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马铃薯块茎GBSS Ⅰ基因的cDNA克隆及其序列特征分析 被引量:9
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作者 沈宝云 刘玉汇 +1 位作者 张俊莲 王蒂 《草业学报》 CSCD 北大核心 2010年第5期1-8,共8页
以马铃薯普通栽培种"甘农薯2号"块茎为材料,利用RNA提取试剂盒提取总RNA,通过RT-PCR技术和DNA序列测定分析,证实获得了马铃薯颗粒结合淀粉合成酶(GBSS I)基因的cDNA序列。该cDNA全长1824bp,包括607个氨基酸和1个终止密码子序... 以马铃薯普通栽培种"甘农薯2号"块茎为材料,利用RNA提取试剂盒提取总RNA,通过RT-PCR技术和DNA序列测定分析,证实获得了马铃薯颗粒结合淀粉合成酶(GBSS I)基因的cDNA序列。该cDNA全长1824bp,包括607个氨基酸和1个终止密码子序列,且与原序列(accession number X58453)同源性为99.78%,但与其他科植物GBSS基因的同源性较低,注册该基因到GenBank中,注册号为EU403426。利用生物信息学相关软件分析预测GBSS I基因cDNA序列编码的蛋白质功能和结构,结果发现,该蛋白与其他15种植物GBSS蛋白一样,具有3个完全保守区域,并具许多重要功能位点,且与农杆菌淀粉合成酶具有相似三级结构模型,表明该蛋白具淀粉合成功能。 展开更多
关键词 马铃薯 颗粒结合淀粉合成酶基因 RT-PCR技术 DNA序列分析 蛋白质功能预测
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农杆菌介导法将大麦胚乳特异型启动子启动的小麦GBSSⅠ基因转化玉米自交系 被引量:3
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作者 周融希 吴颖 +5 位作者 邹宏达 苏胜忠 李世鹏 单晓辉 刘宏魁 原亚萍 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期30-34,共5页
本研究将从大麦中克隆到的大麦胚乳特异型启动子HorD和小麦中克隆到的小麦颗粒结合型淀粉合成酶基因GBSSⅠ(Granule-bound starch synthaseⅠ,GBSSⅠ)通过中间载体pGM-T-HorD和pGM-T-GBSSⅠ,定向连接到表达载体pCAMBIA3301上,构建了植... 本研究将从大麦中克隆到的大麦胚乳特异型启动子HorD和小麦中克隆到的小麦颗粒结合型淀粉合成酶基因GBSSⅠ(Granule-bound starch synthaseⅠ,GBSSⅠ)通过中间载体pGM-T-HorD和pGM-T-GBSSⅠ,定向连接到表达载体pCAMBIA3301上,构建了植物表达载体pHorD-GBSSⅠ并转入农杆菌EHA105,通过农杆菌介导法转化玉米自交系Y423体细胞胚胎,获得抗性愈伤组织,并得到了再生植株,经PCR分子检测,共有35株呈阳性,阳性率为15%。我们认为本研究可能为进一步改良玉米淀粉品质提供一条分子育种的途径。 展开更多
关键词 玉米(Zea maysL.) 颗粒结合型淀粉合成酶(gbss) 大麦胚乳特异型启动子(HorD) 农杆菌介导遗传转化
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马铃薯GBSS基因5′侧翼区调控作用的研究 被引量:10
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作者 宋东光 孙国枫 +4 位作者 单海燕 彭翔寅 王光清 汪训明 谈家桢 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1998年第9期796-802,共7页
将0.4、0.8、1.6、2.9kbGBSS基因的5′侧翼区与GUS基因融合,构建了双元表达载体。0.8kbGBSSGUS通过基因枪介导在块茎切片中获得了瞬间表达。以上建构物通过农杆菌介导转入了马铃薯(Solanu... 将0.4、0.8、1.6、2.9kbGBSS基因的5′侧翼区与GUS基因融合,构建了双元表达载体。0.8kbGBSSGUS通过基因枪介导在块茎切片中获得了瞬间表达。以上建构物通过农杆菌介导转入了马铃薯(SolanumtuberosumL.cv.Desiree)。XGluc染色及PCR结果证实已获得转基因植株。利用离体块茎诱导系统,GUS表达用荧光进行定量检测,结果显示,2.9、1.6、0.4kbGBSSGUS的表达均以块茎明显高于茎段,达2~10倍。0.8、1.6、2.9kbGBSSGUS表达高于0.4kbGBSSGUS。蔗糖浓度的升高可诱导GBSSGUS的表达,而光照抑制了GBSSGUS的表达。 展开更多
关键词 马铃薯 基因调控 gbss基因 块茎专一表达 诱导
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百合GBSS基因RNAi载体构建
