离子注入介导甘草基因组DNA转化酵母菌

目的以甘草酸为目标产物,探讨氮离子(N+)和氩离子(Ar+)注入介导甘草基因组DNA在酵母菌中的转化。方法通过N+和Ar+注入介导乌拉尔甘草基因组DNA在异常汉逊酵母Hansenula anomala中随机转化,转化后的酵母菌经斜面传代和液体培养后,用醋酐-浓硫酸定性检识和RP-HPLC方法,检测重组酵母菌培养液中甘草酸和甘草次酸的量。结果获得了生物合成甘草酸和/或甘草次酸的重组酵母菌5株。液体培养96h,RP-HPLC测试其培养液中甘草酸最高量114.49mg/L,18α-甘草次酸和18β-甘草次酸最高量分别为0.56和0.81mg/L。TLC检测发现其中1株重组酵母菌的培养液中含一种未知的红色组分。结论采用离子注入介导甘草基因级DNA大分子转化技术,可获得易于人工培养的产生甘草酸等次生代谢产物的微生物工程菌株。