双氢青蒿素对C2株蓝氏贾第鞭毛虫Alpha-7.3giardin基因mRNA表达水平的影响

目的观察双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)Alpha-7.3giardin(α-贾第素)基因mRNA表达水平的影响,探讨其对蓝氏贾第鞭毛虫骨架蛋白的损伤作用。方法用双氢青蒿素浓度为100μg/mL、200μg/mL的改良TYI-S-33培养基分别培养C2株蓝氏贾第鞭毛虫2h、4h、8h、12h后,以不含药物组为对照,实时荧光定量RT-PCR检测药物作用后Alpha-7.3giardin基因mRNA表达水平的变化。结果双氢青蒿素作用虫体后Alpha-7.3giardin基因mRNA表达水平明显低于对照组,二者有显著性差异。结论双氢青蒿素对C2株蓝氏贾第鞭毛虫Alpha-7.3giardin基因mRNA的表达具有明显的抑制作用,抑制效果与药物浓度和作用时间相关,提示双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫骨架蛋白具有损伤作用。

双氢青蒿素对C2株蓝氏贾第鞭毛虫Delta giardin抑制作用的研究

目的建立实时荧光定量RT-PCR(real-time quantitative,RT-PCR)检测C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)Delta giardin基因mRNA表达量的方法,分析双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)对体外C2株蓝氏贾第鞭毛虫Delta giardin基因mRNA表达水平的影响。方法分别采用100μg/mL、200μg/mL的双氢青蒿素改良型TYI-S-33培养基培养C2株蓝氏贾第鞭毛虫,以不含药物组作为阴性对照,分别培养2h、4h、8h、12h,提取总RNA,逆转录合成cDNA,实时荧光定量PCR检测Delta giardin基因mRNA表达情况。结果 100μg/mL双氢青蒿素培养2h、4h、8h、12h后,Delta giardin基因mRNA相对表达量分别为0.44、0.26、0.25、0.02;200μg/mL双氢青蒿素培养2h、4h、8h、12h后,Delta giardin基因mRNA相对表达量分别为0.30,0.26,0.11,0.02。药物对照组中C2株蓝氏贾第鞭毛虫Delta giardin基因mRNA表达量明显低于阴性对照组。结论双氢青蒿素对C2株蓝氏贾第鞭毛虫Delta giardin基因mRNA的表达具有明显的抑制作用,提示双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫具有明显的防治效果。

Assemblages of <i>Giardia duodenalis</i>Isolates from Dogs by Amplification and Restriction of tpi and <i>β</i>-Giardin Genes and Sequencing of SSU rDNA Gene

Giardia duodenalis exhibits seven assemblages (A-G) that are distributed in different hosts. The A and B assemblages are commonly found in humans and several mammals, while C and D assemblages are typically found in dogs. The purpose of this study was to determine the assemblage of Giardia duodenalis present in the stool samples of ten canines using an assay based on PCR amplification, restriction analysis, and sequencing of the small subunit ribosomal DNA (SSU-rDNA), β-giardin, and triosephosphate isomerase (tpi) genes in order to establish the similarities or differences between the assemblage obtained with each gene. The results indicated that all positive isolates belonged to assemblage A, and specifically to the sub-assemblage A-I. A comparison of the SSU-rDNA gene sequence revealed the presence of three subgroups of assemblage A. These findings highlight the importance of canine transmission of Giardia in Mexico and its genetic plasticity. They also establish a method for additional and more molecularly extensive epidemiological studies to improve sanitation and hygiene in the most affected areas.

