GnRHⅡ对离体培养子宫内膜异位症间质细胞凋亡的影响

目的:研究GnRHⅡ对子宫内膜异位症(内异症)患者离体培养的异位及在位子宫内膜间质细胞凋亡的影响。方法:体外原代培养人内异症异位及在位子宫内膜间质细胞,用不同浓度的GnRHⅡ(0、10-10、10-8、10-6mol/L)干预,采用Hoechst染色和流式细胞术检测离体培养子宫内膜间质细胞的凋亡发生情况。结果:GnRHⅡ可诱导离体培养的在位或异位子宫内膜间质细胞的凋亡,随着浓度增加,差异有统计学意义(P<0.05),呈剂量依赖性;且对异位内膜间质细胞的促凋亡作用明显强于在位者(P<0.05)。结论:外源性GnRHⅡ可明显促进人内异症异位及在位子宫内膜间质细胞的凋亡,为开发内异症促凋亡治疗方面的新药提供了实验依据。

hVEGF-GnRH3疫苗降低C57BL/6小鼠B16F10黑色素瘤血管生成及增强炎症免疫调节作用

本研究旨在研究融合蛋白促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)和h VEGF-GnRH3(VG)对C57BL/6J小鼠B16F10黑色素瘤的抑制作用,并对其抗肿瘤作用机制进行初步研究。GnRH和VG的靶向抗原过量表达可以促进黑色素瘤的转移。且有研究证明,VG疫苗能引起针对前列腺癌的免疫炎症反应。因此,作者假设VG也有防止黑色素瘤血管生成、进展和复发的潜力。通过大肠杆菌表达系统获取重组蛋白h VEGF-GnRH3,并通过DEAE阴离子交换色谱法纯化,制备蛋白疫苗。雄性C57BL/6J小鼠皮下注射B16F10黑色素瘤细胞(每只小鼠1×10^(6)个细胞),构建黑色素瘤模型。荷瘤小鼠用VG蛋白疫苗免疫三个周期。接着,从肿瘤生长、血管生成和肿瘤组织学、外周和脾细胞体液、细胞和细胞内免疫调节等方面,对疫苗的抑瘤效果进行了评估。结果显示,VG组黑色素瘤的体积和血管生成受到明显抑制(P<0.01)。与PBS组相比,VG提高了小鼠血清中抗GnRH、抗VEGF Ig G和循环干扰素-γ(IFN-γ)的水平,而IL-6水平明显降低。在脾脏相关实验中,通过MTT法检测脾细胞增殖情况。结果显示,VG疫苗能促进脾细胞增殖,并增强脾细胞的细胞毒作用。同时,对细胞内细胞因子水平进一步分析,结果显示CD3^(+)CD4^(+)IFN-γ^(+)细胞明显增加。综上所述,VEGFGnRH3是一种很有前景的治疗黑色素瘤的疫苗。