肝癌H-22细胞膜抗原肽提取物对小鼠免疫功能的影响及其抑瘤作用

目的 应用小鼠肝癌H 2 2细胞膜相关抗原肽 (TAP)提取物免疫小鼠 ,观察其对小鼠自身移植肿瘤生长及免疫学参数的影响 ,为制备肿瘤疫苗提供实验依据。方法 采用微酸洗脱法制备分子量≤ 30 0 0Da的细胞膜TAP提取物 ,皮下免疫小鼠 ,检测胸腺细胞增殖反应、T细胞亚组百分数的变化 ,脾细胞ConA反应性、IL 2和IFN γ活性、CTL杀伤活性的变化及抑瘤效应。结果 TAP提取物免疫后 ,移植肿瘤的发生率降低 (P <0 .0 1) ,平均出现时间延迟 (P <0 .0 0 1) ,生长速度减慢 ;同时 ,脾细胞ConA反应性 (P <0 .0 1)、IFN γ(P <0 .0 5 )和IL 2分泌活性和CTL杀伤活性 (P <0 .0 5 )不同程度增强 ;胸腺细胞3 H TdR自发掺入率 (P <0 .0 5 )及CD4 + 和CD8+ T细胞百分数 (P <0 .0 5 )也有不同程度增高。结论 小鼠肝癌H 2 2细胞膜TAP提取物具有免疫原性 ,能有效激发免疫系统功能 ,抑制自身移植肿瘤的生长。

原卟啉Ⅸ-声动力学方法对H-22肿瘤细胞损伤机制的研究

研究了频率为1.43 MHz、强度为1 W/cm2的聚焦超声结合原卟啉Ⅸ对H-22肿瘤细胞的损伤作用,并探讨其生物学机制.应用台盼蓝拒染法检测不同处理后肿瘤细胞的存活率,环境扫描电镜和透射电镜观察细胞表面和内部的超微结构变化,荧光标记技术检测肿瘤细胞内活性氧的产生,硫代巴比妥酸(TBA)法检测肿瘤细胞脂质过氧化水平的变化.发现原卟啉Ⅸ-声动力学方法对H-22细胞产生的损伤效应表现为:细胞存活率明显下降,细胞表面和内部的超微结构改变,胞内活性氧和脂质过氧化水平增高.结果表明:原卟啉Ⅸ-声动力学方法能够使肿瘤细胞产生活性氧自由基,造成膜脂质过氧化,直接或间接地破坏细胞的膜系统,从而杀伤肿瘤细胞.

痤疮患者外周血IL-17、TNF-α及Th22细胞水平与痤疮严重程度的相关性研究

目的探究痤疮患者外周血白介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及外周血辅助性T细胞22(Th22)细胞水平与痤疮严重程度的相关性。方法选择2020年5月至2022年1月门诊进行治疗的痤疮患者78例作为观察组,同一阶段体检的健康体检者47例作为对照组,比较2组外周血IL-17、TNF-α、IL-22、Th22细胞水平。按Pillsbury法将78例痤疮患者分为轻度(Ⅰ级)组19例,中度(Ⅱ~Ⅲ级)组39例,重度(Ⅳ级)组20例,比较3组血清外周血IL-17、TNF-α、IL-22、Th22细胞水平。并进一步分析外周血IL-17、TNF-α及Th22细胞水平与痤疮严重程度的相关性。结果相较于对照组,观察组IL-17、TNF-α、IL-22及Th22细胞水平均明显上调(P<0.05)。相较于轻度组,中、重度组IL-17、TNF-α、IL-22、Th22细胞水平均明显上调(P<0.05);相较于中度组,重度组IL-17、TNF-α、IL-22、Th22细胞水平均明显上调(P<0.05)。IL-17、TNF-α、Th22预测痤疮严重程度的曲线下面积(AUC)分别为0.736、0.750、0.849,灵敏度分别为94.74%、95.53%、100.00%,特异度分别为51.28%、61.54%、71.79%。IL-17、TNF-α、Th22细胞水平与痤疮患者严重程度均呈正相关(r=0.544,0.443,0.691,P=0.032,0.040,0.021)。结论痤疮患者外周血中IL-17、TNF-α、Th22细胞水平均明显上调,与病情严重程度相关,随病情严重程度增加而上调,在预测痤疮严重程度方面具有重要价值。

