肝癌H-22细胞膜抗原肽提取物对小鼠免疫功能的影响及其抑瘤作用

目的 应用小鼠肝癌H 2 2细胞膜相关抗原肽 (TAP)提取物免疫小鼠 ,观察其对小鼠自身移植肿瘤生长及免疫学参数的影响 ,为制备肿瘤疫苗提供实验依据。方法 采用微酸洗脱法制备分子量≤ 30 0 0Da的细胞膜TAP提取物 ,皮下免疫小鼠 ,检测胸腺细胞增殖反应、T细胞亚组百分数的变化 ,脾细胞ConA反应性、IL 2和IFN γ活性、CTL杀伤活性的变化及抑瘤效应。结果 TAP提取物免疫后 ,移植肿瘤的发生率降低 (P <0 .0 1) ,平均出现时间延迟 (P <0 .0 0 1) ,生长速度减慢 ;同时 ,脾细胞ConA反应性 (P <0 .0 1)、IFN γ(P <0 .0 5 )和IL 2分泌活性和CTL杀伤活性 (P <0 .0 5 )不同程度增强 ;胸腺细胞3 H TdR自发掺入率 (P <0 .0 5 )及CD4 + 和CD8+ T细胞百分数 (P <0 .0 5 )也有不同程度增高。结论 小鼠肝癌H 2 2细胞膜TAP提取物具有免疫原性 ,能有效激发免疫系统功能 ,抑制自身移植肿瘤的生长。

癌痛消胶囊调节小鼠荷H_(22)移植性肝癌细胞VEGF,p53和p21ras表达的实验研究

目的:通过观察癌痛消胶囊调节小鼠荷H22 移植性肝癌细胞中血管内皮生长因子(Vascularen dothelialgrowthfactor,VEGF)、p53和p21ras的表达作用,以探讨该药抑制肿瘤的作用机理。方法:昆明种雄性小白鼠60只,按随机区组分为6组(A -F组) ;A -E组每鼠均于前肢右腋皮下接种0 2mlH22 肿瘤细胞悬液(浓度为1×107/ml) ,接种24h后按体重给药。A组、B组、C组分别给予大、中、小剂量的癌痛消胶囊,D组予康赛迪胶囊,E组予生理盐水,均灌胃给药,每日1次。连续用药10天,停药24h ,称重并处死动物,剥取瘤块称重,计算出肿瘤生长抑制率,用免疫组化法检测癌细胞中VEGF ,p53 ,p21ras ,VHL的表达程度。F组予饲料及水分正常饲养。结果:A ,B ,C ,D组均有明显的抑瘤作用,其中以A组的抑瘤作用最明显(P<0 05或P<0 01)。造模各组动物的肝癌细胞中均见VEGF ,p53和p21ras的阳性染色,但阳性表达程度不同,与B ,C ,E组比较,癌痛消胶囊大剂量组和康赛迪胶囊组均可明显降低肝癌细胞中VEGF ,p53和p21ras的阳性表达(P<0 05或P<0 01)。结论:癌痛消胶囊对小鼠H22 移植性肝癌有抑瘤作用,抑制肿瘤生长的机理可能与下调VEGF ,p53和p21ras的水平有关。

超声激活血卟啉对小鼠肝癌H 22细胞抑制效应的实验研究

通过台盼兰拒染法,以细胞存活率为指标观察超声激活血卟啉对H 22肿瘤细胞在体外的直接杀伤作用;通过小鼠H 22实体瘤模型,以体积和体重变化为指标观察超声激活血卟啉对H 22肿瘤细胞在体内的生长抑制作用.结果表明,超声激活血卟啉在体内体外对H 22肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用.

拟黑多刺蚁对H22荷瘤鼠抑制肿瘤生长的初探

通过建立动物肿瘤模型,采用对比实验法,探讨拟黑多刺蚁对H22荷瘤鼠的抑瘤作用.结果表明:拟黑多刺蚁具有抑制H22肿瘤细胞的作用,并增强荷瘤鼠的免疫功能.

原卟啉Ⅸ-声动力学方法对H-22肿瘤细胞损伤机制的研究

研究了频率为1.43 MHz、强度为1 W/cm2的聚焦超声结合原卟啉Ⅸ对H-22肿瘤细胞的损伤作用,并探讨其生物学机制.应用台盼蓝拒染法检测不同处理后肿瘤细胞的存活率,环境扫描电镜和透射电镜观察细胞表面和内部的超微结构变化,荧光标记技术检测肿瘤细胞内活性氧的产生,硫代巴比妥酸(TBA)法检测肿瘤细胞脂质过氧化水平的变化.发现原卟啉Ⅸ-声动力学方法对H-22细胞产生的损伤效应表现为:细胞存活率明显下降,细胞表面和内部的超微结构改变,胞内活性氧和脂质过氧化水平增高.结果表明:原卟啉Ⅸ-声动力学方法能够使肿瘤细胞产生活性氧自由基,造成膜脂质过氧化,直接或间接地破坏细胞的膜系统,从而杀伤肿瘤细胞.

