乌腺金丝桃对抑郁症大鼠海马单胺类神经递质含量5-HT及5-HIAA的影响

目的:探讨乌腺金丝桃对抑郁症大鼠海马单胺类神经递质五羟色胺(5-HT)及五羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的影响。方法:建立大鼠孤养结合慢性不可预计性应激抑郁模型,用酶联免疫法测定药物对单胺类神经递质5-HT及5-HIAA含量的影响。结果:乌腺金丝桃高剂量组(2.88g/kg)能显著提高大鼠慢性不可预计性应激抑郁模型的单胺类神经递质5-HT及5-HIAA的含量。结论:乌腺金丝桃具有一定的抗抑郁作用,其抗抑郁作用可能与增加海马单胺类神经递质5-HT及5-HIAA含量有关。

乌腺金丝桃与当归配伍对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌HSP70、NF-κBp65表达影响

目的观察乌腺金丝桃与当归配伍(金归)干预后的心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌细胞中HSP70及NF-κBp65的表达,探讨HSP70与NF-κBp65在MIRI大鼠细胞凋亡或脂质过氧化损伤等进程中的调控作用及机制。方法金归2∶1组作用于MIRI大鼠,采用免疫组化法及荧光定量PCR检测方法观察大鼠心肌HSP70、NF-κBp65蛋白及基因表达水平的影响。结果与模型组比较,2∶1组可明显提高HSP70蛋白的表达,减弱NF-κBp65蛋白活化,HSP70mRNA水平上调,NF-κBp65mRNA水平显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论金归2∶1组抗MIRI的机制可能与提高HSP70的表达以抑制NF-κB p65通路、抑制心肌细胞凋亡或脂质过氧化损伤等有关。

乌腺金丝桃HaHYP1基因的克隆及原核表达

目的:克隆乌腺金丝桃HaHYP1基因,并进行表达分析,为进一步探索金丝桃素生物合成的分子机制奠定基础。方法:根据已报道的金丝桃素合成酶Hyp-1同源基因设计兼并引物,利用qRT-PCR扩增金丝桃素合成酶Hyp-1基因,并进行序列分析和原核表达;同时利用qRT-PCR技术分析HaHYP1基因在不同组织部位的表达模式。结果:乌腺金丝桃HaHYP1基因的完整ORF为480 bp,编码159个氨基酸,推测的分子量为17.9 kDa,等电点为5.54。HaHYP1蛋白具有典型的P环结构和Bet v1家族特征性基序区,属于PR-10亚家族。乌腺金丝桃HaHYP1与贯叶连翘HpHYP1位于同一小的分支,表明两者亲缘关系最近。qRT-PCR检测结果表明,该基因在乌腺金丝桃叶中表达最高,其次是花和茎,根中表达最少。原核表达载体pQE-30-HaHYP1转化至大肠杆菌M15感受态细胞,在18 kDa附近表达出目的蛋白。结论:该研究为深入开展金丝桃素生物合成的分子机制和体外转化研究提供了理论依据。

长白山金丝桃属植物生态分化中的光合特性分析

对长白山地区两种金丝桃属植物长柱金丝桃(Hypericum ascyron L.)与乌腺金丝桃(Hypericum attenuatum Choisy)的净光合速率、蒸腾速率与水分利用率等光合特性,光合色素含量以及其生境土壤中的水分含量之间的差异进行了比较研究.结果表明:长柱金丝桃的净光合速率在两个生长季均明显高于乌腺金丝桃,且差异极显著(P<0.01);长柱金丝桃的水分利用率显著高于乌腺金丝桃(P<0.01);长柱金丝桃中的叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素的含量显著高于乌腺金丝桃(P<0.01).水分利用效率与净光合速率显著正相关,与蒸发速率及光合有效辐射显著负相关;蒸发速率与光合有效辐射显著正相关.利用主成分分析筛选出5个区分两植物差异的指标:净光合效率、蒸腾速率、光合有效辐射、温度和光合色素含量.长柱金丝桃的光合性能强于乌腺金丝桃,净光合速率与光合色素含量是导致两种植物生态分化的主要外部因素.