青蒿琥酯纳米胶束制备及其体内药动学、抗肿瘤活性研究

目的制备青蒿琥酯纳米胶束,并考察体内药动学和抗肿瘤活性。方法以聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-聚组氨酸(mPEG-PLA-PHis)为载体制备纳米胶束,单因素试验结合Box-Behnken响应面法优化处方,测定包封率、载药量、沉降率、粒径、Zeta电位、体外释药。12只H_(22)荷瘤小鼠随机分为2组,分别尾静脉注射给予青蒿琥酯注射液和青蒿琥酯纳米胶束(1 mg/kg),于不同时间点采血,HPLC法测定青蒿琥酯血药浓度,计算主要药动学参数。36只H_(22)肝癌荷瘤小鼠随机分为6组,即模型组(生理盐水)、阳性组(20 mg/kg环磷酰胺)、青蒿琥酯注射液组(30 mg/kg)及青蒿琥酯纳米胶束低、中、高剂量组(10、20、30 mg/kg),末次给药3 d后记录体质量和瘤重,计算抑瘤率。结果最佳处方为mPEG-PLA-PHis与青蒿琥酯比例10.18∶1,青蒿琥酯质量浓度0.48 mg/mL,水化时间0.96 h,包封率、载药量、沉降率、粒径、Zeta电位分别为(94.27±1.26)%、(8.26±0.18)%、(4.19±0.20)%、(65.14±4.96)nm、-(17.64±1.06)mV。纳米胶束在弱酸性介质中的累积释放度高于在弱碱性介质中,具有pH敏感性。与注射液比较,纳米胶束t_(1/2)、MRT延长(P<0.01),CL降低(P<0.01),AUC_(0~t)升高(P<0.01);与模型组比较,青蒿琥酯纳米胶束不同剂量组小鼠体质量无明显变化(P>0.05),瘤重下降(P<0.05,P<0.01),以中剂量组更明显,抑瘤率达55.40%。结论青蒿琥酯纳米胶束包封率较高,体内抗肿瘤活性较强。

Th22细胞在炎症免疫性疾病及肿瘤中的研究进展

近年来,一群在细胞分化及生物学特性等方面不同于Thl、Th2和Th17细胞的新型辅助性T细胞-Th22细胞被识别,该亚群以分泌白介素-22(interleukin-22,IL-22)为特点,而不分泌IL-17或干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ).其功能主要通过IL-22来实现,介导炎症反应、自身免疫性疾病、肿瘤等的发生发展.Th22细胞及其效应分子IL-22参与多种疾病的病理生理过程,在机体免疫调节、宿主防御及组织修复中发挥重要作用,但是他们发挥保护还是致病的作用是由受影响的组织的性质和局部细胞因子环境决定的.针对Th22和IL-22在疾病中的作用还有待进一步的解答.本文就Th22细胞及其效应因子IL-22在炎症免疫性疾病及肿瘤中的研究进展进行阐述.

癌肿宁对荷肝癌(H_(22))小鼠的抑瘤作用及其对IL-2和NK细胞活性的影响

目的:探讨中药复方癌肿宁治疗实验性肝癌的疗效和机理。方法:建立荷实体型肝癌(H_(22))小鼠模型,观察经癌肿宁治疗对其肿瘤生长、NK细胞活性和IL-2活性的影响。结果:癌肿宁能显著抑制肿瘤的生长,其最高抑瘤率达56.66％,并可明显增强IL-2和NK细胞活性。结论:癌肿宁有明显的抗肝癌作用,并显著提高荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫功能。

克癌临对荷肝癌(H_(22))小鼠IL-2和NK细胞活性的影响

目的 :研究和探讨中药复方克癌临对荷肝癌 (H2 2 )小鼠的免疫调节作用。方法 :建立荷实体型肝癌(H2 2 )小鼠模型 ,观察经克癌临治疗对其IL - 2和NK细胞活性的影响。结果 :克癌临能显著提高荷瘤小鼠IL - 2和NK细胞活性 ,且其IL - 2活性及NK细胞活性和模型组或阳性对照组 (5 -Fu组 )比较有非常显著性差异 (p<0 0 0 1)。结论 :克癌临方药可显著提高荷瘤机体的抗肿瘤免疫功能。

