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高表达抗β2糖蛋白I(β2GPI)自身抗体可加重结缔组织病炎症程度及免疫功能紊乱
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作者 万磊 刘健 黄传兵 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期532-537,共6页
目的 观察抗β2糖蛋白I(β2GPI)自身抗体在结缔组织病表达及其与炎症及免疫功能的关系。方法 观察对象为广义结缔组织病患者,包括结缔组织病(CTD)、类风湿性关节炎(RA)、干燥综合征(SS)和系统性红斑狼疮(SLE)。采用化学发光法进行定量... 目的 观察抗β2糖蛋白I(β2GPI)自身抗体在结缔组织病表达及其与炎症及免疫功能的关系。方法 观察对象为广义结缔组织病患者,包括结缔组织病(CTD)、类风湿性关节炎(RA)、干燥综合征(SS)和系统性红斑狼疮(SLE)。采用化学发光法进行定量检测抗β2GPI。采用魏氏法检测血沉(ESR),采用全自动生化分析仪检测C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)和抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体。结果 RA患者抗β2GPI抗体及其亚型较CTD、 SS、 SLE患者均明显升高。结缔组织病患者中CRP与抗β2GPI抗体、抗β2GPI抗体IgM呈正比。ESR与抗β2GPI抗体呈正比。与CRP正常组比较,CRP异常组抗β2GPI抗体、抗β2GPI抗体IgM升高。与ESR正常组比较,ESR异常组抗β2GPI抗体、抗β2GPI抗体IgG升高。RA患者中抗β2GPI抗体与ESR、抗CCP抗体呈正相关。抗β2GPI抗体IgG与RF呈正相关。结论 抗β2GPI抗体水平可作为结缔组织病炎症程度和评估免疫紊乱的一个预测因子。 展开更多
关键词 β2糖蛋白I(β2gpi) 结缔组织病 炎症程度 免疫功能 类风湿性关节炎
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数据驱动的人体正常和癌症组织中糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白(GPI-AP)相关基因表达谱的综合分析
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作者 孔维泽 柳艺石 +1 位作者 高晓冬 藤田盛久 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期669-683,共15页
人体细胞中含有超过146种GPI锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol-anchored protein,GPI-AP),包括受体、配体、粘附分子和酶等。这些蛋白通过GPI锚定在细胞膜表面的脂筏中,发挥多种重要生物学功能。目前,已经对GPI锚定蛋白的生物合... 人体细胞中含有超过146种GPI锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol-anchored protein,GPI-AP),包括受体、配体、粘附分子和酶等。这些蛋白通过GPI锚定在细胞膜表面的脂筏中,发挥多种重要生物学功能。目前,已经对GPI锚定蛋白的生物合成开展了大量研究,其中GPI-AP的生物合成包括至少20步反应,已鉴定出超过40个GPI-AP合成相关基因,但是仍缺乏对于GPI-AP相关基因在正常组织与癌症组织中表达调控的研究。本研究利用来自于TCGA数据库和GTEx portal的基因表达数据,同时结合使用GlycoMaple糖基化通路分析工具,对正常组织与癌症组织中参与GPI-AP合成和编码GPI-AP的基因的表达情况进行了全面分析。研究发现,与正常组织相比,在早期胶质瘤、多形性胶质母细胞瘤、胰腺癌、睾丸生殖细胞癌、原发性皮肤黑色素瘤和转移性皮肤黑色素瘤中,参与GPI-AP合成的基因表达发生了显著变化,其中PIGY在这6种癌症中表达量均有上升。此外,GPI锚定蛋白编码基因CD14在这6种癌症中的表达量上升。GPI锚定蛋白编码基因GAS1、GPC2、GPC4仅在早期胶质瘤和多形性胶质母细胞瘤中表达量上升,说明部分GPI锚定蛋白如GAS1等可以作为早期胶质瘤和多形性胶质母细胞瘤生物标志物。本研究为GPI-AP相关基因在正常组织与癌症组织中的表达情况提供了新的见解,为GPI-AP作为生物标志物的开发打下了坚实基础。 展开更多
关键词 糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白(gpi-AP) TCGA 癌症 胶质瘤 标志物
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GPI功能在演播室中的应用研究
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作者 朱军伟 《中国传媒科技》 2023年第7期146-149,共4页