α1-Giardin的原核表达与多克隆抗体制备

目的原核表达α1-Giardin并制备兔抗rα1-Giardin多克隆抗体。方法以蓝氏贾第鞭毛虫DNA为模板,PCR扩增α1-giardin编码基因片段,经双酶切后连入原核表达载体pET-41a(+),构建重组表达载体pET-41a(+)-α1-giardin,热激法转化大肠埃希菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后收集菌体并裂解,采用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达,采用His-tag亲和层析柱纯化融合蛋白。将α1-Giardin蛋白与等体积弗氏完全佐剂乳化后免疫新西兰白兔,隔周以同样剂量蛋白加等体积弗氏不完全佐剂加强免疫2次。末次免疫后一周颈动脉取血,制备多抗血清,采用间接ELISA法测定抗体效价。结果成功构建原核表达载体pET-41a(+)-α1-giardin,转化大肠埃希菌后经IPTG诱导表达分子质量单位为34.8ku的可溶性蛋白;经His-tag亲和层析柱纯化获得高纯度的重组α1-giardin蛋白,制备的免疫兔抗血清ELISA滴度为1∶51 200。结论成功克隆、表达并纯化了贾第虫α1-giardin蛋白,制备了高滴度的抗α1-giardin多克隆兔血清,为以α1-Giardin为抗原的疫苗研究奠定了基础。

重组α1-giardin减毒沙门菌口服DNA疫苗的构建与鉴定

以贾第虫的c DNA作为模板,进行PCR扩增得到目的片段,克隆入p VAX1载体,构建重组质粒p VAX1-α1-giardin;以电击转化的方式转入减毒沙门菌株SL7207,构建重组沙门菌SL7207/p VAX1-α1-giardin;通过体外连续培养测定重组菌株的载体携带稳定性;30只清洁级雌性BALB/c小鼠,随机分为3组,每组10只,分别以1×106的SL7207/p VAX1-α-giardin、SL7207/p VAX1和无菌1×PBS(p H 7.0)口服免疫小鼠,8周后处死,检测各组小鼠肠系膜淋巴结中α1-giardin的表达及血清中和小肠灌洗液中特异性Ig G和SIg A的水平。结果表明,重组减毒沙门菌SL7207/p VAX1-α1-giardin连续培养168 h后,质粒携带率为90%;口服免疫小鼠8周后,SL7207/p VAX1-α1-Giardin免疫组,肠系膜淋巴结可见α1-Giardin的高表达,血清中特异性Ig G抗体水平和小肠灌洗液中特异性SIg A水平均明显增高,分别为PBS组的3.6(P<0.01)和5.7倍(P<0.01)。本研究尝试了以减毒沙门菌为载体携带α1-giardin DNA的抗贾第虫口服疫苗的构建及免疫试验,为进一步的疫苗保护性试验和制剂研究奠定了基础。

成都动物园野生动物源贾第虫的多位点基因分型鉴定

为了解四川省成都市动物园野生动物贾第虫的流行及基因型,本研究采集了146份不同野生动物的新鲜粪便并提取基因组DNA.通过巢式PCR扩增β-giardin、tpi和gdh基因,扩增产物测序后进行种系发育分析.结果表明,CDZOO1黇鹿源和CDZOO3龟源贾第虫通过多位点基因分型(MLG)鉴定为AI-1亚型;CDZOO2鹿源贾第虫为E型(β-giardin基因位点);CDZOO4黇鹿源贾第虫为A型(β-giardin和tpi基因位点);CDZOO5浣熊源和CDZOO6细尾獴源贾第虫在β-giardin位点为D型而在tpi位点为A型.

蓝氏贾第鞭毛虫α-7．1、α-11贾第素的原核表达及抗原活性鉴定

目的原核表达蓝氏贾第鞭毛虫的α-7.1、α-11贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-7.1、α-11贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-7.1及pET-28a(+)-α-11,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-7.1和pET-28a(+)-α-11,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约43kD和35kD的位置分别出现目的蛋白条带,与理论值相符;通过相应α-7.1、α-11贾第素抗血清的Westernblot证实两种贾第素重组蛋白的抗原活性良好;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-7.1、α-11贾第素融合蛋白。结论成功地克隆、表达并纯化了具有良好抗原活性的α-7.1、α-11贾第素蛋白。

