL5和IL-9，不分泌IL-10，也不表达Foxp3。

恩格列净联合二甲双胍治疗老年2型糖尿病患者的临床疗效对IL-17A、IL-22、IFN-γ水平的影响

【目的】探讨恩格列净联合二甲双胍治疗2型糖尿病(T2DM)老年患者的临床疗效及对白细胞介素-17A(IL-17A)、IL-22、干扰素-γ(IFN-γ)水平的影响。【方法】选取2020年1〜7月在本院诊治的T2DM老年患者108例,按照随机数表法分为观察组和对照组,每组54例。对照组采用二甲双胍治疗,观察组在对照组基础上加用恩格列净治疗,均治疗3个月。比较两组临床疗效及治疗前后血糖指标[空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbAlc)]、胰岛功能指标[空腹胰岛素(FINS)、餐后2 h胰岛素(PINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛p细胞功能指数(HOMA-β)]、IL-17 A、IL-22、IFN-γ水平、血脂[低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)]、血压[舒张压(DBP)、收缩压(SBP)]和不良反应发生率。【结果】观察组总有效率为94.44%(51/54),显著高于对照组的81.48%(44/54),其差异有统计学意义(χ^(2)=4.285,P=0.038);治疗1个月、3个月后,观察组FPG、2hPG、HbA1 c、HOMA-IR、IL-17A、IL-22、IFN-γ、LDL-C、TG、TC、DBP、SBP水平显著低于对照组,HOMA-β、FINS、PINS、HDL-C水平显著高于对照组,其差异均有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应发生率为9.26%(5/54),与对照组的5.56%(3/54)比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.135,P=0.713)。【结论】二甲双胍联合恩格列净治疗老年T2DM可有效降低血糖,改善胰岛功能、血脂、血压,下调IL-17A、IL-22、IFN-γ水平,提高临床疗效,且安全性高,值得临床推广应用。

IL-17抗体对DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎的影响

目的探讨腹腔内注射白介素-17A(IL-17A)抗体与IL-17F抗体对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的影响。方法 48只小鼠,随机分为正常对照组、模型组、抗IL-17A组、抗IL-17F组,每组12只。除正常对照组外,其余3组小鼠均饲以DSS溶液。抗IL-17A组和抗IL-17F组于实验第2、4、6天腹腔内分别注射IL-17A抗体和IL-17F抗体。观察4组小鼠体重、疾病活动度指数(DAI)评分、结肠长度及炎症病理学评分变化情况。检测血清IL-17A、IL-17F水平及结肠组织中IL-17A和IL-17F蛋白表达情况。结果与正常对照组比较,模型组、抗IL-17A组、抗IL-17F组小鼠体重下降,DAI评分增高,结肠变短,结肠炎症病理学评分增高,血清和结肠组织中IL-17A和IL-17F蛋白含量增高(P<0.05,P<0.01)。抗IL-17F组与模型组、抗IL-17A组比较,DAI评分更低、结肠更长、结肠炎症病理学评分更低(P<0.05,P<0.01)。抗IL-17F组血清IL-17A、IL-17F及结肠组织IL-17F水平均低于模型组(P<0.05)。结论对于DSS引发的UC,使用IL-17F抗体能够减轻肠道炎症程度。

