Determination of the Flavonoids from Ginkgo Biloba Extract by High Performance Liquid Chromatography

HPLC method for analysis of the flavonoids from ginkgo biloba extract (GBE) was studied. By suitable selection of columns. symmetrical chromatographic peaks were obtained without using acidic modifier in the mobile phase, which can eliminate the time for cleaning the chromatographic system and simplify the analystic method for GBE Experimental conditions: column: Hypersil BDS C-18, 5mumx4x250 mm: column temperature: 35degreesC; mobile phase: 46% methanol-54% water; flow rate: 0.7 mL/min; detection wavelength: 360nm.

培养条件对银杏悬浮培养细胞黄酮合成影响研究

对12个不同品种的银杏树幼叶及其诱导的愈伤组织进行了银杏黄酮含量测定,发现其存在较大差异.梅核品种幼叶黄酮含量最高,为3.32%,大白果品种幼叶黄酮含量最低,为0.84%;梅核品种幼叶愈伤组织黄酮含量最高,达1.26%,岭南品种幼叶愈伤组织黄酮含量最低,为0.22%.选取生长旺盛、银杏黄酮含量高的愈伤组织在B5液体培养基中进行了银杏细胞悬浮培养,研究了多种条件对银杏细胞生长和银杏黄酮含量的影响.结果表明,在150mL培养瓶中装有50mL培养液,接种量为鲜质量30～40g/L,对培养细胞给予3000～4000lx的光照、以蔗糖为碳源最有利于黄酮的合成,以葡萄糖为碳源则最有利于细胞生长.HPLC检测结果显示,银杏悬浮培养细胞中银杏黄酮含量可达细胞干质量的2.82%.

银杏叶总黄酮镇痛作用及机制的探讨

目的 研究银杏叶总黄酮 (TFG)镇痛作用及其机制。方法 镇痛实验采用甲醛法、热板法、温浴法、扭体法 ;血清和脑组织匀浆中NO、PGE2 、丙二醛 (MDA)含量的测定采用比色法。结果 ipTFG可显著抑制福尔马林致小鼠疼痛反应 ;延长小鼠舔足潜伏期并减少小鼠扭体反应数。icvTFG5 0mg·kg-1可明显抑制小鼠温浴法缩尾反应潜伏期 ;TFG10 0mg·kg-1可降低小鼠血清和脑组织MDA、PGE2 含量 ,并能升高脑组织中NO的含量。结论 TFG具有明显镇痛作用 ,其机制可能与抑制PGE2

施氮对银杏叶产量及黄酮含量的影响

为探索施氮对叶用银杏叶片产量及叶黄酮含量的影响,按0,1 5,3 0,4 5和6 0g·株-1等5个水平进行施氮试验,结果表明:不同施氮水平对银杏叶产量及其构成因子有显著影响。施氮量在3 0g·株-1以下,氮的增施对叶产量、单叶面积、单株叶面积及单叶质量等均有良好的促进作用,以3 0g·株-1为最佳,超过3 0g·株-1时,苗木会受到毒害,以上各指标均下降;施氮对银杏叶片黄酮含量和黄酮总量均有显著的影响;5种施氮处理中,以1 5g·株-1的叶片黄酮含量和黄酮总量最大。1 5g·株-1可作为2年生银杏叶用园的推荐施用量,可望获得单位面积上较高的黄酮产量。

近红外漫反射光谱法直接测定银杏叶提取物粉末中总黄酮的含量

目的:应用近红外漫反射光谱技术和化学计量学方法,直接测定银杏叶提取物粉末中总黄酮的含量。方法:收集不同含量分布的银杏叶提取物粉末样品,以HPLC法测定其总黄酮的含量,并采集其近红外漫反射光谱数据。应用主成分分析法(PCR)、偏最小二乘法(PLS)、改进偏最小二乘法(MPLS)等回归模型对HPLC测定的结果与近红外漫反射光谱数据进行回归,经内部交叉验证,建立校正模型,进而对预测集样品进行分析。结果:MPLS建立的校正模型的准确性最佳,其预测决定系数(RQS)为0.977。对预测集样品进行外部验证,预测值与真值的相关系数(r2)达0.973,样品回收率为96.15%～102.0%,RSD为1.1%。结论:建立了一个利用近红外漫反射光谱法直接测定银杏叶提取物粉末中总黄酮含量的新方法。该方法具有快速方便、结果准确的特点,可以应用于银杏提取过程的中间控制和大批量产品的检测。

一株产黄酮银杏内生真菌的分离鉴定与培养介质的初步研究

从银杏 (GinkgobilobaL .)叶片中分离获得了一株内生真菌EG4 ,经形态分类学研究鉴定为刺盘孢Colletotrichumsp .用TLC分析培养液发现该菌可产生黄酮类化合物 .培养生物学特性的研究表明不同的碳、氮源对其生长和代谢有不同的影响 ,蔗糖和葡萄糖、NH+ 4,能够明显促进其生长 ;乳糖、NO- 2 能够明显促进其酮类物质的合成 .

