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MOG抗体阳性和AQP4抗体阳性视神经炎治疗方法的研究进展
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作者 王锴琦 赵洁 《医药前沿》 2024年第3期30-32,共3页
视神经炎是一种主要累及青年,以视神经各种炎性病变为特征的致盲性眼科疾病。近些年随着水通道蛋白-4抗体和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体在部分患者血清中的发现,越来越多的学者认为这两种抗体介导的视神经炎区别于多发性硬化相关性视神... 视神经炎是一种主要累及青年,以视神经各种炎性病变为特征的致盲性眼科疾病。近些年随着水通道蛋白-4抗体和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体在部分患者血清中的发现,越来越多的学者认为这两种抗体介导的视神经炎区别于多发性硬化相关性视神经炎,且分别具有独特的临床特征。本文对目前这两种特异性抗体相关视神经炎的治疗方法的相关研究进行综述,以期为临床工作提供帮助。 展开更多
关键词 视神经炎 髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体 水通道蛋白-4抗体
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Prokaryotic expression, localization and function of the infectious laryngotracheitis virus glycoprotein G
2
作者 SUN Zhaogang ZHANG Manfu 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2005年第18期2033-2038,共6页
The infectious laryngotracheitis virus (ILTV) glycoprotein G (gG) gene of E3 and Zhonghai strains was cloned, sequenced and compared with the gG gene of other Type I animal herpesviruses. To find the localization and ... The infectious laryngotracheitis virus (ILTV) glycoprotein G (gG) gene of E3 and Zhonghai strains was cloned, sequenced and compared with the gG gene of other Type I animal herpesviruses. To find the localization and the function of the gG in the infected cells, the 35 kD fusion pro-tein (His-GG) was expressed by inserting the coding region of gG except for the signal peptide into pET30a (+). After puri-fication of the His-GG fusion protein, the rats’ antibody to the His-GG was prepared and purified by using the protein G Sepharose. Results of laser scanning confocal microscopy (LSCM) detection showed that the ILTV gG was in the peri-nuclear region and membrane of chicken embryo liver (CEL) and kidney (CEK) cells, and that the gG accumulated more in the coalescent part than in the other parts of the adjacent CEL or CEK cells. The plaque size and the one-step growth curve tests suggested that the ILTV gG was required for viral growth by cell-to-cell direct infection in tissue-cultured CEL cells. 展开更多
关键词 原核表达 糖蛋白 传染性 喉气管炎 缩氨酸
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Effect of the infectious laryngotracheitis virus (ILTV) glycoprotein G on virus attachment, penetration, growth curve and direct cell-to-cell spread
3
作者 SUN Zhaogang ZHANG Manfu 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2005年第5期487-494,共8页
The secreted alphaherpesvirus glycoprotein G (gG) works differently from other proteins. Analysis of the role of ILTV gG in virus attachment, penetration, direct cell-to-cell spread (CTCS) and the growth curve showed ... The secreted alphaherpesvirus glycoprotein G (gG) works differently from other proteins. Analysis of the role of ILTV gG in virus attachment, penetration, direct cell-to-cell spread (CTCS) and the growth curve showed that gG or its antibody had no effect on ILTV attachment and penetration and that the gG antibody reduced the virus plaque size and the one-step growth curve on chicken embryo liver (CEL) cells, but gG did not affect the virus plaque size or the one-step growth curve on CEL cells. Laser scanning confocal microscopy (LSCM) detection showed that ILTV gG is located in the perinuclear region and the membrane of the CEL cells. These results suggested that ILTV gG might contribute to direct cell-to-cell transmission. 展开更多
关键词 INFECTIOUS laryngotracheitis virus glycoprotein g direct CELL-TO-CELL transmission.
