Glypican-3蛋白在肝细胞癌患者血清和组织中的表达及意义

目的:探讨肝细胞癌(HCC)患者血清和组织中Glypican-3(GPC3)蛋白的表达及临床意义.方法:收集HCC患者27例和肝良性病变患者28例的术前1d空腹血清及组织标本,采用Western blot检测血清中GPC3蛋白,同时采用免疫组织化学SP法检测组织标本中GPC3的表达情况.结果:27例HCC患者HCC组织、癌旁组织和远癌肝组织中GPC3蛋白阳性的表达率分别为81.5%,0%和0%(HC:23.4689,P<0.001),术前血清中GPC3蛋白阳性率分别为55.6%;28例肝良性病变患者组织和血清中阳性率均为0%;GPC3蛋白对HCC诊断的敏感性为55.6%,特异性为100%,误诊率为0%.HCC患者血清中GPC3蛋白表达与其瘤体大小和病理分级之间差异有显著性(P<0.05),而与患者年龄、性别、HBsAg及AFP值之间差异无显著性(P>0.05).结论:GPC3蛋白在HCC患者血清和组织中有较高的表达,对诊断HCC有较高的敏感性和特异性,可作为HCC早期诊断的标志物.

Glypican-3在原发性肝细胞癌中的表达及其对预后的影响

目的:探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法检测了59例HCC组织及其癌旁组织、10例肝内胆管细胞癌组织、11例肝硬化肝组织、14例正常肝组织(肝血管瘤旁)中GPC3的表达。应用Kap lan-M e ier法进行生存分析;Cox比例风险回归模型进行患者术后无瘤生存的独立危险因素分析。结果:GPC3 mRNA在HCC组织中的阳性率为83.1%(49/59),明显高于癌旁组织的35.6%(21/59)(2=27.53,P<0.01)。GPC3蛋白在HCC中的阳性率为78.0%(46/59),也明显高于在癌旁组织的阳性率32.2%(19/59)(2=24.97,P<0.01)。而GPC3在肝内胆管细胞癌(ICC)、肝硬化和正常肝组织中不表达。Kap lan-M e ier生存分析显示在HCC组织中GPC3(+)组病人的1年无瘤生存率明显低于GPC3(-)组(33.6%vs72.7%,P<0.05);癌旁组织GPC3(+)组病人的1年无瘤生存率也低于GPC3(-)组(23.5%vs40.1%,P<0.05);随着GPC3在HCC组织中表达强度的增加,患者的无瘤生存率也明显降低。Cox风险回归模型分析结果显示,肿瘤AFP阳性[优势比(OR)]=0.372,95%置信区间(CI):0.140-0.900,P<0.05]、肿瘤大小(OR=5.215,95%C:I 1.737-15.656,P<0.01)、癌旁组织GPC3表达(OR=0.226,95%CI:0.085-0.599,P<0.01)、肿瘤GPC3表达的强度(OR=1.946,95%C:I 1.080-3.507,P<0.05)是影响患者术后无瘤生存率的独立危险因素。结论:GPC3在肝细胞癌组织中高表达,而在肝内胆管细胞癌组织、肝硬化组织和正常肝组织不表达。癌旁组织GPC3表达、肿瘤GPC3表达的强度是影响HCC患者术后无瘤生存率的独立危险因素;但对患者1年总体生存率无明显影响。

血清glypican 3 ELISA检测法的建立及初步应用

目的建立血清中磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(glypican 3,GPC3)的双抗体夹心ELISA检测法,并探讨其应用价值。方法以本室自制抗GPC3单克隆抗体为包被抗体,以兔抗人GPC3抗体为检测抗体,建立检测GPC3的双抗体夹心ELISA法。对建立的方法进行线性范围、灵敏度、精密度、回收率等方法学评价,并用于测定原发性肝癌、肝炎后肝硬化、慢性肝炎患者及体检健康者血清标本。结果该法线性范围为0.2～12.5μg/L,灵敏度为0.101μg/L,批内CV≤5.99%,批间CV≤6.96%,平均回收率为99.9%。原发性肝癌患者血清GPC3浓度5.43(2.28～8.62)μg/L明显高于肝炎后肝硬化、慢性肝炎患者及健康对照组(P均<0.05)。以3.19μg/L为临界值时,诊断肝癌的敏感性和特异性分别为85.4%及98.9%。结论该法灵敏、特异和准确,可用于原发性肝癌的诊断。

