RP-HPLC快速测定清胃黄连片中4种指标成分的含量

目的：建立RP．HPLC测定清胃黄连片中栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和甘草酸铵4种指标成分含量的方法。方法：采用HypersilC18色谱柱（4．6mm×250mm，5．0μm）；流动相为乙腈-0．5％三乙胺水溶液（磷酸调pH3．0）采用梯度洗脱，检测波长230nm；流速1．0mL·min^-1。结果：栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和甘草酸铵的线性范围分别为：4．82—77．2，5．80～92．8，1．63～26．1，6．40—102μg·mL^-1（0．9997〈r〈0．9999），平均回收率均大于98．0％。结论：该方法专属性强，结果准确可靠，重复性好，可用于清胃黄连片中栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和甘草酸铵的含量测定，能更好的控制清胃黄连片的质量。

磷脂对甘草酸二铵小肠吸收的影响

研究磷脂对甘草酸二铵及甘草次酸小肠吸收的影响。建立大鼠原位单向肠灌流及伴有肠系膜插管的肠灌流模型,采用高效液相色谱法检测灌流液及血浆中的药物浓度,计算表观通透系数Papp和吸收速率常数Ka。建立大鼠灌胃后肝门静脉取血模型,测定门静脉血浆中药物浓度,以对灌流结果进一步验证。甘草酸二铵和甘草次酸均能跨肠壁吸收,其Papp分别为0.36和5.73 cm.min-1,加入磷脂后,Papp分别提高到0.68和7.98 cm.min-1。磷脂使甘草酸二铵本身的吸收略有增加,但统计学检验差异不显著,但对其肠道菌群代谢物甘草次酸的吸收有显著促进作用。

野生及栽培甘草HPLC指纹图谱

目的:研究野生及栽培甘草的质量区别。方法:建立野生及栽培甘草的HPLC指纹图谱(Cro-masil ODS色谱柱;0.1%磷酸溶液为流动相;梯度洗脱)并进行对比分析;利用MS/MS技术推测化合物结构。结果:鉴定了部分成分的化学结构;野生与栽培甘草所含成分大部分相同,仅有少量区别;栽培甘草中少数成分随栽培年限不同有所变化。结论:本方法灵敏度高,分析快速、准确,可以为甘草药材内在质量控制提供依据。

甘草酸二铵对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后运动神经元Caspase-3表达的影响

目的:观察甘草酸二铵(DG)对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后脊髓前角运动神经元Caspase-3表达的影响。方法:60只大鼠随机分为3组,每组20只。两组采用手术夹闭大鼠左右肾动脉之间的腹主动脉30min致脊髓缺血,然后松开再灌注,其中一组在缺血前10min舌下静脉注射DG20mg/kg(DG干预组),一组仅造成脊髓缺血损伤(损伤组);另一组打开腹腔后即关腹,不进行缺血再灌注(正常对照组)。分别于术后3、24、72、16 8h处死大鼠取腰段脊髓行免疫组化染色,观察脊髓前角Caspase-3光密度变化情况;72、168h处死动物前先采用Behrmann 5点评分法评定大鼠后肢功能。结果:损伤组与干预组72h时后肢功能评分分别为4.2±0.45分、5.8±1.1分;168h时分别为5±0分、6.2±1.3分,两组相同时间比较有显著性差异。Caspase-3表达位于脊髓前角运动神经元胞浆。术后3、24、72、168h,正常对照组前角运动神经元的平均光密度为0.13±0.04、0.15±0.06、0.13±0.06、0.15±0.06,损伤组为0.18±0.04、0.18±0.03、0.20±0.04、0.20±0.05,DG干预组为0.17±0.06、0.15±0.02、0.16±0.04、0.15±0.02,损伤组各时间点与对照比较均有显著性差异,DG干预组在24、72、168h与损伤组比较差异有显著性。结论:DG可下调凋亡信号转导通路中Caspase-3的表达水平,从而抑制脊髓前角神经元凋亡的发生。

LC-MS法测定人血浆中的甘草次酸

目的:建立测定人血浆中甘草次酸的 LC-MS 方法。方法:人空白血浆0.5 mL 中加入甘草次酸及内标格列喹酮,以乙酸乙酯萃取后取上清液挥干,再用流动相溶解,进行 LC/MS 测定。色谱条件:岛津 VP-ODS 色谱柱(2 μm,150 mm×2.0mm),甲醇-3 mmol·L^(-1)醋酸铵水溶液-冰醋酸(92:8:2)为流动相,流速:0.2 mL·min^(-1);质谱条件:电喷雾离子化(ESI)方式,采用选择性离子检测(SIM),检测离子为正离子,甘草次酸 SIM 的离子为[M+H]^+(m/z 471),内标格列喹酮 SIM 的离子为[M+H]^+(m/z 528)。结果:本方法线性范围为5～500 ng·mL^(-1),最低定量限(LOQ)为5 ng·mL^(-1)。准确度、精密度以及稳定性均符合有关要求。结论:本法简便,灵敏度高,可用于药代动力学试验中人血浆的甘草次酸浓度测定。