乌腺金丝桃对类风湿关节炎大鼠NO及VEGF表达的影响

目的:探讨乌腺金丝桃对类风湿关节炎大鼠的治疗作用。方法:以胶原诱导性(CIA)大鼠为实验模型,以雷公藤多苷为阳性对照药,观察乌腺金丝桃对类风湿关节炎大鼠血清中NO含量及滑膜组织中VEGF含量的影响。结果:与模型组比较,乌腺金丝桃和雷公藤多苷均能抑制类风湿关节炎大鼠NO及VEGF的表达(P<0.01或P<0.05)。结论:乌腺金丝桃可能通过降低类风湿关节炎大鼠过高的NO及VEGF含量发挥治疗作用。

黑龙江省乌腺金丝桃资源学调查

目的:明确黑龙江省乌腺金丝桃的资源分布,为合理开发利用乌腺金丝桃提供科学依据。方法:查阅资料与实地考察黑龙江省乌腺金丝桃的群丛类型,并采用样方调查法调查了单位面积蓄积量。结果:乌腺金丝桃所在的植物群丛为:榛子灌丛,单位面积蓄积量为5.60 kg/667m2。结论:乌腺金丝桃在黑龙江省分布少,资源有限,应在人工栽培方面做进一步研究。

黑龙江省两种金丝桃属植物理化鉴别特征

目的 :为了探讨黑龙江省两种金丝桃属植物长柱金丝桃 (Hypericum ascyron L.)、乌腺金丝桃 (H.attenuatumChoisy.)理化鉴别特征。方法 :分别采用黄酮、皂苷、鞣质及金丝桃素的鉴别试验。结果 :黄酮定性反应均为阳性 ;皂苷定性反应表明均含三萜皂苷 ;鞣质的定性反应表明它们所含鞣质为缩合鞣质 ;金丝桃素的定性反应表明乌腺金丝桃含金丝桃素。结论 :二者理化鉴别特征有一定差别 。

不同产地、不同物候期对乌腺金丝桃中总黄酮含量的影响

目的:探讨不同产地、不同物候期乌腺金丝桃中总黄酮含量的变化。方法:采用比色法测定了3个产地乌腺金丝桃在不同物候期总黄酮的含量。以总黄酮为技术指标筛选乌腺金丝桃药材的采收期、黄酮含量最高的产地。结果:以总黄酮成分为指标确定的产地、采收期为:佳木斯猴石山产,花盛期采收。结论:通过研究发现乌腺金丝桃药材以勃利县产花盛期采收总黄酮含量最高,对乌腺金丝桃的开发有一定指导意义。

赤霉素浸种对乌腺金丝桃种子发芽的影响试验

以乌腺金丝桃种子为试验材料,研究不同浓度赤霉素、不同浸种时间、不同温度、不同p H值对其种子发芽的影响,从发芽率及发芽势上进行分析,结果表明:在25℃,浸种24h,p H6.5,赤霉素500 mg/L浸种条件下,乌腺金丝桃种子发芽效果最好,发芽势为62.96%,发芽率为67.36%。

乌腺金丝桃和长柱金丝桃生药鉴别研究

目的:研究乌腺金丝桃和长柱金丝桃的生药学鉴别特征并与贯叶金丝桃进行比较,为这3种金丝桃属植物的使用提供质量保证。方法:采用基源、性状和显微鉴别的方法对乌腺金丝桃和长柱金丝桃的原植物形态、药材性状及显微特征进行研究,并将结果与贯叶金丝桃进行比较,写出检索表。结果:长柱金丝桃、乌腺金丝桃和贯叶金丝桃3种金丝桃属植物在形态上主要在茎的高矮、叶上腺体分布、花的颜色及腺点分布和种子颜色及有无龙骨状突起方面不同;性状上三者主要在茎的长短、叶的排列及腺点分布、花的颜色及蒴果是否有腺点分布方面不同;显微特征的区别主要在茎叶是否有分泌细胞团和气孔是否有二联式方面。结论:可以从基源、性状和显微特征三方面区别长柱金丝桃、乌腺金丝桃和贯叶连翘,为正确使用这3种金丝桃属药用植物奠定重要理论基础。

