GnRH-R在大鼠递增负荷训练中的表达及与性激素的关系

:采用动物实验研究法 ,对促性腺素释放激素受体 (GnRH -R)在大鼠递增负荷训练中的表达及与性激素的关系进行分析。结果显示 ,长期大强度负荷使Ta组大鼠垂体GnRH -R表达明显低于C组 ,且同时伴有LH、E2 、P、T明显低于C组 ,FSH也低于C组 ;但是Ta组大鼠下丘脑、血浆 β -EP明显高于C组。休息 1周后GnRH -R未见恢复。认为 ,长期大强度负荷使Ta组大鼠垂体GnRH -R自身调节发生紊乱 ,是引起AMI的重要因素之一 ;过高的 β -EP抑制中枢GnRH分泌 ,是垂体GnRH -R表达减弱的主要抑制神经递质之一 ;推测AMI可能发生在下丘脑水平。

高脂饮食对雌性大鼠性发育中枢相关基因GnRH mRNA及GnRH-R mRNA表达水平的影响

目的研究高脂饮食对雌性大鼠性发育相关基因下丘脑GnRH mRNA及垂体GnRH-R mRNA表达的影响。方法 20只21日龄的雌性SD大鼠按配对设计分组原则,分为高脂组、标准组,每组10只。高脂组大鼠饲喂高脂肪饲料,正常组大鼠饲喂标准饲料。当高脂组大鼠全体出现阴道口开放后,于当天处死所有实验大鼠,获取下丘脑及垂体。采用RT-PCR法,检测下丘脑GnRH mRNA及垂体GnRH-R mRNA的表达水平。结果高脂组下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH-R mRNA均高于标准组(均<0.05)。结论长期高脂饮食可致雌性大鼠HPGA功能提前启动,其机制可能与促进下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH-R m RN表达有关。

拟穴青蟹GnRH-R的免疫识别

促性腺激素释放激素（GnRH）及其受体（GnRH-R）对生殖具有重要的调控作用．迄今无脊椎动物GnRH及GnRH-R的研究尚少．本研究采用兔抗人GnRH-R、兔抗果蝇GnRH-R和兔抗海鞘GnRH-R的抗体，应用免疫印迹和免疫共沉淀技术对拟穴青蟹（Scylla paramamosain）GnRH-R进行了免疫识别，所得结果如下：1）经免疫印迹检测，拟穴青蟹脑、胸神经团、视神经节和精巢中共有的免疫阳性条带分子质量为45-55ku．脑和胸神经团中另有一条36ku条带；在精巢中，兔抗人GnRH-R和兔抗果蝇GnRH-R抗体只有一条28ku条带，而兔抗海鞘GnRH-R抗体显示有28，36和30ku的条带．2）利用免疫共沉淀技术，分离出与GnRH-R抗体相结合的两种物质，分子质量分别为38．1和54．0ku，分别与哺乳动物和非哺乳动物GnRH-R的分子质量接近．该发现提示拟穴青蟹体内存在GnRH-R，为深入了解甲壳动物生殖调控机理提供了理论依据．

GnRH-R在子宫内膜异位症中的表达及其临床意义

目的研究促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)在子宫内膜异位症(内异症)异位及在位内膜组织中的表达,探讨其与内异症的关系,为临床诊治内异症提供理论依据。方法选择内异症异位内膜30例,并取其中在位内膜组织30例,另选正常子宫内膜组织30例作为对照组,应用免疫组织化学的方法检测上述组织中GnRH-R的表达,分析其与内异症的关系。结果GnRH-R在内异症异位内膜及在位内膜组织中表达,分别为66.67%,100%,差异有显著性(P<0.005),其相对表达量均明显高于正常子宫内膜(16.67%),差异均有显著性(P<0.005)。结论GnRH-R在内异症异位内膜、在位内膜的表达差异可能与内异症的发生、发展有关,借此可更有效地利用促性腺激素释放激素类似物治疗子宫内膜异位症。

