植物质膜H^+-ATPase的研究进展

质膜H+-ATPase参与植物细胞的物质跨膜转运、细胞的伸长生长、气孔的开闭以及植物对环境胁迫的响应等生理过程,是植物生命活动的“主宰酶”。其活性调节涉及激素、环境因子等多种因素,可发生在转录、翻译和酶分子等多级水平。因此,在植物生长发育过程中,质膜H+-ATPase活性的调节对生理活动起重要作用。本文就植物质膜H+-ATPase的结构特征、生理功能、活性变化及其调节机理等的研究进展进行综述,以进一步揭示该酶的生理功能及其调节机理与植物生命活动过程的关系。

盐胁迫对胡杨液泡膜H^+ATPase水解活性的影响

胡杨细胞经 50mmol·L- 1 NaCl处理 1 0d后 ,泡膜液H+ ATPase,PPiase水解活性都增加了 ,说明胡杨具有盐生植物的特性。盐胁迫对专一性抑制剂bafilomycinA1 ,DCCD更敏感 ,说明盐处理下胡杨液泡膜H+ ATPase与bafilomycinA1 ,DCCD结合位点上的构象可能发生了一定的变化。从Mg2 + ,ATP依赖性 ,NO3- 和bafilomycinA1 抑制特性、Cl- 激活特性证明胡杨液泡膜H+ ATPase是典型的V H+ ATPase。盐胁迫后 ,对底物ATP的亲和力增强。

外源一氧化氮供体对感染轮纹病菌后梨质膜H^+—ATPase及抗氧化酶活性的影响

梨叶片感染轮纹病菌5d后,用不同浓度的一氧化氮供体硝普钠(SNP)处理,测定了质膜H+—ATPase及抗氧化酶活性的变化。结果表明:浓度为0.3mmol/L SNP处理可提高H+—ATPase、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、愈创木酚过氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性,降低脂氧合酶(LOX)活性;浓度为0.1mmol/L和0.6mmol/L SNP处理则对其影响效果不明显;在同一浓度SNP处理组中,随处理时间的延长,其变化不同,较低浓度的SNP可缓解轮纹病菌对梨的伤害作用。

耐低钾水稻的根质膜ATPase和H^+分泌特性

对耐低钾和不耐低钾的水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）“威优４９”和“远诱１号”的根原生质膜ＡＴＰａｓｅ性质的研究表明，这两种水稻的质膜ＡＴＰａｓｅ活性的最适ｐＨ均为６０，均在底物ＡＴＰ浓度为３ｍｍｏｌ／Ｌ时达到最大反应速度，Ｋｍ值均在０．８５左右。Ｋ＋对这两种水稻的质膜ＡＴＰａｓｅ活性均具有促进作用。当介质中［Ｋｍ］≤５０ｍｍｏｌ／Ｌ时随［Ｋ＋］的增大，对耐低钾品种根质膜ＡＴＰａｓｅ活性的促进作用明显大于不耐低钾品种；当介质［Ｋ＋］在１００～２００ｍｍｏｌ／Ｌ之间时，Ｋ＋对两种水稻品种质膜ＡＴＰａｓｅ活性的刺激效应的差别减小。这两个水稻品种的基础Ｈ＋分泌没有明显差别，但钾刺激的Ｈ＋分泌存在差异，Ｋ＋对耐低钾品种Ｈ＋分泌的刺激效应大于不耐低钾品种。抑制剂实验表明在耐低钾和不耐低钾的水稻品种中，Ｋ＋刺激的根质膜ＡＴＰａｓｅ活性，Ｋ＋刺激的Ｈ＋分泌和Ｋ＋吸收之间存在着紧密的联系。对Ｋ＋刺激的质膜ＡＴＰａｓｅ活性和Ｈ＋分泌的抑制会减少根对Ｋ＋的吸收量。推测耐低钾水稻的质膜ＡＴＰａｓｅ和Ｈ＋分泌对Ｋ＋更为敏感，特别是在低浓度Ｋ＋存在时，可能是耐低钾水稻更能利用低浓度Ｋ＋、在低钾环境中能更好生长的一个原因。

