短期GnRH脉冲治疗对先天性低促性腺激素性性腺功能减退症青少年期男性患者垂体⁃睾丸功能的作用

目的·探讨短期促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)脉冲治疗对先天性低促性腺激素性性腺功能减退症(congenital hypogonadotropic hypogonadism,CHH)青少年期男性患者垂体及睾丸功能的作用。方法·回顾性研究2016年1月—2021年6月接受GnRH脉冲治疗的CHH青少年期男性患者20例,收集患者临床资料。治疗方法为皮下持续脉冲泵给予戈那瑞林治疗1周(20例),其中5例患者持续治疗3个月;剂量为每个脉冲8~10μg,脉冲间隔90 min。于GnRH脉冲治疗前及治疗1周、1个月和3个月时,检测促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、促卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、睾酮水平;治疗3个月时测量睾丸体积变化。20例CHH患者均进行了全外显子基因测序。结果·20例CHH患者就诊年龄为14.35(14.08,15.31)岁,临床均表现为幼稚型睾丸、小阴茎,其他还伴有肥胖(12/20)、嗅觉障碍(9/20)、胰岛素抵抗(4/20)、隐睾(4/20)、身材矮小(3/20)等。患者身高为161.79(154.90,173.25)cm,体质量指数为23.80(20.51,27.46)kg/m2,睾丸体积为0.91(0.55,1.25)mL。抑制素B为39.67(11.29,64.97)pg/mL,LH基础值为0.20(0.10,0.30)IU/L,FSH基础值为0.87(0.23,0.89)IU/L,睾酮基础值为0.92(0.38,1.49)nmol/L。持续GnRH脉冲治疗1周后,20例患者LH、FSH的基值和峰值以及睾酮峰值均显著升高(均P<0.05)。其中接受3个月治疗的5例患者治疗1周、1个月、3个月时,LH、FSH的基值和峰值均呈逐渐升高趋势;治疗3个月时LH、FSH基值和峰值,以及睾酮峰值均比治疗前显著增高(均P<0.05),睾丸体积也显著增大(P=0.004)。20例患者中仅14例检测到基因突变,分别为人成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)突变7例、anosmin 1蛋白基因(anosmin 1,ANOS1)突变4例、前动力蛋白2受体(prokineticin receptor 2,PROKR2)突变2例、前动力蛋白2(prokineticin 2,PROK2)突变1例。GnRH脉冲治疗1周对FGFR1突变和ANOS1突变患者垂体-睾丸功能的影响差异无统计学意义。结论·青少年期男性CHH患者接受持续GnRH脉冲治疗1周后垂体-睾丸功能出现应答,治疗3个月有助于该类患者青春期第二性征的诱导。

GnRH-a联合LNG-IUS治疗子宫腺肌病相关经量过多的随访结局评价

目的:评价促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)联合左炔诺孕酮宫内缓释系统(LNG-IUS)治疗子宫腺肌病相关经量过多的随访结局。方法:选取西南医科大学附属医院2018年6月至2020年6月接诊的子宫腺肌病相关经量过多患者作为研究对象。研究对象均给予GnRH-a联合LNG-IUS治疗。分析治疗前、治疗后6、12、24、36和48个月的经量图形失血(PBAC)评分、痛经程度视觉模拟(VAS)评分、子宫体积、CA125水平、贫血情况、LNG-IUS带器率。结果:纳入研究患者187例,中位随访时间36.7个月,治疗后48个月累积带器率90.4%,经量过多症状缓解率89.9%。治疗后48个月内,患者的PBAC评分、VAS评分、子宫体积和CA125水平在每个随访时间点与治疗前比较均有显著改善(P<0.01)。结论:GnRH-a联合LNG-IUS可改善子宫腺肌病相关经量过多患者的持续带器率和随访结局。

