氨基末端脑钠肽和糖原磷酸化酶同工酶脑型对充血性心力衰竭患儿的诊断价值

目的探讨氨基末端脑钠肽(NT-proBNP)、糖原磷酸化酶同工酶脑型(GPBB)在充血性心力衰竭(CHF)患儿中的改变及其与CHF严重程度、肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的关系,为诊断CHF提供新的、理想的生物学标志。方法选择2006年9月-2007年6月本院住院的由不同心脏疾病[室间隔缺损(VSD)14例,房间隔缺损(ASD)5例,病毒性心肌炎3例,动脉导管未闭、VSD并ASD、扩张型心肌病各2例,法洛四联症1例]引起的CHF患儿29例(CHF组)。均具有典型表现,临床诊断为CHF。采用小儿心力衰竭诊断改良Ross评分系统进行CHF严重程度评分,其中Ross评分≥1分诊断为CHF。随机选择本院同期健康体检婴幼儿和儿童11例作为健康对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组NT-proBNP和GPBB水平,同时检测cTnT、CK-MB水平,超声心动图测量左室射血分数(LVEF)。结果CHF组血NT-proBNP、GPBB、cTnT、CK-MB水平均显著高于健康对照组(t=3.46,4.08,3.06,2.73 Pa<0.05)。NT-proBNP、GPBB、cTnT、CK-MB诊断CHF的敏感性分别为75.9%、72.4%、34.5%、58.9%,NT-proBNP、GPBB的敏感性均优于cTnT(χ2=10.04,8.39 Pa<0.05)。NT-proBNP与改良Ross评分、cTnT及CK-MB均具有良好的相关性(r=0.52P<0.05;r=0.69 P<0.05;r=0.74 P<0.01)。结论NT-proBNP、GPBB为诊断小儿CHF提供了新的理想的标志物;联合检测CHF患儿NT-proBNP、GPBB、cTnT、CK-MB的变化可动态观察CHF的发生发展过程,有助于评估小儿CHF的严重程度及心肌损害程度。

血清心脏型脂肪酸结合蛋白联合糖原磷酸化酶脑型检测在小儿脓毒症心肌损伤诊断中的临床价值

目的研究血清心脏型脂肪酸结合蛋白(FABP3)联合糖原磷酸化酶脑型(GPBB)检测在小儿脓毒症心肌损伤诊断中的临床价值。方法选用回顾性分析方法,研究对象为2018年1月至2020年6月延安大学附属医院收治入院的87例脓毒症患儿,根据是否出现心肌损伤分为心肌损伤组(38例)与非心肌损伤组(49例);同时,将同一时期入院的44例非脓毒症感染性疾病患儿设为对照组。比较3组患儿的血清FABP3、GPBB与心肌损伤指标[肌红蛋白(Myo)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)]水平,并分析血清FABP3、GPBB与心肌损伤指标的相关性,通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估FABP3、GPBB对小儿脓毒症心肌损伤的诊断效能。结果与对照组比较,心肌损伤组、非心肌损伤组血清FABP3、GPBB、Myo、cTnI、CK-MB水平更高,差异均有统计学意义(P<0.05);与非心肌损伤组比较,心肌损伤组血清FABP3、GPBB、Myo、cTnI、CK-MB水平更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。脓毒症患儿血清FABP3、GPBB水平与Myo、cTnI、CK-MB水平均呈正相关(P<0.05)。FABP3诊断小儿脓毒症心肌损伤的ROC曲线下面积(AUC)、最佳截断值、灵敏度、特异度及准确度依次为0.775、18.23 ng/mL、0.78、0.82、0.75;GPBB诊断小儿脓毒症心肌损伤的的AUC、最佳截断值、灵敏度、特异度及准确度依次为0.822、13.55 ng/mL、0.81、0.86、0.78;FABP3联合GPBB诊断小儿脓毒症心肌损伤的的AUC、灵敏度、特异度及准确度依次为0.875、0.86、0.91、0.86。结论小儿脓毒症心肌损伤诊断中,血清FABP3联合GPBB检测具有重要的临床价值,且可评估心肌损伤程度。