【目的】完善电视转播和录制工作的安全性,提高工作便利性。【方法】利用广播电视设备的GPI接口进行设备GPI功能配置、连接与控制运行。【结果】具备GPI接口的调音台、视频切换台和视音频周边设备通过GPI输入、输出触发可以完成对相关... 【目的】完善电视转播和录制工作的安全性,提高工作便利性。【方法】利用广播电视设备的GPI接口进行设备GPI功能配置、连接与控制运行。【结果】具备GPI接口的调音台、视频切换台和视音频周边设备通过GPI输入、输出触发可以完成对相关设备某项动作的遥控控制。【结论】GPI控制功能的应用,可以确保广播电视设备之间安全、易行的控制,保障电视转播和录制的安全优质播出。 展开更多
关键词 gpi 视频切换台 调音台 基带架构视频系统设计
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MAPKs在anti-β_2 GPI/β_2 GPI刺激THP-1细胞表达TF过程中的作用探讨 被引量:2
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作者 陈东东 周红 +4 位作者 解鸿翔 张先梅 夏龙飞 王婷 王海波 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期99-103,共5页
目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)在anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的活化及其作用。方法:利用荧光定量PCR(Real-time PCR)、TF活性试剂盒等分别检测anti-β2 ... 目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)在anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的活化及其作用。方法:利用荧光定量PCR(Real-time PCR)、TF活性试剂盒等分别检测anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF mRNA及TF活性,Western blot检测细胞表达p38、磷酸化-p38(p-p38)、ERK1/2、磷酸化-ERK1/2(p-ERK1/2)、JNK、磷酸化-JNK(p-JNK)的情况。进一步采用p38、ERK1/2、JNK抑制剂(SB203580、U0126、SP600125)观察是否能阻断anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF。结果:Anti-β2 GPI/β2 GPI复合物(100μg/ml)能够显著增强THP-1细胞表达TF,并使p-p38、p-ERK1/2、p-JNK水平显著升高(P<0.05 vs control);其引发的MAPKs磷酸化具有时间效应性,均在刺激30分钟时达到高峰;对应的特异抑制剂SB203580(10μmol/L)、U0126(5μmol/L)、SP600125(90 nmol/L)单独或合并处理THP-1细胞后,anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导细胞TF mRNA表达及TF活性的效应明显被阻断(P<0.01 vs control)。结论:Anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF过程中,MAPKs被激活进而发挥重要作用。 展开更多
关键词 抗磷脂综合征 Anti-β2 gpi/β2 gpi 丝裂原活化蛋白激酶 组织因子
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EGCG干预抗β_2GPI/β_2GPI复合物对THP-1细胞的诱导活化作用 被引量:2
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作者 王婷 周红 +2 位作者 解鸿翔 夏龙飞 穆原 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期430-433,共4页
目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1细胞)活化的作用。方法用一定剂量的EGCG、脂多糖(LPS)、抗β2GPI/β2GPI复合物等不同刺激物处理THP-1细胞,实时荧光定量PCR检... 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1细胞)活化的作用。方法用一定剂量的EGCG、脂多糖(LPS)、抗β2GPI/β2GPI复合物等不同刺激物处理THP-1细胞,实时荧光定量PCR检测细胞组织因子(TF)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达;发色底物法检测TF活性;ELISA测定TNF-α蛋白的表达。结果 50 mg/L EGCG能抑制抗β2GPI/β2GPI复合物刺激的THP-1细胞TF mRNA和活性的表达(t值为6.97、3.89,P均<0.05),同时下调该复合物诱导的THP-1细胞TNF-αmRNA和蛋白质的表达水平(t值为3.23、4.65,P均<0.05)。结论 EGCG可干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞TF及TNF-α的表达,抑制THP-1细胞活化。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 抗β2gpi β2gpi复合物 组织因子 人急性单核细胞白血病细胞系 肿瘤坏死因子-Α