GnRH激动剂长方案与GnRH拮抗剂方案在不同年龄组、不同反应人群中的新鲜周期临床结局比较

【目的】比较促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)长方案和促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-ant)方案在不同年龄组和不同反应人群中行体外受精或单精子卵胞浆内注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)新鲜周期移植的临床结局。【方法】回顾性分析中山大学附属第三医院生殖医学中心2015年8月28日至2016年12月31日行IVF/ICSI的737个周期,其中Gn RH-a长方案(A组)386个周期,GnRH-ant方案(B组)351个周期。按年龄和获卵数分成a和b两个亚组:a1组(<38岁),a2组(≥38岁);b1组(获卵数≤5个),b2组(获卵数6~15个),b3组(获卵数>15个)。比较患者的临床资料和助孕结局。【结果】(1)A、B两组的受精率、正常受精率、生化妊娠率、流产率均无统计学差异,A组的促性腺激素(Gn)使用天数、Gn总量、人绒毛膜促性腺激素(hCG)日雌二醇(E2)浓度、h CG日内膜厚度、获卵数、成熟卵子数、卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率、胚胎种植率、临床妊娠率均高于B组(P<0.05),B组的新鲜周期移植取消率高于A组(P<0.001)。(2)按年龄分层后,<38岁亚组使用Gn RH-ant方案的胚胎种植率略低于Gn RH-a长方案(32.6%vs 39.8%,P=0.067),两种方案的临床妊娠率没有统计学差异(54.8%vs 50.4%,P=0.429);≥38岁亚组使用Gn RH-ant方案的胚胎种植率低于Gn RH-a长方案(9.7%vs17.9%,P=0.066),使用Gn RH-ant方案的临床妊娠率低于Gn RH-a长方案(19.6%vs 39.1%),差异有统计学意义(P=0.021)。(3)按获卵数分层后,除b1亚组Gn RH-ant方案的胚胎种植率低于Gn RH-a长方案以外(13.1%vs 26.0%,P=0.026),b2、b3亚组使用两种方案的胚胎种植率没有统计学差异;b1、b2、b3三个亚组使用两种方案的临床妊娠率均没有统计学差异,但是b1亚组两种方案的临床妊娠率相差较大(36.6%vs 19.3%,P=0.056)。【结论】总体而言,Gn RH-a长方案的胚胎种植率和临床妊娠率高于Gn RH-ant方案,但Gn RH-ant方案可降低Gn的用量,缩短治疗时间,并有效减少OHSS的发生。对于年轻的卵巢正常反应患者甚至是高反应患者,两种方案有相似的临床结局;而对于高龄等低反应患者,则使用Gn RH-a长方案的胚胎种植率和临床妊娠率更高。

GnRH Ⅱ与GnRH Ⅰ对子宫内膜异位症患者间质细胞分泌VEGF作用的比较(英文)

目的:测定GnRH Ⅱ与GnRH Ⅰ对子宫内膜异位症(EMs)患者离体培养子宫内膜间质细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨GnRH Ⅱ对EMs患者可能的作用。方法:给予原代培养的EMs患者在位及异位子宫内膜间质细胞不同浓度的GnRH Ⅱ,GnRH Ⅰ类似物(戈舍瑞林,goserelin)处理,同时设对照组(不加GnRH),采用酶联免疫吸附法(ELⅠSA)测定培养液中VEGF浓度,并进行比较。结果:EMs患者离体培养的异位子宫内膜间质细胞经48 h培养,能分泌VEGF,分泌量与在位子宫内膜间质细胞的相近,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。不同浓度的GnRH Ⅱ对EMs患者离体培养的在位和异位子宫内膜间质细胞VEGF的分泌有明显的抑制作用,呈剂量依赖性(P<0.05),且较GnRH Ⅰ类似物(戈舍瑞林)的作用更强(P<0.05)。不同浓度的GnRH Ⅱ对EMs患者离体培养的异位子宫内膜间质细胞VEGF分泌的抑制作用明显强于在位(P<0.05)。结论:EMs患者的异位子宫内膜间质细胞具有分泌VEGF的功能,分泌量与在位子宫内膜的相近,这对EMs的形成和发展可能起重要作用。Gn-RH Ⅱ呈剂量依赖性地抑制异位内膜间质细胞分泌VEGF,其抑制作用明显强于在位,且GnRH Ⅱ明显强于GnRH Ⅰ,为寻找EMs抗血管形成方面的新药治疗提供了新的依据。