不同诱导子对甘草悬浮培养细胞中甘草酸积累的影响

目的研究水杨酸、酵母提取物、水解酪蛋白、高糖、高盐、超声等诱导子对甘草悬浮培养细胞中甘草酸积累的影响。方法向细胞悬浮液中加入各种诱导子或对细胞悬浮液进行超声处理。结果加入10 mg·L-1水杨酸可使甘草酸的含量为对照组的1.86倍。低浓度的酵母提取物对甘草酸的积累有显著的促进作用,加入1 mg·L-1酵母提取物时,甘草酸的含量为对照组的3.71倍,达到14.20μg·g-1。添加100 mg·L-1水解酪蛋白时,甘草酸的含量为对照组的1.69倍。高盐胁迫对甘草酸的积累有较高的影响,其含量为对照组的1.96倍。结论甘草细胞悬浮培养中,添加水杨酸、酵母提取物、水解酪蛋白、高糖、高盐、超声等诱导子是提高细胞中甘草酸含量的有效方法之一。

复方鳖甲软肝片联合复方甘草酸苷治疗代偿期肝硬化患者疗效观察

目的观察复方鳖甲软肝片联合复方甘草酸苷治疗代偿期肝硬化患者的临床疗效。方法 67例代偿期肝硬化患者被随机分为两组。给予对照组(n=32)复方甘草酸苷治疗,给予观察组(n=35例)复方鳖甲软肝片联合复方甘草酸苷治疗,两组均观察3个月,比较两组治疗前后肝功能、Chid-Pugh计分、血清肝纤维化指标和肝脾B超声像图变化。结果在治疗后,观察组患者血清ALT、AST水平和Chid-Pugh计分[(72.5±12.3)U/L、(53.7±9.8)U/L、(5.3±1.2)U/L及PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA水平(105.4±17.6)μg/L、(104.7±12.1)μg/L、(93.7±16.7)μg/mL和(110.4±17.2)mg/L)]均显著低于对照组[分别为(120.1±17.7)U/L、(75.2±10.2)U/L、(7.2±1.5)U/L及(150.8±19.4)μg/L、(138.3±15.4)μg/L、(125.4±21.0)μg/mL和(148.3±18.7)mg/L,P<0.05)];观察组患者脾脏厚度(3.85±0.73)cm及门静脉和脾静脉宽度(1.13±0.28)cm和(0.73±0.22)cm显著低于对照组[分别为(4.39±0.75)cm、(1.29±0.22)cm、(0.92±0.25)cm,P<0.05)]。结论复方鳖甲软肝片联合复方甘草酸苷治疗代偿期肝硬化患者疗效显著。

酸枣仁汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂中甘草酸含量的测定

目的比较酸枣仁汤传统汤剂和配方颗粒汤剂中甘草酸的含量。方法采用RP-HPLC法,色谱柱：Dia-monsil C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：甲醇-0.2 mol.L^-1醋酸铵-冰醋酸（66∶33∶1）;流速：1.0mL.min^-1;检测波长：250 nm;柱温：30℃。结果甘草酸铵在432-4 320 ng线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率为100.8%（RSD=1.1%,n=5）。同一批饮片制备的两种汤剂中甘草酸含量无明显差异,不同厂家生产的配方颗粒汤剂中甘草酸含量差别较大。结论中药配方颗粒的制备应优化工艺条件,国家应尽快制定统一的质量标准,以保证配方颗粒的质量稳定。

高效液相色谱法测定小青龙颗粒中甘草酸铵含量

目的建立小青龙颗粒中甘草酸铵的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Alltima C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水-乙腈-冰醋酸(65∶35∶2.5),流速1.0 mL/min,柱温为室温,检测波长为254 nm。结果甘草酸铵质量浓度在15.2～114.1μg/mL之间与峰面积呈良好线性关系,r=1.0。平均加样回收率为96.40%,RSD=1.67%。结论该方法简便易行,结果准确可靠。

