青蒿醇提物对H_(22)肝癌小鼠的抑瘤作用研究

目的:观察青蒿醇提物对H22肝癌小鼠的体内抑瘤作用。方法:取H22肝癌细胞接种于小鼠右腋皮下,随机分为模型对照组、5-氟尿嘧啶组(5-FU)及青蒿醇提物125 mg/(kg.d)组、500 mg/(kg.d)组,5-FU组肌肉注射给药,其余各组灌胃给药。连续给药8 d后,剖瘤称取质量,计算抑瘤率;利用高效液相色谱仪测定青蒿醇提物中青蒿素含量。结果:与模型对照组比较,青蒿醇提物各剂量组均不同程度的抑制肿瘤生长(P<0.01),青蒿醇提物125 mg/(kg.d)组和青蒿醇提物500 mg/(kg.d)组的抑瘤率分别为54.6%、50.6%;本实验青蒿醇提物中青蒿素含量为0.02%,而在青蒿素抗H22小鼠肝癌试验中,青蒿素在剂量为10 mg/(kg.d)时,对H22小鼠肝癌已没有明显的抑制作用。结论:青蒿醇提物对肝癌有明显的抑制作用;除青蒿素以外,中药青蒿中可能存在其它的抗肿瘤成分。

重组Runx3腺病毒联合顺铂对小鼠肝癌移植瘤生长抑制作用研究

目的:探讨重组Runx3腺病毒(Ad-Runx3)与顺铂联合应用对小鼠H22肝癌移植瘤的抑制作用及其机制。方法:将接种H22细胞的荷瘤小鼠随机分为对照组、Ad-Runx3组、顺铂组、顺铂+Ad-Runx3联合治疗组;15d后处死小鼠,通过称量各小鼠H22移植瘤的质量,计算抑瘤率;电镜观察荷瘤小鼠肿瘤组织超微结构改变。结果:联合治疗组对移植瘤抑制力最强,抑瘤力达65.7%,电镜下可见较为典型的细胞凋亡形态学改变。结论:Ad-Runx3与顺铂联合应用,能显著抑制小鼠肝癌移植瘤生长,这种作用可能与诱导肝癌细胞凋亡相关。

含笑内酯对H22肝癌腹水瘤模型小鼠腹腔积液的治疗作用

目的探讨含笑内酯(MCL)对H22肝癌腹水瘤模型小鼠腹腔积液的治疗作用及机制。方法取H22肝癌腹水瘤细胞(0.2 m L,约2×10~7个)注射至40只BALB/C小鼠腹腔建立腹水瘤模型。接种24 h后小鼠随机分为MCL组[50 mg/(kg·d)MCL连续腹腔给药7 d]和模型组(等剂量生理盐水),每组20只。每日观察小鼠日常活动状态,记录小鼠体质量、腹围的变化。末次给药24 h后各组处死13只小鼠,采血后检测肿瘤标志物糖类抗原(CA)199、血清癌胚抗原(CEA)、铁蛋白、CA242、甲胎蛋白(AFP)水平;留取肝脏组织及腹水瘤细胞行HE染色,观察其病理状态;流式细胞术检测2组小鼠腹水瘤细胞凋亡情况。结果实验第4天开始,与模型组相比,MCL组体质量下降,腹围缩小(P<0.05)。与模型组比较,MCL组CEA、CA242、AFP水平出现下降,铁蛋白明显升高,肝组织及腹水瘤细胞水肿程度降低,腹水瘤细胞凋亡率升高(均P<0.05)。结论 MCL可抑制H22肝癌腹水瘤小鼠腹腔积液的生成,其机制可能是通过诱导肝癌细胞凋亡来实现的。

理冲汤加减联合5-氟尿嘧啶对H22荷瘤小鼠移植瘤上皮间质转化的影响

目的:探讨理冲汤加减联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对H22荷瘤小鼠皮下移植瘤上皮间质转化(EMT)的影响。方法:构建小鼠移植性肝癌模型。成瘤后,将其随机分为空白组,5-FU组(5-FU,2.5mg·kg^-1),理冲汤加减联合5-FU组(5-FU+理冲汤加减组),理冲汤加减组(理冲汤加减25g·kg^-1),每组10只。观察理冲汤加减对小鼠皮下移植瘤的作用及与5-FU合用的效果;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-timePCR)检测各组瘤体中EMT相关基因上皮型钙黏蛋白(E-cadherin),神经型钙黏蛋白(N-cadherin),锌指转录因子Snail,TwistmRNA表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组瘤体内EMT相关蛋白E-cadherin,N-cadherin,Snail,波形蛋白(Vimentin)的表达。结果:5-FU组,5-FU+理冲汤加减组,理冲汤加减组的抑瘤率分别为59.18%,84.42%,10.39%,均能抑制肝癌移植瘤的生长,且5-FU+理冲汤加减组抑瘤率显著高于5-FU组(P<0.01)。胸腺指数、脾指数显示,5-FU+理冲汤加减组胸腺指数与脾指数均高于5-FU组(P<0.05,P<0.01)。PCR显示,与空白组比较,5-FU组,5-FU+理冲汤加减组E-cadherin的表达上调,N-cadherin,Snail,Twist的表达下调(P<0.05,P<0.01);与5-FU组比较,5-FU+理冲汤加减组E-cadherin的表达上调,N-cadherin,Snail,Twist的表达下调(P<0.05,P<0.01)。Westernblot显示,与空白组比较,5-FU组,5-FU+理冲汤加减组,理冲汤加减组E-cadherin的表达上调,N-cadherin,Snail,Vimentin的表达下调(P<0.05,P<0.01);与5-FU组比较,5-FU+理冲汤加减组E-cadherin的表达上调,N-cadherin,Snail,Vimentin的表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论:理冲汤加减与5-FU单独和联合使用均对肝癌小鼠移植瘤的生长有抑制作用,且两药合用能增强化疗效果,且一定程度上抑制了5-FU的毒性,其机制可能与对肝癌EMT的抑制有关。