鲤鱼sGnRH基因克隆及其在成熟个体的表达分析

采用RACE方法 ,从鲤鱼脑组织克隆了两个差异的sGnRH(salmonGnRH ,[Trp7Leu8]GnRH)cDNAs ,即cDNA1和cDNA2 ,其长度分别为 393和 4 78bp。两个cDNAs都包括一个 2 85bp开放阅读框 ,编码的sGnRH前体为 94个氨基酸残基 ,由一个信号肽、sGnRH十肽和一个由蛋白水解位点 (Gly Lys Arg)连接的促性腺激素释放激素相关肽共 3部分组成。用内含子捕获得到相应的两个差异sGnRH基因 ,即sGnRHgene1和 gene2 ,其基本结构都包括 4个外显子和 3个内含子 ,3个内含子的核苷酸相似性分别为 71 1%、76 1%和 88.0 %。鲤鱼sGnRHcD NAs及基因的基本结构和编码特点与已报道的不同形式GnRHcDNAs和GnRH基因相似 ,由此推测所有类型的GnRH可能来自一个共同的祖分子。Southern杂交进一步证实鲤鱼基因组存在两个不同的sGnRH基因座位。相对定量RT PCR检测发现 ,两个sGnRH基因除在精巢的表达存在差异外 ,在脑区、垂体和成熟卵巢共表达。其中两个sGnRH基因在端脑和下丘脑的表达水平明显高于后脑区。根据sGnRHmRNAs在多个脑区、性腺和垂体的共存推测 ,sGnRH可能对鲤鱼下丘脑 垂体 性腺轴的调节有至关重要作用 。

GnRH在宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:从蛋白质及核酸水平研究GnRH(促性腺激素释放激素)在宫颈鳞状细胞癌中的表达,以探讨其存在的临床意义。方法:采用免疫组化和原位杂交两种实验方法,分别从蛋白质和核酸水平检测45例宫颈鳞状细胞癌及20例慢性宫颈炎中GnRH的表达。结果:在20例慢性宫颈炎宫颈上皮组织中GnRH及GnRH mRNA表达均为阴性,而在45例宫颈鳞状细胞癌组织中,GnRH阳性表达率为80%,GnRH mRNA阳性表达率为64.44%,即无论是在蛋白质水平还是在核酸水平比较两者均显示差异有显著性;定性及定量比较GnRH及GnRH mRNA在不同临床期别的宫颈癌组织中的表达情况,结果为GnRH定性表达率Ⅰ期50%(6/12),Ⅱa期85.7%(18/21),Ⅱb-期100%(12/12);GnRH mRNA定性表达率,Ⅰb期33.3%(4/12),Ⅱa期71.4%(15/21),Ⅱb-期83.3%(10/12);GnRH及GnRH mRNA在定性上表达有显著差别(P<0.05)。结论:宫颈鳞状细胞癌组织存在较高的GnRH,其有可能参与宫颈鳞状细胞癌发生、发展,为进一步研究通过抑制GnRH的产生,减少宫颈癌的发生及治疗宫颈癌提供了一定的理论基础。

人GnRH及其转运肽基因合成及鉴定

目的人工合成人GnRH及转运肽(TRS)基因。方法根据已发表的人GnRH基因mRNA序列以及转运肽(9个左旋精氨酸)基因核苷酸序列,设计一对核苷酸,再用含7mol/L尿素的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化,然后以这对核苷酸3′末端短互补序列退火、补齐,合成长达90bp的目的序列GnRH/TRS。将其亚克隆到pMD18T载体上,构建重组质粒pYC1。酶切鉴定筛选出阳性克隆pYC1,并测序。结果GnRH/TRS序列由90个核苷酸组成,扩增产物与原设计序列同源性达100%。结论已成功合成人GnRH/TRS基因,为进一步研究和应用奠定基础。