Th22细胞及相关因子在结直肠癌的表达

目的通过检测Th22细胞及相关因子在结直肠癌的表达,探讨Th22细胞在结直肠癌发病机理中的作用。方法采用流式细胞技术检测50例结直肠癌患者肿瘤组织以及癌旁组织中Th22细胞比例的表达差异,同时采用qRT-PCR方法检测IL-22、AHR、CCL27、CCL22、CCL20在结直肠肿瘤微环境中的mRNA相对表达量。结果结直肠肿瘤组织中的Th22细胞比例明显高于癌旁组织(P<0.05),Dukes A+B期患者的Th22细胞比例显著低于Dukes C+D期(P<0.05);qRT-PCR结果显示IL-22、AHR、CCL22C、CL20在肿瘤组织的mRNA表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05),而CCL27在肿瘤组织的表达水平也较癌旁组织增高,但无统计学差异(P>0.05)。结论 Th22细胞在结直肠恶性肿瘤中聚集,并与肿瘤的分期进展相关,可能与肿瘤微环境分泌的趋化因子作用有关。

癌痛消胶囊调节小鼠荷H_(22)移植性肝癌细胞VEGF,p53和p21ras表达的实验研究

目的:通过观察癌痛消胶囊调节小鼠荷H22 移植性肝癌细胞中血管内皮生长因子(Vascularen dothelialgrowthfactor,VEGF)、p53和p21ras的表达作用,以探讨该药抑制肿瘤的作用机理。方法:昆明种雄性小白鼠60只,按随机区组分为6组(A -F组) ;A -E组每鼠均于前肢右腋皮下接种0 2mlH22 肿瘤细胞悬液(浓度为1×107/ml) ,接种24h后按体重给药。A组、B组、C组分别给予大、中、小剂量的癌痛消胶囊,D组予康赛迪胶囊,E组予生理盐水,均灌胃给药,每日1次。连续用药10天,停药24h ,称重并处死动物,剥取瘤块称重,计算出肿瘤生长抑制率,用免疫组化法检测癌细胞中VEGF ,p53 ,p21ras ,VHL的表达程度。F组予饲料及水分正常饲养。结果:A ,B ,C ,D组均有明显的抑瘤作用,其中以A组的抑瘤作用最明显(P<0 05或P<0 01)。造模各组动物的肝癌细胞中均见VEGF ,p53和p21ras的阳性染色,但阳性表达程度不同,与B ,C ,E组比较,癌痛消胶囊大剂量组和康赛迪胶囊组均可明显降低肝癌细胞中VEGF ,p53和p21ras的阳性表达(P<0 05或P<0 01)。结论:癌痛消胶囊对小鼠H22 移植性肝癌有抑瘤作用,抑制肿瘤生长的机理可能与下调VEGF ,p53和p21ras的水平有关。

白附子混悬液对H_(22)荷瘤小鼠肿瘤生长抑制作用及对免疫器官功能的影响

[目的]研究白附子混悬液对H_(22)细胞的抑瘤效应及其对免疫器官(胸腺、脾脏)功能的影响。[方法]用不同浓度的白附子混悬液(SGIR)给H_(22)实体瘤模型小鼠进行灌胃治疗,测定各组小鼠肿瘤生长抑制率(IR)和胸、脾指数。[结果]白附子混悬液能够明显抑制H_(22)细胞的生长,抑瘤率为39.14%,与模型组比较有显著性差异(P<0.01);给予白附子混悬液825mg/(kg·d)治疗能够促进荷瘤小鼠胸腺的发育,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),接近正常对照组水平,模型组小鼠脾指数与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05)。[结论]白附子混悬液对H_(22)细胞的生长有明显的增殖抑制作用;白附子混悬液对H_(22)细胞的增殖抑制作用可能是通过促进荷瘤小鼠的胸腺发育,从而达到调节荷瘤机体的免疫功能。

NMP22诊断膀胱移行细胞癌价值的评价

目的 :探讨核基质蛋白 2 2 (NMP2 2 )对膀胱移行细胞癌的临床诊断价值。方法 :选取 5 8例膀胱移行细胞癌患者为实验组 ,2 0例泌尿系统非尿路上皮肿瘤疾病的患者为对照组 1,10名健康志愿者为对照组 2 ,应用酶联免疫法测定三组受试者尿NMP2 2的含量。结果 :实验组尿NMP2 2中位含量为 2 3 .2× 10 3U/L ,明显高于对照组 1的 8.3× 10 3U/L和对照组 2的 2 .6× 10 3U/L (P <0 .0 1) ;尿NMP2 2检测膀胱移行细胞癌的敏感性为79% ,高于尿细胞学的 3 8% (P <0 .0 5 ) ;NMP2 2的阳性率与膀胱移行细胞癌的分期、分级以及肿瘤的形状、大小和数目无显著相关性。结论 :尿NMP2 2对膀胱癌的诊断有较高的敏感性 ,简便、无创 ,检测结果不受肿瘤的分化程度、生长方式。

超声激活血卟啉对小鼠肝癌H 22细胞抑制效应的实验研究

通过台盼兰拒染法,以细胞存活率为指标观察超声激活血卟啉对H 22肿瘤细胞在体外的直接杀伤作用;通过小鼠H 22实体瘤模型,以体积和体重变化为指标观察超声激活血卟啉对H 22肿瘤细胞在体内的生长抑制作用.结果表明,超声激活血卟啉在体内体外对H 22肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用.

