A new dammarane-type triterpene saponin from Gynostemma pentaphyllum

One new dammarane-type triterpene saponin,named(20S)-3β,20,21-trihydroxydammar-24-ene 3-O-[α-L-rhamnopyranosyl- (1→2)][β-D-xylopyranosyl(1→3)]-β-D-glucopyranoside(1),was isolated from the aerial parts of Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino.Its structural elucidation was accomplished mainly on the basis of the interrelation of spectroscopic methods, such as IR,HR-TOF-MS,NMR.

绞股蓝多糖提高小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能

研究不同浓度(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/mL)绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]多糖(GPP)对小鼠腹腔巨噬细胞的影响,探讨GPP对机体免疫功能的调节作用及其可能的作用机制。采用中性红法、Griess法、CCK8法、ELISA法和荧光定量PCR法检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力、增殖、细胞因子(NO、LDH、TNF-α、IL-1β)的分泌量、CaM和GSα基因的表达水平。结果表明,GPP激活小鼠腹腔巨噬细胞,随着GPP浓度的增加小鼠腹腔巨噬细胞增殖能力增强,当GPP浓度为50.0、100.0、200.0μg/mL时,吸光度与空白对照处理相比差异显著;GPP刺激小鼠腹腔巨噬细胞后,吞噬能力强于空白对照处理,GPP浓度为200.0μg/mL时,小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力最强;GPP促进小鼠腹腔巨噬细胞NO、LDH、TNF-α和IL-1β的分泌;GPP上调CaM和GSα基因的表达,GPP浓度为100.0、25.0μg/mL时CaM、GSα基因表达量分别达到最高。

富硒绞股蓝功能性茶冻的研制

绞股蓝是一种药食同源的草本植物,兼具较高的营养价值与药用价值。目前,绞股蓝相关产品以绞股蓝茶为主,存在味苦、浮沫多的弊端,制约了绞股蓝茶推广销售。本文以富硒超微绞股蓝茶粉为主要原料,以黄原胶、甜菊糖苷(甜味剂)、水等为辅料,以感官评分为主要指标,利用正交试验与Box-Behnken设计-响应面法筛选出最优的富硒绞股蓝功能性茶冻配方工艺,即富硒超微绞股蓝茶粉0.65 g、水1.00 L、甜菊糖苷0.10 g、黄原胶0.20 g,同时添加魔芋葡甘聚糖60 g。相较于传统绞股蓝茶,所得产品克服了绞股蓝茶味苦、浮沫多的弊端,丰富了绞股蓝茶产品形式;茶冻状态突破了传统茶冲泡形式下功能成分利用率低的限制,极大地提高了硒等功能活性物质的摄取率;以膳食纤维魔芋葡甘聚糖为成胶成分,既使产品具有细腻弹爽的口感、透明均匀的色泽,又赋予其调节肠道菌群、缓解便秘的功能特性,增强了产品的功能活性;以甜菊糖苷甜味剂代替传统茶冻中的蔗糖,更适宜控糖人群食用。该研究结果为绞股蓝基功能性产品的研制与推广提供了技术和理论借鉴。

QuEChERS-气相色谱-质谱联用法测定绞股蓝中28种农药残留

为检测绞股蓝中农药残留情况,本文建立了一种使用QuEChERS-气相色谱-质谱联用法测定绞股蓝中28种农药残留的方法。结果表明,28种农药在50~250μg/L的范围内线性关系良好,回归方程相关系数为0.995 5~0.999 5,样品回收率为74.40%~123.54%,相对标准偏差为0.43%~10.00%。该方法简单、快捷,适合绞股蓝中常用农药的快速测定。

不同水分和氮素条件对栽培绞股蓝生物量和皂苷量的影响

目的研究人工栽培条件下水分和氮素对绞股蓝Gynostemma pentaphyllum生物量和皂苷量的影响。方法对野生绞股蓝扦插苗进行水分和氮素控制实验。结果在干旱和缺氮逆境下,整株植株生物量减少,但由于β-糖苷酶活性降低,导致单位干质量叶片中绞股蓝皂苷的量增加。由于干旱使生物量减少的速率大于对皂苷积累的促进作用,表现为干旱使总皂苷产量降低,与之相反,缺氮对生物量减少的速率小于对皂苷积累的促进作用,但是氮素浓度过低也不利于皂苷积累。结论这意味着在人工种植的情况下,必须保证充足的水分供应和适度的氮肥供应才有利于绞股蓝生长,保持较高的生物量和总皂苷产量。

RP-HPLC测定绞股蓝中芦丁和槲皮素的含量

目的：建立绞股蓝中芦丁与槲皮素的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱仪,使用TURNER KromasilTM C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为0.4磷酸水溶液-甲醇-乙腈进行梯度洗脱,流速为0.5mL/min,检测波长为360nm;柱温为40℃。结果：芦丁在0.37-3.70μg范围内有良好的线性关系,r=0.9999。槲皮素在0.05-0.50μg范围内有良好的线性关系,r=0.9999;芦丁的平均加样回收率为99.6,RSD为1.07;槲皮素的平均加样回收率为97.2,RSD为1.01。结论：该方法简便快捷,准确度高。

绞股蓝中总黄酮的分析研究

采用三波长—光谱法测定绞股蓝中总黄酮的含量 ,有效地消除了吸收峰不对称给定量分析造成的影响 ,并校正了基于干扰组分的吸收光谱具有线性吸收产生的基线倾斜 .本法的回收率为 96%～ 1 0 2 % ,变异系数小于 0 3 6% .方法的准确度与精密度均令人满意 ,而且操作简便易行 .