拮抗剂方案添加GnRH-α黄体支持治疗后妊娠结局研究

目的:探讨拮抗剂方案添加促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-α)行黄体支持对临床结局的影响。方法:回顾分析兰州大学第一医院生殖医学专科医院2017年1月至2017年12月252个拮抗剂方案新鲜周期移植后获临床妊娠的患者的临床资料。根据黄体支持方法不同,将患者分为黄体酮+地屈孕酮组128例,添加GnRH-α组124例(常规黄体酮+地屈孕酮支持的基础上于取卵后第6天加用1次曲普瑞林0.1mg)。比较两组的妊娠率、临床妊娠率、持续妊娠率、早期流产率、异位妊娠率、多胎妊娠率、胚胎种植率、卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率及活产率。结果:两组患者的平均年龄、不孕年限、基础内分泌情况、移植日子宫内膜厚度、移植胚胎数及移植胚胎级别均无统计学差异(P>0.05)。添加GnRH-α组的妊娠率、临床妊娠率及胚胎种植率均高于黄体酮+地屈孕酮组(P<0.05);两组的早期流产率、持续妊娠率、异位妊娠率、多胎妊娠率、OHSS发生率及活产率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组妊娠患者的血HCG、E2、PGN比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GnRH拮抗剂方案中,添加GnRH-α黄体支持方案可提高临床妊娠率及胚胎种植率,黄体期添加GnRH-α可作为黄体支持的新选择。

腹腔镜手术联合GnRh-a药物治疗子宫内膜异位伴不孕的临床研究

目的探讨腹腔镜手术联合促性腺激素释放激素激动剂(Gn Rh-a)药物治疗子宫内膜异位伴不孕的临床效果。方法回顾性分析2014年3月至2015年5月在东莞市人民医院接受治疗的85例子宫内膜异位伴不孕患者的临床资料,根据其治疗方式分为腹腔镜治疗组40例和联合治疗组45例(在腹腔镜手术后继续给予Gn Rh-a药物治疗2个月)。观察两组患者的治疗效果,比较两组患者治疗前后肝肾功能、术后1年复发率、妊娠分娩率和性生活质量的差异。结果联合治疗组治疗有效率为100.00%,高于腹腔镜治疗组的85.00%,差异有显著统计学意义(P<0.01);联合治疗组术后1年复发率为2.22%,低于腹腔镜治疗组的20.00%,1年内妊娠率为88.89%,高于腹腔镜治疗组的70.00%,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗前性生活质量得分比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,联合治疗组性生活质量得分高于腹腔镜治疗组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论腹腔镜联合Gn Rh-a药物治疗对子宫内膜异位伴不孕患者有较好的治疗效果,可明显提高患者的妊娠率,且无严重副作用,具有临床应用价值。

GnRH-A主动免疫公兔对垂体GnRHR、FSH-β和LH-β基因表达的影响

目的探讨GnRH-A激动剂(阿拉瑞林)主动免疫对公兔的去势效果和垂体GnRHR、FSH-β和LH-βmRNA表达的影响。方法 30只日本大耳白兔(Oryctolagus cuniculus)随机分为三组(n=10),在实验1组(EG-Ⅰ)和实验2组(EG-Ⅱ)颈部皮下注射1.0mL(100μg/mL)阿拉瑞林抗原乳剂EG-Ⅱ于20d以相同剂量重复注射1次,用荧光定量PCR分析垂体中GnRHR、FSH-β和LH-β mRNA的表达,并测定GnRHR的核苷酸序列。结果 EG-Ⅰ和EG-ⅡGnRH抗体水平高于对照组(P<0.05),EG-Ⅱ在49d达到峰值,显著高于EG-Ⅰ(P<0.05)和对照组(P<0.01),而后开始逐渐下降。28d以后,EG-Ⅱ和EG-Ⅰ血清睾酮浓度低于对照组(P<0.05),且EG-Ⅱ低于EG-Ⅰ(P<0.01);公兔GnRHR的核苷酸为1179bp,同源性达96%。结论阿拉瑞林免疫可以明显提高血清GnRH抗体水平,降低垂体GnRHR、FSH-β和LH-β基因表达,减少睾酮的合成与分泌,从而导致性器官发育受阻,具有明显的作用,加强免疫效果更佳。

