肝癌H-22细胞膜抗原肽提取物对小鼠免疫功能的影响及其抑瘤作用

目的 应用小鼠肝癌H 2 2细胞膜相关抗原肽 (TAP)提取物免疫小鼠 ,观察其对小鼠自身移植肿瘤生长及免疫学参数的影响 ,为制备肿瘤疫苗提供实验依据。方法 采用微酸洗脱法制备分子量≤ 30 0 0Da的细胞膜TAP提取物 ,皮下免疫小鼠 ,检测胸腺细胞增殖反应、T细胞亚组百分数的变化 ,脾细胞ConA反应性、IL 2和IFN γ活性、CTL杀伤活性的变化及抑瘤效应。结果 TAP提取物免疫后 ,移植肿瘤的发生率降低 (P <0 .0 1) ,平均出现时间延迟 (P <0 .0 0 1) ,生长速度减慢 ;同时 ,脾细胞ConA反应性 (P <0 .0 1)、IFN γ(P <0 .0 5 )和IL 2分泌活性和CTL杀伤活性 (P <0 .0 5 )不同程度增强 ;胸腺细胞3 H TdR自发掺入率 (P <0 .0 5 )及CD4 + 和CD8+ T细胞百分数 (P <0 .0 5 )也有不同程度增高。结论 小鼠肝癌H 2 2细胞膜TAP提取物具有免疫原性 ,能有效激发免疫系统功能 ,抑制自身移植肿瘤的生长。

癌痛消胶囊调节小鼠荷H_(22)移植性肝癌细胞VEGF,p53和p21ras表达的实验研究

目的:通过观察癌痛消胶囊调节小鼠荷H22 移植性肝癌细胞中血管内皮生长因子(Vascularen dothelialgrowthfactor,VEGF)、p53和p21ras的表达作用,以探讨该药抑制肿瘤的作用机理。方法:昆明种雄性小白鼠60只,按随机区组分为6组(A -F组) ;A -E组每鼠均于前肢右腋皮下接种0 2mlH22 肿瘤细胞悬液(浓度为1×107/ml) ,接种24h后按体重给药。A组、B组、C组分别给予大、中、小剂量的癌痛消胶囊,D组予康赛迪胶囊,E组予生理盐水,均灌胃给药,每日1次。连续用药10天,停药24h ,称重并处死动物,剥取瘤块称重,计算出肿瘤生长抑制率,用免疫组化法检测癌细胞中VEGF ,p53 ,p21ras ,VHL的表达程度。F组予饲料及水分正常饲养。结果:A ,B ,C ,D组均有明显的抑瘤作用,其中以A组的抑瘤作用最明显(P<0 05或P<0 01)。造模各组动物的肝癌细胞中均见VEGF ,p53和p21ras的阳性染色,但阳性表达程度不同,与B ,C ,E组比较,癌痛消胶囊大剂量组和康赛迪胶囊组均可明显降低肝癌细胞中VEGF ,p53和p21ras的阳性表达(P<0 05或P<0 01)。结论:癌痛消胶囊对小鼠H22 移植性肝癌有抑瘤作用,抑制肿瘤生长的机理可能与下调VEGF ,p53和p21ras的水平有关。

超声激活血卟啉对小鼠肝癌H 22细胞抑制效应的实验研究

通过台盼兰拒染法,以细胞存活率为指标观察超声激活血卟啉对H 22肿瘤细胞在体外的直接杀伤作用;通过小鼠H 22实体瘤模型,以体积和体重变化为指标观察超声激活血卟啉对H 22肿瘤细胞在体内的生长抑制作用.结果表明,超声激活血卟啉在体内体外对H 22肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用.

拟黑多刺蚁对H22荷瘤鼠抑制肿瘤生长的初探

通过建立动物肿瘤模型,采用对比实验法,探讨拟黑多刺蚁对H22荷瘤鼠的抑瘤作用.结果表明:拟黑多刺蚁具有抑制H22肿瘤细胞的作用,并增强荷瘤鼠的免疫功能.

原卟啉Ⅸ-声动力学方法对H-22肿瘤细胞损伤机制的研究

研究了频率为1.43 MHz、强度为1 W/cm2的聚焦超声结合原卟啉Ⅸ对H-22肿瘤细胞的损伤作用,并探讨其生物学机制.应用台盼蓝拒染法检测不同处理后肿瘤细胞的存活率,环境扫描电镜和透射电镜观察细胞表面和内部的超微结构变化,荧光标记技术检测肿瘤细胞内活性氧的产生,硫代巴比妥酸(TBA)法检测肿瘤细胞脂质过氧化水平的变化.发现原卟啉Ⅸ-声动力学方法对H-22细胞产生的损伤效应表现为:细胞存活率明显下降,细胞表面和内部的超微结构改变,胞内活性氧和脂质过氧化水平增高.结果表明:原卟啉Ⅸ-声动力学方法能够使肿瘤细胞产生活性氧自由基,造成膜脂质过氧化,直接或间接地破坏细胞的膜系统,从而杀伤肿瘤细胞.