乳腺癌促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)的表达及临床意义

目的探讨促性腺激素释放激素受体(gonadotropin releasing hormone receptor,GnRH-R)在乳腺癌组织中的表达以及与临床病理特征、预后的相关性。方法收集2013年至2018年间诊断的早期浸润性乳腺癌组织656例以及癌旁组织131例,制成组织芯片。应用免疫组化方法检测乳腺癌组织中GnRH-R表达的情况,通过Logistic回归分析GnRH-R高表达相关的临床病理因素,通过Kaplan-Meier法以及Log-Rank检验比较GnRH-R高表达与低表达患者的无病生存期(disease free survival,DFS)。结果乳腺癌癌组织中GnRH-R高表达率显著高于癌旁组织(54.0%vs.28.2%,P<0.001);在雌激素受体(estrogen receptor,ER)阴性乳腺癌中,GnRH-R高表达率显著高于ER阳性乳腺癌(65.3%vs.48.0%,P<0.001)。多因素分析显示,较低的N分期、肺泡淋巴管侵犯(lymphovascular invasion,LVI)阴性以及高Ki-67是GnRH-R高表达的独立相关因素。尽管在整体样本中,GnRH-R高表达与低表达患者的DFS无显著性差异(Log Rank P=0.132),但是在ER阴性乳腺癌中,GnRH-R高表达的患者较低表达的患者DFS显著改善(Log Rank P=0.023)。结论GnRH-R可能是乳腺癌潜在的治疗靶点,尤其是激素受体阴性的乳腺癌。

GnRH-R与子宫内膜异位症的相关性研究进展

促性腺激素释放激素在体内的重要功能是通过其受体介导的，研究子宫在位与不同部位异位内膜组织GnRH-R的表达，有助于进一步探讨GnRH—R在子宫内膜异位症发病中的作用。

大黄不同萃取物对大鼠下丘脑和腺垂体超微结构及其GnRH、GnRH-R和FSHβ表达的影响

目的:比较大黄不同萃取物对成年雌性大鼠下丘脑、腺垂体超微结构及功能的影响,筛选大黄具有生殖毒性的主要萃取物。方法:采用极性梯度萃取法制备大黄水提物的氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水溶物。雌性成年大鼠随机分为正常对照组、大黄水提物组和各萃取物组,连续灌胃给药60天。采用透射电镜观察下丘脑、腺垂体超微结构病理变化;免疫组化法检测下丘脑弓状核中GnRH、腺垂体促性腺细胞中GnRH-R和FSHβ表达水平。结果:(1)超微结构:电镜下,与正常对照组相比,大黄水提物(生药4.0 g/kg)、氯仿(4.44 mg/kg)和乙酸乙酯萃取物(40.96 mg/kg)组均出现不同程度的病理变化,下丘脑弓状核神经元出现核仁增大,内质网、线粒体数目增多,同时伴有染色质边集和溶酶体增多;腺垂体促性腺细胞可见核膜断裂,线粒体肥大,内质网和高尔基体扩张,以及由粗面内质网组成的同心圆性膜性小体。正丁醇萃取物(79.43 mg/kg)和水溶物(835.72 mg/kg)组超微结构病变不明显。(2)大黄水提物(生药4.0 g/kg)组、氯仿(4.44 mg/kg)和乙酸乙酯萃取物(40.96 mg/kg)组GnRH和FSHβ表达明显高于正常对照组,大黄水提物(生药4.0 g/kg)组GnRH-R表达明显低于正常对照组。大黄水提物(生药4.0 g/kg)组GnRH和FSHβ表达明显高于正丁醇萃取物(79.43 mg/kg)和水溶物(835.72 mg/kg)组,乙酸乙酯萃取物(40.96 mg/kg)组GnRH和FSHβ表达高于正丁醇萃取物(79.43 mg/kg)组,其余各组间比较差异均无统计学意义。结论:氯仿(4.44 mg/kg)和乙酸乙酯萃取物(40.96 mg/kg)具有与大黄水提物相类的毒性作用,是大黄主要的生殖毒性萃取物。