咪喹莫特对BALB/c和C57BL/6小鼠银屑病样皮损诱导作用的比较

目的观察咪喹莫特对不同品系小鼠银屑病样皮损诱导作用的差异及其作用机理。方法选用BALB/c和C57BL/6两种小鼠品系,分别在其背部涂抹62.5 mg含5%咪喹莫特的明欣利迪乳膏,在涂抹2,4,6 d后,采用PAIS评分观察小鼠背部皮肤形态学变化;HE染色观察涂药局部皮肤病理组织学变化,显微镜下测量表皮厚度;实时荧光定量PCR法测定IL-23/IL-17轴相关细胞因子的相对表达量。结果随咪喹莫特涂抹天数的增加,BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠背部皮肤均逐渐出现鳞屑、红斑、表皮增厚等银屑病样表现。与同时间段C57BL/6小鼠银屑病样皮损比较,BALB/c小鼠皮损PAIS评分更高(P<0.05或P<0.01),病理组织学改变及表皮增厚均更显著(P<0.05或P<0.01)。涂抹咪喹莫特2 d后,两种小鼠IL-23、IL-17A和IL-17F mRNA相对表达量均显著升高,且均呈现先高后低的动态变化。其中BALB/c小鼠表达峰值出现于涂药后2 d,C57BL/6小鼠表达峰值出现于涂药后4 d。结论咪喹莫特均可诱导BALB/c和C57BL/6小鼠出现人类银屑病样皮损,其中BALB/c小鼠银屑病样皮损更典型,可能更适用于人类银屑病研究,IL-23/IL-17轴的激活是皮损出现的重要诱导因素之一。

HINS-R DNA Ex-17基因多态性与细胞低镁介导的DM高血压高发倾向的关系

目的 :探讨人胰岛素受体 (HINS R)基因多态性及低镁与DM患者高血压高发倾向的关系。方法 :采用PCR SSCP技术和ICP AES法分析了 6 3例 2型DMHINS RDNAEx 17多态性情况及RBCMg2 + 含量。结果 :Ex 17位点呈现多态性 5例 ,其RBCMg2 + 明显低于其它病例 (P <0 .0 1) ,而FINS水平明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,其它DM伴高血压倾向者RBCMg2 + 也低于不伴高血压的DM者 ,血清Mg2 + 两组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :HINS RDNAEx 17多态性常与高胰岛素血症或IR关联 ,且常伴细胞内Mg2 + 储备低下的情况 ,可被血清Mg2 + 正常的表面现象所掩盖 。

白介素-17在自身免疫性肝炎中的作用及其机制研究

目的:探讨IL(白细胞介素)-17在自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)患者和AIH小鼠中的作用及其机制。方法:选取AIH患者和健康者各12例,分离其外周血单个核细胞(PBMC),实时定量PCR方法检测PBMC中IL-17的表达。将S-100肝抗原与弗氏完全佐剂经腹腔注入到C57BL/6小鼠体内而建立AIH小鼠模型,通过尾静脉注入IL-17中和抗体,观察小鼠肝功能变化和肝脏病理组织学变化。结果:与健康者相比,AIH患者PBMC中IL-17的表达明显增高。AIH小鼠模型中,IL-17中和抗体明显地降低了血清中ALT水平,并且减轻了小鼠肝脏炎症反应。结论:IL-17在AIH患者血清中明显升高。采用IL-17中和抗体干预后,其AIH小鼠的肝功能及肝脏损伤明显好转。证实了IL-17在AIH的发病过程中起了极其重要的作用。