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作者 张进忠 《农学学报》 2022年第7期69-73,共5页
为研究GBSS基因在百合鳞茎形成及发育过程中影响鳞茎淀粉合成代谢的作用机理,构建干扰GBSS基因的RNAi载体为其在转录水平沉默表达提供材料。从百合鳞片克隆GBSS基因300 bp的保守序列,通过BP与LR反应将该序列正反向连接到干扰载体pJawohl... 为研究GBSS基因在百合鳞茎形成及发育过程中影响鳞茎淀粉合成代谢的作用机理,构建干扰GBSS基因的RNAi载体为其在转录水平沉默表达提供材料。从百合鳞片克隆GBSS基因300 bp的保守序列,通过BP与LR反应将该序列正反向连接到干扰载体pJawohl8-RNAi中,经过酶切反应鉴定所构建RNAi表达载体的正确性。实验成功构建pDONR221-GBSS入门克隆与pJawohl8-RNAi-GBSS表达载体,为在百合鳞茎淀粉合成代谢途径中研究GBSS基因功能及对鳞茎发育的影响提供了材料与思路。 展开更多
关键词 百合 gbss基因 鳞茎淀粉 代谢 机理 颗粒结合淀粉合酶 RNAI 表达载体 鳞茎发育
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中国春小麦GBSS与淀粉颗粒结合特性的研究 被引量:4
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作者 郭华 王宪泽 +2 位作者 李海雷 高艾英 田纪春 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期322-326,共5页
以小麦品种中国春(Triticum aestivum)为材料,分析了颗粒结合淀粉合成酶(GBSS)与淀粉颗粒结合的影响因素及作用力。通过SDS-PAGE及测定GBSS溶液浓度,证实小麦GBSS与淀粉粒结合的紧密程度受温度影响,在50-80℃范围内,GBSS从淀粉... 以小麦品种中国春(Triticum aestivum)为材料,分析了颗粒结合淀粉合成酶(GBSS)与淀粉颗粒结合的影响因素及作用力。通过SDS-PAGE及测定GBSS溶液浓度,证实小麦GBSS与淀粉粒结合的紧密程度受温度影响,在50-80℃范围内,GBSS从淀粉颗粒上的解离量随温度的升高逐渐升高;而在85-95℃之间,解离量随温度的升高而降低;沸水浴处理15min的GBSS解离量较大,但超过35min时GBSS的量反而有所减少。Mg^2+浓度也影响GBSS的解离,低于1.75mmol L^-1时,随Mg^2+浓度降低解离量逐渐升高;高于2.5mmol L^-1时,随Mg^2+浓度的升高解离量逐渐降低。表明GBSS与淀粉粒的结合力是非共价键。 展开更多
关键词 小麦 颗粒结合淀粉合成酶(gbss) 结合特性 温度 Mg^2+浓度
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马铃薯GBSS基因的克隆与DNA顺序分析 被引量:4
6
作者 戴卫列 邓炜 +2 位作者 崔伟英 赵寿元 汪训明 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1996年第10期777-784,共8页
构建了中国马铃薯 (Solanum tuberosum)栽培品种“东农 30 3”基因文库 ,用 PCR扩增得到淀粉粒结合淀粉合成酶基因 (GBSS,granule- bound starch synthase)的部分顺序 (GB3) ,以此为探针从基因文库中筛选到 2 0个阳性克隆。测定其中 1... 构建了中国马铃薯 (Solanum tuberosum)栽培品种“东农 30 3”基因文库 ,用 PCR扩增得到淀粉粒结合淀粉合成酶基因 (GBSS,granule- bound starch synthase)的部分顺序 (GB3) ,以此为探针从基因文库中筛选到 2 0个阳性克隆。测定其中 1个克隆 (GBSS1 7- 1 )的 DNA顺序共 542 8bp;它包括 GBSS基因 5′侧翼区 1 82 3 bp、结构基因 2 964 bp和 3′侧翼区 641 bp。该顺序与已报道的 GBSS顺序同源性很高 ,但 5′侧翼区最上游 730 bp尚未见文献报道 ;并存在较多的茎环结构。 展开更多
关键词 马铃薯 淀粉粒 淀粉 合成酶基因 DNA
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一个新的马铃薯GBSS基因5'侧翼序列克隆及调控活性研究 被引量:3
7
作者 李淑洁 张金文 +2 位作者 王煜 郭志鸿 陈正华 《中国马铃薯》 2005年第3期129-133,共5页