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GPI锚——一种复杂的蛋白质翻译后修饰 被引量:1
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作者 李庆伟 宋涛 +2 位作者 勾萌 滕洪明 卢佳丽 《辽宁师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2019年第2期215-222,共8页
糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol-anchored proteins,GPI-APs)是一种在真核生物细胞膜表面普遍存在的蛋白质,最大特点是没有跨膜结构域和胞质尾区,通过翻译后修饰产生的GPI结构锚定在细胞膜上.GPI锚结构复杂,由磷... 糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol-anchored proteins,GPI-APs)是一种在真核生物细胞膜表面普遍存在的蛋白质,最大特点是没有跨膜结构域和胞质尾区,通过翻译后修饰产生的GPI结构锚定在细胞膜上.GPI锚结构复杂,由磷酸氨基乙醇联结部、核心糖链和磷酸肌醇尾组成.核心糖链中的甘露糖、葡萄糖胺、磷酸肌醇残基可不同程度地被磷酸氨基乙醇和其他糖类修饰.尽管被精确解析出的GPI锚结构还较少,但已在分子水平上证明GPI锚具有非常多样的生物学功能,如信号传导、细胞黏附、蛋白质转运和免疫反应等等.近年来,由于实验技术的进步,GPI锚的相关研究也在逐步深入.对GPI锚独特的翻译后修饰及其功能的最新研究进行分析归纳. 展开更多
关键词 糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白 gpi锚结构 gpi锚功能 信号传导
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在CVI环境下开发基于GPIB总线的自动测试系统示例 被引量:5
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作者 程刚 谢弛 《电测与仪表》 北大核心 2003年第2期28-30,共3页
介绍了系统的组成,论述了在windows环境下采用LabWindows/CVI平台开发基于GPIB总线的自动测试系统实例。
关键词 gpiB总线 LabWindows/CV gpiB接口
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GPI锚的结构、功能及GPI锚定B7分子在肿瘤免疫治疗中的应用 被引量:7
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作者 熊茂林 《国外医学(免疫学分册)》 2003年第5期230-233,共4页
GPI锚定蛋白是一种通过GPI结构锚定于细胞膜表面而不跨越其磷脂膜双层的蛋白。利用GPI结构能将目的蛋白B7(CD80 )分子直接整合到肿瘤细胞表面 ,因为不需要自身合成B7,克服了传统基因转导法诸如基因转染效率低又耗时 ,以及转染后可能不... GPI锚定蛋白是一种通过GPI结构锚定于细胞膜表面而不跨越其磷脂膜双层的蛋白。利用GPI结构能将目的蛋白B7(CD80 )分子直接整合到肿瘤细胞表面 ,因为不需要自身合成B7,克服了传统基因转导法诸如基因转染效率低又耗时 ,以及转染后可能不表达等缺点 ,肿瘤细胞提供了共刺激信号激发免疫系统 ,诱导抗肿瘤免疫 ,在临床应用上有广阔的前景。 展开更多
关键词 gpi gpi锚定蛋白 B7 肿瘤 免疫治疗
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中草药添加剂饲喂猪肉中CPK,GPI活性和肉质关系的研究 被引量:18
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作者 韩剑众 董文明 +2 位作者 葛长荣 高士争 黄启超 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第1期91-93,共3页
对添加中草药和常规抗生素试验猪的背最长肌进行相关酶测定 ,发现磷酸肌酸激酶 (CPK) ,磷酸葡萄糖异构酶 (GPI)的活性 ,试验组明显高于对照组 ,分别提高了 30 5 4 %和 2 0 0 4 % (P <0 0 5 ) .屠宰及肉质试验表明 ,试验组的瘦肉... 对添加中草药和常规抗生素试验猪的背最长肌进行相关酶测定 ,发现磷酸肌酸激酶 (CPK) ,磷酸葡萄糖异构酶 (GPI)的活性 ,试验组明显高于对照组 ,分别提高了 30 5 4 %和 2 0 0 4 % (P <0 0 5 ) .屠宰及肉质试验表明 ,试验组的瘦肉率及眼肌面积分别比对照组提高 5 79%和 8 4 8% (P <0 0 5 ) ,而脂肪率、膘厚、失水率和贮存损失则分别下降 31 4 0 % ,2 8 2 1% ,5 0 0 3%和 2 0 35 % (P <0 0 5 ) . 展开更多
