印迹基因H19对人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3基因表达谱的影响

目的获得印迹基因H19对滋养细胞株人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)细胞基因表达谱的影响,以期探讨H19对滋养细胞生物学行为的调控机制。方法含人全长H19cDNA重组真核表达质粒pRc/CMV经测序鉴定正确后,转染JEG-3细胞,采用Affymetrix的U133plus 2.0Array基因表达谱芯片检测基因表达谱的变化。结果转染后H19mRNA表达显著升高,JEG-3细胞基因表达谱明显改变,共筛选出96条差异基因,其中上调基因19条,下调基因77条。选择其中一种差异表达基因HES1,采用荧光定量PCR检测发现重度子痫前期胎盘组织HES1mRNA的表达水平较正常晚孕胎盘组织中HES1mRNA的表达水平明显降低。结论高通量基因芯片筛选出了H19调控滋养细胞的相关基因,为进一步探讨H19对滋养细胞生物学行为的调控机制提供了实验基础。