血清Glypican-3检测在肝癌诊断中的临床意义

目的:探讨血清中Glypican-3(GPC3)检测在肝癌诊断中的临床意义。方法:采用鼠抗GPC3(25-358aa)单克隆抗体和兔抗GPC3(379-393aa)多克隆抗体建立双抗夹心ELISA法,对364例原发性肝细胞肝癌、96例慢性乙型肝炎及106例正常人血清中GPC3进行定量。同时采用放射免疫法检测AFP。结果:原发性肝细胞肝癌患者血清GPC3平均浓度为86.96±422ng/mL;慢性乙型肝炎患者血清GPC3平均浓度为11.7±12.23 ng/mL;正常人血清GPC3平均浓度为6.04±9.21 ng/mL。原发性肝细胞肝癌患者血清GPC3含量与慢性乙型肝炎组和正常组比较差异显著(P<0.001),慢性乙型肝炎组和正常组间差异无统计学意义(P>0.05)。当以30 ng/mL为诊断界值时,GPC3诊断肝癌的敏感性和特异性分别为40%和93%。在151例同时检测AFP和GPC3的HCC血清中,AFP阳性率为49%,GPC3阳性率为40%。AFP联合GPC3检测时,能将HCC的检出率提高至72%。结论:血清GPC3可作为一新的肿瘤标志物用于原发性肝细胞肝癌的临床诊断。

SALL4、D2-40和Glypican-3在睾丸生殖细胞肿瘤诊断中的应用

目的探讨SALL4、D2-40和Glypican-3在睾丸生殖细胞肿瘤(testicular germ cell tumors,TGCTs)诊断中的应用价值。方法采用免疫组化En Vision法检测SALL4、D2-40和Glypican-3蛋白在56例原发性TGCTs中的表达,包括5例小管内生殖细胞肿瘤、10例精原细胞瘤、14例胚胎性癌、14例卵黄囊瘤、1例绒毛膜癌、5例未成熟性畸胎瘤和12例成熟性畸胎瘤。另选取10例正常睾丸组织及5例睾丸淋巴瘤作为对照。结果 SALL4在小管内生殖细胞肿瘤(5/5)、精原细胞瘤(10/10)、胚胎性癌(14/14)和卵黄囊瘤(14/14)中均弥漫强阳性,在绒毛膜癌(1/1)、未成熟畸胎瘤(3/5)和成熟性畸胎瘤(3/12)中局灶阳性。D2-40在小管内生殖细胞肿瘤(5/5)、精原细胞瘤(10/10)中弥漫强阳性,在胚胎性癌(4/14)中局灶阳性,在绒毛膜癌、卵黄囊瘤和畸胎瘤中均阴性。Glypican-3在卵黄囊瘤(13/14)中弥漫强阳性,在胚胎性癌(2/14)中灶性弱阳性,在小管内生殖细胞肿瘤、精原细胞瘤、绒毛膜癌和畸胎瘤中均阴性。10例正常睾丸组织和5例睾丸淋巴瘤中均未见SALL4、D2-40和Glypican-3的表达。结论 SALL4是诊断TGCTs敏感性和特异性均较好的免疫标志物;SALL4、D2-40和Glypican-3联合应用有助于TGCTs的诊断与鉴别诊断。

MMP-9及glypican-3在肝癌组织中的表达及其临床病理价值

目的探究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(glypican-3)在肝癌组织中的表达及临床病理价值。方法选取2014年3月至2016年7月于福建医科大学附属第一医院经病理学诊断为原发性肝癌的患者97例为肝癌组,60例健康志愿者入选对照组。免疫组织化学法检测所有研究对象的肝组织取材标本的MMP-9及glypican-3表达,并分析表达变化与肝癌临床特征间的关系。结果肝癌组的MMP-9阳性率和表达评分分别为47.42%、(1.95±1.61)分,远远大于对照组的0(P<0.05)。肝癌组的glypican-3阳性率和表达评分分别为59.79%、(2.21±1.71)分,明显高于对照组的8.33%、(0.83±1.23)分(P<0.05)。肝癌组的MMP-9及glypican-3表达与性别、年龄、肿瘤直径、肝癌分化情况、有无肝癌癌栓,不具有统计学相关性(P>0.05)。结论 MMP-9可用做为肝癌患者早期检测指标,glypican-3在肝癌组织中高表达也有一定的检测意义。