关键词 肉质 中草药添加剂 肥育 胴体品质 磷酸肌酸激酶 CPK 磷酸葡萄糖异构酶 gpi
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B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗安全性及抗肿瘤效应研究 被引量:4
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作者 何向锋 王净 +6 位作者 余方流 赵枫姝 蔡凯 张洪义 陈峻崧 陈登宇 窦骏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期779-782,共4页
目的:评估B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗用于C57BL/6小鼠的安全性及其诱导的抗肿瘤免疫效应。方法:应用免疫荧光、FCM检测瘤苗细胞ESAT-6-GPI的表达情况;以Western blot方法检测瘤苗细胞IL-21的表达情况;动物实验检测瘤苗体内应用的安全... 目的:评估B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗用于C57BL/6小鼠的安全性及其诱导的抗肿瘤免疫效应。方法:应用免疫荧光、FCM检测瘤苗细胞ESAT-6-GPI的表达情况;以Western blot方法检测瘤苗细胞IL-21的表达情况;动物实验检测瘤苗体内应用的安全性;制备荷瘤鼠术后免疫模型,评价瘤苗免疫效果。结果:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞表面有靶抗原ESAT-6-GPI表达,并分泌IL-21。于C57BL/6小鼠皮下接种2×105个B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞,60天内未见致瘤,但能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应。结论:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗致瘤性明显下降,低剂量应用具有安全性,能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应。 展开更多
关键词 B16F10细胞 IL-21 ESAT-6 gpi 肿瘤疫苗
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IL-21 gpi和sGM-CSF共同修饰的瘤苗构建及其抗肿瘤效应 被引量:4
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作者 赵枫姝 胡卫华 +5 位作者 窦骏 褚莉莉 何向锋 余方流 吴昀 刘春生 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期508-512,共5页
目的:构建膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF(sGM-CSF)双表达瘤苗,并对其抗肿瘤效应及其机制作初步探讨。方法:用分子生物学方法构建双表达IL-21 gpi和sGM-CSF重组质粒,将鉴定过的重组质粒以脂质体转染B16F10细胞制成瘤苗,用流式细胞仪检测转... 目的:构建膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF(sGM-CSF)双表达瘤苗,并对其抗肿瘤效应及其机制作初步探讨。方法:用分子生物学方法构建双表达IL-21 gpi和sGM-CSF重组质粒,将鉴定过的重组质粒以脂质体转染B16F10细胞制成瘤苗,用流式细胞仪检测转染瘤苗IL-21 gpi和sGM-CSF的表达。以瘤苗治疗荷瘤鼠,经观察小鼠肿瘤体积、生存率来分析瘤苗的抗瘤性,并检测了瘤苗治疗鼠的细胞免疫活性。结果:正确构建了pRSC/IL-21 gpi-sGM-CSF重组质粒,转染细胞可很好地表达膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF,制备的瘤苗能有效地发挥抗肿瘤效应,其机制与瘤苗治疗鼠的脾细胞增殖活性、NK细胞及CD8+细胞细胞毒活性增强有关。结论:成功构建了具有抗肿瘤活性的膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF双表达瘤苗,为进一步抗肿瘤免疫治疗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 瘤苗 IL-21 gpi GM-CSF
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β_2GPI/抗β_2GPI抗体复合物激活THP-1细胞内TRIF途径 被引量:5