The Observation of the Photodynamic Effect of Hematoporphyrin Derivative (HpD) Combined with Aidiron on Ascitic Hepatoma Cells in Vitro

In this study, we found, through biochemical synthesis of DNA with the incorporation of ~3HTdR and morphological observation of the tumor cells, that aidiron (912), an extract from earthworm, had a stronger kilting effect (27%) on mouse ascitic hepatoma tumor cells (H_(22)) in vitro, and that laser-hematoporphyrin derivative (HpD) combined with 912 markedly enhanced the kilting effect (74%) on tumor cells. By means of the fluoresoence spectrophotography we also dis- covered that the killing effect of laser-HpD-912 on tumor calls was closely related with the produc- tion of free radicals and lipid peroxidation.

DHA复合物对鼠移植瘤细胞和T淋巴细胞细胞周期及凋亡的影响

目的 研究DHA复合物的抗癌机理。方法 用流式细胞术研究了DHA复合物对荷瘤鼠H2 2 细胞和T淋巴细胞细胞周期及凋亡的影响。结果 ( 1)与阴性对照组相比 ,DHA复合物中、高剂量组G0 G1期H2 2 癌细胞百分比明显增加 (P <0 .0 1) ;DHA复合物低、中、高剂量组G0 G1期T细胞百分比明显减小 (P <0 .0 1)。 ( 2 )与阴性对照组相比 ,DHA复合物低、中、高剂量组S期H2 2 癌细胞百分比明显减小 (P <0 .0 1) ,S期T细胞百分比明显增加 (P <0 .0 1)。 ( 3)与阴性对照组相比 ,DHA复合物中剂量组G2 M期H2 2 癌细胞百分比显著减少 (P <0 .0 1) ,DHA复合物低、高剂量组G2 M期H2 2 癌细胞以及DHA复合物低、中、高剂量组G2 M期T细胞百分比均显著升高 (P <0 .0 1)。 ( 4 )与阴性对照组相比 ,DHA复合物低、中、高剂量组H2 2 癌细胞增殖指数 (PI)明显下降 (P <0 .0 1) ,T细胞增殖指数明显升高 (P <0 .0 1)。 ( 5 )与阴性对照组相比 ,DHA复合物低、中、高剂量组H2 2 癌细胞及DHA复合物中、高剂量组T细胞凋亡率明显升高 (P <0 .0 1)。结论 DHA复合物可抑制H2 2 癌细胞的增殖 ,促进T淋巴细胞增殖 ,同时DHA复合物还可促进H2 2 细胞。

凯息平口服液对H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤生长作用及抑瘤机理探讨

凯息平口服液对小鼠移植性H2 2 实体瘤有明显的抑瘤生长作用 ,2 7.0、18.0、9.0g/kg剂量的抑瘤率分别 4 7.6 %、4 7.8%和 33.8% ;对H2 2 腹水癌小鼠有一定的延长生存期的作用 ,强于阳性对照药复方天仙胶囊 ,且没有氟尿嘧啶 (5 FU)所表现的毒副作用。对体外培养的H2 2 细胞有一定程度的抑制作用 ,最低有效药物浓度可达 2 5mg/L ,抑制作用可维持 4 8h以上。但对培养的脾T细胞 ,其剂量达 80 0mg/L时才表现出抑制增殖的作用。表明凯息平口服液对肿瘤细胞有独特的抑制作用 ,绝非细胞毒所致。实验还表明 :凯息平口服液能增强荷瘤鼠的T、B淋巴细胞增殖能力 ;对自然杀伤细胞 (NK)的活性也有明显的促进作用 ,同时明显增强腹腔巨噬细胞 (MΦ)的吞噬活性 ,显示了其在抗肿瘤免疫中具有重要的作用。

榄香烯复合瘤苗主动免疫抗瘤效应增强途径的比较研究

将ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠的Ｈ２２ 腹水型肝癌和６１５ 系小鼠的Ｌ６１５ 白血病细胞经榄香烯或／和热休克等不同处理制成瘤苗， 进行体内主动免疫实验和致敏脾细胞的体外细胞毒活性实验。结果表明： 热休克和榄香烯复合瘤苗比单一因素处理的瘤苗免疫效果好， 经Ｈ２２和Ｌ６１５ 复合瘤苗免疫、攻击后两个月动物存活率分别达６０－０％ 、８５－０％ （ Ｐ＜０－０１）， 并且能够明显提高死亡小鼠的平均存活天数。瘤苗免疫动物脾细胞的细胞毒活性分别达５８－８％ 、６９－７％ （ Ｐ ＜ ０－０１） 。在制备复合瘤苗时先加入榄香烯后再热休克的免疫效果较好， 这在Ｌ６１５ 瘤苗更为明显， 从而为今后瘤苗免疫在临床上的应用提供了进一步的实验依据。