蓝氏贾第鞭毛虫α-4贾第素的原核表达及纯化

目的原核表达并纯化蓝氏贾第鞭毛虫的α-4贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-4贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-4,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化融合蛋白。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-4,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白以包涵体形式存在;SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约34 kD的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-4贾第素融合蛋白。结论成功克隆、表达并纯化了α-4贾第素蛋白,为α-4贾第素的细胞定位及功能研究提供了必要条件。

蓝氏贾第鞭毛虫α8-贾第素基因克隆、表达与免疫反应性的鉴定

目的对蓝氏贾第鞭毛虫的α8-贾第素(α8-giardin)基因进行克隆和表达,并检测其免疫反应性。方法利用PCR方法获得α8-贾第素基因开放阅读框(ORF)片段,经双酶切将其连入原核表达载体p ET-30a(+),构建重组表达载体p ET30a(+)-α8-giardin。经PCR和酶切鉴定后,将该载体转化入大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3),筛选出阳性菌落并诱导其表达。经亲和层析柱纯化后,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)检测重组蛋白。结果自蓝氏贾第鞭毛虫基因组DNA扩增得到约930 bp的α8-贾第素基因片段。经PCR和酶切鉴定表明,重组表达载体p ET30a(+)-α8-giardin构建成功。SDS-PAGE和Western blotting分析结果显示,α8-贾第素重组蛋白以非可溶性形式存在于包涵体中,相对分子质量(Mr)约为36 000,可被抗His标签抗体和兔抗贾第虫血清识别。结论克隆蓝氏贾第鞭毛虫α8-贾第素基因,纯化的重组α8-贾第素蛋白具有免疫反应性。

蓝氏贾第虫致病机制的研究进展

蓝氏贾第虫(Giardia lamblia)是一种重要的人畜共患寄生虫,可引起人和多种哺乳动物的腹泻。近年来人们对其致病机制进行了大量研究,包括贾第虫结构蛋白(贾第素)和排泄分泌物,表面抗原变异以及贾第虫对小肠的影响等,本文对此进行了综述。

蓝氏贾第鞭毛虫alpha-8贾第素特异性锤头状核酶-GCV重组载体的构建

目的构建蓝氏贾第鞭毛虫alpha-8贾第素(α-8 giardin)特异性锤头状核酶-GCV重组载体。方法采用RNA draw软件对蓝氏贾第鞭毛虫α-8贾第素基因序列(GenBank登录号为AY781323)的二级结构进行模拟分析,按照G∶C比例和锤头状核酶设计原则,选取合适的核酶切割靶点,设计特异性锤头状核酶(H8)序列,并将其与犬贾第虫病毒(GCV)连接,获得α-8贾第素特异性锤头状核酶-GCV重组载体(pGCV634/H8/1423)。将载体线性化体外转录产物电击转染至贾第虫滋养体细胞内。提取转染后24 h的各组虫体总RNA,并以其为模板采用RT-PCR验证转染效果及对靶mRNA的切割效果。结果成功设计、合成了蓝氏贾第鞭毛虫α-8贾第素mRNA锤头状核酶序列(H8),将其与犬贾第虫病毒载体(GCV)连接,成功构建了pGCV634/H8/1423;RT-PCR实验结果表明,重组载体pGCV634/H8/1423转染贾第虫细胞后24 h可检测到核酶RNA的存在,并实现了对α-8贾第素mRNA高效、特异的切割作用。结论构建的pGCV634/H8/1423能有效转染至贾第虫细胞内,并在其细胞内对α-8贾第素基因的mRNA具有高效、特异的切割作用。