血清心脏型脂肪酸结合蛋白联合糖原磷酸化酶脑型检测在小儿脓毒症心肌损伤诊断中的临床价值

目的研究小儿脓毒症心肌损伤诊断中血清心脏型脂肪酸结合蛋白(FABP3)联合糖原磷酸化酶脑型(GPBB)检测的应用价值。方法采用回顾性分析方法,研究对象为2019年1月至2020年1月葫芦岛市中心医院收治的87例脓毒症患儿,根据是否出现心肌损伤划分为2组,心肌损伤患儿列入A组,共38例,未出现心肌损伤患儿列入B组,共49例;同时,选取同一时期入院就诊的44例的非脓毒症感染性疾病患儿作为研究对象,列入C组。3组患儿均选取用全自动血气分析仪测定肌红蛋白、肌钙蛋白Ⅰ,并选取酶联免疫吸附实验法测定GPBB、FABP3及肌酸激酶同工酶,比较3组患儿肌红蛋白、肌钙蛋白Ⅰ、GPBB、FABP3及肌酸激酶同工酶水平,并分析心肌损伤指标肌红蛋白、肌钙蛋白Ⅰ、肌酸激酶同工酶与血清FABP3、GPBB相关性。结果A组[(396.85±13.07)ng/mL、(3.08±0.06)ng/mL、(22.78±1.02)ng/mL、(34.45±2.41)ng/mL、(44.08±6.53)U/L]、B组[(68.26±12.45)ng/mL、(0.12±0.04)ng/mL、(9.17±1.08)ng/mL、(13.64±2.52)ng/mL、(20.85±7.01)U/L]患儿肌红蛋白、肌钙蛋白Ⅰ、GPBB、FABP3及肌酸激酶同工酶水平明显高于C组[(17.16±10.09)ng/mL、(0.04±0.03)ng/mL、(2.58±1.02)ng/mL、(4.34±3.02)ng/mL、(9.17±6.73)U/L],差异有统计学意义(P<0.05);A组患儿肌红蛋白、肌钙蛋白Ⅰ、GPBB、FABP3及肌酸激酶同工酶水平明显高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。脓毒症患儿血清FABP3、GPBB与肌红蛋白、肌钙蛋白Ⅰ、肌酸激酶同工酶均呈正相关(r=0.602、0.521;r=0.466、0.494;r=0.528、0.489,P<0.05)。结论小儿脓毒症心肌损伤诊断中血清FABP3联合GPBB检测的应用效果显著,可用于评估脓毒症患儿心肌损伤严重程度。

Dynamic Variations in Brain Glycogen are Involved in Modulating Isoflurane Anesthesia in Mice

General anesthesia severely affects the metabolites in the brain.Glycogen,principally stored in astrocytes and providing the short-term delivery of substrates to neurons,has been implicated as an affected molecule.However,whether glycogen plays a pivotal role in modulating anesthesia-arousal remains unclear.Here,we demonstrated that isoflurane-anesthetized mice exhibited dynamic changes in the glycogen levels in various brain regions.Glycogen synthase(GS)and glycogen phosphorylase(GP),key enzymes of glycogen metabolism,showed increased activity after isoflurane exposure.Upon blocking glycogenolysis with 1,4-dideoxy-1,4-imino-Darabinitol(DAB),a GP antagonist,we found a prolonged time of emergence from anesthesia and an enhancedδfrequency in the EEG(electroencephalogram).In addition,augmented expression of glycogenolysis genes in glycogen phosphorylase,brain(Pygb)knock-in(PygbH11/H11)mice resulted in delayed induction of anesthesia,a shortened emergence time,and a lower ratio of EEG-δ.Our findings revealed a role of brain glycogen in regulating anesthesiaarousal,providing a potential target for modulating anesthesia.