疏肝泻火方对雌性性早熟大鼠性腺、雌激素和下丘脑GnRH、垂体GnRH-R表达的影响

目的:观察疏肝泻火方对雌性性早熟大鼠性腺、雌激素和下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、垂体促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)表达的作用。方法:取SD雌性大鼠60只,随机分为正常对照组、性早熟模型组、亮丙瑞林100μg/kg组、疏肝泻火方8.5g/kg、4.25g/kg、2.13g/kg组共6组,采用NMA建立性早熟模型,予不同剂量的疏肝泻火方和亮丙瑞林干预,观察性腺发育情况;测定血FSH、LH水平和下丘脑GnRH、垂体GnRH-R的mRNA表达。结果:性早熟模型组大鼠阴道口开放和出现第一个动情间期的时间分别为32.10±1.56天、35.24±1.46天,均较正常对照组提前,性早熟模型组第一只大鼠出现阴道口开放和第一个动情间期时,疏肝泻火方2.125g/kg组出现一只,其余各组均未见。各组子宫指数和卵巢指数均较模型组显著降低、血清FSH和LH分泌量显著降低,下丘脑GnRH mRNA、垂体GnRH-R mRNA的表达量显著降低,疏肝泻火方8.5g/kg组与亮丙瑞林100μg/kg组疗效相当,疏肝泻火方2.13g/kg、4.25g/kg、8.5g/kg组的作用呈现依次递增的趋势。结论:疏肝泻火方可以降低下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH-R mRNA的表达水平,降低雌激素水平,抑制性腺的发育,延缓HPG轴的启动。

人甲状腺肿瘤中有GnRH-R存在

本报通讯员、第四军医大学西京医院(710032)张中桥报道第四军医大学西京医院内分泌科完成的一项研究证明,人甲状腺肿瘤中有促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)存在,这一研究成果为探讨甲状腺肿瘤新的治疗方法提供了形态学依据。

滋阴泻火方对性早熟模型大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的影响

目的:观察滋阴泻火方对性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴功能的影响。方法:26d雌性SD大鼠60只,随机分成正常对照(N)组、性早熟模型(P)组、亮丙瑞林(L)组、中药大剂量(C-H)组、中药中剂量(C-M)组和中药小剂量(C-L)组。除N组外,其余组建立由N-甲基-DL-天冬氨酸(NMA)诱导的性早熟大鼠模型。L组、C-H组、C-M组和C-L组在建立模型的同时,分别用L、C-H、C-M及C-L进行干预。测定各组大鼠卵巢、子宫指数,卵巢黄体出现率,下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH-R mRNA表达水平。结果:①与N组比较,P组、C-L组上述观察指标显著升高(P＜0．05),而L组、C-H组和C-M组未见统计学差异(P＞0．05)。②与L组比较, C-H组、C-M组以上指标未见统计学差异(P＞0．05)。结论:滋阴泻火方能抑制NMA诱导的雌性大鼠性早熟的发生,并使其维持在正常青春前期状态,其作用与亮丙瑞林相似。其干预机制可能是通过下调下丘脑GnRH和垂体GnRH-R基因的表达,从而抑制下丘脑—垂体—性腺轴的功能来实现的。

促性腺素释放激素受体与凋亡相关蛋白FAS在前列腺肿瘤中的共表达及意义

目的 :研究促性腺素释放激素受体 (GnRH R)和凋亡相关蛋白FAS在前列腺肿瘤中的共表达及临床意义。方法 :采用SABC免疫组化法及原位定量法 ,对前列腺肿瘤和前列腺增生患者中GnRH R和FAS的表达与共存进行检测及半定量分析。结果 :在前列腺癌组织高分化的 1 1例 ,中分化的 3例以及低分化的 5例中 ,各种不同分化的癌组织均显示不同程度的GnRH R和FAS阳性免疫反应 ,原位定量显示GnRH R表达分别随着组织分化程度增高而非常显著地增高 ,FAS表达随着组织病理分化的增高而非常显著地降低。结论 :GnRH R和FAS的表达与前列腺癌的恶性程度有关 。