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作者 解鸿翔 周红 +5 位作者 王海波 陈东东 王婷 张先梅 夏龙飞 穆原 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1280-1283,1287,共5页
目的:观察β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能否激活单核细胞株THP-1的TRIF途径,以探讨TRIF依赖途径在抗磷脂综合征(APS)发病机制中的作用。方法:采用一定剂量β2GPI/抗β2GPI抗体复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,荧光定量... 目的:观察β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能否激活单核细胞株THP-1的TRIF途径,以探讨TRIF依赖途径在抗磷脂综合征(APS)发病机制中的作用。方法:采用一定剂量β2GPI/抗β2GPI抗体复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞TRIF mRNA水平,Western blot检测细胞TRIF蛋白表达情况;进一步观察TLR4途径抑制剂-TAK-242是否干预β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对TRIF的诱导表达以及相关细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α的表达。结果:β2GPI/抗β2GPI抗体复合物(100 mg/L)能够诱导THP-1细胞表达TRIF(mRNA及蛋白),并显示时间效应,分别于刺激1 h和2 h时TRIF mRNA及蛋白表达至高峰。TAK-242(5μmol/L)能够明显抑制β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对THP-1细胞TRIF的诱导表达,同时抑制IL-6、IL-8、TNF-α等炎症因子的表达。结论:TRIF依赖的TLR4途径参与了β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对THP-1细胞的激活,提示其在抗磷脂综合征的病理机制中发挥一定作用。 展开更多
关键词 抗磷脂综合征 β2gpi/抗β2gpi抗体 TLR4 TRIF 炎症因子
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抗β2GPI抗体促进载脂蛋白E缺陷小鼠血管炎症及血栓相关分子的表达 被引量:10
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作者 朱晓洁 周红 +5 位作者 王晓燕 蔡谦谦 何超 夏龙飞 张贵婷 欧阳航 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期295-299,共5页
目的探讨抗β2糖蛋白I(β2GPI)抗体在载脂蛋白E缺陷(ApoE^(-/-))小鼠表达动脉粥样硬化相关炎症因子和血栓相关分子过程中的作用。方法将ApoE^(-/-)小鼠实施颈动脉套环手术后,随机分为生理盐水组、100μg抗β2GPI抗体组、100μg同源对照... 目的探讨抗β2糖蛋白I(β2GPI)抗体在载脂蛋白E缺陷(ApoE^(-/-))小鼠表达动脉粥样硬化相关炎症因子和血栓相关分子过程中的作用。方法将ApoE^(-/-)小鼠实施颈动脉套环手术后,随机分为生理盐水组、100μg抗β2GPI抗体组、100μg同源对照抗体(兔IgG)组以及100μgβ2GPI/抗β2GPI抗体复合物组。各组均给以高脂饮食,且每7 d腹腔注射1次相应刺激剂,6周后处死小鼠。采用HE染色观察套环侧颈动脉阻塞情况,并以免疫组织化学染色检测套环侧颈动脉TLR4、组织因子(TF)和冯·维勒布兰德因子(vWF)的表达。采用实时荧光定量PCR检测主动脉的白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA水平。结果 HE染色结果显示抗体组阻塞最为明显,免疫组织化学染色结果显示抗体组套环侧颈动脉TLR4、TF和vWF表达上调,抗体组主动脉IL-1β和TNF-α的mRNA水平明显高于其他3组。结论抗β2GPI抗体通过上调小鼠动脉血管表达炎症因子IL-1β和TNF-α,血栓相关分子TF和vWF以及TLR4的表达,促进动脉粥样斑块形成。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 抗β2gpi抗体 炎症 组织因子 冯·维勒布兰德因子
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TRAF6在抗β_2GPI/β_2GPI复合物诱导THP-1细胞表达组织因子时的活化 被引量:3
14
作者 许国莹 周红 +4 位作者 文海平 郭东琳 周芳 陈东东 解鸿翔 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期487-490,共4页