采用PCR技术,从马铃薯叶片基因组DNA中扩增到了约0.6kb的马铃薯GBSS基因的5'侧翼序列,经序列同源性分析所克隆的序列与已知序列同源性为97.41%,含有启动基因表达所需的主要调控元件CAAT盒和TATA盒。构建该序列与GFP的融合基因植物... 采用PCR技术,从马铃薯叶片基因组DNA中扩增到了约0.6kb的马铃薯GBSS基因的5'侧翼序列,经序列同源性分析所克隆的序列与已知序列同源性为97.41%,含有启动基因表达所需的主要调控元件CAAT盒和TATA盒。构建该序列与GFP的融合基因植物表达载体pBIGGFP,并用基因枪转化法将pBIGGFP导入马铃薯无菌苗茎段、叶片和微型薯薯片,用荧光显微镜观察转化组织中GFP的瞬时表达,结果表明GFP在上述器官中都得到了表达,说明所克隆的约0.6kbGBSS基因的5'侧翼序列是具有启动基因表达的功能。 展开更多
关键词 马铃薯 gbss基因5’侧翼区 克隆 GFP 调控
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氮钾对杂交水稻B优827籽粒淀粉含量及淀粉合成酶活性的影响 被引量:16
8
作者 张玲 谢崇华 +1 位作者 李伟 杨国涛 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期551-554,共4页
以优质杂交籼稻B优827为材料,通过施用不同水平的氮、钾肥,并在B优827灌浆时段测定籽粒的直链淀粉、总淀粉含量以及淀粉合成酶的活性,分析氮、钾对水稻灌浆过程中籽粒淀粉积累、淀粉合成关键酶活性的影响,以及直链淀粉的积累与淀粉合成... 以优质杂交籼稻B优827为材料,通过施用不同水平的氮、钾肥,并在B优827灌浆时段测定籽粒的直链淀粉、总淀粉含量以及淀粉合成酶的活性,分析氮、钾对水稻灌浆过程中籽粒淀粉积累、淀粉合成关键酶活性的影响,以及直链淀粉的积累与淀粉合成关键酶活性间的相关性。B优827的直链淀粉含量在开花后20d内呈线性增加,开花20d后有所下降;可溶性淀粉合成酶活性变化呈单峰曲线,开花后12d酶活性达到了最高值,以后随天数增加而迅速降低;淀粉粒结合型淀粉合成酶活性变化呈单峰曲线,开花后15d酶活性达到最高值,开花后15d籽粒直链淀粉含量也接近最高值;灌浆中后期可溶性淀粉合成酶(SSS)、淀粉粒结合型淀粉合成酶(GBSS)与直链淀粉含量呈现出显著的正相关关系。增施氮肥可以提高SSS和GBSS活性,施钾肥在生育前期提高SSS和GBSS活性,后期抑制两者的活性;氮肥和钾肥均有促进淀粉积累的作用,但氮肥施用量过高时会抑制淀粉的积累。适当控施氮肥、增施钾肥是提高B优827籽粒产量的有效途径。 展开更多
关键词 氮素 钾素 直链淀粉含量 可溶性淀粉合成酶 淀粉粒结合型淀粉合成酶 相关性
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小麦淀粉粒束缚淀粉合成酶基因多态性的分子鉴定 被引量:15
9
作者 宋建民 李保云 +5 位作者 尤明山 梁荣奇 常成 刘守斌 唐朝晖 刘广田 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第1期81-86,共6页
运用 6 %的SDS PAGE对 14个小麦品种成熟籽粒Wx蛋白的多态性进行了鉴定 ,结果表明 ,14个小麦品种根据其Wx蛋白的缺失情况可分为 6种组合类型。另外 ,根据Wx A1、Wx B1和Wx D1这 3个位点基因序列和变异情况分别设计了PCR引物 ,扩增结果表... 运用 6 %的SDS PAGE对 14个小麦品种成熟籽粒Wx蛋白的多态性进行了鉴定 ,结果表明 ,14个小麦品种根据其Wx蛋白的缺失情况可分为 6种组合类型。另外 ,根据Wx A1、Wx B1和Wx D1这 3个位点基因序列和变异情况分别设计了PCR引物 ,扩增结果表明 :Wx A1位点突变材料扩增产物为 32 7bp ,正常材料中扩增不到该特异带 ;在Wx B1位点扩增出 187bp目标带 ,突变材料没有该扩增产物 ;在Wx D1位点扩增出约 70 0bp目标带 ,突变材料没有该特异带。与前人的研究结果相比 ,Wx B1引物在 3个位点的扩增产物长度更短 ,差异更大 ,在 2 %琼脂糖胶上即可清楚分开 ,缩短了鉴定时间 ,提高了效率 。 展开更多
关键词 小麦 淀粉粒束缚淀粉合成酶基因 多态性 分子鉴定
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缺失不同Wx蛋白对小麦籽粒直链淀粉合成及淀粉特性的影响 被引量:3
10
作者 谭彩霞 封超年 +3 位作者 郭文善 朱新开 李春燕 彭永欣 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期920-925,共6页
为探索糯小麦籽粒直链淀粉合成的生理机制,以缺失不同Wx蛋白的小麦品种为试验材料,研究缺失不同Wx蛋白对小麦籽粒直链淀粉合成及淀粉特性的影响。结果表明,缺失不同Wx蛋白对小麦籽粒直链淀粉含量、积累量和积累速率、束缚态淀粉合成酶基... 为探索糯小麦籽粒直链淀粉合成的生理机制,以缺失不同Wx蛋白的小麦品种为试验材料,研究缺失不同Wx蛋白对小麦籽粒直链淀粉合成及淀粉特性的影响。结果表明,缺失不同Wx蛋白对小麦籽粒直链淀粉含量、积累量和积累速率、束缚态淀粉合成酶基因(GBSSI)相对表达量以及束缚态淀粉合成酶(GB-SS)活性的影响顺序均表现为:ABD型(缺失Wx-A1、Wx-B1、Wx-D1)>AB型(缺失Wx-A1和Wx-B1)>B型(缺失Wx-B1)>D型(缺失Wx-D1)>A型(缺失Wx-A1)>正常型;对淀粉最终黏度、反弹值以及糊化温度影响的表现顺序与其一致;对淀粉峰值黏度、低谷黏度、稀懈值以及膨胀势影响的表现顺序与此相反。 展开更多