拟黑多刺蚁对H22荷瘤鼠抑制肿瘤生长的初探

通过建立动物肿瘤模型,采用对比实验法,探讨拟黑多刺蚁对H22荷瘤鼠的抑瘤作用.结果表明:拟黑多刺蚁具有抑制H22肿瘤细胞的作用,并增强荷瘤鼠的免疫功能.

核基质蛋白22（NMP22）检测对膀胱移行细胞癌早期诊断价值的应用研究

目的 探讨核基质蛋白22（rqMe22）的检测对膀胱移行细胞癌（B11Cc）早期诊断的可行性及影响因素。方法采集可疑膀胱移行细胞癌患者、泌尿系良性疾病患者及健康对照人员尿液共225份样本，均行尿NMP22、尿细胞学、尿常规检测及中段尿培养，所有样本均新鲜检测，保存最长不超过4小时。分析比较各种方法的敏感性、特异性、191阳性预测价值和准确性。结果尿液NMP22水平以10．0×103U／L为临界值，超出为阳性，尿细胞学检测以发现肿瘤细胞为阳性，尿常规检测及中断尿培养用于辅助检查及排除其他疾病。尿液NMP22的阳性率为82．3％，与脱落细胞学（20．8％）比较，具有显著性差异（P〈0．01），此两种方法诊断膀胱移行细胞癌的特异性分别为64．4％和100％，阳性预测值分别为54．8％和100％，阴性预测值分别为91．7％和76．2％。结论尿NMP22采样方便，检测技术简单，具有较高的敏感性和特异性，可作为早期诊断膀胱移行细胞癌的肿瘤标志物，但需尽量排除影响因素。

Th22细胞和IL-22在肝癌外周血的表达及与肿瘤标记物的相关性研究

目的探讨Th22和IL-22在肝细胞癌外周血的表达情况,并分析其与肿瘤标记物的相关性。方法抽取45例肝细胞癌患者和15名正常人的外周血标本,采用流式细胞术检查Th22细胞水平,ELISA法检测IL-22水平,分析Th22、IL-22水平与肿瘤标记物AFP、CA125、CA193、CA199、CEA的相关性。结果肝细胞癌患者Th22和IL-22水平均显著高于健康人群水平(P<0.05)。男性和女性患者Th22、IL-22水平差异无统计学意义(P>0.05)。肝细胞癌患者外周血Th22细胞数量和血清IL-22水平存在正相关(r=0.322,P=0.033),而Th22数量和血清IL-22水平与肿瘤标记物AFP、CA125、CA193、CA199、CEA均无相关性(P>0.05)。结论尽管Th22和IL-22在肝癌外周血中高表达,但与血清肿瘤标记物无相关性,其在肝癌发病中的临床意义仍需临床大样本研究证实。

MicroRNA-30e-5p通过下调泛素特异性蛋白酶22抑制非小细胞肺癌的发生和发展

目的探讨microRNA-30e-5p(miR-30e-5p)是否可通过下调泛素特异性蛋白酶22(USP22)抑制非小细胞肺癌(NSCLC)的发生和发展。方法采用qPCR、蛋白质印迹法和免疫组织化学染色法检测miR-30e-5p、USP22在NSCLC组织和癌旁组织中的表达。NSCLC细胞株H460转染miR-30e-5p模拟物或miR-30e-5p抑制物后,利用qPCR和蛋白质印迹法检测细胞中miR-30e-5p、USP22的表达。构建USP22突变载体,采用荧光素酶报告基因检测miR-30e-5p在USP22基因中的结合位点。采用MTT法检测转染后H460细胞的增殖情况,并采用异种移植法检测裸鼠体内肿瘤生长情况。流式细胞术检测转染后H460细胞的周期阻滞和凋亡情况。结果 MiR-30e-5p、USP22在肿瘤组织中的表达均高于癌旁组织(P均<0.01)。在H460细胞中过表达miR-30e-5p后USP22 mRNA和蛋白的表达均下调(P均<0.01),而抑制miR-30e-5p表达后USP22mRNA和蛋白的表达均上调(P均<0.01)。NSCLC组织中miR-30e-5p与USP22的表达呈负相关(P<0.01)。miR-30e-5p可通过结合在3′UTR的特异序列负调控USP22的表达。过表达miR-30e-5p可抑制H460细胞的增殖、诱导细胞周期阻滞和凋亡,并抑制裸鼠体内肿瘤的生长(P<0.05,P<0.01);而抑制miR-30e-5p的表达可促进H460细胞的增殖、抑制细胞周期阻滞和凋亡(P<0.05,P<0.01)。结论 MiR-30e-5p可以下调USP22的表达,从而抑制NSCLC的发生和发展,提示其可作为NSCLC患者的潜在治疗靶点。