Arginase-1、Glypican-3、HepPar-1在肝细胞癌中的表达及意义

目的研究肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)、肝脏良性病变组织中精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(glypican-3,GPC-3)、肝细胞抗原(Hep-1)的表达情况,探讨三种抗体及其他临床病理参数与肿瘤预后的相关性。方法回顾性分析156例HCC患者及146例肝脏良性病变患者的临床病理特征,免疫组织化学方法检测三种抗体的表达,并结合HCC患者随访资料行临床病理学参数与预后关系分析。结果 Arg-1、GPC-3、Hep-1在HCC及肝脏良性病变中的表达率分别为93.6%(146/156)、90.4%(141/156)、85.3%(133/156)和97.3%(142/146)、3.4%(5/146)、98.6%(144/146)。单因素分析显示肿瘤直径、肿瘤多发、脉管癌栓、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)及Arg-1是影响HCC患者术后总体生存率的预后因素;多因素COX回归分析结果显示,肿瘤直径与脉管瘤栓是影响HCC患者术后总体生存率的独立预后因素。结论联合应用Arg-1、GPC-3和Hep-1在HCC与肝脏良性结节性病变的鉴别诊断中具有重要意义。Arg-1可作为评估HCC患者预后的参考指标。

肝细胞癌组织中Glypican-3基因表达及其调控机制

目的:探讨肝细胞癌中Glypican-3(GPC3)基因表达及调控机制。方法:采用RT-PCR和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法分别检测48例肝细胞癌的癌组织、39例癌旁组织和31例正常肝组织中GPC3 mRNA的表达和基因突变;免疫组化S-P法检测GPC3、P53和PCNA蛋白的表达。结果:GPC3 mRNA在肝细胞癌的癌组织中的阳性表达率为77.1%,但其在癌旁和正常肝组织中不表达;肝细胞癌的癌组织中未发现GPC3基因突变;GPC3与P53蛋白表达无相关性(r=-0.12574,P>0.05),肝细胞癌的癌组织中GPC3表达阳性和阴性的增殖细胞核抗原(PCNA)平均指数分别为(46.32±27.54)%、(39.83±21.47)%,P>0.05。结论:肝细胞癌组织中GPC3 mRNA高表达与基因突变无关,没有直接影响P53和PCNA蛋白表达。

体外表达的Glypican-3的CTL表位肽诱导特异性免疫应答

目的探讨体外表达的Glypican-3(GPC3)能否诱导出GPC3特异性的细胞免疫应答。方法体外表达GPC3的CTL表位肽GPC3298-306及GPC3144-152偶联血蓝蛋白(KLH)后免疫Balb/c小鼠,检测免疫后小鼠脾淋巴细胞免疫活性,包括IFN-γ的分泌,以及该淋巴细胞对表达GPC3的鼠肿瘤细胞细胞毒活性。结果经GPC3298-306及GPC3144-152免疫后,小鼠脾细胞中分泌IFN-γ的T淋巴细胞阳性率明显增高(P<0.01);脾淋巴细胞中CD4+T/CD8+T比值亦明显升高(P<0.05);脾淋巴细胞对表达GPC3的鼠肿瘤细胞有特异性的杀伤作用。结论体外表达的GPC3的CTL表位肽能诱导出GPC3特异性的细胞免疫,提示体外表达的GPC3的CTL表位肽GPC3298-306及GPC3144-152可能在在以GPC3为靶向的抗肿瘤免疫治疗中发挥重要作用。

Glypican-3在原发性肝细胞性肝癌中的表达及其临床意义

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican-3)在原发性肝细胞性肝癌(HCC)中的表达状况及其临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测原发性肝细胞性肝癌150例、肝硬化50例、肝炎50例、正常肝组织10例中Glypican-3的表达。结果Glypican-3主要表达于细胞浆,原发性肝细胞性肝癌、肝硬化、肝炎和正常肝组织的Glypican-3蛋白阳性表达率分别是63.33%(95/150)、34.00%(17/50)、28.00%(14/50)、0%(0/10),四者之间的差异有显著性(2=35.36,P<0.05),且Glypican-3在原发性肝细胞性肝癌组织中的表达明显高于在正常肝组织中的表达(2=13.07,P<0.05)。结论Glypican-3异常表达与原发性肝细胞性肝癌的发展密切相关,在原发性肝细胞性肝癌的发展过程中起非常重要的作用。

Glypican-3与肿瘤关系的研究进展

磷脂酰肌醇蛋白聚糖是硫酸乙酰肝素糖蛋白中的一个家族,参与调控个体发育、细胞增殖和分化等过程。其中,磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican-3)与肿瘤的发生发展关系密切,特别是在肝细胞癌中特异性高表达,有望成为一个新的肿瘤标志物。