GnRH激动剂主动免疫对GnRHR在腺垂体与子宫表达及分布的作用研究

目的探讨GnRH激动剂主动免疫对绵羊腺垂体与子宫GnRHR表达及分布的影响,为深入研究GnRH-A调节生殖功能的机理及合理应用提供依据。方法 28只5～6月龄健康母绵羊(Ovis aries)随机分为4组(n=7),实验Ⅰ组(EG-Ⅰ)、实验Ⅱ组(EG-Ⅱ)和实验Ⅲ组(EG-Ⅲ)于0 d和14 d分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg和400μg(0 d和14 d各1次);对照组(CG)皮下注射2.0 ml药物的溶媒(0 d和14 d各1次)。各组于70 d无菌切取腺垂体和子宫。提取腺垂体总RNA,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测GnRHR mRNA表达的变化,Western blotting分析子宫GnRHR蛋白表达,免疫组织化学SP法染色检测GnRHR表达的变化。结果 EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ腺垂体GnRHR mRNA表达量均低于对照组,以EG-Ⅲ最小(P<0.01)。与CG相比,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ子宫GnRHR蛋白表达水平分别减少3.46%、4.90%和24.78%(P<0.05)。子宫组织中有GnRHR分布主要见于子宫内膜细胞和子宫腺上皮细胞的胞质和胞核,EG-Ⅲ灰度值显著低于CG(P<0.05)。结论 GnRH激动剂主动免疫可以剂量依赖性地抑制垂体GnRHR mRNA和子宫组织中GnRHR蛋白的表达。GnRHR主要分布在子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞的胞核和胞质,GnRHR激动剂免疫对子宫中GnRHR的分布具有抑制作用。

GnRH-a治疗子宫内膜异位症对骨密度影响的系统评价

目的:评价促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)治疗子宫内膜异位症对骨密度影响。方法:检索Cochrane Library、MEDLINE、EMBASE、中国生物医学文献数据库、CBM、CNKI等。纳入GnRH-a治疗子宫内膜异位症的随机对照试验,对其方法学质量进行评价。用RevMan 4.2.10软件进行统计分析。结果:①GnRH-a组骨密度和骨丢失率明显大于反加疗法[RR=0.03,95%CI(0.01,0.06),P<0.05;RR=1.86,95%CI(1.11,2.61),P<0.01]。其余描述性研究支持上述结果,认为两组差异有统计学意义(P<0.05)。GnRH-a组骨密度减少大于孕激素组(P<0.05)。②GnRH-a组药物副反应比反加疗法组大(P<0.05),雌激素水平也比反加疗法组下降多(P<0.01),在缓解疼痛上与反加疗法组差异无统计学意义(P>0.05)。GnRH-a组在缓解疼痛、药物副反应方面同孕激素组差异均无统计学意义。结论:目前研究认为GnRH-a组与反加疗法组、孕激素组在缓解子宫内膜异位症疼痛上效果相同,GnRH-a组所致骨密度下降大于其余两组。反加疗法组能降低GnRH-a所致骨密度下降及潮热等副反应,为长期和反复治疗提供了一个较好方案。但纳入研究质量不高、样本量小,有必要设计和实施严密、科学的多中心、大样本、高质量的随机双盲临床对照试验研究来进一步验证。

GnRH-A促进雌兔FSH与LH分泌及卵巢发育的作用

目的探讨GnRH类似物(GnRH-A)对FSH与LH分泌及卵巢发育的影响,及GnRH-A调节生育的机制。方法 24只雌兔均分为实验Ⅰ组(EG-Ⅰ)、Ⅱ组(EG-Ⅱ)、Ⅲ组(EG-Ⅲ)和对照组(CG)(n=6),实验组分别于颈背侧皮下注射0.1、0.1和0.05 g/L GnRH-A抗原1.0 mL,EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组于20 d加强注射1次。ELISA法测定血清FSH和LH含量。于70 d无菌切取卵巢,光镜和电镜观察。结果 40 d时EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组血清FSH和LH浓度均达到峰值,明显高于EG-Ⅰ和CG组的FSH和LH(P<0.01),且EG-Ⅱ组高于EG-Ⅲ组(P<0.05)。EG-Ⅱ组和EG-Ⅲ组卵巢皮质变厚,卵泡纵径和横径均增大,且与剂量相关。实验组卵巢卵泡数增加,生长加快。细胞核、线粒体和线粒体嵴变大,细胞质中的皮质颗粒和分泌物增多,透明带和微绒毛变大。结论 GnRH-A能促进FSH和LH的合成及卵巢与卵泡的发育,加强注射效果更明显。