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汉滩病毒囊膜糖蛋白G_2基因重组腺病毒的构建与表达 被引量:7
4
作者 吴兴安 张芳琳 +5 位作者 于澜 胡刚 白文涛 史梦远 王海涛 徐志凯 《科学技术与工程》 2004年第5期363-366,370,共5页
获得汉滩病毒G2 基因 ,构建其重组腺病毒并在HEK2 93细胞中包装表达 ,为研究汉滩病毒基因疫苗提供了实验基础。设计引物采用PCR从含汉滩病毒 \|76 1 1 8株M基因的M5 6质粒扩增出糖蛋白G2 基因片段 ,并将其克隆入腺病毒载体Adeno XviralD... 获得汉滩病毒G2 基因 ,构建其重组腺病毒并在HEK2 93细胞中包装表达 ,为研究汉滩病毒基因疫苗提供了实验基础。设计引物采用PCR从含汉滩病毒 \|76 1 1 8株M基因的M5 6质粒扩增出糖蛋白G2 基因片段 ,并将其克隆入腺病毒载体Adeno XviralDNA ,筛选获得重组腺病毒DNA ,转染HEK2 93细胞 ,包装、扩增后得到汉滩病毒G2 基因重组腺病毒原种 ;并在感染细胞内初步表达 ,用ELISA检测表达产物。得到了含汉滩病毒G2 基因的重组腺病毒 ,其滴度约为 1 0 10 pfu/mL ,同时在感染的HEK2 93细胞中检测到汉滩病毒糖蛋白G2 的表达。含汉滩病毒糖蛋白G2 基因重组腺病毒的成功构建 。 展开更多
关键词 汉滩病毒 毒囊膜糖蛋白g2 基因重组 腺病毒 基因构建 基因表达 肾综合征出血热
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Ⅰ型单纯疱疹病毒糖蛋白G基因片段的克隆表达及初步鉴定 被引量:4
5
作者 王洁 李越希 张云 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第6期55-58,63,共5页
通过计算机分析Ⅰ型单纯疱疹病毒糖蛋白G的氨基酸序列 ,筛选出HSV1 gG蛋白中优势抗原决定簇位点 ,用PCR技术扩增克隆含强抗原决定簇较集中的基因片段。将该段基因克隆至质粒表达载体pGEX 4T 2内 ,转化大肠杆菌TG1 ,构建成功了高效表达... 通过计算机分析Ⅰ型单纯疱疹病毒糖蛋白G的氨基酸序列 ,筛选出HSV1 gG蛋白中优势抗原决定簇位点 ,用PCR技术扩增克隆含强抗原决定簇较集中的基因片段。将该段基因克隆至质粒表达载体pGEX 4T 2内 ,转化大肠杆菌TG1 ,构建成功了高效表达Ⅰ型单纯疱疹病毒糖蛋白G基因的工程菌。用纯化的表达蛋白HSV1 gG GST作抗原ELISA分析证实有较好的抗原性和特异性 。 展开更多
关键词 Ⅰ型单纯疱疹病毒 糖蛋白g 基因克隆 基因表达
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单纯疱疹病毒2型糖蛋白G的基因扩增、克隆及其B细胞抗原表位分析 被引量:2
6
作者 王茜 曾抗 +2 位作者 孙乐栋 周再高 刘凤岩 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第13期1217-1219,共3页
目的:克隆单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白G-2(gG-2)全长基因并对糖蛋白G-2进行B细胞抗原表位预测.方法:用PCR法扩增HSV-2的gG-2基因,连接到pGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α株后测序.利用Lasergene,C lustal X等软件,进行B细胞抗原表位预测... 目的:克隆单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白G-2(gG-2)全长基因并对糖蛋白G-2进行B细胞抗原表位预测.方法:用PCR法扩增HSV-2的gG-2基因,连接到pGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α株后测序.利用Lasergene,C lustal X等软件,进行B细胞抗原表位预测.结果:完成单纯疱疹病毒2型(HSV-2)gG-2全长基因克隆.通过B细胞抗原表位分析,发现HSV-1的gG-1和HSV-2的gG-2氨基端的同源性很低.gG-2蛋白在“独特区”存在抗原指数非常强的抗原表位.结论:成功构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)gG-2全长基因克隆,为单纯疱疹病毒感染的诊断试剂的研发及抗单纯疱疹病毒疫苗研究寻找更好的靶位点提供研究材料和参考. 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒2型 包膜糖蛋白g-2 基因克隆 抗原表住
