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阿霉素对K562细胞Gfi-1表达的影响及其与相关凋亡基因关系的研究 被引量:5
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作者 常伟 孙汉英 +2 位作者 黄敏 周剑锋 张义成 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期278-282,共5页
本研究探讨阿霉素体外作用于K562细胞的细胞效应及癌基因Gfi-1和相关凋亡基因表达变化的机制。用不同浓度的阿霉素作用于K562细胞24小时,然后应用DNA电泳和流式细胞术检测K562细胞凋亡;用RT-PCR、流式细胞术检测Gfi-1、Bcl-2、bax基因... 本研究探讨阿霉素体外作用于K562细胞的细胞效应及癌基因Gfi-1和相关凋亡基因表达变化的机制。用不同浓度的阿霉素作用于K562细胞24小时,然后应用DNA电泳和流式细胞术检测K562细胞凋亡;用RT-PCR、流式细胞术检测Gfi-1、Bcl-2、bax基因和蛋白表达的变化。结果表明:当阿霉素浓度在0、0.5、2.0mg/L作用K562细胞24小时,细胞凋亡增加,可见典型的DNA断裂电泳条带;同时,当ADM浓度自0.5增为2.0mg/L时,Gfi-1表达减少,bax表达增加;Bcl-2表达在ADM0.5-2.0mg/L之间变化不明显,mRNA及蛋白水平均无统计学差异;当阿霉素浓度大于2.0mg/L时,细胞凋亡率并不增加,而是下降,且出现细胞坏死。结论:一定浓度阿霉素能诱导K562细胞凋亡,细胞凋亡率表达的变化与阿霉素浓度呈一定的量效依赖关系,阿霉素诱导K562细胞凋亡可能与抑制Gfi-1基因的表达和激活bax基因的表达有一定的关系。 展开更多
关键词 阿霉素 K562细胞 细胞凋亡 gfi-1 BCL-2 BAX
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白血病人的gfi-1表达及慢病毒介导的gfi-1基因沉默对K562细胞增殖的影响 被引量:4
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作者 战榕 吴顺泉 +2 位作者 黄豪博 黄胜林 林君 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期849-854,共6页
本研究旨在检测独立生长因子(Gfi-1)在白血病患者的表达水平并探讨慢病毒介导的gfi-1基因沉默对人白血病细胞株K562增殖的影响。采用荧光实时定量PCR及Westernblot方法检测初治白血病患者gfi-1的表达水平,分析其在各型白血病中的表达情... 本研究旨在检测独立生长因子(Gfi-1)在白血病患者的表达水平并探讨慢病毒介导的gfi-1基因沉默对人白血病细胞株K562增殖的影响。采用荧光实时定量PCR及Westernblot方法检测初治白血病患者gfi-1的表达水平,分析其在各型白血病中的表达情况。设计、合成一对针对gfi-1 mRNA的shRNA序列,退火后连接到pLVTHM干扰载体上,与psPAX2、PDM2G共转HEK293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染K562细胞,建立稳定株。应用实时定量PCR和Western blot方法检测K562细胞gfi-1及baxmRNA和蛋白的表达,并与对照组进行比较.结果表明:慢病毒介导的shgfi-1能明显降低gfi-1的mRNA及蛋白水平,而bax的mRNA及蛋白水平则都上调。CCK-8检测发现,与对照组相比,shgfi-1能明显抑制K562细胞的增殖。结论:gfi-1在初治白血病患者中的高表达可能参与白血病的发生发展。gfi-1特异的shRNA干扰可以有效地下调K562细胞gfi-1基因的表达,抑制K562细胞的增殖,gfi-1基因可能是白血病基因治疗的一个有效靶点。 展开更多
关键词 gfi-1 白血病 RNA干扰 K562
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慢病毒介导的GFI-1基因沉默对慢性髓细胞白血病患者单个核细胞生长及凋亡的影响
3
作者 杨熙 刘红 +2 位作者 林赠华 陆伟 张亚平 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第13期1944-1947,共4页