栽培条件下乌腺金丝桃生长与发育节律

通过对栽培乌腺金丝桃(Hypericum attenuatum Choisy)进行形态与发育节律观测,并建立Verhaulst生长模型,研究了药用植物乌腺金丝桃栽培条件下的生长发育节律.结果表明:乌腺金丝桃株高在7月上旬达到峰值,平均为63cm;叶数也是在7月上旬达到最多;分枝出现在5月上旬,数量在7月上旬达到峰值;始花期在6月中旬,盛花期在7月初.株高、叶对数和分枝变化的Verhaulst模型分别为:H=73.902/(1+6.526×e^(-0.051(t-10))),L=27.11/(1+2.48×e^(-0.021(t-10))),B=19.922/(1+5.037×e^(-0.066(t-30))).

乌腺金丝桃显微特征观察

为了探讨乌腺金丝桃(Hypericum attenuatum Choisy)的显微特征,采用显微鉴定方法对乌腺金丝桃茎、叶横切面及全草粉末进行生药学研究。结果表明,乌腺金丝桃茎横切面维管束为外韧型;叶为异面叶,栅栏细胞一列;全草粉末石细胞众多;导管为螺纹、具缘纹孔,少为网纹;花粉粒长球形;气孔为不定式或不等式。

乌腺金丝桃不同采收期不同部位中金丝桃苷含量变化研究

本试验采用HPLC法测定乌腺金丝桃不同采收期不同部位中金丝桃苷的含量。结果表明,金丝桃苷含量由低到高依次分布为:果实<花<嫩茎<叶;叶、嫩茎、果实中金丝桃苷含量最高的时期为7月份,花中为8月份。乌腺金丝桃的最佳采收部位是叶,最佳采收期为7月下旬。

反相高效液相色谱法测定乌腺金丝桃中伪金丝桃素的含量

样品(10.000 0 g)经80%(体积分数)乙醇溶液300 mL于70℃下超声提取35 min(超声功率225 W)。分取浓缩后的提取液总质量的10%,用80%乙醇溶解并定容至100 mL,经0.45μm PTEF微孔滤膜过滤后,进行反相高效液相色谱分离。以VP-ODS C18色谱柱为固定相,以不同体积比的0.006 mol·L-1的磷酸氢二钠-磷酸溶液(p H 6.5)和甲醇的混合液为流动相进行梯度洗脱。伪金丝桃素的质量浓度在0.21~200.0 mg·L-1的范围内与其峰面积呈线性关系,检出限为(3S/N)为0.040 mg·L-1。按标准加入法进行回收试验,回收率为95.3%~101%,测定值的相对标准偏差(n=6)均小于3.5%。

野生与栽培乌腺金丝桃不同部位中总黄酮及芦丁的含量变化

目的:测定野生与栽培乌腺金丝桃不同部位中总黄酮及芦丁的含量。方法:采用乙醇超声提取法提取乌腺金丝桃不同部位总黄酮及芦丁,以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法和高效液相色谱法测定栽培和野生乌腺金丝桃(叶、茎、花)中的总黄酮含量。结果:乌腺金丝桃不同部位中总黄酮含量有很大差异,其中野生乌腺金丝桃中含量大小为叶>花>茎;栽培乌腺金丝桃中含量大小为叶>花>果>茎,栽培乌腺金丝桃各部位中总黄酮含量均大于野生乌腺金丝桃各部位中总黄酮含量,但未达到统计学上显著水平,而芦丁含量均达到极显著差异。结论:乌腺金丝桃不同部位黄酮含量有差异,其中叶中含量最高,茎中最少;栽培乌腺金丝桃含量高于野生乌腺金丝桃。