囊泡型H^＋-ATPase B1亚基的突变对大鼠内髓集合管细胞H^＋-ATPase结构和泵氢功能的影响

目的研究致遗传性远端肾小管酸中毒（dRTA）的囊泡型H^＋-ATPaseB1亚基（ATP6V181）的点突变对大鼠内髓集合管（IMCD）细胞H^＋-ATPase结构和泵氢功能的影响。方法模拟致人类遗传性dRTA的B1亚基点突变构建野生型（WT）和7种突变型（M）质粒，转染大鼠IMCD细胞并筛选稳定表达绿色荧光蛋白（CFP）-B1 M和GFP—B1 WT的IMCD细胞系。应用免疫荧光、免疫蛋白印迹法、ATP。NADH耦合实验和快速酸负荷后不依赖钠的细胞内pH的变化，来观察GFP—B1 M和GFP—B1 WT在细胞内的分布，及其与H^＋-ATPase其他（E、H和c）亚基结合能力对ATP酶活性和H^＋-ATPase泵氢功能的影响。结果GFP．B1wT在转染细胞中呈囊泡样分布，与H^＋-ATPase的分布一致；而GFP—B1 M则为弥散分布。免疫沉淀结果显示只有GFP—B1 WT融合蛋白能和其他的H^＋-ATPase亚基（E、H和c）结合形成复合物，而GFP-B1 M融合蛋白无此作用。ATP酶活性只有在GFP—B1 WT转染细胞株的免疫沉淀产物中存在，在GFP—B1 M转染细胞株的免疫沉淀产物中不存在。在GFP—B1 M转染的IMCD细胞快速酸负荷后H^＋-ATPase介导的钠不依赖pHi的恢复受到显著抑制[pHi的恢复率（pHU／min）在L81P、R124W、M174R、P275R、G316E、P346R、G364S GFP—B1M转染的IMCD细胞分别为0．007±0．002、0．004±0．002、0．002±0．002、0．003±0．002、0．006±0．004、0．009±O．004、0．015±0．006，P〈0．05，n=51。而GFP—B1 WT转染的IMCD细胞pHi的恢复率与未转染IMCD细胞相似[（0．040±0．006）pH U／min]，且能被1μmol／L巴弗洛霉素（H^＋-ATPase特异性抑制剂）所抑制。结论遗传性dRTA囊泡型H^＋-ATPaseB1亚基点突变影响GFP—B1融合蛋白与其他亚基正常结合组装形成完整的H^＋-ATPase，并抑制H^＋-ATPase的泌酸功能。

甘氨酸甜菜碱增强青菜抗盐性的作用(英文)

通过对青菜 (BrassicachinensisL .)叶面喷施甜菜碱 ,发现其易于为叶片所吸收并运至其他部位。一定浓度范围内的甜菜碱可明显增强青菜对盐胁迫的抗性。甜菜碱可显著降低盐胁迫下叶和根中Na+的累积 ,这种降低主要是根系对Na+、K+的选择性吸收能力增强所致。盐胁迫下甜菜碱导致根系质膜H+ ATPase活性提高了 45.1 % ,据此推测甜菜碱降低植株中Na+的累积很可能部分由于促进根系质膜的主动排Na+过程。另外 ,甜菜碱对抗盐性的增强还体现在对叶片质膜和叶绿素的稳定作用和对脯氨酸合成的促进。

Validation of diagnostic strategies of autoimmune atrophic gastritis:A case report

BACKGROUND Autoimmune atrophic gastritis(AAG)is a type of chronic gastritis that mainly affects the gastric corpus.Due to the lack of standard diagnostic criteria and overlaps with the courses of Helicobacter pylori-related atrophic gastritis,reports on the diagnostic strategy of AAG at an early stage are limited.CASE SUMMARY A 71-year-old woman with severe anemia was diagnosed with AAG.Endoscopic views and pathological findings showed the coexistence of normal mucosa in the gastric antrum and atrophic mucosa in the gastric fundus.Serological tests showed that anti-parietal cell antibodies and anti-intrinsic factor antibodies were both positive.Immunohistochemical results,which showed negative H^(+)-K^(+)ATPase antibody staining and positive chromogranin A(CgA)staining,confirmed the mechanism of this disease.After vitamin B12 and folic acid supplementation,the patient recovered well.CONCLUSION Successful diagnosis of AAG includes serological tests,endoscopic characteristics,and immunohistochemistry for H^(+)-K^(+)ATPase and CgA antibodies.