目的观察慢病毒介导的GFI-1基因沉默后对慢性髓细胞白血病患者单个核细胞生长及凋亡的影响,研究GFI-1在慢性髓细胞白血病发病中作用。方法收集16例慢性髓细胞白血病初治患者的外周血标本,以17例正常人的外周血作为正常对照。并采集患者... 目的观察慢病毒介导的GFI-1基因沉默后对慢性髓细胞白血病患者单个核细胞生长及凋亡的影响,研究GFI-1在慢性髓细胞白血病发病中作用。方法收集16例慢性髓细胞白血病初治患者的外周血标本,以17例正常人的外周血作为正常对照。并采集患者及正常人的临床相关资料,以慢病毒感染方法沉默GFI-1基因,以实时定量PCR、Western blot、流式细胞术等方法研究慢性髓细胞白血病患者GFI-1在单个核细胞中的表达及基因沉默后对细胞生长及凋亡的影响。结果 GFI-1在慢性髓细胞白血病初治患者中的表达明显高于正常人,差异有统计学意义(P<0.001)。GFI-1沉默后72 h,与感染了空载体的慢性髓细胞白血病单个核细胞相比细胞增殖显著受抑制(P<0.001),细胞凋亡也明显高于感染了空载体的慢性髓细胞白血病单个核细胞(P<0.005),细胞周期阻滞。结论 GFI-1可能通过调控凋亡通路及细胞周期相关因子导致细胞凋亡周期阻滞,从而抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 慢性髓细胞白血病 gfi-1 单个核细胞 慢病毒转染 细胞增殖
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原癌基因GFI-1在急性白血病患者骨髓细胞中表达的研究 被引量:2
4
作者 蔡琦 刘红 《南通大学学报(医学版)》 2009年第2期116-117,共2页
目的:研究原癌基因GFI-1在急性白血病患者骨髓细胞的表达。方法:采用PCR的方法检测GFI-1在急性白血病患者骨髓细胞的表达情况。结果:GFI-1在急性白血病患者骨髓细胞的表达呈阳性,正常人呈阴性。结论:GFI-1参与急性白血病的发病。
关键词 急性白血病 gfi-1基因 骨髓细胞
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地塞米松对小鼠Th17细胞分化模型中IL-17f、gfi-1表达的影响
5
作者 李南 张青华 +3 位作者 刘双 潘紫凤 陈嵘祎 史建强 《广东医学院学报》 2016年第2期117-120,共4页
目的研究地塞米松对小鼠Th17细胞分化模型中IL-17f、gfi-1表达的影响。方法提取小鼠脾脏淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化CD4^+CD62L^+T细胞,将其分为对照组、地塞米松组、Th17组、地塞米松组+Th17组。Th17组加antiCD3ε、anti-CD28、anti-IFN... 目的研究地塞米松对小鼠Th17细胞分化模型中IL-17f、gfi-1表达的影响。方法提取小鼠脾脏淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化CD4^+CD62L^+T细胞,将其分为对照组、地塞米松组、Th17组、地塞米松组+Th17组。Th17组加antiCD3ε、anti-CD28、anti-IFN-γ、anti-IL-4抗体及IL-6、TGF-β1、IL-23,地塞米松+Th17组在Th17组培养条件下加10μg/L地塞米松。细胞培养72 h后,采用Real-time PCR检测4组IL-17f、gfi-1 m RNA表达。结果 Th17组IL-17f m RNA表达明显增高(P<0.01)。与Th17组比较,地塞米松+Th17组IL-17f m RNA表达明显降低(P<0.01),而gfi-1 m RNA表达明显增高(P<0.01)。结论地塞米松可下调IL-17f和上调gfi-1表达,gfi-1表达增加可能引起骨质疏松。 展开更多
关键词 IL-17 F gfi-1 小鼠 地塞米松 骨质疏松
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藤黄酸调控白血病K562细胞GFI-1表达及对细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3
6
作者 刘晓倩 李依 +5 位作者 郭佳丽 吴涛 张素洁 许超平 吴芷静 常伟 《内科急危重症杂志》 2021年第1期54-57,共4页