中药复方Ⅰ号对荷瘤鼠肿瘤生长抑制作用的实验研究

目的 研究中药复方Ⅰ号对移植性肿瘤的抑制作用。方法 运用人工形成的肿瘤模型 ,观察中药复方Ⅰ号单用、联用其它化疗药物后的抗癌效果及其相互作用。结果 中药复方Ⅰ号 7 5、15、3 0g/kg灌胃给药 ,对S1 80 、H2 2 荷瘤小鼠和大鼠W2 56 肉瘤有抑制作用 ,瘤重抑制率分别达 2 6%～ 47%、18%～ 47%、13 %～ 43 %。对大剂量环磷酰胺引起白细胞减少的毒副作用有对抗效果 ,用药后能使外周血白细胞和骨髓有核细胞显著回升。此外 ,中药复方Ⅰ号与环磷酰胺、顺铂等化疗药配伍用于小鼠移植性肿瘤的试验性治疗 ,有增效、减毒的功效。结论 中药复方Ⅰ号能抑制多种肿瘤细胞的生长 ,与环磷酰胺。

肿瘤基质成纤维细胞模型的建立及生物学特性研究

目的 建立肿瘤基质成纤维细胞模型并探讨其恶性生物学特性 ,为研究其恶性转化机制、开发靶向肿瘤基质的抗癌药物提供有价值的细胞模型。方法 用小鼠肝癌细胞H2 2 培养上清液诱导小鼠成纤维细胞L92 9,获得能稳定生长的L92 9 H2 2 细胞。用光镜、电镜观察其形态改变 ,MTT法检测其生长情况 ,免疫细胞化学测定其PCNA、bcl 2、MMP 9、TN表达变化 ,RT PCR测定其端粒酶活性 ,并分析其核型、蛋白合成能力、对常用抗癌药物的反应性及其条件培养基 (conditionedmedium ,CM)对H2 2 细胞生长的影响。结果 L92 9 H2 2 细胞出现多核和畸形核 ,染色体众数略有增加。细胞群体倍增时间较亲代细胞缩短 (t=2 65 41,P <0 0 5 ) ,分裂指数增高 (χ2 =4 5 2 5 ,P <0 0 5 ) ,PCNA、bcl 2、MMP 9、TN表达增强 (t≥ 3 3 0 5 5 ,P<0 0 1)。端粒酶活性增高 (t=-4 0 4163 ,P <0 0 0 1)。L92 9 H2 2 细胞对作用于S期或S期和M期或细胞骨架的抗癌药物较L92 9敏感 (q≥ 3 0 15 2 ,P <0 0 5 )。蛋白质合成能力增强 (q =-5 90 11,P <0 0 0 1)。其CM促进H2 2 细胞生长。结论 L92 9 H2 2 细胞较亲代细胞增殖快 ,核型发生变化 ,存活能力强 ,功能活跃 ,表达并分泌促进肿瘤细胞生长与侵袭的因子增强 。

钝顶螺旋藻藻胆蛋白的抑瘤研究

目的研究钝顶螺旋藻藻胆蛋白(phycobiliprotein,PBP)的抑瘤作用。方法给皮下接种H-22肝癌细胞的NIH小鼠,每天分别灌胃PBP15.0mg/kg、7.5mg/kg、3.75mg/kg及腹腔注射PBP15mg/kg,0.9%氯化钠注射液作为对照,共给药7天,第8天处死小鼠,测量肿瘤长短径,算体积,称体重、瘤重和脾重。结果PBP口服中、高剂量对小鼠H-22肝癌有抑制作用,瘤重抑制率分别为71.10%和51.10%,灌胃低剂量及注射高剂量无效。结论PBP对肿瘤有抑制作用。

小鼠移植性肝癌和乳腺癌中端粒酶的表达及其生物学特性

目的 探讨实验动物肿瘤的端粒酶表达及其生物学特性。方法 将 40只BALB/c小鼠随机分为H2 2 及MA782 2个组 ,每只小鼠左腹股沟皮下分别接种H2 2 、MA782 活细胞 5× 10 6个。连续观察移植瘤的生长 ,并对其组织切片进行观察及端粒酶PCRELISA检测。结果 H2 2 和MA782 的接种成功率均为 10 0 %。H2 2 的肿瘤生长速度较MA782 快 ,H2 2 的肿瘤体积显著大于MA782(P <0 .0 1)。H2 2 的核分裂像较MA782 更多见。H2 2 和MA782 的端粒酶活性均为阳性 ,且H2 2 的端粒酶A值 ( 1.6 72± 0 .15 6 )显著高于MA782 的端粒酶A值 ( 0 .817± 0 .14 2 ) ,P <0 .0 1。结论 H2 2 和MA782 是较好的移植性肿瘤动物模型。H2 2 与MA782 比较 ,H2 2 的核分裂像更多见 ,肿瘤生长更快。H2 2 和MA782 均表达端粒酶活性 ,且H2 2 较MA782 高 ,H2 2 有更高的恶性潜能。