银杏叶黄酮制备工艺研究

概述用沸水提取银杏叶黄酮类化合物,并用树脂吸附法进行精制的生产工艺。

不同培养条件对银杏愈伤组织生长及黄酮含量的影响

以胚为外植体,通过固体培养,研究了培养基,激素和光照对银杏愈伤组织诱导的影响,以及继代培养中激1素和活性炭对愈伤组织生长和产黄酮的影响,结果表明:愈伤组织的诱导的最佳条件为DCR培养基+1.0mg/L2,4-D+0.5mg/LBA+完全暗条件培养。继代培养过程中既能促进愈伤组织生长又使黄酮含量最高的处理为0.3mg/LBA+2.0mg/L2,4-D,活性炭抑制愈伤组织生长但能促进黄酮的积累。

银杏叶黄酮含量变化及分布规律的研究

对银杏不同枝类、叶位叶及叶柄黄酮含量进行全周期测定 ,结果表明 :叶黄酮含量 ,长枝叶最高 ;长枝有 3次高峰 ,中短枝和叶丛枝各有 2次高峰 ,均以最后一次峰值最大。叶黄酮含量增长幅度同时期相比为长枝 >中短枝 >叶丛枝 >叶柄。在生长发育后期 ,叶片与其叶柄黄酮含量变化趋势相反 ,长枝不同叶位叶黄酮含量最大值是中部叶 >基部叶 >顶部叶。就叶黄酮含量变化及分布与叶片采收。

一株银杏内生真菌的分离及其产黄酮类物质的初步研究

从银杏 (GinkgobilobaL .)树叶中分离得到一株内生真菌EG4 ,经鉴定为刺盘孢Colle totrichumsp .。应用薄层层析、显色反应及分光光度法对该菌的发酵产物进行了初步分析 。

银杏黄酮苷的水浸提方法研究

研究水浸提银杏黄酮苷的方法，探讨了影响黄苷浸出率的主要因素以及最适的精制方法。结果表明：水为提取剂，在９０℃水溶回流浸提银杏叶２次，每次４ｈ。经沉淀，过滤，浓缩后，用树脂精制。冷冻干燥后，制得总黄酮苷含量高的提取物。采用ＨＰＬＣ法监控工艺过程及产品质量。

银杏叶总黄酮抗炎作用及机制的探讨

目的 研究银杏叶总黄酮(TFG)的抗炎作用及其可能的机制。方法 通过二甲苯致小鼠耳肿胀和蛋清致大鼠足爪肿胀模型观察TFG的抗炎作用，并测定大鼠血清和足爪组织中一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、前列腺素E2(PGE2)的含量。结果 100 mg/kg TFG能抑制二甲苯致小鼠耳片肿胀；50、100 mg/kg TFG可抑制蛋清致大鼠足爪的肿胀；在蛋清诱导大鼠脚爪肿胀模型中，TFG使血清和脚爪组织中MDA量减少，同时脚爪组织中NO和PGE2含量也下降。结论 TFG有一定的抗炎作用，其抗炎作用与抑制PGE2和NO合成及脂质过氧化有关。

β-环糊精键合固定相分离纯化银杏叶提取物和银杏黄酮

目的 考察以β-环糊精(β-CD)为键合固定相的色谱柱分离纯化银杏叶提取物和银杏黄酮的影响因素。方法 以色谱图中色谱峰的个数和目标物为离度为指标,采用低压液相色谱技术对银杏叶提取物和银杏黄酮进行分离纯化。同时比较固定相、流动相、缓冲液、pH值、洗脱速度和上样体积对分离结果的影响。结果 氯代环氧丙烷偶联β-CD-Superose 12 pg键合相能够较好地分离银杏叶提取物和银杏黄酮,优于葡聚糖凝胶Sephardex LH-20。结论 β-环糊精键合固定相适用于银杏叶提取物和银杏黄酮的分离与纯化。