目的:探讨藤黄酸对白血病K562细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:体外培养K562细胞,采用CCK-8法检测不同浓度藤黄酸(0、0.2、0.4、0.8、1.2、2.0μmol/L)处理24、48、72 h后K562细胞增殖率;用流式细胞术检测K562细胞的凋亡和周期... 目的:探讨藤黄酸对白血病K562细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:体外培养K562细胞,采用CCK-8法检测不同浓度藤黄酸(0、0.2、0.4、0.8、1.2、2.0μmol/L)处理24、48、72 h后K562细胞增殖率;用流式细胞术检测K562细胞的凋亡和周期;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot法检测独立生长因子1(GFI-1)的mRNA及蛋白表达水平。结果:藤黄酸可以抑制K562细胞的增殖,并呈剂量、时间依赖性;0.4μmol/L藤黄酸处理24 h后的K562细胞凋亡率增加;藤黄酸对GFI-1的mRNA表达无显著影响,藤黄酸可以下调GFI-1蛋白的表达;藤黄酸及蛋白酶体抑制剂(MG132)共处理后的K562细胞GFI-1蛋白水平较藤黄酸组升高;藤黄酸及氯喹(CQ)共处理后的K562细胞GFI-1蛋白水平与藤黄酸组无统计学差异(P>0.05)。结论:藤黄酸可以有效抑制K562细胞的增殖并诱导细胞凋亡;藤黄酸可以诱导K562细胞G0/G1期及S期阻滞;藤黄酸通过蛋白酶体途径促进GFI-1蛋白降解。 展开更多
关键词 藤黄酸 K562细胞 细胞增殖 细胞凋亡 蛋白酶体通道 独立生长因子
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GFI-1在慢性髓细胞白血病患者中的表达及意义
7
作者 朱星星 刘红 《交通医学》 2016年第2期103-106,共4页
目的:研究慢性髓细胞白血病(CML)患者中GFI-1的表达情况及其与BCR-ABL定量之间的关系,以探讨GFI-1在CML中的意义。方法:收集82例CML患者的骨髓标本,其中初诊慢性期50例,急变期6例,加速期6例,经伊马替尼治疗后细胞遗传学缓解期20例。以2... 目的:研究慢性髓细胞白血病(CML)患者中GFI-1的表达情况及其与BCR-ABL定量之间的关系,以探讨GFI-1在CML中的意义。方法:收集82例CML患者的骨髓标本,其中初诊慢性期50例,急变期6例,加速期6例,经伊马替尼治疗后细胞遗传学缓解期20例。以20例正常人的外周血或骨髓标本作为正常对照。应用实时定量PCR、Western blot等方法检测CML患者GFI-1、BCR-ABL的表达情况,分析两者基因表达量之间的关系。结果:(1)CML慢性期、急变期/加速期GFI-1的表达均明显高于正常对照组(P<0.05);慢性期与急变期/加速期患者GFI-1的表达差异无统计学意义(P>0.05);慢性期患者的GFI-1较缓解期表达高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)GFI-1与BCR-ABL定量之间成正相关(r2=0.7647,P<0.01)。结论 :CML患者GFI-1表达水平异常,可能参与CML的发生发展。 展开更多
关键词 独立生长因子1 慢性髓细胞白血病 BCR-ABL融合基因
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斑马鱼Gfi-1基因结构和功能分析 被引量:2
8
作者 姜利军 周晓曦 +5 位作者 李钦璐 于飞 黄亮 马全富 周剑峰 曹阳 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第17期3213-3216,共4页
目的:研究斑马鱼Gfi-1基因在物种间进化的保守性和功能分析。方法:运用生物信息学方法分析斑马鱼Gfi-1基因结构特征和保守性等。结果:斑马鱼Gfi-1基因在蛋白水平与小鼠、人高度保守;分析斑马鱼和人的Gfi-1基因外显子、内含子和ATG起始... 目的:研究斑马鱼Gfi-1基因在物种间进化的保守性和功能分析。方法:运用生物信息学方法分析斑马鱼Gfi-1基因结构特征和保守性等。结果:斑马鱼Gfi-1基因在蛋白水平与小鼠、人高度保守;分析斑马鱼和人的Gfi-1基因外显子、内含子和ATG起始、终止密码子也具有高度相似性;从进化树分析斑马鱼Gfi-1基因与人、小鼠、犬、猴等在进化上高度保守;分析斑马鱼、人、小鼠Gfi-1基因在染色体上的位置和相邻基因,显示出惊人的相似性。结论:斑马鱼Gfi-1基因在进化上高度保守,为脊椎动物保守基因,为其后续在造血系统和造血微环境方面的研究提供了理论支持和铺垫。 展开更多
关键词 斑马鱼 gfi-1基因 生物信息学
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肺小细胞癌和鳞状细胞癌GFI-1、Fli-1的表达与预后相关性分析 被引量:1