以减毒沙门氏菌为载体的抗贾第虫肠溶疫苗制备及免疫效果检测

目的以携带α1-giardin DNA的减毒沙门菌为对象,探讨肠溶制剂的制备、免疫剂量和免疫效果。方法携带有贾第虫α1-giardin基因的重组减毒沙门菌经培养扩增冻干后,对各种辅料,包括微分硅胶、分散剂、润滑剂、崩解剂、包衣液等成分与减毒沙门菌的相容性,及包衣条件进行检测。采用最佳配方制备肠溶片剂,用于动物免疫试验。初始免疫后第25d后,分别检测血清和小肠灌洗液中抗rα1-giardin特异性IgG和SIgA的水平;并用106个贾第虫滋养体灌胃,每天检测各组小鼠粪便中的滋养体和(或)包囊的排出率。结果肠溶片剂的处方中微分硅胶和分散剂的用量分别为菌粉用量的10%和2倍;润滑剂和崩解剂的用量分别占处方量的0.8%和2%;包衣液的浓度为20%,包衣增重为处方量的6%。每个包衣片活菌含量在4×106以上。动物试验表明,以SL7207/pVAX1-rα1-giardin肠溶片剂免疫鼠小肠灌洗液中特异性抗rα1-giardin SIgA的水平明显高于对照组,并在攻虫试验具有46.7%的减虫率,明显高于rα1-giardin肌注免疫组(23%)(P<0.01)。结论本研究为多种以减毒沙门菌为载体的DNA疫苗的肠溶制剂的研究提供了实验依据,如规模化生产,该处方尚需进一步完善。

犬贾第鞭毛虫α-12贾第素基因的原核表达及纯化

为了原核表达、纯化犬贾第鞭毛虫α-12贾第素蛋白,试验经RT-PCR获得α-12贾第素基因片段,克隆至原核表达载体p ET-28a(+),构建重组原核表达质粒p ET-28a-α-12,再转化入E.coli Rosetta(DE3)后,用IPTG诱导表达,表达的重组蛋白经SDS-PAGE和Western-blot分析验证,并用Ni琼脂糖凝胶纯化融合的α-12贾第素蛋白。结果表明:重组原核表达质粒p ET-28a-α-12经双酶切和测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为40 ku,且主要以包涵体形式存在;表达量约占菌体总蛋白的15.7%;纯化的重组蛋白纯度达90%以上。

蓝氏贾第鞭毛虫α-19贾第素的单克隆抗体制备与亚细胞定位研究

目的制备蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)α-19贾第素的特异性抗体,并通过免疫荧光对该贾第素的亚细胞定位进行鉴定。方法经PCR获得α-19贾第素编码区片段,双酶切将目的片段连入原核表达载体pET-28a(+)-α-19,重组载体转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE及Western blot验证表达情况;采用设计的合成抗原肽免疫小鼠经细胞融合和筛选制备特异性单克隆抗体,分别用贾第虫滋养体裂解物和α-19贾第素重组蛋白Western blot验证抗体特异性和结合力,选择特异性最好的单克隆抗体通过免疫荧光技术对α-19贾第素的亚细胞定位进行观察。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-19,经SDS-PAGE及Westernblot分析显示重组载体在大肠杆菌中表达出相对分子量约49 kD的重组蛋白,与理论值相符;Western blot显示单克隆杂交瘤细胞株α-19-3-7-3-5分泌的抗体结合力和特异性俱佳,可用于定位研究;免疫荧光定位结果表明α-19贾第素主要位于贾第虫滋养体的腹鞭毛。结论制备了α-19贾第素的特异性单克隆抗体,免疫荧光显示α-19贾第素定位于贾第虫滋养体的腹鞭毛。