绞股蓝与辣蓼草对小曲质量的影响性研究

研究绞股蓝与辣蓼草对小曲糖化力、液化力及发酵力的影响,探索小曲制作过程中,各中草药的最佳添加量,通过正交试验获得最佳的工艺条件。设定草药比、药米比和接种量为3个因素,进行L(933)正交试验,通过检测糖化力、液化力与发酵力,确定最佳工艺条件为28℃培养6d,绞股蓝与辣蓼草比为2∶1,药/米为15%,接种量为8%。辣蓼草与绞股蓝的添加对小曲的质量有促进作用。

原子吸收光谱法测定绞股蓝中20种微量元素

本文运用火焰和石墨炉ＡＡＳ法结合使用基体改进技术测定了绞股蓝叶、茎、地下茎中２０种微量元素的含量，并通过实验拟定了各待测元素的最佳分析条件。各元素的回收率在９３％～１０６％之间，相对标准偏差小于８％。方法简单准确，具有实用意义。

中草药绞股蓝的傅里叶变换红外和拉曼光谱分析

利用傅里叶变换红外和拉曼光谱法直接、快速地测定了中草药绞股蓝样品 ,并对所测样品的红外、拉曼光谱图进行比较。结果表明 ,红外光谱图中各吸收峰位置与拉曼光谱图中各散射特征峰位置相对应 ,其关系互补。采用傅里叶变换红外和拉曼光谱分析法 ,对中草药绞股蓝的成份研究和特征波谱的鉴别 。

绞股蓝的RAPD指纹图谱鉴定及其特异DNA片段克隆、序列分析

目的：在DNA分子水平上鉴定绞股蓝及其伪品乌蔹莓。方法：用筛选出的两条随机引物（WGS001，WGS004）对不同采集地绞股蓝及乌蔹莓基因组DNA进行PCR扩增，将引物WGS004扩增7份绞股蓝样品中的具有相同迁移率的1条500bp左右的DNA片段进行克隆、测序、一致性分析，并在NCBI上作Blastn比对检索。结果：以上两条引物能分别扩增得到绞股蓝与乌蔹莓样品基因组的差异性DNA片段，这些片段可以明确区别绞股蓝与乌蔹莓。经克隆获得的7条绞股蓝DNA序列问的一致性在45．7％～94．5％之间，在NCBI上检索后未见相似序列的报道，为新序列。结论：RAPD技术可有效地鉴别绞股蓝和乌蔹莓，本研究克隆得到一段绞股蓝DNA序列，为绞股蓝的品种鉴定、辅助选择育种等研究奠定了基础。

HPLC法测定绞股蓝中5种皂苷成分的含量

目的:HPLC法比较不同地区绞股蓝中人参皂苷Rb1、Rb3、Rd和绞股蓝皂苷XLIX、XVII的含量。方法:采用Shimpack C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈和水,流速为0.8m L·min-1,检测波长为203nm,柱温为25℃。结果:采自陕西沣峪口的绞股蓝样品中人参皂苷Rb1、Rb3和Rd的含量最高,约为1.625%,1.776%,0.892%;云南普洱样品所含的绞股蓝皂苷XLIX最高,约为1.75%;重庆北碚区-1的样品中XVII的含量最高,约为1.063%。结论:各地区绞股蓝样品中皂苷含量差异很大。

应用RAPD技术构建绞股蓝DNA指纹图谱

以不同类型绞股蓝(Gynostemma Pentaphyllum,(Thunb)Makino)DNA为模板,进行RAPD反应条件的优化及RAPD结果分析.最终筛选的RAPD反应条件为:20μL PCR反应体系中包括了10×buffer2.0μL,Mg2+2.0 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,引物0.5 mmol/L,Taq酶1U,模板DNA 50 ng.反应程序为94℃3 min→(94℃30 s→38℃40 s→72℃1 min)45个循环→72℃10min→4℃保持,并从66条随机引物中筛选出5条带型丰富、适合于绞股蓝分析的随机引物.以这5条随机引物对不同类型绞股蓝进行RAPD扩增,识别其特征性多态位点,建立分子标记检索表.