甘草甜素药理作用研究动态

目的综述甘草甜素的药理作用,为甘草资源的合理利用和深度开发提供可靠的依据。方法归纳和总结多年来的研究结果和国内外的文献。结果与结论甘草甜素具有较多和较强的药理活性,甘草有长期作为民族用药的历史,是一种有价值的开发保健品和药品的药用植物。

异甘草酸镁注射液治疗慢性乙型肝炎的疗效

目的观察异甘草酸镁对慢性乙型肝炎的疗效和安全性。方法选取慢性乙型肝炎病例178例,随机分成3组:异甘草酸镁大剂量组,给予异甘草酸镁200 mg;异甘草酸镁小剂量组,给予异甘草酸镁100 mg;甘草酸二铵组,给予甘草酸二铵150 mg。以上药品均加入5%葡萄糖250ml,静脉滴注,每日一次,疗程3周。结果异甘草酸镁大小剂量组的患者症状、体征的改善率以及肝功指标的好转程度显著优于甘草酸二铵组,且大剂量异甘草酸镁对慢乙肝的疗效优于小剂量异甘草酸镁。三组病人均未发现明显不良反应。结论异甘草酸镁对慢性乙型肝炎的疗效优于甘草酸二铵,且大剂量组疗效更好。

反相高效液相色谱法测定甘草酸18H-差向异构体含量

目的建立同时测定18α-甘草酸和18β-甘草酸的反相高效液相色谱法。方法色谱柱为C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH=7.0)-乙腈(80:20),流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长250nm。结果18α-甘草酸和18β-甘草酸达到基线分离,两者的进样量在1.0～2.0μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9998(n=6),平均回收率分别为99.58%和99.94%,RSD分别为0.54%和0.28%(n=9)。结论所用方法简便、快速,可同时测定18α-甘草酸和18β-甘草酸的含量。

甘草酸对哮喘小鼠一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的观察甘草酸对哮喘小鼠血清中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)活性的影响,探讨甘草酸防治支气管哮喘的可能机制。方法建立小鼠卵蛋白哮喘模型,测定正常、模型、激素和甘草酸各组血清中NO含量及NOS活性的变化。结果模型组小鼠血清中NO含量及NOS活性的较正常组显著升高(P<0.01),甘草酸组血清中NO及NOS较模型组显著降低(P<0.05)。结论甘草酸可降低哮喘小鼠血清中NO含量及NOS水平,对支气管哮喘有一定的防治作用。

甘草甜素联合单磷酸阿糖腺苷对HepG2.2.15细胞及其HBsAg表达的影响

目的探讨甘草甜素联合单磷酸阿糖腺苷对HepG2.2.15细胞株存活率及其HB-sAg表达的影响,评价甘草甜素(GL)与单磷酸阿糖腺苷(Ara-AMP)合用体外抗HBV效果。方法利用乙型肝炎病毒基因转染的人肝癌细胞系HepG2.2.15细胞检测细胞培养上清液中的乙肝病毒表面抗原(HBsAg),作为这两种药物联合在体外抗HBV效果的观察指标(以抑制率来表示)。用MTT法检测HepG2.2.15细胞的存活率。结果(1)各药对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg的抑制率呈药物浓度和时间依赖性;联合组与两个单药组分别比较,抑制HBsAg差异有显著意义(P<0.05或P<0.01)。(2)随着浓度的增加,各药对细胞的存活率均显示抑制作用,尤其联合组高于其它两个单药组。结论GL联合Ara-AMP在体外HepG2.2.15细胞中具有协同抗HBV的作用。

甘草酸二铵及其磷脂复合物注射液的小鼠体内分布研究

目的:研究比较甘草酸二铵及其磷脂复合物注射液在小鼠体内的组织分布,探讨甘草酸二铵磷脂复合物作为肝靶向药物的可行性。方法:将甘草酸二铵磷脂复合物溶液与甘草酸二铵水溶液分别小鼠尾静脉注射600mg.kg-1和300mg.kg-1,分别于注射后15min,30min,1h,2h,4h取血和心、肝、脾、肺、肾各组织,测定药物浓度,代入DAS2.0软件计算小鼠血浆和各组织中药物的AUC。结果:小鼠分别尾静脉注射甘草酸二铵磷脂复合物溶液与甘草酸二铵水溶液600mg.kg-1和300mg.kg-1后,体内分布结果显示:甘草酸二铵磷脂复合物静脉给药后在肝脏中的分布较甘草酸二铵水溶液中有明显提高(P<0.001),AUC为水溶液中的1.687倍。其他组织中药物的AUC基本无显著差异。结论:甘草酸二铵磷脂复合物注射液具有肝靶向性,有良好的发展前景。

