双酚A对雌性大鼠间脑组织Kisspeptin/GnIH基因表达的影响

目的探索环境雌激素双酚A(BPA)对脑组织新型神经生殖内分泌调节因子Kisspeptin/GnIH基因表达的影响。方法以去卵巢雌性大鼠为动物模型,腹腔给予不同剂量的雌二醇(E2)或BPA后,应用荧光定量PCR法检测BPA或E2对雌性大鼠间脑组织中Kisspeptin、GnIH及其各自受体基因表达的影响。结果 BPA各剂量组及E2处理组均显著降低大鼠间脑内Kisspeptin基因的表达量(P<0.05),而BPA高剂量组及E2处理组则明显升高间脑内Kisspeptin受体GPR54基因的表达量(P<0.01);大鼠间脑内GnIH基因的表达量在BPA低剂量处理组明显下降(P<0.01),而BPA高剂量及E2组无显著变化,各剂量组GnIH受体GPR147基因的表达量亦无显著性改变。结论 BPA能干扰生殖轴中的重要神经肽Kisspeptin及GnIH的表达,并且其干扰作用具有低剂量效应。

Kisspeptin调控鱼类生殖内分泌的研究进展

Kisspeptin是近10年新发现的调控动物生殖内分泌的关键因子,是kiss基因所编码的多肽产物,属神经内分泌肽类激素,为G蛋白偶联受体54(GPR54)的内源性配体。Kisspeptin具多个功能性的分子结构形态,在鱼类中,主要结构形式为Kisspeptin-10肽。Kisspeptin/GPR54系统在生殖中具重要功能。该文综合现有研究资料,就Kisspeptin在鱼类生殖内分泌调控中的概况、Kisspeptin神经元在鱼脑中的分布和定位、鱼类Kisspeptin分子的多态性、Kisspeptin调控鱼生殖内分泌的功能多样性、Kisspeptin调控鱼类生殖内分泌的机制、Kisspeptin的分子进化以及Kisspeptin和其他功能分子对鱼类生殖内分泌的协同调控进行了初步阐述,同时对Kisspeptin在鱼类生殖内分泌调控中的研究进行了展望。

GnIH对母猪生殖调控的研究

【目的】研究促性腺激素抑制激素(GnIH)mRNA在母猪组织器官中的分布,不同剂量GnIH对母猪卵巢类固醇激素合成和细胞增殖相关蛋白表达的影响,及GPR147与GnRH的形态学关系。从分子、细胞水平和形态学角度,探讨GnIH在下丘脑-垂体-性腺轴对母猪生殖调控的作用机制,丰富神经内分泌学的内容。【方法】以30日龄健康仔母猪为研究对象,采用半定量RT-PCR方法研究GnIH mRNA在母猪24个组织中的分布定位。采集青年母猪卵巢样品,分离卵巢颗粒细胞,研究不同剂量GnIH(10-6、10-8、10-10和10-12 mol·L-1)对体外培养的母猪卵巢颗粒细胞类固醇激素(雌二醇,孕酮)的合成、细胞增殖相关蛋白(cyclin B1,PCNA)表达的影响。取30日龄健康仔母猪下丘脑,制作脑片,采用荧光双标记,激光共聚焦显微镜观察拍照分析GPR147与GnRH的形态学关系。【结果】GnIH mRNA主要在母猪的中枢神经系统中表达,尤其是在间脑表达含量最高。在外周组织,如子宫、卵巢、垂体中也有一定量表达。不同剂量的GnIH作用于体外培养的卵巢颗粒细胞,其中10-6和10-10 mol·L-1 GnIH能极显著地抑制雌二醇的分泌(P<0.01),但不同剂量的GnIH对孕酮分泌的影响并不显著。GnIH能极显著地抑制卵巢增殖相关蛋白PCNA和cyclin B1的表达(P<0.01)。此外,激光共聚焦结果显示GPR147与GnRH在下丘脑室旁核及视前区存在密切联系。【结论】GnIH可在下丘脑水平通过其受体直接作用于GnRH神经元,影响GnRH的合成和分泌,进而在中枢水平调控母猪的生殖活动。在外周生殖器官中,GnIH可通过影响卵巢激素的分泌和细胞增殖相关蛋白的表达参与母猪的生殖调控。