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北京地区人偏肺病毒膜表面糖蛋白G编码基因和特征的分析 被引量:3
7
作者 朱汝南 钱渊 +2 位作者 赵林清 邓洁 王芳 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期180-185,共6页
为了解北京地区人偏肺病毒(hMPV)膜表面糖蛋白G编码基因的特征,提取2003年和2004年各6份hMPV阳性的临床呼吸道标本中的RNA,经用随机引物合成cDNA后,用特异性引物扩增G蛋白全基因,克隆至pBST载体中并进行测序。用生物软件与GenBank... 为了解北京地区人偏肺病毒(hMPV)膜表面糖蛋白G编码基因的特征,提取2003年和2004年各6份hMPV阳性的临床呼吸道标本中的RNA,经用随机引物合成cDNA后,用特异性引物扩增G蛋白全基因,克隆至pBST载体中并进行测序。用生物软件与GenBank中hMPV的基因序列进行比较和种系进化分析。12株hMPV可以分为两个主要的进化簇1和2。每个进化簇还可以再分为不同的亚进化簇。3株(2003年)hMPV属于进化簇1;9株(3株2003年和6株2004年)hMPV属于进化簇2。这12株hMPV G蛋白基因的核苷酸长度在624~711nt,使用了两种不同的终止密码,编码的氨基酸长度为208~236aa,蛋白质分子量为22.9~25.8kD。与进化簇2相比,进化簇1的3株hMPV都出现了3个核苷酸的缺失,但未改变读码框架。同一进化簇内的hMPV G蛋白基因核苷酸和氨基酸的同源性分别为95.7%~100%和91.8%~100%,不同进化簇间的核苷酸和氨基酸的同源性分别为56.3%~57.4%和34.3%~38.2%。疏水性分析表明这12株hMPV G蛋白是典型的Ⅱ型跨膜锚定蛋白,分别与两个进化簇代表株的疏水图一致。这些hMPV的G蛋白氨基酸的替换集中在胞外区。它们都含有高百分比的脯氨酸(P)、丝氨酸(S)和苏氨酸(T),含有相当数量的位于胞外区的O-连接糖基化化点。这些hMPV的G蛋白的N连接糖基化位点数目和位置不尽相同。通过对G蛋白基因的分析显示,2003年和2004年北京地区流行的hMPV分属于两种不同的进化簇。基因分析品示hMPV的G蛋白是高精基化的膜表面蛋白,具有与同属于副粘病毒科、肺病毒亚科的人呼吸道合胞病毒(hRSV)的G蛋白相似的基因特征,推测其功能和在感染免疫中的作用相当于hRSV的G蛋白,但有待进一步深入研究予以证实。 展开更多
关键词 人偏肺病毒 膜表面糖蛋白g 基因特征
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伪狂犬病病毒Ea株gE基因主要抗原表位区的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量:1
8
作者 肖少波 陈焕春 +2 位作者 方六荣 何启盖 徐引娣 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期459-462,共4页
以伪狂犬病病毒 Ea株为模板 ,通过 PCR扩增含 g E基因主要抗原表位区的 80 1 bp的片段 ,扩增产物酶切后克隆于 p Bluescript SK+ 中 ,双脱氧末端终止法测定序列并同国外 Rice株进行同源比较。将该片段插入原核表达载体 p ET-1 7b的 T7... 以伪狂犬病病毒 Ea株为模板 ,通过 PCR扩增含 g E基因主要抗原表位区的 80 1 bp的片段 ,扩增产物酶切后克隆于 p Bluescript SK+ 中 ,双脱氧末端终止法测定序列并同国外 Rice株进行同源比较。将该片段插入原核表达载体 p ET-1 7b的 T7噬菌体启动子下游 ,构建的原核表达质粒 p ETE80 4在大肠杆菌 BL2 1( DE3 )中获得了高效表达。 SDS-PAGE结果显示 ,表达的蛋白 Mr为 380 0 0 ,并形成包涵体。 Western印迹分析表明 ,该蛋白能与 Ea株野毒高免血清发生特异性反应 ,但与 g E缺失的 Bartha株高免血清不反应。上述结果说明 ,该原核表达产物不仅具有生物学活性 。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 gE基因 抗原表位 克隆 表达