目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在抗β2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:采用一定剂量抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,实时定量PCR检测细胞TF mRN... 目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在抗β2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:采用一定剂量抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,实时定量PCR检测细胞TF mRNA水平,发色底物法检测细胞TF活性;RT-qPCR及Western blot分别检测细胞TRAF6mRNA和蛋白表达情况;进一步采用蛋白酶体抑制剂MG-132,观察是否能够干预抗β2GPI/β2GPI复合物对细胞的刺激效应。结果:抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg/L)能够刺激THP-1细胞表达TF mRNA及活性,与对照相比差异显著(P<0.05);使细胞TRAF6 mRNA和蛋白表达均增加,并显示时间相关性,分别在刺激15 min和30 min时表达至高峰;MG-132(5μmol/L)明显抑制抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg/L)对THP-1细胞TRAF6 mRNA和蛋白的刺激效应及TF的诱导表达。结论:抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF过程中,TRAF6被激活并发挥重要作用。 展开更多
关键词 抗磷脂综合征 抗β2gpi/β2gpi tumor NECROSIS factor receptor-associated factor6 组织因子
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抗β_2GPI/β_2GPI复合物激活THP-1细胞表达炎性相关因子 被引量:5
15
作者 王海波 周红 +4 位作者 解鸿翔 王婷 穆原 陈东东 夏龙飞 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期347-350,共4页
目的探讨抗β2糖蛋白I(抗β2GPI)自身抗体与β2糖蛋白I(β2GPI)复合物刺激单核细胞株THP-1表达炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α及可能机制。方法用荧光定量PCR法检测抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞不同时间(0.5、1、1.5、2、6 h)后IL-6... 目的探讨抗β2糖蛋白I(抗β2GPI)自身抗体与β2糖蛋白I(β2GPI)复合物刺激单核细胞株THP-1表达炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α及可能机制。方法用荧光定量PCR法检测抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞不同时间(0.5、1、1.5、2、6 h)后IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达,用免疫荧光染色法及western blot观察THP-1细胞表达IL-6、IL-8、TNF-α蛋白的情况。荧光定量PCR及western blot观察Toll样受体4(TLR4)途径抑制物(TAK-242)干预抗β2GPI/β2GPI复合物对THP-1细胞的刺激作用。结果抗β2GPI/β2GPI复合物(100μg/mL)刺激THP-1细胞不同时间,可使细胞表达IL-6、IL-8及TNF-αmRNA水平逐渐上升,于刺激2 h时IL-6、IL-8及TNF-α达到峰值(P<0.01),免疫荧光染色及western blot证实细胞表达IL-6、IL-8及TNF-α蛋白水平也明显增加。TAK-242(5μmol/L)可显著抑制抗β2GPI/β2GPI复合物诱导的细胞IL-6、IL-8及TNF-α表达。结论抗β2GPI/β2GPI复合物通过TLR4途径,激活THP-1细胞表达炎性细胞因子IL-6、IL-8及TNF-α,参与抗磷脂综合征的病理机制。 展开更多
关键词 抗磷脂综合征 抗β2gpi/β2gpi复合物 TOLL样受体4 炎性因子 THP-1细胞
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oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促进人脐静脉内皮细胞黏附分子表达的机制 被引量:7
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作者 张贵婷 周红 +4 位作者 何超 陈芋丹 欧阳航 张鹏 王韧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1472-1478,共7页