鹅GnIH基因克隆及其在卵泡发育中的表达规律研究

为研究促性腺激素抑制激素（Gonadotropin—inhibitory hormone，GnIH）基因表达与鹅卵泡发育间的关系，对鹅锄Ⅲ基因的CDS区序列进行了克隆与分析，并采用荧光定量PCR检测了该基因在产蛋高峰期鹅的不同大小卵泡中的表达量。序列分析结果表明，所获得的鹅翻删基因CDS区长471bp，编码157个氨基酸，与已知的其它鸟类GnlH相似性达87％。鹅锄坍前体包括3个“LPLRF”，具有典型的“LPXRF-酰胺”基序。荧光定量结果表明，鹅GnlH在所有不同大小的卵泡中均有表达，其表达量在卵泡发育过程中呈现规律性变化，总趋势是先增高后降低，且在直径4～5mm的卵泡中表达量最高。研究结果显示，鹅卵泡锄鹏基因的表达与卵泡选择性发育有关，且该选择过程可能发生在直径为4～5mm的卵泡。这一研究可为探讨季节性繁殖禽类卵泡发育的调控机理奠定基础。

不同周龄小鼠GnIH的血清含量及卵巢表达研究

以3、6、9、12和50周龄昆明小鼠为研究对象,利用ELISA和荧光定量PCR技术分别检测不同发育阶段小鼠血清GnIH质量浓度及卵巢GnIH基因的表达.结果表明:小鼠血清GnIH质量浓度在3周龄和50周龄极显著高于其他组(P<0.01),且6至12周龄逐渐升高.卵巢GnIH基因表达从3至12周龄逐渐升高,50周龄极显著下降(P<0.01).初步表明GnIH参与调节小鼠卵巢的发育及功能.

腹腔注射GnIH对瑶鸡卵巢糖代谢的影响

旨在探究促性腺激素抑制激素(GnIH)对瑶鸡卵巢糖代谢的影响。将10只瑶鸡随机分为对照组(0.9%生理盐水)和GnIH组(24.54μg/kg GnIH),每组5只。每天7:00和19:00注射生理盐水或GnIH(100μL/次),连续注射14 d,观察并记录瑶鸡的采食情况;采用实时荧光定量PCR方法对瑶鸡卵巢中糖代谢相关基因葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)、丙酮酸激酶(PK)、磷酸果糖激酶(PFK)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、乳酸脱氢酶B(LDHB)和琥珀酸脱氢酶B(SDHB)mRNA表达量进行检测;采用试剂盒对卵巢中葡萄糖、丙酮酸含量进行检测。结果:与对照组相比,GnIH组注射后1、2、4、8 h,瑶鸡的采食量显著升高(P<0.05),夜间平均采食量极显著升高(P<0.01),卵体比显著下降(P<0.05);GLUT1、GLUT3 mRNA的表达量极显著上升(P<0.01),PK、PFK和LDHA mRNA的表达量显著上升(P<0.05),LDHB和SDHB mRNA的表达量显著下降(P<0.05);丙酮酸含量显著升高(P<0.05)。本试验结果表明,腹腔注射GnIH会增加雌性瑶鸡采食量,引起卵巢糖代谢紊乱,进而导致卵巢发育异常。

光照条件改变对青春期前雄性金黄地鼠性腺轴的影响

目的:观察光照改变对雄性金黄地鼠下丘脑-垂体-性腺轴的影响。方法:2日龄雄性金黄地鼠40只,随机分为正常组(12h,50lux)、16h弱光组(16h,50lux)、16h强光组(16h,350lux)和20h强光组(20h,350lux),光照干预至28日龄;放免法检测血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)水平;Real-time PCR法检测下丘脑促性腺激素释放激素(Gn RH)、促性腺激素抑制激素(Gn IH)、褪黑素受体1c亚型(Mel1c),垂体Gn RHR、GPR147 m RNA表达变化。结果:光照组金黄地鼠出现躁动不安,皮毛光泽度差,体质量偏轻等类似阴虚火旺证候表现。与正常组比较,各光照组T水平显著上升(P<0.05);下丘脑Mel1c m RNA表达水平显著下降(P<0.01,P<0.05);16h弱光组和20h强光组下丘脑Gn IH m RNA表达水平显著升高(P<0.05)。结论:延长光照时间、增加光照强度可使雄性地鼠出现一定的阴虚火旺表现。光照时间延长、强度增加可引起雄性地鼠睾丸发育提前,其机制可能与褪黑素受体、Gn IH有关。