绵地花菌(Albatrellus ovinus)中的grifolin及其衍生物

本文对高等真菌绵地花(Albatrellus ovinus)进行了化学成分的研究。利用各种柱色谱方法(包括正相硅胶、反相硅胶、Sephadex LH-20凝胶色谱、中压液相色谱、半制备HPLC等),分离得到grifolin及其它的5个衍生物。分别为grifolin(1)、neogrifolin(2)、grifolinone A(3)、grifolinone C(4)、confluentin(5)和4-O-methylgrifolic acid(6)。这些化合物的结构通过波谱学方法以及与文献数据对照进行确定。化合物3～6为首次从该种高等真菌中分离得到。化合物4为一个真菌色素,它是一个由一分子的grifolin和一分子苯醌化的grifolin以头对头的方式聚合而成的二聚体。

黑盖地花菌中一个新的grifolin衍生物(英文)

从黑盖地花菌(Albatrellus yasuda)中分离得到4个grifolin衍生物:grifolene(1),grifolin(2),grifolic acid(3)和neogrifolin(4),其中1为新化合物,它的化学结构通过波谱学方法鉴定。

奇果菌素促进宫颈癌HeLa细胞凋亡的蛋白质组研究

目的寻找与奇果菌素促进宫颈癌HeLa细胞凋亡相关的蛋白质。方法随机将宫颈癌HeLa细胞分成两组,一组为对照组,另一组以奇果菌素(剂量为半数抑制率)处理24 h。提取蛋白质做双向电泳(2-dimensional electrophoresis,2-DE),基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱仪(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectros-copy,MALDI-TOF-MS)鉴定2组细胞间有明显差异表达的蛋白质。结果奇果菌素作用于HeLa细胞的蛋白质组,质谱鉴定出6种蛋白质表达差异有显著性,分别是:塌陷反应介导蛋白1(CRMP-1)、转胶蛋白2(Transgelin-2)、磷酸化应激诱导蛋白1(StIP1)、腺苷酸环化酶(ATPase)、磷酸甘油酸变位酶1(PGM-1)和原肌球蛋白4(TPM-4);其中StIP1表达下调,其他蛋白均上调。结论奇果菌素能够通过诱导宫颈癌HeLa细胞发生凋亡而发挥抑制HeLa细胞生长作用,奇果菌素可能通过上调或下调上述蛋白质的表达参与促进宫颈癌HeLa细胞的凋亡。

奇果菌素调控miR-646/ADAM17通路对白血病细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨奇果菌素(Gri)对白血病细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养白血病K562细胞,经不同浓度的Gri处理细胞后,采用甲基噻唑基四唑(MTT)法测定Gri对细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Gri对微小RNA-646(miR-646)与解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)表达的影响;双荧光素酶报告基因检测miR-646与ADAM17的靶向作用关系;观察miR-646过表达或干扰ADAM17表达对细胞增殖及凋亡的影响,以及抑制miR-646表达后细胞抑制率及凋亡率的变化;Western blot检测细胞周期蛋白1(CyclinD1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、p21、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)蛋白表达。结果Gri呈剂量依赖性抑制K562细胞增殖(P<0.05),细胞凋亡率随着药物浓度的增加而显著增高(P<0.05),促进miR-646、p21、Bax表达(P<0.05),抑制ADAM17、CyclinD1、Bcl-2表达(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-646可负性调控ADAM17的表达;miR-646过表达或干扰ADAM17表达后可显著抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制miR-646表达可逆转Gri对细胞增殖、凋亡的作用。结论奇果菌素可通过调控miR-646/ADAM17通路抑制细胞增殖及促进其凋亡从而发挥抗白血病作用。

奇果菌素诱导骨肉瘤U2OS细胞凋亡及其机制的研究

目的研究奇果菌素(grifolin)诱导骨肉瘤U2OS细胞体外生长抑制及诱导凋亡的作用及其机制。方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定奇果菌素对U2OS细胞的生长抑制实验;荧光显微镜下(Hoechst33258荧光染色)观察细胞核形态学变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;Western blot法检测Akt、GSK3、FKHRL蛋白表达。结果奇果菌素的浓度在50μm以上时对骨肉瘤U2OS细胞具有明显的生长抑制作用,呈明显的时间和浓度效应关系;并能诱导细胞发生凋亡,出现凋亡小体,呈典型的凋亡细胞形态;随着药物浓度的增加和作用时间的延长,细胞的生长抑制率及细胞凋亡率均明显升高,50.0μm的奇果菌素作用U2OS细胞0,6,12,24h后,细胞出现不同程度的亚G_1峰,细胞凋亡率分别为1.96%、13.91%、52.6%、63.5%;Western blot法分析表明U2OS细胞经过50.0μm和100μm的奇果菌素作用24h后,U2OS细胞的Akt、FKHRL、GSK3的表达均下调,表示其表达水平及活性显著降低。结论奇果菌素能够通过诱导人骨肉瘤U2OS细胞发生凋亡而发挥抑制U2OS细胞生长作用,尤其当奇果菌素的浓度>50.0μm,其对U2OS细胞增生的抑制作用呈剂量和时间依赖性,抑制Akt和GSK3的活性是奇果菌素体外诱导人骨肉瘤U2OS细胞发生凋亡的重要作用机制之一。

奇果菌素通过调控miR-4429表达抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解和增殖的机制研究

目的探讨奇果菌素对乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解和增殖的影响及其对miR-4429的调控作用。方法不同浓度(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)的奇果菌素处理MDA-MB-231细胞,将miR-NC、miR-4429 mimics分别转染至MDA-MB-231细胞后加入奇果菌素处理细胞(回复实验);试剂盒检测葡萄糖消耗量与乳酸生成量;CCK-8、平板克隆形成实验分别检测细胞增殖及克隆形成;qRT-PCR法检测miR-4429的表达量;Westernblot法检测PKM2、HK2蛋白表达量。结果不同浓度的奇果菌素处理后细胞中葡萄糖消耗量与乳酸生成量降低(P<0.05),PKM2、HK2蛋白水平降低(P<0.05),克隆形成数减少(P<0.05),细胞增殖抑制率升高(P<0.05),miR-4429的表达水平升高(P<0.05);与转染miR-NC比较,转染miR-4429 mimics后细胞中葡萄糖消耗量与乳酸生成量降低(P<0.05),PKM2、HK2蛋白水平降低(P<0.05),克隆形成数减少(P<0.05),细胞增殖抑制率升高(P<0.05);回复实验结果显示葡萄糖消耗量与乳酸生成量升高(P<0.05),PKM2、HK2蛋白水平升高(P<0.05),克隆形成数增多(P<0.05),细胞增殖抑制率降低(P<0.05)。结论奇果菌素可通过促进miR-4429的表达而抑制乳腺癌细胞糖酵解、增殖及克隆形成。