大鼠肺孢子虫肺炎动物模型建立及病原学病理学观察

纯系Wistar大鼠皮下注射醋酸可的松25mg/次,每周2次,用药7周即可成功诱发大鼠肺孢子虫肺炎。相差显微镜直接镜检、姬姆萨氏染色(Giemsa's stain)、六亚甲基四胺银染色(GMS stain)和亚甲胺蓝染色(TBO stain)均可检出包囊。其中六亚甲基四胺银染色可显示囊壁特征性的括弧样结构,具有确诊价值。病理改变主要为肺泡间隔增厚和淋巴细胞、单核细胞浸润,肺泡中少量蜂窝状渗出物。对肺孢子虫的滋养体。

肺孢子虫包囊的分离及纯化

20只纯系Wistar大鼠经皮下注射醋酸可的松25m/次,每wk2次,用药7wk后即可诱发大鼠肺孢子虫肺炎。经相差显微镜直接检查、姬姆萨染色、亚甲胺蓝染色及六亚甲基四胺银染色在肺组织内检出肺孢子虫包囊。分离纯化过程包括三个步骤:1 肺组织匀浆的制备及过滤;2 采用0.2％胶原酶消化;3 不连续Percoll密度梯度离心。包囊及滋养体密度为1.033g/ml,肺组织碎片密度达1.040g/ml,从而分离。经上述过程处理后可获得较为纯净的肺孢子虫包囊,可用于ELISA。

免疫组化和GMS染色对AIDS合并肺孢子菌肺炎的临床诊断价值

目的探讨免疫组化及六胺银(gomori’s methenamine silver nitrate stain,GMS)染色法对AIDS合并肺孢子菌肺炎(pneu-mocystis pneumonia,PCP)的临床诊断价值。方法选择50例临床确诊为合并PCP的AIDS患者作为实验组(PCP组)、25例非PCP的呼吸道感染患者作为对照组,分别采用单克隆抗体免疫组化法和GMS染色法对两组患者的支纤镜肺活检标本进行肺孢子菌(pneumocystis jiroveri,Pj)检测,并比较两种方法的敏感性和特异性。结果免疫组化法检测Pj的敏感性为66%(33/50),特异性为100%(25/25);GMS染色法检测Pj的敏感性为42%(21/50),特异性为92%(23/25)。结论免疫组化法检测Pj的敏感性和特异性均高于GMS染色法,这将有助于提高Pj的检出率及PCP的确诊率。

特殊染色技术在艾滋病合并真菌病理诊断中的应用

目的 探讨特殊染色技术在艾滋病合并真菌病理诊断中的应用价值.方法 选取2010年2月至2013年11月上海市（复旦大学附属）公共卫生临床中心确诊为艾滋病合并真菌感染的患者20例,回顾性分析经苏木素-伊红（HE）染色、过碘酸希夫染色（PAS）和六胺银染色的病理资料,观察常见真菌在光镜下的形态.结果 20例艾滋病合并真菌感染的患者中,肺部隐球菌2例,皮肤、肺、腹腔肠系膜淋巴结马尔尼菲青霉菌3例,会厌、颈部淋巴结、口腔、腹腔及皮肤组织胞浆菌5例,上颌窦、肺及声带曲霉4例（合并结核3例）,肝、咽、食道及胃部白色假丝酵母菌6例.HE染色组织中炎性细胞浸润,可见肉芽肿形成,凝固性坏死,真菌形态尚能辨认,但需仔细观察,否则易漏诊或误诊;PAS染色,真菌孢子和假菌丝呈亮丽的紫红色,细胞核紫蓝色;六胺银染色,真菌孢子和假菌丝呈清晰可辨的黑褐色.结论 除常规进行HE染色外,联合应用PAS染色和六胺银染色,有助于提高真菌的病理诊断率.