关键词 小麦 WX蛋白 直链淀粉 gbssI gbss
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应用ihpRNA干扰技术创制高支链淀粉马铃薯材料 被引量:2
11
作者 刘玉汇 王丽 +4 位作者 杨宏羽 余斌 李元铭 张俊莲 王蒂 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期3750-3757,共8页
【目的】创造块茎高支链淀粉或纯支链淀粉含量的转基因马铃薯材料。【方法】以构建的由Patatin启动子驱动的pBI121g-PgABI为干扰表达载体,采用农杆菌介导法转化马铃薯优良品种甘农薯2号。用PCR、Southern blotting、半定量RT-PCR和实时... 【目的】创造块茎高支链淀粉或纯支链淀粉含量的转基因马铃薯材料。【方法】以构建的由Patatin启动子驱动的pBI121g-PgABI为干扰表达载体,采用农杆菌介导法转化马铃薯优良品种甘农薯2号。用PCR、Southern blotting、半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR技术检测转基因植株,并对转基因植株的微型薯进行淀粉含量的测定。【结果】通过农杆菌介导法获得10个转基因株系。PCR和Southern杂交结果证明,目的基因已被整合到基因组中,通过半定量RT-PCR分析表明,转基因株系中GBSSI的表达均受到明显抑制,且在6个转基因株系中检测不到mRNA的表达。进一步通过real-time PCR分析表明,转基因株系中GBSSI的mRNA沉默效率为66.27%—93.53%;转基因株系微型薯的淀粉含量也发生明显变化,其支链淀粉含量高达90.16%—98.84%,比对照高出10.31%—20.92%。转基因株系GBSSI的mRNA沉默效率与支链淀粉含量呈显著正相关(r=0.937,P<0.01)。【结论】采用ihpRNAi技术可有效抑制马铃薯块茎中内源GBSSI表达,获得高支链或纯支链淀粉含量的马铃薯材料。 展开更多
关键词 马铃薯 高支链淀粉 ihpRNA干扰技术 颗粒结合型淀粉合成酶
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板栗颗粒型淀粉结合酶基因cDNA的克隆与生物信息学分析 被引量:1
12
作者 王猛 梁雪 《北方园艺》 CAS 北大核心 2016年第16期99-103,共5页
以板栗为试材,采用RT-PCR技术,克隆了颗粒性淀粉结合酶(GBSS)的基因,并进行了生物信息学分析。结果表明:从板栗果实中分离了GBSS基因cDNA全长,命名为Cgbss,登录GenBank号为KU162945。该基因全长2 085bp,编码区全长为1 836bp,编码611个... 以板栗为试材,采用RT-PCR技术,克隆了颗粒性淀粉结合酶(GBSS)的基因,并进行了生物信息学分析。结果表明:从板栗果实中分离了GBSS基因cDNA全长,命名为Cgbss,登录GenBank号为KU162945。该基因全长2 085bp,编码区全长为1 836bp,编码611个氨基酸。生物信息学分析表明该基因编码的蛋白质等电点和分子量为8.36和67.580 9kDa,含有典型的GT1家族的糖基转移酶蛋白功能域。序列分析表明,该基因与所报道的植物GBSS I的基因有85%的同源性。 展开更多
关键词 板栗 颗粒性淀粉结合酶 克隆 序列分析
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禾谷类作物淀粉合酶
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作者 闫洪波 杨虹 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期799-802,共4页
淀粉合酶是禾谷类作物淀粉合成所必需的一类酶。根据淀粉合酶家族成员的氨基酸序列的相似性,分别介绍了一个颗粒性淀粉合酶亚家族和四个可溶淀粉合酶亚家族的组成、基因结构和表达特点,并从转录、转录后和翻译后水平上对这些基因的表达... 淀粉合酶是禾谷类作物淀粉合成所必需的一类酶。根据淀粉合酶家族成员的氨基酸序列的相似性,分别介绍了一个颗粒性淀粉合酶亚家族和四个可溶淀粉合酶亚家族的组成、基因结构和表达特点,并从转录、转录后和翻译后水平上对这些基因的表达调控做了概述。 展开更多
关键词 淀粉 可溶淀粉合酶 颗粒性淀粉合酶
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调控木薯淀粉合成的干涉载体构建及转化木薯的研究 被引量:2
14
作者 崔丽丽 韦祖生 +7 位作者 谢宝书 黄强 田益农 黎萍 李慧敏 黄惠芳 彭靖茹 侯学文 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2012年第11期1996-2001,共6页