TLR7激动剂CL097对实验性自身免疫性葡萄膜炎中Th17细胞活性的促进作用

背景 研究表明,Toll样受体7（TLR7）在自身免疫性疾病中发挥重要作用,但TLR7在实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）中是否通过树突状细胞（DCs）调控辅助性T淋巴细胞17（Th17）的作用机制鲜见报道.目的 探讨TLR7激动剂CL097处理的小鼠骨髓树突状细胞（BMDCs）对光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP） 1-20-特异性Th17细胞的影响.方法 采用C57BL/6小鼠股骨和胫骨分离小鼠骨髓细胞,将重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rmGM-CSF）及重组小鼠白细胞介素-4（rmIL-4）加入培养基在体外定向诱导BMDCs,于诱导后第6天在培养基中加入5μg/ml CL097作用8h,对照组加入PBS,采用实时荧光定量PCR技术检测CL097处理组与对照组BMDCs中IL-6、IL-23、IL-1β及转化生长因子-β（TGF-β） mRNA的相对表达量.小鼠腹腔内注射百日咳毒素1μg,注射后2h将IRBP1-20与等容积含有结核分枝杆菌HR37RA的完全弗氏佐剂充分乳化后主动免疫C57BL/6小鼠,眼底检查参照Caspi 0 ～4分的标准进行炎症评分.免疫后第13天取眼球制作病理切片,苏木精-伊红染色后行组织病理学检查,并分离小鼠脾脏及淋巴结中IRBP1.20-特异性T细胞,分别与CL097处理组及对照组的BMDCs共培养5d,收集细胞,采用实时荧光定量PCR技术检测2个组细胞中IL-17、γ干扰素（IFN-γ）、维甲酸相关核孤儿受体γt（RORγt）和T细胞中表达的T盒21转录因子（T-bet） mRNA的相对表达量;采用流式细胞仪检测并分析CL097处理组和对照组Th1与Th17细胞比例的变化.结果 EAU模型成功建立.实时荧光定量PCR检测结果显示,CL097处理组BMDCs中IL-6、IL-23、IL-1β mRNA的相对表达量明显高于对照组,差异均有统计学意义（t=4.560,P=0.045; t=5.476,P=0.032; t=17.240,P=0.003）,而TGF-β mRNA相对表达量明显低于对照组,差异有统计学意义（t=10.410,P=0.009）.CL097处理组BMDCs与IRBP1-20-特异性T细胞共培养后,RORγt和IL-17 mRNA相对表达量较对照组明显升高,差异均有统计学意义（t=8.844,P=0.012;t=8.831,P=0.013）,而CL097处理组中T-bet、IFN-γmRNA的相对表达量与对照组比较差异均无统计学意义（t=2.078,P=0.173; t=1.082,P=0.393）.流式细胞仪检测证实,CL097处理组Th17细胞的百分比为（17.750±4.793）％,明显高于对照组的（10.240±3.173）％,差异有统计学意义（t=4.938,P=0.039）,CL097处理组和对照组Th1细胞的百分比分别为（1.123±0.356）％和（1.060±0.384）％,差异无统计学意义（t=2.714,P=0.113）.结论 TLR7激动剂CL097促进BMDCs分泌与Th17细胞极化相关的细胞因子,并促进IRBP1-20-特异性Th17细胞的分化.

急性支气管哮喘患儿血清LTB4、IL-17水平和肺功能的变化及意义

【目的】探讨急性支气管哮喘患儿血清白三烯B4(LTB4)、白介素17(IL-17)和肺功的能变化及临床意义。【方法】在本院治疗的急性哮喘患儿共90例,依据病情严重度分为轻度组、中度组和重度组。选择健康儿童30例作为对照组。比较四组血清LTB4、L-17、IgE水平和肺功能情况。【结果】轻度、中度及重度哮喘组患儿的血清IL-17、LTB4和IgE水平随哮喘程度的加深逐渐增高,且以重度组患儿的相关数值上升最为显著,各组之间相比较差异均有显著性(P <0.05)。除轻度组与对照组的LTB4水平比较差异无显著性(P >0.05),三组不同程度哮喘患儿各指标水平均明显高于对照组,且差异均有显著性(P <0.05)。轻度组、中度组和重度组患儿的第一秒钟用力呼气量(FEV1)/用力肺活量(FVC)的比值(FEV1%),最大呼气流量(PEF),50%、25%肺活量最大呼气流速(V50、V25)水平随哮喘程度的加深逐渐降低,且以重度组患儿的肺功能相关数值降低最为显著,各组间相比较差异均有显著性(P<0.05)。【结论】急性支气管哮喘患儿血清LTB4 、L-17水平明显增加,PEF、FEV1、V50,V25等肺功能指数明显下降,且与患儿病情严重程度相关。

