利用GT1-7细胞体外研究雌激素对GnRH分泌及其相关基因表达的影响

雌激素对GnRH神经元活性及其合成分泌具有重要的调控作用。为了体外模拟雌激素对GnRH合成分泌的抑制作用,使用1μmol/L的雌激素处理GT1-7细胞0、6、12、18、24和30 h,分别检测GnRH的分泌及相关基因GnRH、ERα、KISS-1和GPR54的表达。结果显示:雌激素处理GT1-7细胞GnRH分泌量相对于对照组先升高(6和12 h,P>0.05)后极显著降低(18和30 h,P<0.01)。雌激素处理组GnRH mRNA表达在整个培养期间相对于对照组极显著降低(P<0.01),ERα(12和18 h,P<0.01)、KISS-1(12 h,P<0.01)和GPR54表达也极显著降低(6、12和24 h,P<0.01)。结果表明:1μmol/L雌激素能够抑制GT1-7细胞GnRH的分泌,可能是通过降低ERα、GnRH、KISS-1及GPR54等基因的表达来实现的。

雌激素对GT1-7细胞GnRH分泌及相关基因表达的影响

【目的】研究低浓度雌激素对下丘脑GnRH分泌以及ERα、GnRH等6个生殖相关基因表达的影响.【方法】采用体外培养GT1-7细胞,对照组添加溶剂(无水乙醇),试验组添加雌激素(100pmol/L),培养1、3、6、12、18、24、30、36h收集细胞和培养上清液,利用酶联免疫法(ELISA)测定收集上清液中GnRH浓度,并利用相对荧光定量法测定目的基因的表达.【结果】与对照组相比,试验组GnRH分泌呈增加趋势,培养12h左右GnRH分泌达到峰值(P<0.05);ERα、GnRH、Kiss-1、GPR54mRNA相对表达量先增加后降低,4种基因mRNA依次在18h(P<0.01)和24h(P<0.05)、6h(P<0.01)、3h(P<0.01)、6h和12h(P<0.05)表达显著增加.nNOS和c-fos mRNA相对表达量较对照组呈降低趋势,这2种基因mRNA依次在30h和36h(P<0.05)、3h(P<0.01)表达显著降低.【结论】100pmol/L雌激素能够促进GT1-7细胞分泌GnRH,这种作用可能是通过调控ERα、GnRH、Kiss-1、GPR54、nNOS以及c-fos mRNA的表达实现的.

“中花11”水稻谷蛋白Gt1基因克隆及蜡质基因启动子引导Gt1基因表达载体的构建

谷蛋白含量及分布对水稻营养品质起着至关重要的作用.利用PCR技术从"中花11"水稻基因组成功克隆到谷蛋白Gt1基因,再分别以PCR技术和限制酶酶切从p13W4载体上获得水稻蜡质基因(Waxy)启动子、第一内含子和NOS终止子,并以pCAMBIA1301双元载体为骨架,成功构建了由Waxy启动子引导的水稻Gt1基因表达载体,为今后利用转基因技术改良水稻稻米营养品质奠定了基础.

Overexpression of a Glycosyltransferase Gene from a Metabolically Poly-Resistant Beckmannia syzigachne Population Alters Growth and Confers Herbicide Resistance to Brachypodium distachyon

Beckmannia syzigachne is a noxious weed for rice-wheat rotations in China.The B.syzigachne(AH-02)population evolved metabolic resistance to fenoxaprop-P-ethyl and mesosulfuron-methyl.To investigate the function of GT73C1 in this population,the GT73C1 gene was amplified by reverse transcription-polymerase chain reaction,and the sequence was 100%consistent with the transcriptome data.Its phylogenetic tree was displayed and annotated using FigTree v1.4.4.The plant overexpression vector of GT73C1 gene was constructed and used to transform Brachypodium distachyon plants.Furthermore,the expression of GT73C1 was significantly induced by fenoxaprop-P-ethyl and mesosulfuron-methyl,which was consistent with the findings from the whole plant bioassay.These results indicate that GT73C1 is closely related to the metabolic resistance of B.distachyon.

水稻籽粒厚度基因GT1的连锁分析

水稻的籽粒性状包括粒重、粒长、粒宽、粒厚和长宽比等,是影响水稻产量的重要因素,水稻的粒厚性状是籽粒性状的重要组成部分,是水稻重要的经济性状。经多年观察,水稻的巨胚性状与粒厚性状存在连锁遗传,本研究对这两个性状进行了连锁分析,并尝试对粒厚基因GT1进行分子标记定位,为今后对粒厚基因进一步的研究提供参考。

鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因植物表达载体的构建

以含鸡传染性法氏囊病病毒(杭州分离株,HZ96)VP2基因的质粒PBS为模板,根据其序列设计引物进行PCR扩增,得到1.5kb左右长的VP2基因产物;用Kpn 和Sal 酶切纯化的PCR产物;将纯化的酶切产物在T4DNA连接酶的作用下定向克隆到植物表达载体Cambia1301水稻胚乳特异性启动子GT1下游,并经PCR、酶切和测序鉴定。植物重组表达载体经三亲交配已导入根癌农杆菌中。