人糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的基因结构初探

探讨人糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D (GPI PLD)的cDNA及其基因组基因的结构。从人骨髓基质细胞克隆出的GPI PLDcDNA中发现 ,它能编码信号肽 ,其编码的酶蛋白成熟肽为 817个氨基酸残基。该GPI PLDcDNA与从人肝组织和胰腺组织克隆到的GPI PLDcDNA的碱基序列的同源性分别为 95 %和 99%。人GPI PLD基因组基因定位于 6p2 2 .1～ 2 2 .3区域 ,包含 2 5个外显子 ,其上游调控区具有启动子 (TATA盒与CAAT盒 )、增强子核心序列 (TGGAAG)及同源转换盒Pit 1/GHF 1结合序列 (TATGCATAA)等顺式作用元件。

血清糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的检测

利用自制的、具完整糖基化磷脂酰肌醇（ＧＰＩ）结构的胎盘型碱性磷酸酶（ＰＬＡＰ）做底物，通过聚乙二醇／葡聚糖分相系统定性，ＴＸ１１４分相定量，初步建立了检测人血清中ＧＰＩ特异性磷脂酶Ｄ（ＧＰＩＰＬＤ）的方法，并对酶促反应的某些动力学性质进行了探讨。该方法重现性好（ＣＶ＝３．６％），灵敏度高（血清用量２μｌ即可），且经济、实用，有一定的推广价值。用该方法检测１００名正常人血清，表明其ＧＰＩＰＬＤ的活性范围为３０％～５０％（用转化底物的百分率表示）。

全反式维甲酸对白血病HL-60细胞株GPI-PLD基因表达的影响

目的研究用分化诱导剂全反式维甲酸(ATRA)培养HL-60细胞株后GPI-PLD的表达变化,以初步探讨该酶在全反式维甲酸(ATRA)作用下的变化及其与白血病细胞生长增殖的关系。方法用ATRA处理HL-60细胞后,以胎盘碱性磷酸酶为底物,定量检测GPI-PLD活性;RT-PCR法确定GPI-PLD mRNA表达水平;MTT检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期。结果加入全反式维甲酸培养后,HL-60细胞株中GPI-PLD表达量和活性增加。流式细胞仪检测显示细胞阻滞在G2/M期;MTT实验检测显示ATRA处理后HL-60细胞株增殖生长受到抑制。结论加ATRA处理后HL-60细胞株增殖生长受到抑制,可能与GPI-PLD表达量显著增加有关。

几种肝脏疾病血清中糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的活性改变

目的 观测几种肝脏疾病患者血清中糖基化磷脂酸肌醇特异性磷脂酶D(GPI -PLD)的活性改变。方法 利用自制的具完整糖基化磷脂酰肌醇 (GPI)结构的胎盘型碱性磷酸酶 (PLAP)做底物 ,通过TX - 114分相 ,定量测定血清GPI-PLD的活性 ,用SPSS 10 0统计软件分析资料。结果 检测 172例肝脏疾病患者 (包括A组 :2 6例急性重症病毒性肝炎 ;B组 :2 9例肝硬化 ;C组 :32例慢性病毒性肝炎 ;D组 :55例急性非重症病毒性肝炎 ;E组 :30例原发性肝癌 )血清中GPI -PLD的活性 (转化底物的百分率 ) ,发现A、B两组患者的该酶活性较正常人 (182名 )显著性降低 ,而D、E两组则较正常人显著性增高 ,C组患者的酶活性与正常人无显著性差异 ,但A、B、C、D、E两组之间的酶活性水平改变却均有显著性。结论 检测患者血清GPI -PLD活性水平 ,既可作为临床诊断急性病毒性肝炎、肝硬化、原发性肝癌等肝脏疾病的一项生化指标 ,也可作为这些疾病临床疗效和预后的一项判断指标。

糖基化磷脂酰肌醇-特异性磷脂酶D与白血病类型、CD24表达及细胞黏附功能的关系

糖基化磷脂酰肌醇-特异性磷脂酶D（GPI-PLD）在特定的情况下能通过特异性水解糖基化磷脂酰肌醇（GPI）锚定蛋白中的肌醇磷酸酯键来调节细胞膜上的锚定蛋白表达。在人的造血细胞上有一些GPI锚定蛋白（如CD24、CD87等）属于黏附分子，在肿瘤细胞的转移中发挥重要作用。我们检测了急性白血病患者骨髓细胞GPI-PLD基因表达水平及其活性，探讨其与白血病类型，肝、脾、淋巴结肿大，CD24表达及白血病细胞对纤维连接蛋白（Fn）黏附率的关系。