芍药苷对溃疡性结肠炎小鼠Treg/Th17平衡、氧化应激反应的调节作用

目的:研究芍药苷对溃疡性结肠炎(UC)小鼠调节性T细胞(Treg细胞)/辅助性T细胞17(Th17)(Treg/Th17)平衡、氧化应激反应的调节作用。方法:选择雄性C57小鼠并随机分为对照组、模型组、芍药苷组、美沙拉嗪组,后两组采用2,4,6-三硝基苯磺酸/乙醇灌肠的方式建立UC小鼠模型,芍药苷组给予芍药苷干预,美沙拉嗪组给予美沙拉嗪干预。比较四组间黏膜损伤指数(CMDI)、黏膜病理改变及评分、Th17、 Treg细胞、氧化应激反应的差异。结果:模型组小鼠肠黏膜出现了显著的病理改变且CMDI为(5.96±0.95),高于对照组的(0.74±0.14),外周血中Treg数目、肠黏膜及血清中白细胞介素-10(IL-10)、总抗氧化能力(T-AOC)的含量均明显低于对照组,外周血中Th17数目、肠黏膜及血清中IL-17、丙二醛(MDA)的含量均明显高于对照组;芍药苷组和美沙拉嗪组小鼠肠黏膜的病理改变明显改善且病理评分、CMDI均低于模型组的,外周血中Treg数目、肠黏膜及血清中IL-10、T-AOC的含量均明显高于模型组,外周血中Th17数目、肠黏膜及血清中IL-17、MDA的含量均明显低于模型组。结论:芍药苷能够改善UC小鼠肠黏膜的病理改变且该作用与调节Treg/Th17平衡、减轻氧化应激反应有关。

IL-35、IL-17在糖尿病视网膜病变患者血清和房水中的表达水平及其意义

【目的】探讨白细胞介素-35(IL-35)、白细胞介素-17(IL-17)在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者血清和房水中的表达水平及其意义。【方法】选取2019年3月至2021年3月在泾阳县医院行白内障超声乳化手术的DR患者80例(80只眼)为研究对象,另选取同期在泾阳县医院行白内障超声乳化手术的老年白内障患者65例(65只眼)为对照组。比较两组患者临床资料;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测所有患者血清、房水中IL-35、IL-17水平;采用Pearson相关系数分析血清、房水中IL-35、IL-17水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清、房水中IL-35、IL-17水平及两者联合对DR的诊断价值。【结果】与对照组比较,DR组患者血清、房水中IL-35水平明显降低(P<0.05),IL-17水平均明显升高(P<0.05),且DR患者血清IL-35、IL-17水平低于房水中IL-35、IL-17水平(P<0.05);DR患者血清、房水中IL-35与IL-17水平均呈负相关(P<0.05);血清中IL-35、IL-17水平及两者联合检测对DR诊断的曲线下面积(AUC)分别为0.843、0.863、0.957,两者联合检测诊断DR的AUC明显高于血清中IL-35、IL-17水平的单独诊断(P<0.05);房水中IL-35、IL-17水平及两者联合检测对DR诊断的AUC分别为0.830、0.882、0.963;两者联合检测诊断DR的AUC明显高于房水中IL-35、IL-17水平的单独诊断(P<0.05)。【结论】DR患者血清、房水中IL-35低表达,IL-17高表达,均对DR具有一定诊断作用,但血清标本取材方式简单,更有实用价值。

天灸“肺俞”穴对健康大鼠Th17/Treg免疫平衡及炎症反应的影响

目的探讨天灸“肺俞”穴对健康大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫平衡的影响。方法将48只大鼠随机分为假天灸组10只,天灸组38只。假天灸组大鼠将空白的穴位贴贴敷于双侧“肺俞”穴,天灸组大鼠将填有复方斑蝥膏的穴位贴贴敷于双侧“肺俞”穴,贴敷时间为8 h。8 h后天灸组大鼠成功发泡30只,再随机分为天灸1天组、天灸3天组、天灸7天组,每组10只。实验期间记录大鼠一般情况;天灸不同时间组在相应时间取材,采用HE染色观察大鼠贴敷区域皮肤的病理改变;采用流式细胞术检测外周血Th17、Treg细胞表达,计算Th17/Treg值;采用ELISA法检测血清白细胞介素17A(IL-17A)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)含量。结果与假天灸组比较,天灸1天组大鼠贴敷区域可见水泡,大鼠经常搔抓天灸区域皮肤,皮肤出现角质层松散,棘层、颗粒层增厚,基底层细胞缺失,炎性细胞浸润,外周血Treg及血清IL-17A、IL-6水平升高(P<0.01);天灸3天组天灸区域结痂并可见部分脱落,皮肤病理改变最明显,外周血Th17、Treg表达及血清IL-17A、IL-6、IL-10水平升高(P<0.01);天灸7天组天灸区域皮肤损伤及病理改变基本恢复。天灸1、3、7天组Th17/Treg值均较假天灸组降低(P<0.05或P<0.01)。与天灸1天组比较,天灸3天组外周血Th17、Treg表达及血清IL-17A升高;天灸7天组外周血Treg表达及血清IL-17A、IL-6降低,Th17/Treg值升高(P<0.05或P<0.01)。与天灸3天组比较,天灸7天组外周血Th17、Treg表达及血清IL-17A、IL-6、IL-10降低,Th17/Treg值升高(P<0.05或P<0.01)。结论天灸“肺俞”穴能使健康大鼠Th17/Treg平衡向Treg偏移,使其逐渐趋向免疫平衡,并调节血清中相关的炎症因子防止炎症的发生发展。