前列腺癌组织Glypican-3、β-catenin和GSK-3β的表达及意义

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3基因(GSK-3)、β黏连蛋白(β-catenin)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)蛋白在前列腺癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学法检测GSK-3、β-catenin、GSK-3β蛋白在40例前列腺腺癌石蜡包埋组织块(高危组17例,低危组23例)和30例前列腺增生组织(石蜡包埋组织块)中的表达情况并进行比较。结果 GSK-3、β-catenin、GSK-3β在前列腺癌组织中表达阳性率分别为82.5%(33/40)、90.0%(36/40)、17.5%(7/40),在前列腺增生组织中表达阳性率分别为13.3%(4/30),23.3%(7/30)、43.3%(13/30),两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。低危组和高危组GSK-3及β-catenin表达组间比较差异均无统计学意义(P>0.05),GSK-3β表达在低危组和高危组组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GSK-3、β-catenin在前列腺癌组织中呈高表达,GSK-3β呈较低表达,3种蛋白对前列腺癌的发生、发展可能具有一定促进作用。

胃肝样腺癌中Glypican-3的表达及临床病理特征的研究

目的 探讨Glypican-3（GPC3）在胃肝样腺癌（HAC）组织中的表达及与临床病理特点和预后之间的关系.方法 回顾性分析2008年～2013年我院确诊的21例胃HAC患者的临床资料,采用免疫组织化学染色的方法检测GPC3、甲胎蛋白（AFP）及肝细胞石蜡单克隆抗体（HepPar-1）在21例胃HAC患者及42例普通型胃腺癌（GC）患者中的表达,分析GPC3与临床病理特点的关系及其与预后的相关性.结果 GPC3、AFP及HepPar-1在胃HAC中的表达明显高于GC,分别为85.7％（18/21）和14.3％（6/42）、48.6％（10/21）和2.4％ （1/42）及57.1％（12/21）和19.0％ （8/42）.在胃HAC患者中,GPC3强阳性比例为66.7％（14/21）,远高于AFP的33.3％（7/21）及HepPar-1的38.1％ （8/21）.GPC3诊断胃HAC的敏感性高于AFP及HepPar-1.GPC3的表达与癌组织脉管侵犯及血清AFP水平升高显著相关（P＜0.05）,与患者的性别、年龄、肿瘤的大小、部位、pTMN分期、是否合并其他类型腺癌、肿瘤分化程度及血清CA199的水平无明显相关（P＞0.05）.Kaplan-Meier分析显示,GPC3在胃HAC中的过表达与手术后的生存时间呈负相关（P＜0.01）.结论 GPC3可用于辅助诊断胃HAC,其过表达是预后不良的相关因素.

Glypican-3mRNA在人原发性肝细胞癌组织中的表达及意义

目的:探讨Glypican-3mRNA在人肝细胞癌中的表达和意义。方法:收集48例肝细胞癌肿瘤组织,相应39例癌旁组织和31例非肿瘤肝组织,采用RT-PCR检测Glypican-3mRNA的表达。结果:48例肝细胞癌肿瘤组织中有37例(77.1%)检测到Glypican-3mRNA表达,其中过度表达率为62.16%。而在相应的癌旁组织和非肿瘤肝组织中表达缺失。肝细胞癌Glypican-3mRNA表达与其瘤体大小和病理分级之间有显著性差异(P<0.05),而与患者年龄、性别、AFP值、HBsAg及包膜状况之间无显著性差异(P>0.05)。结论:Glypican-3mRNA在人肝细胞癌肿瘤组织中过度表达,可作为诊断肝细胞癌的肿瘤特异性标记物之一。

Glypican-3的血清检测与原发性肝癌诊断的研究进展

磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3,GPC3)是继AFP之后发现的一个新的肝细胞癌标志物。随着对GPC3研究的不断深入,发现它不但在肝细胞癌组织中有表达而且在血清中同样有表达。GPC3对HCC诊断的敏感性和特异性较高,尤其在肿瘤发生的早期,具有极大的临床应用价值,为早期HCC的诊断带来了希望。

血清Glypican-3联合AFP对肝癌患者的诊断效果

目的探讨血清磷脂酸肌醇蛋白聚糖-3(Glypican-3)和甲胎蛋白(AFP)对肝癌患者的诊断效果。方法收集2012年1月至2013年12月就诊的110例肝病患者血清分为3组,其中肝癌患者42例,肝硬化患者24例,肝炎患者44例。同时收集健康体检者血清40例作为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)与电化学发光法分别检测血清Glypican-3及AFP的表达水平。结果 Glypican-3在肝细胞癌患者血清中的表达水平明显高于其余3组;AFP在肝细胞癌组及肝硬化组患者血清中的表达水平均高于其余两组患者。Glypican-3与AFP联合检测对肝癌患者诊断的特异性及敏感性明显高于Glypican-3或AFP单项检测。结论血清中Glypican-3的表达水平对诊断肝细胞癌具有很高的价值,血清Glypican-3联合AFP检测可很大程度地提高肝细胞癌的诊断率。