宁夏部分地区奶牛贾第鞭毛虫分子流行病学调查

为了明确宁夏地区奶牛贾第鞭毛虫的优势基因型及其流行特征,试验首先于宁夏地区10个规模化奶牛养殖场采集880份奶牛粪便样品,针对贾第鞭毛虫保守基因——β-贾第素(β-giardin,βg)基因序列设计引物,然后以提取的粪便样品全基因组DNA为模板进行巢式PCR,将PCR产物的测序结果进行BLAST比对分析,鉴定贾第鞭毛虫的基因型,并建立系统进化树,最后对宁夏地区不同城市、不同月龄及腹泻和非腹泻奶牛粪便样品的感染阳性率和基因型进行统计。结果表明:880份粪便样品中,有145份样品扩增到大小为510 bp的条带,贾第鞭毛虫感染阳性率为16.5%(145/880),其中集聚体A的占比为1.4%(2/145),集聚体E的占比为98.6%(143/145);所有集聚体A的βg基因为1种序列(已上传至GenBank,登录号为OQ1012611NX),所有集聚体E的βg基因为4种序列(已上传至GenBank,登录号分别为OQ1012622NX、OQ1012633NX、OQ1012644NX和OQ1012655NX);OQ1012611NX(奶牛)与MK5773339.1(藏牛)、MF497409.1(麝香鹿)和LC437420.1(犬)等在同一分支上;OQ1012622NX(奶牛)、OQ1012633NX(奶牛)、OQ1012644NX(奶牛)与MK862313.1(马)、KR0755939.1(绵羊)、MK610388.1(滩羊)等在同一分支上;OQ1012655NX(奶牛)与KJ188047.1(奶牛)、KJ188056.1(奶牛)、MK5773337.1(藏牛)在同一分支上。宁夏地区四个城市奶牛贾第鞭毛虫感染阳性率表现为中卫市(50.0%,8/16)>银川市(16.3%,126/772)>吴忠市(14.3%,9/63)>石嘴山市(6.9%,2/29);仅在银川市同时检测出集聚体A(1.6%,2/126)和集聚体E(98.4%,124/126),在中卫市、石嘴山市和吴忠市均仅检测出集聚体E;不同月龄奶牛贾第鞭毛虫感染阳性率表现为3~4月龄(26.5%,30/113)>0~2月龄(23.3%,53/227)>5~7月龄(17.4%,49/282)>12月龄以上(6.9%,13/189)>8~12月龄(0,0/69),仅在5~7月龄奶牛粪便中同时检测出集聚体A(4.1%,2/49)和集聚体E(95.9%,47/49),其他月龄段均仅检测出集聚体E;腹泻样品中贾第鞭毛虫感染阳性率为23.6%(37/157),非腹泻样品中贾第鞭毛虫感染阳性率为14.9%(108/723),腹泻样品中集聚体A和集聚体E的占比分别为2.7%(1/37)和97.3%(36/37),非腹泻样品中集聚体A和集聚体E的占比分别为0.9%(1/108)和99.1%(107/108)。说明宁夏地区奶牛存在第鞭毛虫感染,集聚体E为优势基因型。

猴源贾第虫新亚型B11的基因鉴定

运用饱和蔗糖溶液漂浮法收集了26份雅安市碧峰峡野生动物园不同野生动物的粪便寄生虫卵囊,提取DNA,经巢式PCR扩增β-giardin和tpi基因,扩增产物经测序后进行同源性和系统发育分析。结果显示,环尾狐猴(YARTL01)和猕猴(YARM01)感染贾第虫,其中YARTL01分离株为一个新基因亚型,被命名为B11;YARM01分离株为蓝氏贾第虫B1亚型。YARTL01分离株的β-giardin基因序列与环尾狐猴分离株6LC(GenBank登录号HQ616629)的相似率为99.4%,tpi基因序列与猕猴分离株34538(GenBank登录号JX000563)的相似率为98.6%。种系发育分析显示,YARTL01在β-giardin基因位点与聚集体B处于同一分支,而在tpi基因位点,此分离株单独成一分支。YARM01的β-giardin基因序列和tpi基因序列分别与河狸分离株Be1(GenBank登录号EU014382)、猕猴分离株36395(GenBank登录号KC441076)的相似率达到100%;在进化树中,YARM01分离株在β-giardin基因位点与聚集体B处于同一分支,在tpi基因位点此分离株与聚集体B1处于同一个进化分支。本研究是首次报道四川省猴感染贾第虫,其中YARTL01分离株为一个新基因亚型。