针刺肺俞及四花穴对慢性支气管炎迁延期老年患者免疫球蛋白的影响

目的观察针刺肺俞及四花(膈俞和胆俞)穴对慢性支气管炎迁延期老年患者免疫球蛋白的影响。方法将60例老年慢性支气管炎迁延期患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。两组均采用常规药物治疗,治疗组采用针刺肺俞及四花穴治疗,对照组采用口服蜜炼川贝枇杷膏治疗。分别观察两组治疗前后免疫球蛋白变化。结果治疗组治疗后免疫球蛋白各项指标(IgA、IgM、IgG)与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后免疫球蛋白各项指标与对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论针刺肺俞及四花穴对慢性支气管炎迁延期老年患者免疫球蛋白具有升高作用。

膈俞穴注射川芎嗪治疗冠心病临床研究

本文对１００例患者分别进行了穴位注射药液及穴位电针刺激，比较观察了其对血浆６－酮－前列腺素Ｆ１α（６－Ｋ－Ｐ）含量、血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）含量和６－Ｋ－Ｐ／ＴＸＢ２比值的影响。结果一疗程后，膈俞川芎嗪组、膈俞生理盐水组、膈俞电针组、肺俞川芎嗪组均能调节血浆６－Ｋ－Ｐ、血浆ＴＸＢ２及６－Ｋ－Ｐ／ＴＸＢ２比值（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１），肺俞电针组无此作用（Ｐ＞０．０５）。进一步的分析表明，有效组间的疗效亦有一定的差异。

膈俞穴注射川芎嗪对冠心病血液流变学的影响

本文对１００例冠心病血液流变学指标异常增高的患者，进行了穴位注射药液及穴位电针刺激的疗程作用比较观察。结果表明，治疗１疗程后，膈俞川芎嗪组、膈俞生理盐水组、膈俞电针组、肺俞川芎嗪组均能使增高的血液流变学指标降低（Ｐ＜０．０５～０．０１），而肺俞电针组无此作用（Ｐ＞０．０５），其中膈俞川芎嗪组疗效最佳。

电针肾俞、膈俞、百会穴对拟血管性痴呆小鼠脑缺血、缺氧、脑水肿的影响

目的 :观察电针肾俞、膈俞、百会穴对拟血管性痴呆小鼠脑缺血、缺氧、脑水肿的影响。方法 :复制脑缺血再灌注拟血管性痴呆小鼠模型 ,电针肾俞、膈俞、百会穴 ,分别于术后 7d、1 5d、30 d,与喜德镇对照治疗 ,记录小鼠张口喘气时间 ,计算脑指数及脑含水量。结果 :造模导致了小鼠脑缺血、缺氧 ,早期还出现脑组织水肿 ,表现为张口喘气时间缩短 ,脑指数和脑含水量增加。而电针和喜德镇均可延长张口喘气时间、降低脑指数和脑含量 ,具有抗脑缺氧和减轻脑水肿程度的作用 ,但疗效以电针为优。结论 :电针肾俞、膈俞、百会穴对该模型出现的脑缺血、缺氧状态 ,及早期的脑组织水肿有显著改善作用 ,此可能为针刺治疗 VD作用机理之一。