目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达黏附分子的影响,以及Toll样受体4(TLR4)信号通路在其中发挥的作用。方法用单纯培养基、oxLDL、oxLDL/β2GPI... 目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达黏附分子的影响,以及Toll样受体4(TLR4)信号通路在其中发挥的作用。方法用单纯培养基、oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、oxLDL/抗β2GPI抗体复合物、oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、LPS分组刺激HUVEC,收集总RNA和蛋白,利用实时定量PCR和Western blot法检测细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管黏附分子1(VCAM-1)和冯·维勒布兰德因子(v WF)的mRNA和蛋白水平;采用TLR4阻断剂TAK-242(5μmol/L)或p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)阻断剂SB203580(10μmol/L)预处理的方式,探索阻断TLR4通路后,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对HUVEC黏附分子表达的影响,通过THP-1细胞黏附实验检测oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对HUVEC黏附能力的影响。结果与培养基对照组相比,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够显著提高HUVEC的ICAM-1、VCAM-1和v WF表达,并且能够增强HUVEC对THP-1细胞的黏附,TAK-242或SB203580处理能够抑制该过程。结论 oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够增强HUVEC的黏附分子表达和对THP-1细胞的黏附,TLR4和p38MAPK与该过程密切相关。 展开更多
关键词 oxLDL/β2gpi/抗β2gpi抗体复合物 Toll样受体4(TLR4) 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 黏附分子
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SEA基因与GPI信号肽序列融合基因的真核表达载体的构建和序列分析 被引量:3
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作者 易平勇 余海 马文学 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期343-346,共4页
目的 将超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A (staphylococcusenterotoxinA ,SEA)基因与人胎盘碱性磷酸酶(hPLAP 1 )C末端信号肽序列 ,即糖基化磷脂酰肌醇 (glycosyl phosphatidylinositol,GPI)附着信号序列 ,拼接成融合基因 ,并构建该融合基... 目的 将超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A (staphylococcusenterotoxinA ,SEA)基因与人胎盘碱性磷酸酶(hPLAP 1 )C末端信号肽序列 ,即糖基化磷脂酰肌醇 (glycosyl phosphatidylinositol,GPI)附着信号序列 ,拼接成融合基因 ,并构建该融合基因的真核表达载体。方法 利用基因SOEing法 ,分别扩增hPLAP 1C末端信号肽序列和SEA基因 ,然后将二段基因拼接起来 ,拼接后与pGEM T克隆载体连接 ,再亚克隆到真核表达载体pcDNA3 .1 (+)中 ,测序鉴定。结果 分别成功扩增出hPLAP 1C末端信号肽序列 1 31bp和SEA基因 789bp ,并将二段基因序列成功拼接 (90 1bp) ,且成功构建了真核表达载体pcDNA3 .1 (+) /SEA GPI,经测序是正确的。结论 真核表达载体pcDNA3 .1 (+) /SEA GPI的构建 ,为研究SEA GPI抗肿瘤作用奠定了基础。 展开更多
关键词 SEA基因 gpi信号肽序列 融合基因 真核表达载体 构建 序列分析 肿瘤
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GPI基因突变致葡萄糖磷酸异构酶缺乏症1例报告并文献复习 被引量:3
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作者 黄鹏 唐黎 +5 位作者 汪爱平 刘玲娟 熊洁 肖阳阳 毛定安 刘利群 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期785-788,共4页