为了调控木薯块根淀粉含量与组成,以甘薯块根特异表达Sporamin A启动子驱动构建了腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶AGPase小亚基(ADP-glucose pyrophosphorylase small subunit 1,AGPase SU1)、可溶性淀粉合成酶(soluble starch synthase 1,S... 为了调控木薯块根淀粉含量与组成,以甘薯块根特异表达Sporamin A启动子驱动构建了腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶AGPase小亚基(ADP-glucose pyrophosphorylase small subunit 1,AGPase SU1)、可溶性淀粉合成酶(soluble starch synthase 1,SSS1)、颗粒性淀粉合成酶(granule-bound starch synthase 1,GBSS1)的干涉载体,通过农杆菌介导法转化木薯SC205的胚性愈伤,获得了转化再生株系。酶切鉴定及测序表明,构建的上述3个调控木薯块根淀粉合成的干涉载体构建正确,对获得的转化再生株系用潮霉素筛选及潮霉素抗性基因HPT的引物进行扩增,部分株系有阳性扩增条带,初步说明本研究获得了以调控木薯块根淀粉含量与组成的转基因木薯SC205株系。 展开更多
关键词 木薯 RNA干涉 腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶 可溶性淀粉合成酶 颗粒性淀粉合成酶
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籼米中淀粉粒结合蛋白的分离鉴定及提取工艺优化 被引量:3
15
作者 陈兰煊 杨阳 易翠平 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第20期240-245,共6页
采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)缓冲体系分离提取碱洗籼米粉中的淀粉粒结合蛋白(starch granule-associated proteins,SGAPs),经高效液相色谱-串联质谱法鉴定表明:碱洗得到上、中、下层籼米淀粉中的SGAPs均主要为淀粉... 采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)缓冲体系分离提取碱洗籼米粉中的淀粉粒结合蛋白(starch granule-associated proteins,SGAPs),经高效液相色谱-串联质谱法鉴定表明:碱洗得到上、中、下层籼米淀粉中的SGAPs均主要为淀粉合成酶I(granule-bound starch synthase I,GBSS I),其他组分略有差别;其中以中层SGAPs含量最高,GBSS I达99.8%,谷蛋白质量分数仅为0.11%。采用响应面优化中层淀粉SGAPs的提取参数,得到最优条件为SDS添加量10.90%、煮沸时间4.10 min、MgSO4浓度0.90 mmol/L,此时SGAPs提取量为(1 028.61±0.05)μg/g。 展开更多
关键词 籼米 淀粉粒结合蛋白(SGAPs) 高效液相色谱-串联质谱法 淀粉合成酶I(gbssI) 响应面优化
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大米淀粉结合蛋白研究进展
16
作者 陈兰煊 任思 易翠平 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第2期142-146,共5页
淀粉结合蛋白(starch granule-associated proteins,SGAPs)是指紧密结合于淀粉表面及内部具有显著特征的一类蛋白质,在大米中的质量分数为0.2%~0.5%,不同于普通蛋白,其更多以酶的形式存在于淀粉颗粒中决定淀粉颗粒的结构及形态,对淀粉... 淀粉结合蛋白(starch granule-associated proteins,SGAPs)是指紧密结合于淀粉表面及内部具有显著特征的一类蛋白质,在大米中的质量分数为0.2%~0.5%,不同于普通蛋白,其更多以酶的形式存在于淀粉颗粒中决定淀粉颗粒的结构及形态,对淀粉颗粒的生理生化特性有着重要作用。本文综述了目前国内外关于大米淀粉结合粒蛋白(SGAPs)的研究进展,介绍了几种较为典型的淀粉结合蛋白的分布、分离与纯化方法及其对淀粉的理化特性产生的影响,旨在对大米淀粉深入研究及大米淀粉工业提供一定理论研究基础。 展开更多
关键词 大米 淀粉结合蛋白 淀粉合成酶
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不同长度马铃薯GBSS基因启动子的块茎专一性表达的初报 被引量:10
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作者 宋东光 黄大庆 +1 位作者 王光清 汪训明 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期559-563,共5页