针刺双侧内关、膈俞辨证分型治疗膈肌痉挛102例临床观察

[目的]观察刺双侧内关、膈俞辨证分型治疗膈肌痉挛疗效。[方法]使用前瞻性设计方法,对102例门诊患者使用针刺治疗以双侧内关和膈俞为主穴,根据病因采用三种配穴方案(饮食不节配伍双侧足三里,情志失和配伍双侧太冲,不明显诱因配伍双侧足三里、太冲和阴陵泉)。患者取坐位,充分暴露穴位表面皮肤,穴位常规皮肤消毒,使用0.35mm×40mm(1.5寸)及0.35mm×25mm(1寸)毫针直刺,根据针刺穴位不同,针刺深度内关1寸,膈俞0.5寸,足三里1寸,太冲0.5寸,阴陵泉1寸,以平补平泻手法,穴位得气后,静留针20min。1次/d,连续治疗5d为1个疗程,疗程间休息1d。观测临床症状、不良反应。连续治疗3疗程,判定疗效。[结果]痊愈94例,显效5例,有效3例,总有效率100%。[结论]针刺双侧内关、膈俞辨证分型治疗膈肌痉挛疗效满意。

男性非肥胖非酒精性脂肪性肝病患者代谢指标与肠道菌群的相关性

【目的】探讨男性非肥胖非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者代谢指标与肠道菌群的相关性。【方法】收集2019年1~6月在新疆医科大学第二附属医院消化内科就诊的男性患者,其中非肥胖NAFLD组(A组)20例、肥胖NAFLD组(B组)20例、健康对照组(C组)20例、代谢正常肥胖组(D组)20例。检测四组研究对象血红蛋白(Hb)、空腹血糖(FPG)、肌酐(SCr)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)及肠道菌群代谢产物短链脂肪酸(SCFA)和炎症因子白介素-17(IL-17)。采用16S rDNA高通量测序检测D组研究对象肠道菌群中的蓝藻菌门、拟杆菌门、厚壁菌门等,分析男性非肥胖非酒精性脂肪性肝病患者代谢指标、炎症因子与肠道菌群的相关性。【结果】四组Hb、TC水平比较差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示:TC是影响男性非肥胖NAFLD的独立危险因素。A组和B组血清SCFA水平均显著高于C组和D组,A组血清SCFA水平显著低于B组,其差异均有统计学意义(P<0.05);但四组血清IL-17水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。四组肠道菌群结构均有其特异性,但拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门为主要优势菌群,A组拟杆菌门丰度显著高于B组,但B组厚壁菌门丰度显著低于A组,其差异均有统计学意义(P<0.05)。黑水仙菌门在C组中含量最高、在B组中含量最低。A组中蓝藻细菌门与SCr呈负相关(P<0.05);拟杆菌门丰度与IL-17呈负相关(P<0.05);厚壁菌门丰度与SCFA呈负相关(P<0.05)。B组中厚壁菌门、拟杆菌门与代谢指标及炎症因子均无统计学意义(P>0.05)。【结论】男性非肥胖NAFLD患者肠道菌群结构优于肥胖NAFLD患者,推测非肥胖和肥胖NAFLD人群肠道优势菌的不同可能是二者表型不同的原因之一,但优势菌与不同NAFLD表型间的因果关系尚待进一步研究。