糖原磷酸化酶同工酶脑型在急性心肌梗死早期诊断中的临床意义

目的探讨糖原磷酸化酶同工酶脑型（GPBB）在急性心肌梗死（AMI）早期诊断中的价值。方法选择115例发病6h内的胸痛患者，其中AMI患者45例（AMI组），非AMI患者70例（非AMI组）。非AMI组中不稳定型心绞痛（UAP）40例、稳定型心绞痛（SAP）13例、非心源性胸痛17例；选择55例健康体检者作为健康对照组。检测发病0～6h的血浆GPBB水平，并与心肌肌钙蛋白I（cTnI）、肌酸激酶同工酶-MB（CK—MB）和肌红蛋白（MYO）的检测结果进行比较，分析上述指标诊断发病0．3h和0．6hAMI的灵敏度、特异度和准确度。结果在0—3h和0～6h时间段，GPBB诊断AMI的灵敏度（64．29％、88．89％）显著高于cTnI（28．57％、60．00％）和CK—MB（21．43％、64．44％），P均〈0．05；与MYO（71．43％、77．78％）比较差异无统计学意义。上述指标特异度差异无统计学意义。在0．3h和0—6h时间段GPBB诊断AMI的准确度（80．77％、89．57％）显著高于cTnI（61．54％、81．74％）、CK—MB（50．00％、75．65％）和MYO（73．08％、73．91％），P均〈0．05。结论GPBB对于诊断早期AMI具有较高的灵敏度和特异度，其诊断准确度优于cTnI、CK—MB和MYO。

GPBB与NT-proBNP检测在心力衰竭患儿中的临床价值

目的本实验通过检测糖原磷酸化酶同工酶脑型(GPBB)、氨基末端脑钠尿肽激素原(NT-proBNP)在肺炎伴充血性心力衰竭(CHF)患儿中的改变,探讨GPBB、NT-proBNP在心力衰竭中的的诊断价值。方法肺炎组患儿共72例,其中合并心力衰竭组患儿共32例;健康婴幼儿30例作为对照组。用酶联免疫吸附试验(ELISA)测量NT-proBNP、GPBB浓度。结果肺炎组NT-proBNP、GPBB与正常对照组比较差异有显著性(P<0.05)。肺炎合并心力衰竭组患儿血浆NT-proBNP、GPBB明显升高,与正常对照组和肺炎组比较均有显著性差异(P<0.01);心衰纠正后,各项指标下降,与治疗前比较P<0.05。结论 GPBB和NT-proBNP是肺炎合并心力衰竭比较可靠的诊断指标,检测NT-proBNP、GPBB可以观察重症肺炎患儿合并心力衰竭的严重程度以及心肌损害的程度。

蛋白酶体抑制剂MG132诱导胃癌细胞AGS凋亡的机制研究

目的蛋白酶体抑制剂MG132已在几种肿瘤治疗中取得一定疗效,但MG132对胃癌细胞凋亡的作用机制尚不完全清楚。因此,本文主要探讨MG132对胃癌细胞AGS凋亡的影响及其可能机制,旨在为胃癌治疗提供实验基础。方法选择AGS细胞为研究对象,实验分为6个组(MG132浓度分别为0、0.5、1、2.5、5、10μmol·L^(-1)),利用CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,全自动生化分析仪检测乳酸脱氢酶(detect lactate dehydrogenase,LDH)水平,免疫沉淀(immunoprecipitation,IP)探讨脑型糖原磷酸化酶(brain-type glycogen phosphorylase,PYGB)、受体相互作用蛋白3(receptor interacting protein 3,RIP3)和受体相互作用蛋白1(receptor interacting protein1,RIP1)的相互作用关系,进一步用Western blot检测PYGB、RIP3和RIP1的表达情况。结果不同浓度MG132处理AGS细胞12、24、36 h后,MG132存在浓度和时间依赖性抑制AGS细胞增殖;MG132处理AGS细胞24 h后,诱导AGS细胞凋亡,促进细胞内LDH释放和ROS水平增加;MG132处理AGS细胞24 h后,细胞内PYGB表达水平降低,RIP3和RIP1表达水平升高。此外,IP实验表明PYGB、RIP3和RIP1之间存在相互作用。结论在胃癌细胞AGS中,MG132诱导的AGS细胞凋亡与PYGB表达水平降低,RIP3和RIP1表达水平升高有关。