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HSV-1 stocker株糖蛋白G基因膜外区毕赤酵母表达载体的构建及序列分析 被引量:1
9
作者 刘毅 韩金祥 +2 位作者 邵金辉 朱波 朱有名 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期146-149,共4页
目的构建Ⅰ型单纯疱疹病毒型特异性包膜糖蛋白G基因膜外区毕赤酵母表达载体,并进行序列分析。方法PCR扩增HSV-1-gG基因的膜外区,克隆于pGEM-T载体,转化DH5α,提取质粒酶切鉴定后,与pPIC9K载体连接,转化DH5α,筛选阳性克隆,鉴定后转化GS... 目的构建Ⅰ型单纯疱疹病毒型特异性包膜糖蛋白G基因膜外区毕赤酵母表达载体,并进行序列分析。方法PCR扩增HSV-1-gG基因的膜外区,克隆于pGEM-T载体,转化DH5α,提取质粒酶切鉴定后,与pPIC9K载体连接,转化DH5α,筛选阳性克隆,鉴定后转化GS115菌,构建酵母表达载体。对克隆的序列进行分析,预测表达产物的理化特性、抗原性及表达形式。结果获得的重组酵母表达载体pPIC9K-gG,测序结果证实为HSV-1-gG基因,序列分析其高度保守,预测蛋白相对分子质量15870,等电点pI为4.72,包含全部膜外区分值达1.7的6个强抗原决定簇,将以可溶性形式分泌表达于胞外。结论已成功构建HSV-1stocker株糖蛋白G基因膜外区毕赤酵母表达载体。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒Ⅰ型 包膜糖蛋白g 毕赤酵母 序列分析
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伪狂犬病病毒糖蛋白G基因的结构分析及其原核表达 被引量:3
10
作者 闵平 张楚瑜 潘兹书 《中国病毒学》 CSCD 2002年第2期166-171,共6页
利用PCR技术扩增了伪狂犬病毒湖北株 (PRVHB)糖蛋白G(gG)基因 ,进行了序列测定和分析。结果显示扩增和测序片段长 180 4bp ,G +C含量 6 8.78%。gG基因ORF长 15 0 0bp ,编码 5 0 0个氨基酸组成的多肽。与PRVRice株 gG基因比较 ,两者核苷... 利用PCR技术扩增了伪狂犬病毒湖北株 (PRVHB)糖蛋白G(gG)基因 ,进行了序列测定和分析。结果显示扩增和测序片段长 180 4bp ,G +C含量 6 8.78%。gG基因ORF长 15 0 0bp ,编码 5 0 0个氨基酸组成的多肽。与PRVRice株 gG基因比较 ,两者核苷酸及推导的氨基酸序列同源性分别为 98%、84.1%。 32 0~ 380位之间的氨基酸序列存在较大差异。根据序列分析结果 ,选取 gG基因长短不同的两个片段分别克隆到原核表达载体 pET2 8a(+)进行表达。经SDS PAGE和Dot ELISA分析证实 ,表达出分子量大小分别约为 5 5kD和 6 3kD的特异性gG多肽 ,这为深入阐明PRV gG基因结构与功能及研制 gG 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 糖蛋白g 原核表达 核苷酸序列 氨基酸 序列 基因表达 基因结构
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云南4株狂犬病毒N和G基因的克隆及测序 被引量:4
11
作者 赵焕云 张文东 +13 位作者 金卫华 杨斌 张富强 李朝仓 李刚山 宋建领 何晓辉 周建国 胡媛媛 王永贤 张应国 范泉水 李作生 高云英 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第3期413-419,共7页