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作者 李学玲 梁冰锋 董西林 《中国药物经济学》 2014年第6期173-174,共2页
目的通过检测肺小细胞癌(SCLC)和肺鳞状细胞癌(SCC)中GFI-1和Fli-1的表达,分析两种肺癌与常见临床病理因素之间的相关性,为临床早期诊断、治疗效果的观察和预后判断提供依据。方法应用免疫组织化学染色技术检测原发性肺癌术后存档蜡块13... 目的通过检测肺小细胞癌(SCLC)和肺鳞状细胞癌(SCC)中GFI-1和Fli-1的表达,分析两种肺癌与常见临床病理因素之间的相关性,为临床早期诊断、治疗效果的观察和预后判断提供依据。方法应用免疫组织化学染色技术检测原发性肺癌术后存档蜡块134例(SCLC 36例、SCC 98例)中GFI-1、Fli-1蛋白表达情况;并对患者进行随访,生存时间从手术日期至随访日期止。结果 36例SCLC患者中淋巴结转移27例,淋巴结转移率为75.0%;98例SCC患者中淋巴结转移48例,淋巴结转移率为49.0%,其差异有统计学意义(P<0.01)。结合随访资料,134例患者生存时间为7d~89个月,≥3年的患者为64例,3年生存率为47.8%。经免疫组织化学染色后,GFI-1、Fli-1的阳性表达率SCLC高于SCC,差异有统计学意义(P<0.05)。GFI-1、Fli-1表达与临床病理指标比较证实,SCCⅡ、Ⅲ级间的GFI-1、Fli-1的阳性表达率Ⅱ、Ⅲ级差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GFI-1、Fli-1在SCLC中的表达具有一致性,并且高于SCC;提示二者可考虑为监测肺小细胞癌病情发生、发展的标志物。GFI-1、Fli-1的阳性表达在淋巴结转移患者明显高于无淋巴结转移患者,并且组织分化愈差,临床分期愈高,表达愈高,提示二者与肺癌的预后相关,高表达者预后较差。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 肺鳞状细胞癌 gfi-1 FLI-1 预后
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GATA-3 promotes Th2 responses through three different mechanisms: induction of Th2 cytokine production, selective growth of Th2 cells and inhibition of Thl cell-specific factors 被引量:49
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作者 Jinfang Zhu Hidehiro Yamane Javier Cote-Sierra Liying Guo William E Paul 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2006年第1期3-10,共8页
Naive CD4 T cells can differentiate into at least two different types ofT helpers, Thl and Th2 cells. Th2 cells, capable of producing IL-4, IL-5 and IL-13, are involved in humoral immunity against extracellular pathog... Naive CD4 T cells can differentiate into at least two different types ofT helpers, Thl and Th2 cells. Th2 cells, capable of producing IL-4, IL-5 and IL-13, are involved in humoral immunity against extracellular pathogens and in the induction of asthma and other allergic diseases. In this review, we summarize recent reports regarding the transcription factors involved in Th2 differentiation and cell expansion, including StatS, Gfi- 1 and GATA-3. Stats activation is necessary and sufficient for