脑型糖原磷酸化酶对胃癌细胞凋亡的影响及机制

目的探讨脑型糖原磷酸化酶(PYGB)对胃癌(GC)细胞凋亡的影响及其机制。方法收集29例初诊GC患者的一般临床资料和GC组织及距肿瘤边缘>5 cm的癌旁组织作为组织标本,同时选取GC细胞系HGC-27、MGC-803、MKN45、AGS及人胃黏膜上皮细胞GES-1作为细胞标本,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测2种组织和上述5种细胞中PYGB mRNA的表达,采用蛋白印迹法(Western blot)检测各种细胞PYGB蛋白的表达,采用χ^(2)检验分析PYGB mRNA表达与患者临床病理特征的关系;选择PYGB mRNA表达量最高的AGS细胞作后续研究,采用RNA干扰技术根据PYGB基因合成3对siRNA(si-PYGB 1~3)序列,以Lipofectamine^(TM) 3000为转染试剂转染胃癌细胞AGS,分为Control组(空白对照)、si-NC组(阴性对照)、si-PYGB 1组(si-PYGB 1)、si-PYGB 2组(si-PYGB 2)和si-PYGB 3组(si-PYGB 3),分别采用RT-qPCR和Western blot检测各组AGS细胞PYGB在mRNA和蛋白水平上的表达;保留干扰效果最好的si-PYGB 2组,采用流式细胞术检测si-NC组和si-PYGB 2组细胞周期、凋亡及细胞内活性氧(ROS)水平。结果与癌旁组织比较,GC组织中PYGB mRNA水平表达上调(P<0.05);与GES-1比较,GC细胞AGS和MKN45中PYGB mRNA和蛋白水平上表达上调、GC细胞HGC-27和MGC-803中表达下调(P<0.05);与si-NC组比较,si-PYGB 2组AGS细胞S期比例下降、G2/M期比例上升(P<0.05),同时细胞凋亡率上升、细胞内ROS水平增加(P<0.05)。结论沉默PYGB可诱导AGS细胞凋亡,其机制可能与细胞内ROS水平增加有关。

脑糖原磷酸化酶小干扰RNA对人骨肉瘤细胞MG63增殖的抑制作

目的观察脑糖原磷酸化酶（PYGB）对人骨肉瘤细胞株MG63的细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期分布的影响。方法通过实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）方法检测35例骨肉瘤和15例骨囊肿标本的PYGB表达水平。采用Western blot法挑选PYGB高表达的骨肉瘤细胞株。采用细胞计数试剂盒（CCK-8）方法测定细胞增殖，使用流式细胞仪检测MG63细胞凋亡和细胞周期，Western blot法分别检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（bax）和B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）的表达。结果骨肉瘤组的PYGB表达（0.105±0.945）水平明显较骨囊肿组（0.062±0.038）高（P＝0.006）。小干扰RNA沉默PYGB后的骨肉瘤细胞的增殖明显降低，PYGB干扰组的G1期细胞比例从（49.74±1.54）%增加至（69.41±2.35）%（P＝0.004），而S期细胞比例从（21.04±2.59）%下降至（14.15±0.98）%（P＝0.028）。G2期百分比从（25.62±0.64）%减少至（8.19±0.11）%（P＝0.002），表明细胞周期受阻断在G1期。PYGB干扰组的bax的表达水平显著增加，而bcl-2的表达水平显著降低。结论PYGB的小干扰RNA通过靶向抑制半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）/bcl和细胞周期蛋白依赖激酶1（CDK1）信号通路而抑制人骨肉瘤细胞MG63细胞的增殖。