促性腺激素释放激素受体及其基因表达调控

促性腺激素释放激素 ( Gn RH)在体内的重要功能是由促性腺激素释放激素受体( Gn RH- R)介导的 ,Gn RH及其受体相互作用的调控在繁殖性能调控中是一个关键性位点。本文从 Gn RH- R结构与功能、Gn RH- R基因表达调控、Gn RH- R介导的细胞信号转导机制等三个方面对 Gn RH- R近年来的研究进展进行了综述 ,并展望了 Gn RH-

湖羊GnRH受体基因的单核苷酸多态性研究

对高繁殖力绵羊品种(湖羊)和低繁殖力绵羊品种(陶赛特、特克赛尔和哈萨克)促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)基因的5′非翻译区、外显子1和外显子2部分序列进行了PCR-SSCP分析,结果发现在5′非翻译区发生3处碱基突变(552T→G、653C→G、654G→A);在第二外显子区发生1处碱基突变(230G→C),该突变导致了第66位氨基酸的改变(精氨酸→丝氨酸)。并对这4个位点在4个绵羊品种间的基因频率进行了初步分析:对于引物1,4个绵羊群体均检测到AA基因型,AB基因型只出现在湖羊、陶赛特羊和特克塞尔羊中,仅在哈萨克羊中检测到CC基因型。对于引物2,4个绵羊群体均检测到DD基因型;DE基因型只出现在湖羊和哈萨克羊中;仅在湖羊中检测到EE基因型。

GnRH在广西摩拉杂交水牛乳腺中的免疫组化定位及其受体基因表达的研究

采用免疫组化及RT-PCR技术检测广西摩拉杂交水牛乳腺组织中的促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体。结果表明,15份正常乳腺组织中有13份呈GnRH免疫阳性反应,免疫阳性产物主要集中在腺泡细胞的胞质和胞膜,胞核无特异性染色;同时扩增的目的条带大小为1 008 bp,与促性腺激素释放激素受体(GnRHR)基因片段大小一致。

中华鲟促性腺激素释放激素受体基因cDNA序列的克隆及表达分析

为了研究中华鲟(Acipenser sinensis)促性腺激素释放激素受体(Gonadotropin-releasing hormone receptor,Gn RH-R)基因在中华鲟中的组织表达特征,为中华鲟生长发育调控研究提供基础数据,通过构建中华鲟(Acipenser sinensis)垂体的SMART cDNA质粒文库,采用cDNA末端快速扩增(RACE),克隆得到了中华鲟Gn RH-R基因的cDNA全长序列。该序列全长1530 bp,有478 bp的5′非翻译区,579 bp的开放阅读框和473 bp的3′非翻译区,共编码192个氨基酸,其成熟多肽含有5个N连糖基化位点。通过和已知其他鱼类的Gn RH-R基因进行氨基酸序列多重比对,发现其与真鲷(Pagrus major)的同源性最高,为76%,与米氏叶吻银鲛(Callorhinchus milii)的同源性最低,为39%。采用实时荧光定量PCR(Real time PCR)方法,检测了Gn RH-R的m RNA在中华鲟心、肝、脾、肾、肠道、精巢、肌肉及脑组织中的表达状况,发现其在精巢中大量转录,而在其他组织中则表达微弱。以上结果表明中华鲟Gn RH-R基因在性腺发育特别是精子发生过程中可能起重要作用。