HPLC法测定复方甘草酸苷注射液中甘氨酸和盐酸半胱氨酸的含量

目的:建立离子交换高效液相色谱法测定复方甘草酸苷注射液中甘氨酸和盐酸半胱氨酸含量的方法。方法:色谱.柱:SHIM-PACK AMINO-NA(10cm x6.0mm),流动相:0.25mol·L^(-1)磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH3.0),流速:0.35ml-min^(-1),柱温:60℃,检测波长:205nm。结果:甘氨酸浓度在0.20～3.20mg·ml~^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9997);平均回收率为99.1%,RSD=O.6%(n=9)。盐酸半胱氨酸浓度在0.01～0.16mg·ml^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9991);平均回收率为101.9%,RSD=0.9%(n=9)。结论:本方法简单、准确、重复性好,可用于该制剂的质量控制。

复方甘草酸苷对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体介导的NF-κB信号通路的影响

目的:探讨复方甘草酸苷对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体介导的NF-κB信号通路的影响。方法:健康SD大鼠49只取10只作为正常对照组(A组),其余39只大鼠采用TNBS/乙醇联合建模法制备溃疡性结肠炎大鼠模型,39只大鼠再随机平分为模型对照组(B组),柳氮磺吡啶组(C组)、复方甘草酸苷组(D组),分别给予生理盐水、柳氮磺吡啶与复方甘草酸苷干预处理。结果:肉眼与病理学观察发现大鼠溃疡性结肠炎模型造模成功。复方甘草酸苷组的血清TLR4与NF-κB p65表达量明显低于模型对照组,与柳氮磺吡啶组及正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。正常对照组的NF-κB p65与TLR4蛋白阳性表达率明显低于模型对照组,与柳氮磺吡啶组与复方甘草酸苷组对比无明显差异(P>0.05)。Pearson相关分析显示NF-κB p65与TLR4在溃疡性结肠炎模型中的表达呈正相关关系(P<0.05)。结论:Toll样受体介导的核因子-κB信号通路在溃疡性结肠炎的发生发展中起重要作用,复方甘草酸苷可阻断该通路中TLR与NF-κB p65的表达,进而为临床用药提供理论依据。

复方甘草酸苷治疗特应性皮炎的临床及实验研究

目的:复方甘草酸苷(美能)用于治疗特应性皮炎,观察复方甘草酸苷对IgE介导的小鼠皮炎动物模型的作用。方法:特应性皮炎患者84例,美能加皿治林片口服,对照组皿治林口服。以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导小鼠特应性皮炎为动物模型,研究美能对其血清IgE、腹部真皮炎症细胞浸润和血清某些细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ的影响。结果:临床观察显示84例患者口服皿治林加美能后与对照组相比,对特应性皮炎的疗效具有显著性差异。实验结果显示美能抑制血清IgE、真皮炎性细胞浸润、血清IL-4,上调IFN-γ,对IL-2无明显影响。结论:复方甘草酸苷对特应性皮炎具有抗炎、抗过敏作用。

复方甘草酸苷中有关物质的测定

目的建立同时测定复方甘草酸苷片中3个主成分有关物质的反相高效液相色谱法(二极管阵列检测器),以控制其质量。方法采用C18色谱柱,以0.025 mol.L-1醋酸钠溶液(pH 3.5)-乙腈(59∶41)洗脱,检测波长251,360 nm。结果样品中各主成分与有关物质的分离度及检出灵敏度可满足测定要求,甘草酸单铵盐,甘氨酸,DL-蛋氨酸最低检出限分别为2.02,0.28,0.96 ng。结论该法灵敏、准确、简便、专属性强,可作为该制剂质量控制的有效手段。

复方甘草酸苷预防老年人带状疱疹后遗神经痛的对照研究

目的评价复方甘草酸苷注射液预防带状疱疹后遗神经痛（postherpesneuralgia，PHN）的临床疗效。方法将入选的60例患者随机分为两组，试验组予以复方甘草酸苷和阿昔洛韦联合治疗，对照组予以阿昔洛韦治疗，记录止疱时间、疼痛减轻时间和疼痛消失时间，治疗结束时评价疗效，治疗结束1个月后随访PHN的发生情况。结果试验组止疱时间[（4．10±1．65）天]、疼痛减轻时间[（3．27±2．02）天]、疼痛消失时间[（17．20±11．52）天]均短于对照组[（5．70±1．86）天、（6．73±2．59）天、（51．83±37．72）天1，两组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；PHN的发生率试验组（10．00％）低于对照组（53．33％），两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论复方甘草酸苷注射液预防PHN安全、有效。