γδT细胞在实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠脾脏中的动态表达及作用机制

背景以往研究证明葡萄膜炎的发病机制与γδT细胞相关，18T细胞在实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）中的作用尚不完全清楚。目的研究γδT细胞在EAU小鼠脾脏中的动态变化，探讨γδT细胞在EAU病程进展中的作用机制。方法应用随机数字表法将45只C57BL／6（B6）小鼠随机分为正常对照组6只和模型组39只。用抗原肽光感受器间维生素A类结合蛋白1-20（IRBP1-20）及完全弗氏佐剂（CFA）的乳化液在B6小鼠的足垫、尾根部及躯干部均匀注射6个点，用Genesis-D动物眼部照相机观察并记录正常小鼠及免疫后不同时间点（4、8、12、16、20、24、28、32和36d）EAU小鼠的发病情况，参照Thurau的评分标准进行炎症评分。颈椎脱臼法处死小鼠后摘取右侧眼球，切片后行组织病理学评分。同时在相同时间点分离模型小鼠脾脏淋巴细胞，流式细胞仪检测18T细胞数量和激活状态。免疫磁珠分选18T细胞，并用流式细胞仪检测其细胞内表达白细胞介素-17A（IL-17A）的变化。向EAU小鼠回输激活的18T细胞，观察炎症变化。结果经IRBP1-20及CFA乳化液免疫后小鼠于第12天可见轻度葡萄膜炎症，炎症反应在免疫后第16-20d达峰，至第28天炎症明显减轻。组织病理学观察发现，免疫小鼠视网膜外核层皱褶，玻璃体、视网膜全层炎性细胞浸润及内界膜层增厚。造模后不同时间点的炎症症状评分和病理学炎症评分的总体比较，差异均有统计学意义（F=51．399，P=0．000；F=47．342，P=0．000）。流式细胞仪检测发现，EAU发病高峰期小鼠的脾脏中γδT细胞数量增加，造模后16d和20d分别为（5．67±0．49）％和（5．78±0．55）％，与造模前的（1．53±0．14）％比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05），且呈活化状态。EAU发病高峰期小鼠的脾脏中18T细胞分泌的IL-17A明显增多，造模后16d和20d分别为（13．40±0．50）％和（17．80±2．37）％，与正常对照小鼠的（1．53±0．19）％比较，差异均有统计学意义（P=0．000、0．001）。体内回输激活的γδT细胞后EAU炎症加重，炎症症状评分为1．00（1．00，2．00），明显高于未回输激活的γδT细胞的0．75（0．05，1．00），二者比较差异有统计学意义（Z=27．00，P=0．03）。结论EAU中γδT细胞比例在炎症的高峰期明显升高，且呈激活状态；活化性γδT细胞在EAU模型中发挥的免疫调节作用可能是通过分泌IL-17A进行的。

急性缺血性脑卒中外周血IL-17和HMGB1及TSLP表达水平与继发医院感染的关系

目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)外周血白细胞介素-17(IL-17)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达水平与继发医院感染的关系。方法选取2017年1月-2021年12月东南大学附属中大医院江北院区收治的103例AIS患者,根据是否发生继发医院感染分为感染组(n=24)和非感染组(n=79)。分析感染组患者病原菌分布情况,检测并比较两组外周血IL-17、HMGB1、TSLP表达水平,采用logistic回归分析AIS患者继发医院感染的危险因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)分析外周血IL-17、HMGB1、TSLP表达水平对AIS患者继发医院感染的预测价值。结果24例AIS继发医院感染患者共分离出36株病原菌,其中革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌占比分别为33.33%、61.11%、5.56%。感染组外周血IL-17、HMGB1、TSLP表达水平分别为(62.14±18.36)pg/mL、(6.02±1.68)ng/mL、(2.85±0.61)pg/mL,均高于非感染组(28.34±5.57)pg/mL、(2.28±0.49)ng/mL、(1.76±0.43)pg/mL,差异均有统计学意义(t=14.450、17.633、9.804,P均<0.05)。Logistic回归分析显示,血清IL-17、HMGB1及TSLP水平升高、年龄≥60岁、肺部疾病史、糖尿病、入院时美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分≥14分、侵入性操作、吞咽障碍、住院时间≥14 d均为影响AIS患者继发医院感染的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线显示,外周血IL-17、HMGB1、TSLP联合预测AIS患者继发医院感染的AUC为0.907,高于三者单独预测(AUC分别为0.759、0.744、0.710)(Z=3.143、2.881、3.146,P均<0.05)。结论AIS继发医院感染患者病原菌以革兰阴性菌为主,感染会引起AIS患者外周血IL-17、HMGB1、TSLP水平升高,三者联合检测对AIS继发医院感染具有良好的预测价值。