奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)的临床应用评估

为了评估商品化的奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)(后文简称为“检测试剂盒”)在临床应用中的适用性,本试验采用传统细菌分离培养、检测试剂盒、16S rRNA基因扩增子测序和药物敏感性试验对宁夏回族自治区9个牧场155份奶牛乳房炎奶样分别进行菌株鉴定和耐药性检测,并将检测试剂盒与其他3种检测结果进行比较和分析。结果显示,检测试剂盒与传统细菌分离培养在病原菌检出情况上基本保持一致,均主要检出了大肠杆菌、芽孢杆菌属和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)等;检测试剂盒与16S rRNA基因扩增子测序结果在菌属组成上一致性较高,均主要检出了假单胞菌属、链球菌属和葡萄球菌属等;药物敏感性试验结果显示,检出率较高的66株病原菌分离株对β-内酰胺类抗菌药物的耐药率普遍偏高;奶样中β-内酰胺酶耐药基因blaZ的检测试剂盒检出结果与同一奶样中分离菌株的药物敏感性试验结果一致率达58%(7/12)。综上所述,该检测试剂盒具有较高的准确度和病原覆盖率,可为牧场奶牛乳房炎主要病原的快速诊断和耐药基因(blaZ)监测提供有效的技术支持,从而降低抗菌药物的使用量,以减少牧场经济损失。

多个已知全同胞参与的全同胞关系排除方法

目的建立一种多个已知全同胞参与的全同关系排除方法—第五等位基因排除法。方法本方法原理:当2个以上全同胞参与鉴定时,若已知全同胞和被鉴定人在某一个STR位点出现了多于5个的等位基因(含5个),则该位点不符合遗传规律,倾向于排除被鉴定人;如果检出3个以上这类位点则排除全同胞关系。为了评估该方法的检验效能,本研究用Goldeneye^(TM)20A中19个STR位点对日常检案中已明确13组2-全同胞和5组3-全同胞的体系进行检验,与100个无关个体进行比对并统计其排除率。结果用19个STR位点检测13组2-全同胞与100个无关个体的排除率为47.77%,5组3-全同胞的排除率为88.00%。若已知全同胞在某一基因座提供3个以上等位基因则称之为有效STR,有效STR数目增多时排除率也增加。结论第五等位基因排除法结论明确,可推广于多人参与的全同胞鉴定。