肝细胞癌Villin及Glypican-3的表达及临床意义

目的探讨Villin和Glypican-3在肝细胞癌的表达及其临床意义。方法利用免疫组化方法检测Villin和Glypican-3在100例肝细胞癌与非肿瘤性肝组织的表达。结果Villin在肝细胞癌和非肿瘤性肝组织的阳性表达率分别为91.3%(73/80)和20.0%(4/20)。Glypican-3在肝细胞癌和非肿瘤性肝组织的阳性表达率分别为85.0%(68/80)和0%(0/20),两者在肝细胞癌和非肿瘤性肝组织表达率差异有统计学意义(P<0.05)。患者性别、年龄、肿瘤部位、HBsAg以及有无肝硬化不是Villin和Glypican-3在肝细胞癌表达的影响因素(P>0.05),而肿瘤的大小、肿瘤组织学分级以及有无门静脉癌栓是Villin和Glypican-3在肝细胞癌表达的影响因素(P<0.05)。结论 Villin和Glypican-3在肝脏良恶性肿瘤中的表达差异,有助于肝细胞癌的鉴别诊断。

Glypican-3和CD34免疫组化染色在肝细胞癌与良性肝细胞性病变鉴别诊断中的价值

目的探讨Glypican-3和CD34免疫组化染色在肝细胞癌与良性肝细胞性病变鉴别诊断中的价值。方法选择2003年1月至2017年6月在我院接受治疗的150例肝病患者作为研究对象,所有患者均行Glypican-3和CD34免疫组化染色,观察诊断结果。结果肝细胞癌患者的Glypican-3表达水平为(1 326.8±121.4)ρg/mL,明显高于其他良性病变(P<0.05);Glypican-3表达敏感度为84.1%,特异度为84.1%,阳性预测值为52.4%,阴性预测值为93.7%,准确度为77.8%。肝细胞癌患者的CD34阳性表达水平显著高于良性肝细胞性病变患者(P<0.05)。结论在对肝细胞癌与良性肝细胞性病变患者的诊断中,Glypican-3和CD34免疫组化染色具有较高的诊断价值,可为患者的临床诊断和治疗提供理论依据。

普美显增强MRI及DWI相关定量参数对原发性肝癌肝脏储备功能及CD34、Glypican-3表达水平的预测价值

目的:探讨以钆塞酸二钠(Gd-EOB-DTPA,商品名:普美显)为对比剂的动态对比增强磁共振成像(DEC-MRI)定量参数对原发性肝癌肝脏储备功能及CD34、Glypican-3表达水平的预测价值。方法:纳入96例原发性肝癌患者作为研究对象,并选择50例肝良性结节患者作为对照组。使用普美显为对比剂行增强MRI检查,测定并计算肝胆期相对信号强化率(REHBP);行扩散加权成像(DWI)检查并测定表观扩散系数(ADC)值。采用免疫组化评估CD34、Glypican-3表达水平。结果:原发性肝癌患者的REHBP和ADC值均显著低于肝脏良性结节患者,差异有统计学意义(P<0.05)。Child-Pugh肝功能分级B+C级、低分化、Ⅲ~Ⅳ期患者的REHBP和ADC值分别显著低于A级、中高分化和Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。CD34、Glypican-3高表达患者的REHBP和ADC值均显著低于低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,REHBP和ADC值预测肝脏储备功能的曲线下面积(AUC)为0.901(95%CI:0.840~0.962,P<0.001)和0.861(95%CI:0.784~0.937,P<0.001),预测CD34高表达的AUC为0.923(95%CI:0.866~0.980,P<0.001)和0.866(95%CI:0.783~0.948,P<0.001),预测Glypican-3高表达的AUC为0.879(95%CI:0.791~0.966,P<0.001)和0.933(95%CI:0.884~0.982,P<0.001)。结论:普美显增强MRI及DWI相关定量参数对原发性肝癌患者肝脏储备功能及预后分子标志物表达具有一定预测价值。

利用TCGA数据库分析Glypican-6在鼻咽癌中的表达及意义

目的探索glypican-6基因在鼻咽癌中的表达水平,预测glypican-6参与鼻咽癌发生发展的关系。方法从癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)提取头颈癌glypican-6的数据进行整合;有临床样本信息的成对(癌和癌旁)RNA-seq数据,通过edgeR分析软件完成分析工作。结果 glypican-6在鼻咽癌组织中的表达水平较癌旁组织显著上调。结论 Glypican-6可作为促癌基因在鼻咽癌中发挥作用,有望成为鼻咽癌的预后指标或者治疗靶点。