DHA复合物对鼠移植瘤细胞和T淋巴细胞细胞周期及凋亡的影响

目的 研究DHA复合物的抗癌机理。方法 用流式细胞术研究了DHA复合物对荷瘤鼠H2 2 细胞和T淋巴细胞细胞周期及凋亡的影响。结果 ( 1)与阴性对照组相比 ,DHA复合物中、高剂量组G0 G1期H2 2 癌细胞百分比明显增加 (P <0 .0 1) ;DHA复合物低、中、高剂量组G0 G1期T细胞百分比明显减小 (P <0 .0 1)。 ( 2 )与阴性对照组相比 ,DHA复合物低、中、高剂量组S期H2 2 癌细胞百分比明显减小 (P <0 .0 1) ,S期T细胞百分比明显增加 (P <0 .0 1)。 ( 3)与阴性对照组相比 ,DHA复合物中剂量组G2 M期H2 2 癌细胞百分比显著减少 (P <0 .0 1) ,DHA复合物低、高剂量组G2 M期H2 2 癌细胞以及DHA复合物低、中、高剂量组G2 M期T细胞百分比均显著升高 (P <0 .0 1)。 ( 4 )与阴性对照组相比 ,DHA复合物低、中、高剂量组H2 2 癌细胞增殖指数 (PI)明显下降 (P <0 .0 1) ,T细胞增殖指数明显升高 (P <0 .0 1)。 ( 5 )与阴性对照组相比 ,DHA复合物低、中、高剂量组H2 2 癌细胞及DHA复合物中、高剂量组T细胞凋亡率明显升高 (P <0 .0 1)。结论 DHA复合物可抑制H2 2 癌细胞的增殖 ,促进T淋巴细胞增殖 ,同时DHA复合物还可促进H2 2 细胞。

凯息平口服液对H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤生长作用及抑瘤机理探讨

凯息平口服液对小鼠移植性H2 2 实体瘤有明显的抑瘤生长作用 ,2 7.0、18.0、9.0g/kg剂量的抑瘤率分别 4 7.6 %、4 7.8%和 33.8% ;对H2 2 腹水癌小鼠有一定的延长生存期的作用 ,强于阳性对照药复方天仙胶囊 ,且没有氟尿嘧啶 (5 FU)所表现的毒副作用。对体外培养的H2 2 细胞有一定程度的抑制作用 ,最低有效药物浓度可达 2 5mg/L ,抑制作用可维持 4 8h以上。但对培养的脾T细胞 ,其剂量达 80 0mg/L时才表现出抑制增殖的作用。表明凯息平口服液对肿瘤细胞有独特的抑制作用 ,绝非细胞毒所致。实验还表明 :凯息平口服液能增强荷瘤鼠的T、B淋巴细胞增殖能力 ;对自然杀伤细胞 (NK)的活性也有明显的促进作用 ,同时明显增强腹腔巨噬细胞 (MΦ)的吞噬活性 ,显示了其在抗肿瘤免疫中具有重要的作用。

榄香烯复合瘤苗主动免疫抗瘤效应增强途径的比较研究

将ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠的Ｈ２２ 腹水型肝癌和６１５ 系小鼠的Ｌ６１５ 白血病细胞经榄香烯或／和热休克等不同处理制成瘤苗， 进行体内主动免疫实验和致敏脾细胞的体外细胞毒活性实验。结果表明： 热休克和榄香烯复合瘤苗比单一因素处理的瘤苗免疫效果好， 经Ｈ２２和Ｌ６１５ 复合瘤苗免疫、攻击后两个月动物存活率分别达６０－０％ 、８５－０％ （ Ｐ＜０－０１）， 并且能够明显提高死亡小鼠的平均存活天数。瘤苗免疫动物脾细胞的细胞毒活性分别达５８－８％ 、６９－７％ （ Ｐ ＜ ０－０１） 。在制备复合瘤苗时先加入榄香烯后再热休克的免疫效果较好， 这在Ｌ６１５ 瘤苗更为明显， 从而为今后瘤苗免疫在临床上的应用提供了进一步的实验依据。