IL-2-mediated function in Th2 differentiation. Enhanced Stats signaling induces Th2 differentiation independent of IL-4 signaling; although it does not up-regulate GATA-3 expression, it does require the presence of GATA-3 for its action. Gfi-1, induced by IL-4, promotes the expansion of GATA-3-expressing cells. Analysis of conditional Gata3 knockout mice confirmed the critical role of GATA-3 in Th2 cell differentiation (both IL-4 dependent and IL-4 independent) and in Th2 cell proliferation and also showed the importance of basal GATA-3 expression in inhibiting Thl differentiation. 展开更多
关键词 GATA-3 STAT5 gfi-1 Th2 cell differentiation cell expansion transcription factors
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靶向沉默独立生长因子1基因对不典型慢性髓细胞白血病细胞生长和增殖的影响 被引量:1
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作者 杨熙 刘红 +2 位作者 林赠华 钱娟 徐新润 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期572-577,共6页
目的 分析siRNA介导独立生长因子1(GFI-1)基因沉默对不典型慢性髓细胞白血病(aCML)NT1细胞生长和增殖的影响。方法 采用细胞转染试剂Lipofectamine 2000,将siRNA导入对数生长期的NT1细胞,实验分为空白对照组(加入PBS和脂质体复... 目的 分析siRNA介导独立生长因子1(GFI-1)基因沉默对不典型慢性髓细胞白血病(aCML)NT1细胞生长和增殖的影响。方法 采用细胞转染试剂Lipofectamine 2000,将siRNA导入对数生长期的NT1细胞,实验分为空白对照组(加入PBS和脂质体复合物)、阴性对照组(加入阴性干扰序列和脂质体复合物)和GFI-1基因干扰组(加入针对GFI-1的干扰序列和脂质体复合物)。采用实时荧光定量PCR法检测GFI-1 mRNA的表达水平,Western blot法检测GFI-1蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测GFI-1 siRNA对NT1细胞增殖的影响,流式细胞仪检测GFI-1 siRNA对NT1细胞周期的影响。裸鼠移植瘤实验检测GFI-1 siRNA对裸鼠成瘤的影响。结果 实时荧光定量PCR检测显示,空白对照组、阴性对照组和基因干扰组的GFI-1 mRNA表达水平分别为1.010±0.005、0.918±0.006和0.367±0.017,基因干扰组与空白对照组和阴性对照组的差异有统计学意义(P〈0.05)。Western blot检测显示,基因干扰组的GFI-1蛋白表达水平明显低于空白对照组和阴性对照组(P〈0.05)。MTT法检测显示,空白对照组、阴性对照组和基因干扰组的A值分别为1.193±0.064、1.096±0.049和0.667±0.059,基因干扰组的细胞增殖能力明显低于空白对照组和阴性对照组(P=0.023)。流式细胞仪检测显示,空白对照组、阴性对照组和基因干扰组的G0/G1期细胞比例分别为(48.6±3.2)%、(53.3±4.5)%和(66.7±3.8)%,基因干扰组与空白对照组和阴性对照组的差异有统计学意义(P〈0.05)。空白对照组、阴性对照组和基因干扰组的sub-G1期细胞比例分别为(2.0±3.6)%、(1.9±1.3)%和(8.2±2.5)%,基因干扰组与空白对照组和阴性对照组的差异有统计学意义(P〈0.05)。裸鼠移植瘤实验显示,空白对照组、阴性对照组和基因干扰组裸鼠的肿瘤重量分别为(0.92±0.04)g、(0.83±0.06)g和(0.37±0.02)g,基因干扰组裸鼠的肿瘤重量明显小于空白对照组和阴性对照组(P〈0.05)。结论 siRNA介导GFI-1基因沉默可抑制NT1细胞生长与增殖,可能为aCML的治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 白血病 髓样 细胞 gfi-1 细胞增殖 RNA 小分子干扰