目的:认识云南狂犬病毒株N基因和G基因的结构特征及其与已知毒株的遗传相关性。方法:对2006-2007年云南曲靖(YNQJ07)、昭通(YNZT07)、楚雄(YNMD06)、保山(YNTC06)狂犬病毒株N基因和G基因进行RT-PCR扩增,克隆至pPICZαA载体... 目的:认识云南狂犬病毒株N基因和G基因的结构特征及其与已知毒株的遗传相关性。方法:对2006-2007年云南曲靖(YNQJ07)、昭通(YNZT07)、楚雄(YNMD06)、保山(YNTC06)狂犬病毒株N基因和G基因进行RT-PCR扩增,克隆至pPICZαA载体进行测序,并与已知代表性毒株进行比对及系统发育分析。结果:云南狂犬病毒株均属于基因Ⅰ型毒株,YNQJ07、YNZT07、YNMD06以及近年部分广西、浙江、江苏、湖北、安徽、江西省毒株N基因和G基因核酸序列同源性分别介于97.0%-99.3%、97.4%-99.3%,与其它基因I型毒株同源性分别介于86.3%-90.2%、82.9%-93.0%。YNTC06与泰国和部分广西毒株同源性介于95.0%-95.8%,与其它基因Ⅰ型毒株同源性介于82.9%-92.9%。结论:YNQJ07、YNZT07、YNMD06属于亚组群Ⅱ毒株,YNTC06毒株属于亚组群Ⅲ毒株,云南狂犬病毒核蛋白和糖蛋白存在特异性氨基酸变异位点。 展开更多
关键词 云南 狂犬病毒 核蛋白基因(N) 糖蛋白基因(g) 测序
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含GFP基因的逆转录病毒与VSV-G蛋白重组形成高滴度假病毒 被引量:3
12
作者 陈瑾君 刘伟 +4 位作者 刘德莉 陆峻泓 李卿 崔磊 曹谊林 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第4期315-318,共4页
目的 通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)蛋白重组,提高含绿色荧光蛋白(GFP)基因逆转录病毒的感染效率,并使其经受超速离心以达到进一步浓缩。方法 应用GFP-RV质粒转染PT67细胞并用G418筛选出GFP阳性克隆,利用其产生的病毒上清... 目的 通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)蛋白重组,提高含绿色荧光蛋白(GFP)基因逆转录病毒的感染效率,并使其经受超速离心以达到进一步浓缩。方法 应用GFP-RV质粒转染PT67细胞并用G418筛选出GFP阳性克隆,利用其产生的病毒上清液再转染GP2-293细胞,在G418筛选的同时,瞬时转染VSV-G基因。收集该GP2-293细胞产生的重组病毒作滴度测定,并通过低温超速离心制成含GFP病毒的浓缩液,再感染NIH3T3细胞,观察GFP在NIH3T3细胞内的表达情况。结果 GFP-RV质粒转染PT67细胞产生的GFP阳性克隆,随着细胞传代过程,GFP的表达逐渐减弱。GP2-293细胞转染VSV-G基因后可产生(7.5±1.4)×105cfu/mL的GFP重组假病毒,将其浓缩液转染NIH3T3细胞,可见GFP在细胞内有较强的表达。结论逆转录病毒与VSV-G共转染GP2-293包装细胞可以形成高滴度的假病毒,由此得到含GFP基因的病毒上清液,其在组织工程中应用范围更广泛。 展开更多
关键词 gFP基因 逆转录病毒 假病毒 疱疹性口腔炎病毒 基因转染 克隆 组织工程
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P-gp和ABCG2在食管鳞状细胞癌中的表达及临床病理意义 被引量:3
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作者 龚晓瑾 古力巴哈尔.阿不力米提 +1 位作者 蒲红伟 陈晓 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第7期728-733,共6页
目的:研究肿瘤耐药相关基因P-gp和ABCG2在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床病理特征和预后的关系.方法:应用免疫组织化学SP法检测食管鳞状细胞癌患者76例及正常食管黏膜30例,观察肿瘤耐药相关基因P-gp和ABCG2的表达,同时回顾性研究... 目的:研究肿瘤耐药相关基因P-gp和ABCG2在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床病理特征和预后的关系.方法:应用免疫组织化学SP法检测食管鳞状细胞癌患者76例及正常食管黏膜30例,观察肿瘤耐药相关基因P-gp和ABCG2的表达,同时回顾性研究了这些表达与食管鳞状细胞癌发生、浸润及转移等临床病理学参数的关系.结果:(1)食管鳞状细胞癌组织中,P-gp和ABCG2的表达阳性率分别为88.16%和80.26%.30例食管正常黏膜中两者的表达率分别为60%和50%.