中药复方Ⅰ号对荷瘤鼠肿瘤生长抑制作用的实验研究

目的 研究中药复方Ⅰ号对移植性肿瘤的抑制作用。方法 运用人工形成的肿瘤模型 ,观察中药复方Ⅰ号单用、联用其它化疗药物后的抗癌效果及其相互作用。结果 中药复方Ⅰ号 7 5、15、3 0g/kg灌胃给药 ,对S1 80 、H2 2 荷瘤小鼠和大鼠W2 56 肉瘤有抑制作用 ,瘤重抑制率分别达 2 6%～ 47%、18%～ 47%、13 %～ 43 %。对大剂量环磷酰胺引起白细胞减少的毒副作用有对抗效果 ,用药后能使外周血白细胞和骨髓有核细胞显著回升。此外 ,中药复方Ⅰ号与环磷酰胺、顺铂等化疗药配伍用于小鼠移植性肿瘤的试验性治疗 ,有增效、减毒的功效。结论 中药复方Ⅰ号能抑制多种肿瘤细胞的生长 ,与环磷酰胺。

肿瘤基质成纤维细胞模型的建立及生物学特性研究

目的 建立肿瘤基质成纤维细胞模型并探讨其恶性生物学特性 ,为研究其恶性转化机制、开发靶向肿瘤基质的抗癌药物提供有价值的细胞模型。方法 用小鼠肝癌细胞H2 2 培养上清液诱导小鼠成纤维细胞L92 9,获得能稳定生长的L92 9 H2 2 细胞。用光镜、电镜观察其形态改变 ,MTT法检测其生长情况 ,免疫细胞化学测定其PCNA、bcl 2、MMP 9、TN表达变化 ,RT PCR测定其端粒酶活性 ,并分析其核型、蛋白合成能力、对常用抗癌药物的反应性及其条件培养基 (conditionedmedium ,CM)对H2 2 细胞生长的影响。结果 L92 9 H2 2 细胞出现多核和畸形核 ,染色体众数略有增加。细胞群体倍增时间较亲代细胞缩短 (t=2 65 41,P <0 0 5 ) ,分裂指数增高 (χ2 =4 5 2 5 ,P <0 0 5 ) ,PCNA、bcl 2、MMP 9、TN表达增强 (t≥ 3 3 0 5 5 ,P<0 0 1)。端粒酶活性增高 (t=-4 0 4163 ,P <0 0 0 1)。L92 9 H2 2 细胞对作用于S期或S期和M期或细胞骨架的抗癌药物较L92 9敏感 (q≥ 3 0 15 2 ,P <0 0 5 )。蛋白质合成能力增强 (q =-5 90 11,P <0 0 0 1)。其CM促进H2 2 细胞生长。结论 L92 9 H2 2 细胞较亲代细胞增殖快 ,核型发生变化 ,存活能力强 ,功能活跃 ,表达并分泌促进肿瘤细胞生长与侵袭的因子增强 。

钝顶螺旋藻藻胆蛋白的抑瘤研究

目的研究钝顶螺旋藻藻胆蛋白(phycobiliprotein,PBP)的抑瘤作用。方法给皮下接种H-22肝癌细胞的NIH小鼠,每天分别灌胃PBP15.0mg/kg、7.5mg/kg、3.75mg/kg及腹腔注射PBP15mg/kg,0.9%氯化钠注射液作为对照,共给药7天,第8天处死小鼠,测量肿瘤长短径,算体积,称体重、瘤重和脾重。结果PBP口服中、高剂量对小鼠H-22肝癌有抑制作用,瘤重抑制率分别为71.10%和51.10%,灌胃低剂量及注射高剂量无效。结论PBP对肿瘤有抑制作用。

小鼠移植性肝癌和乳腺癌中端粒酶的表达及其生物学特性

目的 探讨实验动物肿瘤的端粒酶表达及其生物学特性。方法 将 40只BALB/c小鼠随机分为H2 2 及MA782 2个组 ,每只小鼠左腹股沟皮下分别接种H2 2 、MA782 活细胞 5× 10 6个。连续观察移植瘤的生长 ,并对其组织切片进行观察及端粒酶PCRELISA检测。结果 H2 2 和MA782 的接种成功率均为 10 0 %。H2 2 的肿瘤生长速度较MA782 快 ,H2 2 的肿瘤体积显著大于MA782(P <0 .0 1)。H2 2 的核分裂像较MA782 更多见。H2 2 和MA782 的端粒酶活性均为阳性 ,且H2 2 的端粒酶A值 ( 1.6 72± 0 .15 6 )显著高于MA782 的端粒酶A值 ( 0 .817± 0 .14 2 ) ,P <0 .0 1。结论 H2 2 和MA782 是较好的移植性肿瘤动物模型。H2 2 与MA782 比较 ,H2 2 的核分裂像更多见 ,肿瘤生长更快。H2 2 和MA782 均表达端粒酶活性 ,且H2 2 较MA782 高 ,H2 2 有更高的恶性潜能。