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新型GATA-1相互作用蛋白质及其在造血调控中的作用 被引量:1
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作者 丁亚丽 李长燕 杨晓明 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期339-342,共4页
GATA-1在造血干细胞的谱系分化中起关键的调控作用,为红系和巨核系发育成熟必不可少,对肥大细胞系及嗜酸性粒细胞系发育也有一定的调控作用。GATA-1的转录活性受到多层次的精确调节,其调控不同谱系分化的功能大多通过与不同的蛋白质... GATA-1在造血干细胞的谱系分化中起关键的调控作用,为红系和巨核系发育成熟必不可少,对肥大细胞系及嗜酸性粒细胞系发育也有一定的调控作用。GATA-1的转录活性受到多层次的精确调节,其调控不同谱系分化的功能大多通过与不同的蛋白质相互作用来实施。近年来,多种新的GTAT-1相互作用蛋白质被确定,特别是GATA-1复合体的研究,揭示了GATA-1转录活性及其调控造血分化的新机制。 展开更多
关键词 GATA-1 gfi-1b ZNF521 runt相关转录因子1 ZBP-89
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独立生长因子1对小鼠骨髓多能造血干细胞增殖和凋亡的调控 被引量:2
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作者 叶应金 王晗 刘红 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期134-138,共5页
目的探讨骨髓多能造血干细胞中独立生长因子1(Gfi—I)的表达与细胞凋亡和增殖间的关系,观察Gfi-1及其突变型对骨髓多能造血干细胞的不同效应,进一步研究Gfi-1对造血干细胞的调节机制。方法用质粒转导技术使正常小鼠骨髓多能造血干... 目的探讨骨髓多能造血干细胞中独立生长因子1(Gfi—I)的表达与细胞凋亡和增殖间的关系,观察Gfi-1及其突变型对骨髓多能造血干细胞的不同效应,进一步研究Gfi-1对造血干细胞的调节机制。方法用质粒转导技术使正常小鼠骨髓多能造血干细胞(32D细胞)高表达Gfi-1基因及其突变型(N382S),以流式细胞仪检测细胞凋亡率,以Western印迹检测细胞中Gfi-1、凋亡途径信号分子Bax、信号转导子和转录激活3(STAT3)蛋白的表达水平。结果培养48、96、144h时Gfi-1组的细胞凋亡率分别为4.0%±1.8%、7.0%-4-1.6%和10.O%±2.4%,明显低于对照组(6.0%±1.0%、11.0%±1.5%、23.0%±1.5%,均P〈0.05);N382S组细胞凋亡率分别为5.0%4-1.3%、12.0%-4-2.1%、21.0%±2.2%,与对照组差异无统计学意义(P〉0,05)。培养48、96、144h时Gfi-1组的细胞数量分别为0.96×10^6、2.03×10^6、3.47×10^6,明显低于对照组(1.42×10^6、3.26010^6、6.12×10^6,均P〈0.05);N382S组细胞数量分别为1.51×10^6、3.36×10^6、6.54×10^6,与对照组差异无统计学意义(P〉0.05)。Gfi-1组Bax蛋白表达水平低于空载体对照组(1.090-4-0.062比1.707±0.025),STAT3蛋白表达水平高于对照组(1.723-4-0.168比1.203±0.168)(均P〈0.05);N382S组Bax蛋白表达水平(1.7104±0.062)与对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05),STAT3蛋白表达水平(1.7974-0.292)高于对照组(P〈0.05)。结论Gfi-1不仅抑制细胞凋亡,也抑制细胞增殖;它可能通过抑制Bax的表达而抑制32D细胞的凋亡;Gfi-1同时会影响STAT3的表达但其锌指结构对于STAT3表达影响意义不大,提示Gfi-1在造血干细胞方面有着独特而复杂的作用。 展开更多
关键词 造血干细胞 细胞增殖 细胞凋亡 BAX 独立生长因子1
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