产黄酮银杏内生真菌的分离与鉴定

本研究利用组织块培养法从健康的银杏根、茎中分离得到116株内生真菌。通过显色反应、高效液相色谱(HPLC)等方法对内生真菌的代谢产物进行分析,最终筛选出2株能够产黄酮的内生真菌,利用分光光度法测定其发酵液中总黄酮产量均达到20 mg/L以上。形态学特征和真菌r DNA间隔序列(Internal Transcribed Spacer,ITS)的系统进化分析结果表明两株菌分别属于青霉属和毛霉属,其中青霉属为产黄酮银杏内生真菌的首次报道。本研究为利用微生物发酵生产黄酮类化合物奠定了良好的基础。

硼酸-柠檬酸比色法测银杏枝叶中黄酮苷含量

用硼酸-柠檬酸比色法测定了银杏枝叶不同季节黄酮苷的含量,结果表明:硼酸-柠檬酸比色法测定银杏枝叶中的黄酮苷含量稳定性好,精度高,标准差为0.06,黄酮苷测定回收率为98.3%～101.1%,测定结果不受脂溶性杂质的干扰;银杏枝叶中的黄酮苷含量随季节的变化而变化,8月黄酮苷含量最高。

一种改进的银杏黄酮紫外分光光度检测方法的研究

紫外分光光度法(UV法)是银杏黄酮的主要检测方法之一。本文建立一种UV法的改进方法,并对其进行准确性、重现性、线性关系、添加回收率的研究。与未经改进的UV法相比,改进UV法具有检测准确度高、重现性和线性关系较好的特点,能满足科研实验和工业生产的要求。

银杏叶总黄酮的镇痛作用

对银杏叶总黄酮的镇痛作用进行研究。在小鼠扭体模型上，皮下注射银杏叶总黄酮２０～８０ｍｇ·ｋｇ－１可显著减少小鼠扭体数，并且呈量效依赖关系；在小鼠热板模型上，皮下注射和侧脑室注射银杏叶总黄酮均可显著延长小鼠舔足潜伏期；皮下注射银杏叶总黄酮的ＥＤ５０值为２９．７ｍｇ·ｋｇ－１。结果表明，银杏叶总黄酮有明显的镇痛作用，其镇痛作用可能有中枢机制的参与。

银杏叶中黄酮类物质的酶法提取研究

以当地丰富的银杏叶为原料,采用纤维素酶辅助提取法对银杏叶中主要活性物质黄酮类物质进行浸提,通过单因素试验和正交试验,研究不同条件对提取率的影响,结果表明:酶解温度为45℃、酶处理pH为4、酶用量为0.3 mg/mL、酶解时间为2 h,在此条件下,银杏叶总黄酮提取得率为2.80%,与未添加纤维素酶相比,总黄酮得率增加了45.83%。在此基础上,通过比较银杏叶提取物和黄酮苷元对照品的高效液相图谱得出,银杏叶提取物中黄酮类物质主要是槲皮素、山奈酚、异鼠李素。

产黄酮银杏内生菌的分离与鉴定

从健康银杏植株中分离到126株内生菌,并通过HPLC-UV检测方法筛选到8株内生菌产黄酮类物质。用察氏平板培养基分离菌株,根据菌株的菌落形态、大小、颜色、生长速率、质地、生长培养基颜色变化以及菌丝体和孢子的形态特征进行鉴定。初步鉴定结果分别属于匐柄霉、丛梗孢属、交链孢属、镰孢霉属、赤霉属、蜜孢霉、放线菌属和暗梗单孢霉属。

高效液相色谱法测定银杏叶提取物中黄酮含量

银杏叶提取物具有多种生物活性．其中的黄酮是其主要药效成分．建立快速、高效、成本低廉的分析方法是非常必要的，在NANONSPACE SI-2型高效液相色谱仪上建立了测定银杏叶提取物（EGB）中总黄酮含量的方法．色谱每件：应用Shiseido MG C18色谱柱（1．5mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇：0．5％磷酸（48：52）；流速200μL/min；检测波长360nm；进样量1μL．3种黄酮苷元有良好的分离度，并通过稳定性实验和加标回收实验，验证了方法的稳定性和可靠性．槲皮素浓度在40～200μg/mL；线性关系良好，r=0．9998；槲皮素的平均回收率为99.2％．