将0.4,0.8,1.6,2.9kbGBSS基因的5'侧翼区与GUS基因融合,构建了双元表达载体.0.8kbGBSS-GUS通过基因枪转化法在块茎切片中获得了瞬间表达.已将上述构建体通过农杆菌转化法导入了马铃薯.X-Gluc染色及PCR结果均证实已获得... 将0.4,0.8,1.6,2.9kbGBSS基因的5'侧翼区与GUS基因融合,构建了双元表达载体.0.8kbGBSS-GUS通过基因枪转化法在块茎切片中获得了瞬间表达.已将上述构建体通过农杆菌转化法导入了马铃薯.X-Gluc染色及PCR结果均证实已获得转基因再生植株.在离体诱导块茎中,2.9,1.6,0.4kbGBSS启动子驱动的GUS活性均明显高于茎段,高出1~15倍;1.6,2.9kbGBSS启动子驱动的GUS活性则大大高于0.8,0.4kbGBSS启动子驱动的GUS活性;其中2.9kb的GBSS启动子显示最强烈的块茎表达专一性. 展开更多
关键词 马铃薯 gbss GUS 块茎专一表达 基因表达 启动子
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芭蕉芋块茎颗粒结合淀粉合成酶Ⅰ基因的克隆与序列分析 被引量:1
18
作者 杨龙 付瑜华 +3 位作者 罗春芳 雷静 罗亚红 欧珍贵 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第22期7376-7384,共9页
颗粒结合型淀粉合成酶(granule-bound starch synthase, GBSS)是一种能够决定直链淀粉生物合成的关键性酶。根据已发表的多种淀粉粒结合淀粉合成酶(GBSS)基因序列的对比分析,设计一对简并引物,采用同源克隆法和5’/3’RACE (Rapid ampli... 颗粒结合型淀粉合成酶(granule-bound starch synthase, GBSS)是一种能够决定直链淀粉生物合成的关键性酶。根据已发表的多种淀粉粒结合淀粉合成酶(GBSS)基因序列的对比分析,设计一对简并引物,采用同源克隆法和5’/3’RACE (Rapid amplification of c DNA ends)的方法,获得芭蕉芋GBSS全长的cDNA,从芭蕉芋中获得GBSSⅠ基因的cDNA全长片段,并对其核酸序列及其推导的氨基酸序列进行了生物信息学分析,结果表明:芭蕉芋块茎GBSSⅠ基因ORF全长1 851 bp,编码616个氨基酸且蛋白质为一个稳定的蛋白;生物进化分析结果显示芭蕉芋与同姜目下巴西蕉、天宝蕉和马六甲小果野蕉亚种亲缘关系最为接近,芭蕉芋GBSSⅠ的克隆在分子生物学基础上对芭蕉芋块根直链淀粉生物合成及表达途径与调控的研究奠定重要的理论基础。 展开更多
关键词 芭蕉芋(Cannas delis Ker) 颗粒结合淀粉合成酶 同源克隆 RACE
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药用野生稻GBSS基因的系统发育及组织特异性表达 被引量:4
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作者 张霞 景翔 +1 位作者 周光才 包颖 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期343-349,共7页
淀粉作为主要的碳水化合物在储藏能量方面发挥至关重要的作用。颗粒结合型淀粉合酶(GBSS)与直链淀粉的合成息息相关。尽管该酶的编码基因已在许多栽培植物中被分离和确定,但有关它们在作物野生近缘种中的序列分歧和表达的研究却相对较... 淀粉作为主要的碳水化合物在储藏能量方面发挥至关重要的作用。颗粒结合型淀粉合酶(GBSS)与直链淀粉的合成息息相关。尽管该酶的编码基因已在许多栽培植物中被分离和确定,但有关它们在作物野生近缘种中的序列分歧和表达的研究却相对较少。该研究以药用野生稻(Oryza officinalis)为研究对象,定性和定量地分析了GBSS编码基因的序列特点、与其它植物同源基因的进化关系以及在叶和种子中的表达情况。系统发育分析表明,该酶在禾本科植物中分别由GBSSI和GBSSII基因编码。在药用野生稻中,这2种基因所编码蛋白的氨基酸序列一致性为62%,并且它们在不同器官内呈现时空分化表达,其中GBSSI在种子中超强表达, GBSSII则主要在叶片表达。 展开更多
关键词 药用野生稻 颗粒结合型淀粉合酶 序列一致度 表达分化 种子
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Effects of the activities of key enzymes involved in starch biosynthesis on the fine structure of amylopectin in developing rice (Oryza sativa L.) endosperms 被引量:3