差异均有统计学意义(P<0.05);(2)食管鳞状细胞癌组织中,P-gp在不同临床分期、不同浸润深度组之间阳性表达率的差异有统计学意义(P=0.002,0.035);(3)食管鳞状细胞癌组织中,ABCG2在不同临床分期、有或无淋巴结转移组之间阳性表达率的差异有统计学意义(P=0.006,0.034);(4)P-gp与ABCG2的表达呈正相关(r=0.228,P<0.05);(5)本组病例的5年总生存率为34.21%,单因素生存分析表明,P-gp阳性表达组的生存率显著低于阴性表达组,两组间生存率的差异有统计学意义(P<0.05).结论:P-gp和ABCG2在食管鳞癌的发生发展中可能起一定的作用.P-gp与食管鳞癌的预后密切相关. 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 P-糖蛋白 三磷酸腺苷结合转运蛋白g超家族成员2
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单纯疱疹病毒II型糖蛋白G主要抗原表位的表达和抗原性检测
14
作者 王晓红 卢海蓉 +4 位作者 章刚 陈少娟 黄德新 李凌云 林枫 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期63-68,共6页
利用PCR拼接技术,合成含单纯疱疹病毒II型糖蛋白G(gG2)抗原表位(氨基酸序列第561~578位)的片段,并进一步利用基因工程技术获得该表位的双拷贝片段,克隆入pET—KDO表达载体进行原核表达。经IPTG诱导后,高效表达出分子量大小约为... 利用PCR拼接技术,合成含单纯疱疹病毒II型糖蛋白G(gG2)抗原表位(氨基酸序列第561~578位)的片段,并进一步利用基因工程技术获得该表位的双拷贝片段,克隆入pET—KDO表达载体进行原核表达。经IPTG诱导后,高效表达出分子量大小约为39kDa的融合蛋白,经Western blot检测具有良好的抗原性。表达的融合蛋白经凝血酶切割和亲和层析纯化,得到双拷贝gG2(561~578aa)目的蛋白,经ELISA检测具有良好的灵敏度和特异性。该重组抗原的构建和表达可用于HSV-2特异性血清学诊断的研究。 展开更多
关键词 人单纯疱疹病毒 糖蛋白g 抗原表位
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应用GFP基因转染示踪BMSCs在组织工程下颌骨内的分化
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作者 袁捷 韦敏 +3 位作者 祁佐良 陈瑾君 崔磊 曹谊林 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2010年第2期165-170,共6页
目的:应用绿色荧光蛋白(GFP)标记技术,观察组织工程化下颌骨形成过程中种子细胞的变化与转归。方法:用GFP反转录病毒载体与疱疹性口炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)蛋白重组形成假病毒,高效转染犬骨髓间质干细胞(bone marrow stromal cells,BM... 目的:应用绿色荧光蛋白(GFP)标记技术,观察组织工程化下颌骨形成过程中种子细胞的变化与转归。方法:用GFP反转录病毒载体与疱疹性口炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)蛋白重组形成假病毒,高效转染犬骨髓间质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs),将其接种于珊瑚,形成细胞、材料复合物,植入修复犬下颌骨标准缺损。术后32周取材,进行大体观察,组织学观察组织结构,免疫组化检测GFP蛋白表达情况。结果:32周后,大体可见组织工程化下颌骨形成,Van Gieson染色示新生骨大部分为成熟骨质,免疫组化显示新骨表面有GFP阳性成骨细胞,连接处无GFP阳性细胞,,珊瑚大部分降解。结论:组织工程下颌骨结构与正常皮质骨类似,新生组织表达GFP,证实组织工程下颌骨组织的形成来源于植入细胞。 展开更多
关键词 疱疹性口炎病毒糖蛋白g基因 绿色荧光蛋白 组织工程 下颌骨
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伪狂犬病病毒Kaplan株糖蛋白gG基因的克隆与表达
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作者 赵培 魏园园 +1 位作者 兰德松 魏澍 《现代畜牧兽医》 2014年第7期5-8,共4页
