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滇龙胆GrDXR基因特异性片段的克隆
1
作者
桂子昌
李猛
张晓东
《天津农业科学》
CAS
2018年第3期5-8,共4页
GrDXR基因功能分析是揭示滇龙胆中MEP途径的基础,试验提取滇龙胆总RNA,通过RT-PCR技术进行进行扩增,所获得片段连接T载体后,进行测序,并进行序列分析。结果获得了279 bp的基因片段,将测序结果与原基因序列进行比对,确认序列为GrDXR基因...
GrDXR基因功能分析是揭示滇龙胆中MEP途径的基础,试验提取滇龙胆总RNA,通过RT-PCR技术进行进行扩增,所获得片段连接T载体后,进行测序,并进行序列分析。结果获得了279 bp的基因片段,将测序结果与原基因序列进行比对,确认序列为GrDXR基因特异片段,为阐明其基因功能奠定基础。
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关键词
滇龙胆
grdxr
基因
特异性片段
基因克隆
下载PDF
职称材料
滇龙胆1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因GrDXR的克隆、序列分析与原核表达
被引量:
4
2
作者
张晓东
赵静
+2 位作者
李彩霞
李涛
王元忠
《中草药》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第16期2378-2384,共7页
目的从滇龙胆Gentiana rigescens幼叶中克隆萜类合成关键酶1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因GrDXR,进行序列分析和原核表达。方法根据滇龙胆转录组中GrDXR基因序列,设计引物,通过RT-PCR扩增得到GrDXR开放阅读框(ORF)序列,并进行TA...
目的从滇龙胆Gentiana rigescens幼叶中克隆萜类合成关键酶1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因GrDXR,进行序列分析和原核表达。方法根据滇龙胆转录组中GrDXR基因序列,设计引物,通过RT-PCR扩增得到GrDXR开放阅读框(ORF)序列,并进行TA克隆、测序和序列分析;构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrDXR,转入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,在IPTG诱导下进行表达。结果 GrDXR ORF全长1 425 bp,编码474个氨基酸。序列分析表明,GrDXR基因是DXR家族成员;蛋白质序列系统发育分析表明,GrDXR与萝芙木RvDXR、橡胶树HbDXR和长春花CrDXR亲缘关系较近。构建pGEX-4T-1-GrDXR重组质粒,获得稳定的原核表达体系。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。结论克隆了GrDXR基因,建立其稳定的原核表达体系,为进一步纯化GrDXR蛋白,研究其结构和功能奠定基础。
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关键词
滇龙胆
1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因
基因克隆
序列分析
原核表达
原文传递
题名
滇龙胆GrDXR基因特异性片段的克隆
1
作者
桂子昌
李猛
张晓东
机构
云南省玉溪第一中学
玉溪师范学院资源环境学院
出处
《天津农业科学》
CAS
2018年第3期5-8,共4页
文摘
GrDXR基因功能分析是揭示滇龙胆中MEP途径的基础,试验提取滇龙胆总RNA,通过RT-PCR技术进行进行扩增,所获得片段连接T载体后,进行测序,并进行序列分析。结果获得了279 bp的基因片段,将测序结果与原基因序列进行比对,确认序列为GrDXR基因特异片段,为阐明其基因功能奠定基础。
关键词
滇龙胆
grdxr
基因
特异性片段
基因克隆
Keywords
Gentiana rigescens曰
grdxr
gene
specific fragment
gene cloning
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
滇龙胆1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因GrDXR的克隆、序列分析与原核表达
被引量:
4
2
作者
张晓东
赵静
李彩霞
李涛
王元忠
机构
玉溪师范学院资源与环境学院
云南省农业科学院药用植物研究所
出处
《中草药》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第16期2378-2384,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(81260608)
科技部"十二五"国家科技支撑计划项目(2011BAI13B02-04))
云南省教育厅科学研究基金重点项目(2013Z075
文摘
目的从滇龙胆Gentiana rigescens幼叶中克隆萜类合成关键酶1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因GrDXR,进行序列分析和原核表达。方法根据滇龙胆转录组中GrDXR基因序列,设计引物,通过RT-PCR扩增得到GrDXR开放阅读框(ORF)序列,并进行TA克隆、测序和序列分析;构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrDXR,转入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,在IPTG诱导下进行表达。结果 GrDXR ORF全长1 425 bp,编码474个氨基酸。序列分析表明,GrDXR基因是DXR家族成员;蛋白质序列系统发育分析表明,GrDXR与萝芙木RvDXR、橡胶树HbDXR和长春花CrDXR亲缘关系较近。构建pGEX-4T-1-GrDXR重组质粒,获得稳定的原核表达体系。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。结论克隆了GrDXR基因,建立其稳定的原核表达体系,为进一步纯化GrDXR蛋白,研究其结构和功能奠定基础。
关键词
滇龙胆
1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因
基因克隆
序列分析
原核表达
Keywords
Gentiana rigescens Frach. ex Hemsl.
grdxr
gene cloning
sequence analysis
prokaryotic expression
分类号
R282.12 [医药卫生—中药学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
滇龙胆GrDXR基因特异性片段的克隆
桂子昌
李猛
张晓东
《天津农业科学》
CAS
2018
0
下载PDF
职称材料
2
滇龙胆1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因GrDXR的克隆、序列分析与原核表达
张晓东
赵静
李彩霞
李涛
王元忠
《中草药》
CAS
CSCD
北大核心
2014
4
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参考文献
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