USP22的作用机制及其与肿瘤关系的研究现状

泛素化特异性蛋白酶22(USP22)是一种去泛素化酶,其通过去除蛋白底物的泛素连接,影响c-Myc、Bmi-1、FBP-1等靶基因的表达,从而调控细胞周期进展、细胞生长分化等一系列生物学行为,可能导致肿瘤的发生。目前已发现USP22在甲状腺癌、喉癌、口腔鳞癌等多种肿瘤组织细胞中高表达,且与恶性肿瘤的分期、预后密切相关,是近年来被广泛研究的肿瘤标记物,对USP22生理作用机制的探讨已成为目前肿瘤学方面的研究热点。USP22可能作为抗肿瘤治疗新的作用靶点,但相关药物仍需进一步研究。

USP22在神经母细胞瘤中的表达及意义的初步研究

目的观察肿瘤干细胞标记物泛素特异性肽酶22（USP22）蛋白在神经母细胞瘤中的表达，探讨其在神经母细胞瘤发生发展过程中的作用。方法用免疫组化法检测USP22蛋白在68例神经母细胞瘤组织和瘤旁组织细胞中的表达，结合临床资料分析其与临床病理学特征的关系。结果免疫组织化学染色结果显示USP22主要在肿瘤细胞核中呈阳性表达，而瘤旁组织中呈阴性表达。进一步统计分析，USP22在Ⅲ-Ⅳ期肿瘤中的表达水平高于Ⅰ～Ⅱ肿瘤（P〈0．05）；USP22在有淋巴结转移组的表达水平明显高于无淋巴结转移组（P〈0．05）；而USP22在神经母细胞瘤中的表达水平与性别、年龄、大小、肿瘤部位、病理分型等参数无相关性（P〉0．05）。结论USP22在神经母细胞瘤细胞中有表达，其表达水平与肿瘤的临床分期及是否淋巴结转移有相关性，与性别、年龄等参数无明显相关性。

泛素特异性肽酶22基因与肿瘤发展和预后的研究进展

泛素特异性肽酶22（ubiquitin—specificprocessingpeptidase22，USP22）是一种新型的去泛素化酶家族基因，是hSAGA复合物的亚单位。越来越多的实验研究结果证明泛素特异性肽酶22（USP22）是癌干细胞标记物中的一种，在肿瘤形成及发展的病理过程中扮演关键的角色，并与不良预后有着密切的关系。

外周血辅助性T细胞22比例与肿瘤相关性的Meta分析

目的:系统评价外周血辅助性T细胞22(Th22细胞)比例与肿瘤的相关性。方法:计算机检索PubMed、EMBASE、Web of Science、CNKI及Wanfang等数据库,搜集建库至2018年11月25日公开发表的关于外周血Th22细胞比例与肿瘤发生发展相关性的研究。采用RevMan5.3软件进行Meta分析。结果:最终共纳入26个研究,包括8种肿瘤,共计1020例患者和679例健康对照。Meta分析的结果显示,肿瘤组外周血Th22细胞比例高于健康人群组[WMD=1.37,95%CI(1.07,1.68),P<0.00001],并且晚期患者外周血Th22细胞比例高于早期患者[WMD=0.41,95%CI(0.17,0.66),P=0.0009]。亚组分析结果显示,在不同肿瘤类型(除脑胶质瘤外)、不同肿瘤分期、不同Th22细胞圈定方法以及不同NOS评分的研究中,患者的外周血Th22细胞比例均比健康人群高(P均<0.05)。结论:外周血Th22细胞比例与肿瘤发生相关,Th22细胞比例升高可能会增加发生肿瘤的风险,且对肿瘤的恶性程度具有一定的提示作用。