不同类型子宫内膜组织中GnRH及其受体的表达及意义

目的在蛋白水平检测促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体(GnRH R)在不同类型子宫内膜组织中的表达,探讨其可能存在的意义。方法采用免疫组化法检测子宫内膜异位症(EMS)的在位内膜和异位内膜以及子宫内膜增生、子宫内膜癌和对照组子宫内膜上GnRH及GnRH R的表达及分布。结果GnRH和GnRH R在EMS和对照组在位内膜持续表达,阳性物质位于腺上皮和间质上皮胞浆内,分泌期染色最强;异位内膜组织中二者的表达率近50%;子宫内膜增生组织中GnRH和GnRH R表达率分别为92.3%、92.3%,而子宫内膜癌组织中则分别为58.8%、82.4%。结论在子宫内膜组织中存在着GnRH及GnRH R的蛋白表达,其在异位内膜组织、内膜增生和内膜癌中的高表达可能成为临床诊断指标和治疗的靶点。

GnRH受体在人类子宫内膜的表达及意义

促性腺激素释放激素(GnRH)在体内的生理调节功能是由促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)介导的,GnRH与受体的结合具有高度特异性。研究发现,GnRH和GnRH-R除位于下丘脑垂体系统外,在机体的其他组织,尤其是生殖器官也有分布。近年来有许多对人类不同类型子宫内膜表达GnRH-R的研究报道,推测子宫内膜GnRH和GnRH-R系统在调节子宫内膜的自分泌或旁分泌中起重要作用,并参与子宫内膜的增殖调节。

体外培养的人子宫内膜细胞中GnRH及其受体的表达

目的探讨促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体(GnRH-R)在体外培养的人子宫内膜异位症(EMS)和对照组在位子宫内膜细胞中的表达情况。方法用酶消化分离法培养EMS和对照组在位子宫内膜细胞;用免疫细胞化学法检测培养细胞GnRH和GnRH-R表达。结果17例标本15例培养成功,成功率88.2%;GnRH和GnRH-R在EMS和对照组在位子宫内膜培养细胞胞浆内均表达阳性,但经过3～4次传代后,GnRH不再表达,而GnRH-R持续表达。结论在位子宫内膜细胞的消化分离培养是一种简便易行的方法;GnRH-R在培养细胞中持续表达提示其可以用于研究GnRH类似物(GnRH-a)对子宫内膜的直接作用。

循经通络推拿结合药物对乳腺增生大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的影响

目的观察循经通络推拿手法结合药物治疗与单纯手法、单纯药物治疗对乳腺增生(MGH)大鼠的疗效差异及对下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴的影响。方法SD大鼠随机分为对照组、模型组、手法组、药物组、药物加手法组,每组10只。采用孕雌激素联合造模法制备乳腺增生症模型。手法组予以循经通络推拿手法治疗,药物组灌胃给予三苯氧胺,药物加手法组同时给予循经通络推拿和药物灌胃。治疗结束后测量大鼠乳头直径和乳头高度,HE染色观察乳腺组织病理学变化,ELISA法检测血清中卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)水平,Western-blot及RT-RCR检测下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)及垂体促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)的蛋白和mRNA表达。结果与模型组比较,各治疗组大鼠乳头直径、乳头高度显著减小(P<0.05);药物加手法组大鼠乳腺组织病理形态明显改善,手法组和药物组大鼠乳腺组织形态改善不明显;药物组、药物加手法组血清FSH水平明显降低,LH水平显著升高(P<0.05),手法组大鼠血清FSH、LH水平变化不明显(P>0.05);药物加手法组大鼠GnRH、GnRH-R的蛋白和mRNA表达均明显减少(P<0.05),药物组明显下调了GnRH和GnRH-R的mRNA表达,而对其蛋白水平未见明显调控作用(P>0.05),手法组GnRH、GnRH-R的蛋白表达和mRNA表达均无明显变化(P>0.05)。结论循经通络推拿手法结合三苯氧胺对乳腺增生症大鼠的疗效优于单纯手法、单纯药物治疗,其作用机制可能与降低下丘脑GnRH和垂体GnRH-R的表达,影响下丘脑-垂体-卵巢轴功能相关。