GnRH-A免疫与母兔生殖激素浓度的变化

目的探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)对动物生殖功能调节的效果和作用机制。方法 24只日本大耳白兔分为四组,分别在实验Ⅰ组(EG-I)、实验Ⅱ组(EG-II)和实验III(EG-III)组兔的颈背侧注射1.0 mL(100、100和50μg/mL)GnRH-A抗原,实验II组和实验III组于第3周以原剂量加强注射一次,用ELISA法测定血清GnRH抗体效价、促卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)含量。结果注射GnRH-A后10 d实验组兔均出现GnRH抗体,而对照组未检测到;EG-I在第30天达到高峰,而EG-II和EG-III于40～50 d至峰值,但在实验结束时(70 d)实验组均高于对照组,40～70 d时EG-II显著高于EG-I和EG-III。30～50 d时EG-II的LH明显高于EG-I和EG-III及对照组。EG-II和EG-III的FSH浓度在40 d达到峰值,但EG-II高于EG-I、对照组及EG-III,EG-I和对照组无显著差异。结论兔体内注射GnRH-A可以明显提高GnRH抗体效价,增强LH和FSH的合成与分泌,加强注射效果更明显,且与注射剂量相关,持续时间为40 d左右。

长短日照下绍鸭性成熟时间,下丘脑GnRH-I、POMC和NPY mRNA表达的差异

利用长日照和短日照环境调控绍鸭的性成熟时间,并采用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法, 检测两种日照组(n=6)鸭性成熟过程中下丘脑促性腺激素释放激素-Ⅰ(GnRH-Ⅰ)、阿片促黑激素皮质素 原(POMC)和神经肽Y(NPY)mRNA表达的发育性变化及日龄间差异。结果表明,长日照组性成熟时间较短 日照组提前30d。RT-PCR结果显示,两组鸭下丘脑GnRH-Ⅰ mRNA的发育性表达模式相似,从出雏至性成熟 过程中,其表达水平呈逐渐增加趋势;长日照组下丘脑GnRH-Ⅰ mRNA表达丰度均高于同日龄短日照组,并于 120日龄时其差异达显著水平。两组POMC mRNA的表达丰度呈现先增加后降低趋势,于性成熟前后显著下降; 日照长度对其基因表达具有显著影响。两组NPY mRNA表达水平分别于60和90日龄时显著升高,于性成熟时 显著下降,但光照对其基因表达无显著影响。下丘脑GnRH-Ⅰ基因表达的显著上调可能是禽类性成熟启动的关 键因素,也是长日照条件下绍鸭性早熟的主要原因;GnRH-Ⅰ表达的上调与下丘脑POMC和NPY mRNA表达变 化有关。

GnRH-A免疫对兔去势效果的实验研究

探讨促性腺激素释放激素类似物（GnRH—A）对动物免疫去势的效果和作用机理。用自制的GnRH—A抗原乳剂在30只兔（EG-I与EG-Ⅱ组）的颈背部皮下分2～3点注射1．0mL（100／lg·mL^-1）GnRH—A抗原，EG-Ⅱ组3周后加强免疫1次。测定睾丸长度和质量，体质量变化，GnRH抗体效价与血清睾酮浓度。制备的抗原无菌性、安全性和物理性状良好，EG-Ⅱ组睾丸长度与EG-I组差异极显著（P〈o．01）；EG-Ⅱ组的抗体水平也明显高于EG-I组；免疫注射后2个试验组与对照组的血清睾酮浓度差异逐渐增加，102d时EG-Ⅱ组血清睾酮浓度极显著低于对照组（P〈0．01），且第28天后EG-Ⅱ组显著低于EG-I组（P〈O．05）；EC-Ⅱ组雄兔的体质量和平均日增质量均最大，显著高于EG-I组和对照组（P〈O．05）。GnRH—A免疫家兔对睾丸发育、血清GnRH抗体效价和睾酮浓度具有显著的影响，加强免疫效果更理想。