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作者 Lü Bing, GUO ZhiGang & LIANG JianSheng College of Bioscience and Biotechnology, Key Laboratory of Crop Genetics and Physiology of Jiangsu Province, Yangzhou Univer- sity, Yangzhou 225009, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2008年第10期863-871,共9页
The dynamic changes of the activities of enzymes involving in starch biosynthesis, including ADP-glucose pyrophosphorylase (AGPase), soluble starch synthases (SSS), starch branching enzyme (SBE) and starch debranching... The dynamic changes of the activities of enzymes involving in starch biosynthesis, including ADP-glucose pyrophosphorylase (AGPase), soluble starch synthases (SSS), starch branching enzyme (SBE) and starch debranching enzymes (DBE) were studied, and changes of fine structure of amy- lopectin were characterized by isoamylase treatment during rice grain development, using trans anti-waxy gene rice plants. The relationships between the activities of those key enzymes were also analyzed. The amylose synthesis was significantly inhibited in transgenic Wanjing 9522, but the total starch content and final grain weight were less affected as compared with those of non-transgenic Wanjing 9522 rice cultivar. Analyses on the changes of activities of enzymes involving in starch bio- synthesis showed that different enzyme activities were expressed differently during rice endosperm development. Soluble starch synthase is relatively highly expressed in earlier stage of endosperm de- velopment, whilst maximal expression of granule-bound starch synthase (GBSS) occurred in mid-stage of endosperm development. No obvious differences in changes of the activities of AGPase and SBE between two rice cultivars investigated, except the DBEs. Distribution patterns of branches of amy- lopectin changed continually during the development of rice grains and varied between two rice culti- vars. It was suggested that amylopectin synthesis be prior to the synthesis of amylose and different enzymes have different roles in controlling syntheses of branches of amylopectin. 展开更多
关键词 ADP-glucose PYROPHOSPHORYLASE AMYLOPECTIN structure granule-bound starch synthase Oryza sativa soluble starch synthase starch branching ENZYME starch debranching ENZYME
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