不同郁闭度橡胶园间作绞股蓝的生长、产量及药材品质研究

目的:为综合了解林下不同郁闭度对橡胶园间作绞股蓝生长、产量,尤其是对绞股蓝药材品质的影响。方法:以绞股蓝的旷地种植为对照,对不同胶园间作条件下绞股蓝3个采样期地上部主要生长、产量指标,及其叶和茎中的主要成分含量指标进行了同步比较研究。结果:旷地种植条件下,绞股蓝表现生长不良,且产量均低于各间作处理,但其叶、茎中的皂苷、黄酮、多糖、浸出物含量在各时期均高于其他处理或处于较高水平;在南北行向的全周期间作模式胶园间作条件下,绞股蓝的生长及产量表现最优,叶、茎中的黄酮、浸出物含量部分情况下略高于旷地种植或与之接近,而皂苷、多糖含量均低于旷地种植;在郁闭度较高的常规胶园林下,绞股蓝表现为茎细叶薄、生长慢、产量偏低,亦未见开花结果,叶、茎主要成分含量均处于较低水平。总体上,绞股蓝叶、茎中的主要成分含量指标倾向于随郁闭度的增加而降低,而在胶园间作条件下,绞股蓝的生长、产量及药材品质均随郁闭度的增加趋于变差。结论:不同郁闭度均会对绞股蓝的生长、产量及其药材品质产生重要影响,绞股蓝在中低郁闭度的南北行向全周期间作模式胶园中间作可获得最大效益。

铁皮石斛与绞股蓝原生质体融合的初步研究

目的 探索铁皮石斛与绞股蓝原生质体杂交融合 ,为中药材的改良提供新途径。方法 两种原生质体通过PEG法进行成对融合 ,融合子培养在添加 BA2 mg/L 及 NAA1m g/L 改良的 MS液体培养基中。结果 分离得到了高产量、活力强、纯度高的铁皮石斛及绞股蓝叶肉原生质体。结论 融合获得了有活力的杂种细胞 ,培养 3d后 ,杂种细胞开始分裂 ,共进行了

HPLC快速测定绞股蓝中槲皮素的含量

[目的]建立绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum（Thunb.）Makino]中槲皮素含量的简便、快速、准确检测方法。[方法]用Microsorb-MV100-5C18色谱柱（4.6mm×250.0mm,5μm）,ProStar325紫外可见检测器,流动相为甲醇-混合液（乙氰∶1.0%醋酸∶0.4%磷酸=30∶35∶35,V/V/V）（37∶63,V/V）,流速为0.6ml/min,检测波长为372nm,柱温为室温,进样量为20μl。[结果]槲皮素在0.64~25.60μg/ml范围内与峰面积线性关系良好（r=0.9999）,方法平均回收率大于96%（n=9）。[结论]该研究建立的方法简便、快速、准确。

UFLC-QTRAP-MS/MS法同时测定绞股蓝中11种氨基酸

目的建立UFLC-QTRAP-MS/MS法同时测定绞股蓝Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino中苯丙氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、脯氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、组氨酸、精氨酸、赖氨酸、谷氨酸的含有量。方法绞股蓝水提液的分析采用Waters XBridge Amide色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm);以水-乙腈为流动相(含0.2%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.6 m L/min。结果 11种氨基酸在各自范围内线性关系良好(r>0.998 9),平均加样回收率90.74%~103.05%,RSD 0.61%~5.00%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于绞股蓝的质量控制。

绞股蓝提取物抗抑郁活性研究

目的考察绞股蓝提取物抗抑郁活性。方法通过3种动物模型,即小鼠悬尾实验(TST)、强迫游泳实验(FST)和开场实验(OFT)模型,首次测试绞股蓝75%乙醇提取物(醇提物,JE)及其水提物(JW)的抗抑郁活性。结果 JE(2.5,5 g/kg)可使小鼠在TST及FST的不动时间均显著性缩短(P<0.05),呈现出良好的量效关系,且与阳性药盐酸氟西汀(FH)相比无显著性差异(P>0.05),而JW(2.5,5 g/kg)对小鼠在TST及FST的不动时间均无显著性差异(P>0.05);各组小鼠OFT穿格次数比较,均无显著性差异(P>0.05)。结论首次证实绞股蓝醇提物具有抗抑郁活性,且与FH的作用相当,而其水提物在既定给药方案下无抗抑郁活性。

缙云山绞股蓝形态多样性分化研究

以药用植物绞股蓝为研究对象,测定了缙云山绞股蓝5个居群的50个个体的28项形态指标,采用多种数量分析方法研究其形态多样性.方差分析表明:在所测量的21个营养器官性状中,共有13个性状的变异达到显著或极显著水平,而生殖器官的形态特征相对稳定,差异性不显著.聚类分析显示:在个体水平上,不同居群的个体大多混聚在一起,无明显的分化规律,但是从亚表征群看,个体间出现一定程度的形态分化;在居群水平上,缙云山绞股蓝可划分为两个大的表征群.

动态连续逆流提取绞股蓝皂苷的研究

本文在中试条件下,通过单因素试验和正交试验考察不同因素对绞股蓝皂苷提取得率的影响,从而探讨动态连续逆流提取绞股蓝皂苷的最佳工艺。结果表明:动态连续逆流提取绞股蓝皂苷最佳条件为:提取溶剂温度为80℃,料液比为1∶35(g/mL),提取时间为50 min。在此条件下,绞股蓝提取物平均提取得率为33.95%,皂苷得率为8.9%;动态连续逆流提取绞股蓝皂苷具有生产连续性好、皂苷提取得率高、产品纯度高等优点。