牙鲆促性腺激素释放激素基因cGnRH-Ⅱ和sbGnRH的克隆与表达特征分析

采用RACE和RT-PCR方法,从牙鲆脑组织中克隆获得了两种牙鲆促性腺激素释放激素cGnRH-Ⅱ（DQ008580）和sbGnRH（DQ074693）的cDNA全基因序列,其长度为607 bp和395 bp,分别编码85和98个氨基酸的GnRH前体,均包含一个信号肽、具有活性的GnRH十肽和一个由蛋白水解位点（Gly-Lys-Arg）连接的GnRH相关肽.氨基酸同源性比较表明,牙鲆促性腺激素释放激素cGnRH-Ⅱ与其他鱼类的cGnRH-Ⅱ基因有较高的同源性,如与鲽科鱼类条斑星鲽的相似性为97.6%,但与哺乳类、爬行类和两栖类动物的同源性较低;sbGnRH与条斑星鲽的相似性为86.7%.采用RT-PCR方法分析了两种GnRH基因在成熟牙鲆个体中的表达,结果表明该两基因在脑区、垂体和性腺中皆有表达,但sbGnRH基因的体内表达部位稍多于cGnRH-Ⅱ.

GnRH拮抗剂方案与激动剂方案在多囊卵巢综合征高反应患者的临床应用比较

目的探讨促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-ant)方案与促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)长方案在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)高反应患者的临床运用及疗效比较。方法回顾性分析2015年1月至2017年12月在本中心行体外受精胚胎移植或卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)的PCOS高反应患者,获卵数>20个,预防中重度卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)取消新鲜移植后行冷冻周期移植的共727个周期,其中GnRH-ant方案163个周期,GnRH-a长方案564个周期。比较两组患者的临床资料及临床疗效。结果 GnRH-ant方案组Gn用量、Gn天数、获卵数、成熟卵子数、正常受精率明显低于GnRH-a长方案组(P <0.05);GnRH-ant方案组优胚率显著高于GnRH-a长方案组(P <0.05)。两组中成熟卵子率、优胚数、重度OHSS发生率、ET日内膜厚度、临床妊娠率、生化妊娠率、种植率、活产率、流产率、宫外孕率、早产率及低出生体重周期率等差异均无统计学意义(P> 0.05)。结论对于PCOS高反应获卵数>20个的患者,GnRH-ant方案比GnRH-a长方案能在减少Gn用量,缩短Gn时间的前提下获得更高的优胚率;联合冻融胚胎移植,GnRH-ant方案组妊娠结局与GnRH-a长方案相当;在使用HCG扳机的前提下,GnRH-ant方案在降低中重度OHSS发生率方面未能体现优势。

黄鳝cGnRH-Ⅱ的cDNA克隆与序列分析

促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是一个保守的十肽神经家族激素,在脊椎动物的性腺发育和繁殖功能的维持方面起着重要的调控作用。本文通过运用RACE和RT-PCR方法,从黄鳝脑组织中克隆得到cGnRH-ⅡcDNA全序列,其核苷酸序列长度为617bp。该cDNA编码的cGnRH-Ⅱ的前体氨基酸序列结构组成与其他物种的cGnRH-Ⅱ前体结构一致,其推导的蛋白前体长度为83个氨基酸,包括一个信号肽、cGnRH-Ⅱ十肽和一个由蛋白水解位点(Gly-Lys-Arg)连接的GnRH联接肽,其中信号肽和联接肽的长度分别为21和49个氨基酸。cGnRH-Ⅱ的氨基酸序列和其他相关物种cGnRH-Ⅱ氨基酸序列比较结果显示,cGnRH-ⅡcDNA的蛋白编码区高度保守,而非编码区的保守性程度很低。