乌腺金丝桃总黄酮的超声提取及其抗氧化活性

黄酮类化合物是乌腺金丝桃植物的主要生物活性成分之一.为了研究开发乌腺金丝桃的应用价值,本文以乌腺金丝桃为材料,通过单因素和响应面法得到乌腺金丝桃中总黄酮提取的最佳工艺条件为超声功率500,W、超声温度60℃、乙醇体积分数62%,、液料比37﹕1、提取时间32,min,该条件下乌腺金丝桃中总黄酮提取得率为6.20%,.在10~500,μg/m L范围内,乌腺金丝桃黄酮提取液对不同自由基表现出不同的清除能力,其对DPPH自由基的清除能力相对最强(IC50值为322.58,μg/m L),而对ABTS自由基的清除能力最弱.

乌腺金丝桃中金丝桃素超声提取工艺及其抗病毒性能

以金丝桃素提取量为评价指标,在单因素实验基础上,采用响应面法对提取因素进行优化,建立了超声提取乌腺金丝桃中金丝桃素的工艺数学模型。确定最佳提取条件为:提取温度为41℃,丙酮体积分数为69.5%,提取时间为43.5 min,提取溶剂体积(m L)与药材质量(g)比值即液料比为15.3,在该条件下金丝桃素提取量可达4.70 mg/g。主效应关系为提取时间>丙酮浓度>提取温度>液料比。采用细胞病变效应(CPE)法检测乌腺金丝桃提取物体外抗传染性支气管炎病毒(IBV)作用。乌腺金丝桃提取物在鸡胚肾细胞(CEK)感染IBV前、后及同时加入,有一定抑制细胞病变的作用,说明乌腺金丝桃提取物具有一定的抗IBV作用。

乌腺金丝桃-丹参药对提取工艺的优化

目的优化乌腺金丝桃-丹参药对提取工艺。方法在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、料液比、提取时间为影响因素,金丝桃苷、丹参酮Ⅱ_A含有量为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果最佳条件为14倍量80%乙醇提取2次,每次1.75 h,综合评分93.22。结论该方法稳定可行,可提取乌腺金丝桃-丹参药对。

赶山鞭化学成分的研究

目的研究赶山鞭Hypericum attenuatum Choisy的化学成分。方法赶山鞭80%乙醇提取物采用硅胶、中压柱、HPLC等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到15个化合物,分别鉴定为对羟基苯甲酸(1)、反式阿魏酸⁃β⁃D⁃葡萄糖苷(2)、(6R,9R)⁃3⁃酮⁃α⁃紫罗兰醇⁃9⁃O⁃β⁃D⁃葡萄糖苷(3)、(6S,9R)⁃6⁃羟基⁃3⁃酮⁃α⁃紫罗兰醇⁃9⁃O⁃β⁃D⁃葡萄糖苷(4)、2⁃oxabicyclo[3􀆰2􀆰2]nona⁃5,7,8⁃triene(5)、金丝桃苷(6)、icaraside B2(7)、二氢脱氢二松柏基醇⁃9′⁃O⁃β⁃D⁃葡萄糖苷(8)、4,7,9⁃三羟基⁃3,3′⁃二甲氧基⁃8⁃O⁃4′⁃新木脂素⁃9′⁃O⁃β⁃D⁃葡萄糖苷(9)、香草酸(10)、顺式对羟基肉桂酸(11)、异槲皮苷(12)、木犀草素8⁃C⁃α⁃L⁃阿拉伯糖苷(13)、芒果苷(14)、槲皮素(15)。结论除了化合物1、6、12、15外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到。

不同激素对乌腺金丝桃愈伤组织诱导与增殖的影响

以乌腺金丝桃无菌苗为材料,分析了不同激素对愈伤组织诱导与增殖的影响,以确定适合的激素配比。结果表明:2,4~D 0.6 mg/L+KT 0.4 mg/L较适合乌腺金丝桃愈伤组织诱导,诱导率为81.11%;而增殖阶段的激素配比为2,4~D 0.6 mg/L+TDZ0.4 mg/L,增殖倍数达7.2。