心脏型脂肪酸结合蛋白及糖原磷酸化酶同工酶脑型与脓毒症心肌损伤的相关性研究

目的研究血清心脏型脂肪酸结合蛋白（heart—typefattyacidbindingprotein，H-FABP）及糖原磷酸化酶同工酶脑型（brain glycogen phosphorylase isoenzyme type，GPBB）水平与脓毒症心肌损伤的相关性，探讨血清H—FABP及GPBB水平与疾病严重程度及临床预后的关系。方法选取2017年1月1日至2017年10月31日收入中国医科大学附属盛京医院PICU的脓毒症患儿共40例作为研究对象，根据病情严重程度分为脓毒症组15例、严重脓毒症组13例和脓毒性休克组12例，选择同期入院的小儿外科择期手术非感染性疾病患儿19例为对照组，收集其临床资料。监测人院24h内患儿血清WBC、C-反应蛋白、降钙素原、血清肌钙蛋白I（cTnI）、CK、CK—MB、CK—MB同工酶质量、氨基末端BNP前体（NT—proBNP），计算APECHEII评分，并取入院24h内的外周血使用ELISA夹心法测定新型心肌标记物即血清H—FABP、GPBB水平，分析各组间临床指标的差异。根据脓毒症患儿出院时死亡与否分为好转组37例和死亡组3例；行床旁心脏超声将所有脓毒症患儿分为左室射血分数（LVEF）正常组26例和伴LVEF下降组14例；根据血清cTnI是否升高将所有脓毒症患儿分为cTnI正常组29例和cTnI升高组11例；比较各组H—FABP、GPBB水平的差异。根据有无LVEF下降，利用ROC曲线下面积评估各指标对脓毒症心肌损伤的预测能力。结果对照组、脓毒症组、严重脓毒症组和脓毒性休克组间H—FABP、GPBB水平差异有统计学意义（H=42．241，P〈0．05；H=32．486，P〈0．05）。LVEF正常组与LVEF下降组（LVEF≤60％）新型心肌标记物水平的比较，H—FABP（t=-3．770，P=0．001）、GPBB（Z=-2．113，P=0．033）两组间差异有统计学意义。虽然好转组与死亡组新型标记物水平差异无统计学意义（P〉0．05），但死亡组两者水平有增高趋势。cTnI正常组与cTnI升高组间新型心肌标记物水平差异无统计学意义（P〉0．05），但cTnI升高组两者水平有升高趋势。血清CK、CK—MB、cTnI、NT—proBNP及H—FABP、GPBB在判断脓毒症心肌损伤方面，ROC曲线下面积分别为H-FABP0．821、NT—ProBNP0．738、GPBB0．661、CK0．560、cTn10．512，其中H—FABP敏感度（0．833）及特异度（0．786）均较高。结论血清H-FABP和GPBB水平可作为脓毒症心肌损伤的监测指标，并与疾病严重程度及预后有一定相关性。H—FABP判断脓毒症心肌损伤的敏感性和特异性相比传统的心肌标记物有明显的综合优势。

心脏型脂肪酸结合蛋白及糖原磷酸化酶同工酶脑型与脓毒症心肌损伤的相关性研究进展

目前脓毒症的发病率呈上升趋势，病死率也居高不下。脓毒症导致的心肌损伤是死亡的重要原因之一。国内外针对脓毒症并发的心肌损伤尚无明确的、统一的诊断标准，临床上诊断心肌损伤主要依靠心脏超声及心肌标志物等，但是对于射血分数的测量需要考虑左心室前后负荷的影响，且操作者的主观因素影响也比较大。因此，心肌标志物在检测脓毒症心肌损伤中具有重要价值，尤其在早期诊断及判断预后上，具有高度敏感性和特异性的心肌标志物能更好地反映心肌损伤和脓毒症的严重程度。心脏型脂肪酸结合蛋白及糖原磷酸化酶同工酶脑型相比于其他传统心肌标志物，具有更高的敏感性、特异性和稳定性，值得研究并应用于临床心肌损伤诊断中。