本试验利用PCR技术扩增了伪狂犬病病毒(PRV)Kaplan株的糖蛋白G(gG)基因,结果显示,扩增的片段长约为1 314 bp。将gG基因克隆到原核表达载体pET-30a中,转入大肠杆菌中并经IPTG诱导表达,通过SDSPAGE蛋白电泳和Western-Blot免疫印迹分析,证... 本试验利用PCR技术扩增了伪狂犬病病毒(PRV)Kaplan株的糖蛋白G(gG)基因,结果显示,扩增的片段长约为1 314 bp。将gG基因克隆到原核表达载体pET-30a中,转入大肠杆菌中并经IPTG诱导表达,通过SDSPAGE蛋白电泳和Western-Blot免疫印迹分析,证实表达了分子量大小约为54 ku的特异性gG蛋白,并能被特异性抗体所识别。本研究为深入阐明PRV gG基因结构与功能及诊断试剂的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 糖蛋白g 基因表达
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儿童抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白免疫球蛋白G抗体相关疾病急性期视觉诱发电位特点分析 被引量:3
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作者 陈金晓 孙静 +3 位作者 杨文民 王小月 王昕 杨健 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期284-289,共6页
目的探讨儿童抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白免疫球蛋白G抗体相关疾病(MOGAD)急性期的视觉诱发电位(VEP)特点。方法回顾性分析2018年5月至2020年2月收治的临床诊断为中枢神经系统特发性炎性脱髓鞘病(CNS-IIDDs)患儿的临床资料,根据血清MOG抗... 目的探讨儿童抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白免疫球蛋白G抗体相关疾病(MOGAD)急性期的视觉诱发电位(VEP)特点。方法回顾性分析2018年5月至2020年2月收治的临床诊断为中枢神经系统特发性炎性脱髓鞘病(CNS-IIDDs)患儿的临床资料,根据血清MOG抗体检测结果以及是否存在视神经炎进行分组,分析不同组间VEP特点。结果67例CNS-IIDDs患儿中,MOG抗体阳性组29例(43.3%),15例(51.7%)存在视神经炎;MOG抗体阴性组38例(56.7%),19例(50.0%)存在视神经炎。对所有患儿双眼分别进行VEP检测,MOG抗体阳性组含58只眼,MOG抗体阴性组含76只眼,共获得了134只眼的VEP结果。非视神经炎组66只眼中,MOG抗体阳性组的VEP异常率(14/28,50.0%)明显高于MOG抗体阴性组(9/38,23.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。视神经炎组68只眼中,MOG抗体阳性组的盲及重度视力损害比例高于MOG抗体阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。在MOG抗体阳性组58只眼中,不同MOG抗体滴度组之间VEP异常率差异有统计学意义(P<0.05),随着MOG抗体滴度增高,VEP异常率有增高趋势。结论VEP检查可以较好地发现MOGAD的视神经亚临床病灶。高MOG抗体滴度条件下发生视觉通路损伤的概率可能更高。 展开更多
关键词 髓鞘少突胶质细胞糖蛋白 髓鞘少突胶质细胞糖蛋白免疫球蛋白g抗体相关疾病 视觉诱发电位 视神经炎 儿童
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Ⅰ型单纯疱疹病毒gG基因片段的高效表达、纯化 被引量:1
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作者 王洁 李越希 张云 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期414-416,共3页