复齿鼯鼠源贾第虫新亚型B15的基因鉴定

为了对复齿鼯鼠粪便中分离的贾第虫滋养体进行基因型鉴定,采用饱和蔗糖溶液漂浮法进行卵囊收集,然后提取虫卵的DNA,采用巢式PCR对贾第虫的β-giardin和tpi基因位点进行扩增、测序,建立了系统进化树并进行分析。结果显示,共检测到3株贾第虫分离株,其中HNSMX03分离株为新亚型,被命名为B15,HNSMX20分离株为蓝氏贾第虫的B14亚型和E型混合感染。HNSMX49分离株为蓝氏贾第虫A型。本研究是我国首次报道复齿鼯鼠感染贾第虫,新基因亚型B15的发现为进一步研究我国野生啮齿类动物的流行病学提供了一定的资料。

双抗夹心ELISA检测犬粪贾第虫抗原方法的建立及应用

目的建立简便、特异的检测犬粪贾第虫抗原贾第素α-12的双抗夹心ELISA方法。方法利用辣根过氧化物酶标记抗贾第素α-12单克隆抗体4C9,通过过滤、超声的方法处理犬粪样品。以抗贾第素α-12单克隆抗体3H10为捕获抗体,5%脱脂奶粉作为封闭剂,辣根过氧化物酶标记的抗贾第素α-12单克隆抗体4C9为检测抗体,经底物显色后,用酶标仪测量490nm处的吸光度(A)值。通过棋盘滴定法确定抗体最适包被浓度、最佳封闭剂、待检粪液最佳稀释度及酶标抗体最佳稀释度。应用建立的ELISA方法对122份犬粪样品进行检测。结果建立的双抗夹心ELISA检测标准阳性样品的A490为0.465,标准阴性样品的A490为0.098;优化的最佳检测条件为:抗体包被浓度为0.01mg/ml,封闭剂为1%BSA,粪液稀释度为1∶2,酶标二抗稀释度为1∶400,该试验与犬等孢球虫、犬隐孢子虫、犬蛔虫样品均无交叉反应,批间和批内变异系数较小,重复性好。应用本方法对122份犬粪进行检测,阳性率为36.9%。结论建立的双抗夹心ELISA方法特异性高,重复性好,为贾第虫流行病学调查提供了一种更简便、快速、特异的免疫学检测方法。

猫源贾第虫16S rRNA与β-贾第素基因双位点的基因型鉴定

为了对流浪猫粪便中分离的贾第虫滋养体进行基因型鉴定,提取虫体基因组DNA,以16SrRNA和β-贾第素基因为遗传标记,通过PCR扩增、克隆、测序、NCBI比对以及相关软件分析,建立系统进化树,确定了其基因型。结果显示,成功扩增出291bp的16SrRNA和511bp的β-贾第素基因片段,测定了2个基因片段的序列,并经NCBI比对以及DNAStar中MegAlign软件分析确定该株贾第虫为十二指肠贾第虫F型。本研究首次对我国猫源贾第虫进行了基因型鉴定,为猫源贾第虫分子生物学和分子流行病学研究奠定了基础。

蓝氏贾第鞭毛虫α-4贾第素特异性多克隆抗体的制备及免疫电镜定位研究

目的制备针对蓝氏贾第鞭毛虫α-4贾第素的特异性抗体,免疫胶体金电镜观察该贾第素的亚细胞定位。方法生物信息学分析并合成α-4贾第素抗原肽,与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联后免疫新西兰白兔,Protein A亲和层析纯化抗血清,采用α-4贾第素重组蛋白和贾第虫滋养体全虫体裂解物通过Western blot验证抗血清结合力和结合特异性,选择高特异性抗体通过免疫胶体金电镜观察α-4贾第素的亚细胞定位。结果筛选出3段可能的抗原肽,合成的抗原肽与KLH偶联后免疫兔得到高效价抗血清,Protein A纯化效果良好;3种纯化抗血清均能与α-4贾第素结合,其中anti-P2具有较高的抗原结合特异性。采用anti-P2进行免疫胶体金电镜,显示α-4贾第素主要定位于鞭毛,胞浆也有少量散在表达。结论制备的α-4贾第素多克隆抗体具有抗原结合特异性。用anti-P2进行免疫胶体金电镜,α-4贾第素主要定位于贾第虫鞭毛。