目的探讨葡萄糖磷酸异构酶(GPI)缺乏症的临床特点及致病基因。方法回顾分析1例GPI缺乏症患儿的临床资料,并复习相关文献。结果患儿,男,4岁3月龄。自出生起反复出现贫血、黄疸,伴有肝脾肿大、膝关节疼痛、大运动发育落后;葡萄糖-6-磷酸... 目的探讨葡萄糖磷酸异构酶(GPI)缺乏症的临床特点及致病基因。方法回顾分析1例GPI缺乏症患儿的临床资料,并复习相关文献。结果患儿,男,4岁3月龄。自出生起反复出现贫血、黄疸,伴有肝脾肿大、膝关节疼痛、大运动发育落后;葡萄糖-6-磷酸脱氧酶、丙酮酸激酶、血红蛋白电泳、直接抗人球蛋白试验、红细胞脆性试验及骨髓细胞学检查均未见异常;膝关节磁共振示双膝关节少量积液并滑膜炎。全外显子测序显示患儿GPI基因6号外显子存在纯合错义变异c.553T>A(F185 I),Sanger测序验证分别来自其父母,为未见报道的新发变异。该变异为致病性变异。结论GPI缺乏症为罕见的常染色体隐性遗传病,早期行基因检测可协助诊断。 展开更多
关键词 葡萄糖磷酸异构酶缺乏症 gpi基因 溶血性贫血 基因突变
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Toll样受体4在β2GPI诱导小鼠骨髓来源树突状细胞成熟过程中的作用 被引量:5
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作者 刘敬敬 周红 +5 位作者 解鸿翔 胥亚 张晓蕾 孔祥民 谢娅超 何超 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期15-18,共4页
目的探讨Toll样受体4(TLR4)在β2糖蛋白I(β2GPI)诱导小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)成熟过程中的作用。方法体外联合使用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)诱导TLR4正常(C3H/HeN)及TLR4缺陷(... 目的探讨Toll样受体4(TLR4)在β2糖蛋白I(β2GPI)诱导小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)成熟过程中的作用。方法体外联合使用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)诱导TLR4正常(C3H/HeN)及TLR4缺陷(C3H/HeJ)小鼠的骨髓细胞为未成熟树突状细胞(iDC)。用β2GPI或LPS(阳性对照)对iDC进一步刺激后,采用倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞术分析细胞表面分子变化,ELISA测定细胞因子IL-12和TNF-α的分泌水平。结果同C3H/HeJ小鼠相比,C3H/HeN小鼠iDC经β2GPI或LPS刺激后,细胞突起较多,形态上更成熟;细胞表面分子CD11c和MHC-Ⅱ的表达量更高(P<0.05);细胞因子IL-12和TNF-α的分泌更强(P<0.01)。结论 TLR4在β2GPI诱导小鼠骨髓细胞来源的树突状细胞成熟过程中起重要作用。 展开更多
关键词 抗磷脂综合征 132gpi 树突状细胞 TOLL样受体4
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GPI修饰的ESAT-6核酸疫苗的构建及其免疫功能初探 被引量:2
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作者 何向锋 王净 +6 位作者 余方流 赵枫姝 张洪义 陈峻崧 陈登宇 曹文虎 窦骏 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期737-740,746,共5页
目的构建糖基化磷脂酰肌醇(GPI)修饰的结核杆菌早期分泌性抗原靶(ESAT-6)核酸疫苗,初步分析其免疫功能。方法利用重叠PCR法构建pIRES-ESAT-6-gpi重组体,转染B16F10细胞,G418筛选阳性克隆,用RT-PCR、免疫荧光检测转染细胞的ESAT-6抗原表... 目的构建糖基化磷脂酰肌醇(GPI)修饰的结核杆菌早期分泌性抗原靶(ESAT-6)核酸疫苗,初步分析其免疫功能。方法利用重叠PCR法构建pIRES-ESAT-6-gpi重组体,转染B16F10细胞,G418筛选阳性克隆,用RT-PCR、免疫荧光检测转染细胞的ESAT-6抗原表达情况;采集ESAT-6核酸疫苗免疫鼠血清,分别检测抗体滴度和CDC效应,免疫磁珠法分选CD4+和CD8+T细胞,CFSE/7-AAD细胞毒实验分析CTL细胞毒活性。结果测序正确的重组体pIRES-ESAT-6-gpi转染细胞后,ESAT-6表达于细胞膜表面。ESAT-6核酸疫苗免疫血清和CD8+T细胞分别通过CDC效应和细胞毒作用杀伤膜表达ESAT-6的B16F10细胞。结论构建的GPI修饰的ESAT-6核酸疫苗能够诱导免疫鼠产生体液和细胞免疫反应,杀伤膜表达ESAT-6的B16F10细胞,为进一步基于该法构建B16F10瘤苗的抗肿瘤免疫效应及机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 B16F10 ESAT-6 gpi 核酸疫苗
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