目的 获得具有优势抗原表位的Ⅰ型单纯疱疹病毒糖蛋白G的表达抗原并纯化鉴定。方法 用PCR技术扩增经分析筛选出的HSV1 gG蛋白中优势抗原决定簇较集中的基因片段。将该段基因克隆至PGEX 4T 2表达载体内 ,转化大肠杆菌TGl,对重组体进行... 目的 获得具有优势抗原表位的Ⅰ型单纯疱疹病毒糖蛋白G的表达抗原并纯化鉴定。方法 用PCR技术扩增经分析筛选出的HSV1 gG蛋白中优势抗原决定簇较集中的基因片段。将该段基因克隆至PGEX 4T 2表达载体内 ,转化大肠杆菌TGl,对重组体进行诱导表达 ,表达产物主要以可溶性形式存在 ,使用硫酸铵沉淀后采用Sepharose阴离子交换层析进行纯化。纯化的蛋白抗原包被酶联板分别对抗HSV1 IgM阳性血清和正常人血清标本进行检测。 结果 在原核表达载体中成功地克隆了HSV1 gG ,电泳分析表明在相对分子质量 4 3 5kD处有HSV1 gG/GST融合蛋白的高效表达 ,并纯化获得了纯度达 90 %的表达蛋白。ELISA分析初步证实表达产物具有较好的抗原性和特异性。结论 成功地克隆、表达了高纯度的具有良好免疫原性的HSV1 gG蛋白 ,为研制高质量的HSV 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒 HSVl-gg蛋白 基因表达 聚合酶链反应 Sephamse阴离子交换层析法
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马疱疹病毒1型gG蛋白间接ELISA检测方法的建立及应用 被引量:1
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作者 王旭蕾 胡月 +5 位作者 加尔肯 车传忠 刘建华 郑学功 王雪竹 冉多良 《动物医学进展》 北大核心 2021年第4期31-34,共4页
为了解新疆马疱疹病毒1型(EHV-1)的流行情况,需要建立一种检测抗体的间接ELISA方法。采用纯化后EHV-1 XJ2015株的gG蛋白作为检测抗原,优化反应条件后建立检测EHV-1血清抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验及... 为了解新疆马疱疹病毒1型(EHV-1)的流行情况,需要建立一种检测抗体的间接ELISA方法。采用纯化后EHV-1 XJ2015株的gG蛋白作为检测抗原,优化反应条件后建立检测EHV-1血清抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验及商品化试剂盒的应用效果对比。结果表明,该方法仅与EHV-1阳性血清发生反应,不与马疱疹病毒4型、马流感病毒和马动脉炎病毒阳性血清发生反应,血清稀释1∶1600后,仍可以检测到阳性,组内及组间变异系数均小于5%。与试剂盒进行检测结果比较,符合率为93.35%。建立了EHV-1 gG蛋白间接ELISA检测方法,可为EHV-1的快速诊断、流行病学调查及防控工作提供技术支撑。 展开更多
关键词 马疱疹病毒1型 gg蛋白 间接ELISA 抗体检测
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糖蛋白激素LGR6的结构分析及其表达细胞株的建立 被引量:1
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作者 徐立 Axel Methner Rainer Reinscheid 《南通医学院学报》 2000年第1期3-5,共3页
L GR6是新近分离出来的糖蛋白激素受体家族的新成员 ,对分离出来的全长 c DNA及其编码的蛋白质序列初步分析结果显示 ,该受体属于富含亮氨酸重复序列的 G-蛋白偶联受体。c DNA编码一个 977个氨基酸组成的多肽链 ,没有信号肽 ,跨膜区域长... L GR6是新近分离出来的糖蛋白激素受体家族的新成员 ,对分离出来的全长 c DNA及其编码的蛋白质序列初步分析结果显示 ,该受体属于富含亮氨酸重复序列的 G-蛋白偶联受体。c DNA编码一个 977个氨基酸组成的多肽链 ,没有信号肽 ,跨膜区域长为 2 64个氨基酸 ,受体的胞外区域含有 16个 LRR。组织分布的研究显示 ,该受体广泛表达于人体各组织 ,但骨骼肌中没有检测到。该受体在蛋白水平上与 L GR5有 5 1%的同源性。为进一步研究受体的功能 ,我们利用脂质体 DAC-3 0转染 HEK2 93细胞 ,建立了稳定表达 L GR6的细胞株 ,用于今后的研究 ,包括天然配基的分离。 展开更多
关键词 糖蛋白激素 LRg6 结构分析 表达细胞株 建立
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