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H2A变体在小鼠不同时期雄性生殖细胞核质区的分布 被引量:1
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作者 时小艳 潘丽红 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2253-2258,共6页
【目的】了解小鼠雄性生殖细胞中macro H2A、H2A.Z和H2A.X 3种组蛋白变体变化与其发育特征间的联系,为揭示原始生殖细胞(PGCs)的发育机理及其分子调控机制奠定基础。【方法】以C57BL/6J小鼠胚胎的中肾和生殖嵴为试验材料,通过免疫荧光... 【目的】了解小鼠雄性生殖细胞中macro H2A、H2A.Z和H2A.X 3种组蛋白变体变化与其发育特征间的联系,为揭示原始生殖细胞(PGCs)的发育机理及其分子调控机制奠定基础。【方法】以C57BL/6J小鼠胚胎的中肾和生殖嵴为试验材料,通过免疫荧光染色技术检测11.5dpc、12.5dpc和13.5dpc不同发育时期含有PGCs的组织石蜡切片及单细胞中macro H2A、H2A.X和H2A.Z变体的分布情况。【结果】macro H2A变体在11.5dpc胚胎时主要存在于细胞质中,12.5dpc时在细胞质中的表达增强,但进入生殖嵴后(13.5dpc)表达消失;H2A.X变体在11.5dpc和12.5dpc时存在于PGCs的核质区,13.5dpc时主要存于细胞质,且呈聚集分布;H2A.Z变体在11.5dpc时在PGCs的核质区均有存在,12.5dpc和13.5dpc时主要分布在细胞核,且表达明显增强。【结论】随着PGCs的不断迁移、增殖与分化,macro H2A、H2A.X和H2A.Z 3种组蛋白H2A变体在细胞核质区的分布及表达情况也发生变化,即H2A变体分布特征与PGCs的性别分化及其有丝分裂停止相关。 展开更多
关键词 小鼠 雄性生殖细胞 macroh2a变体 h2a.Z变体 h2a.X变体 分布
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黄芪多糖上调γH2AX的表达提高宫颈癌细胞放疗敏感性的分析
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作者 刘雅雯 章玲玲 +1 位作者 涂海燕 李凌 《实用癌症杂志》 2024年第6期871-873,877,共4页
目的研究黄芪多糖(APS)对宫颈癌Siha细胞增殖能力的影响,观察放疗后磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)的表达情况。方法体外培养Siha细胞,将其分为两组即放疗组和APS联合放疗组。应用CCK8法检测不同浓度APS对Siha细胞增殖活性的影响;Western blo... 目的研究黄芪多糖(APS)对宫颈癌Siha细胞增殖能力的影响,观察放疗后磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)的表达情况。方法体外培养Siha细胞,将其分为两组即放疗组和APS联合放疗组。应用CCK8法检测不同浓度APS对Siha细胞增殖活性的影响;Western blotting检测放疗4 h后两组γH2AX蛋白的表达水平。结果APS浓度越高,细胞的增殖活力越弱;APS作用时间越长,细胞增殖能力越弱(P<0.01);放疗后,APS联合放疗组γH2AX表达水平高于放疗组(P=0.031)。结论APS可以抑制Siha细胞增殖,促进γH2AX表达,从而提高放疗的敏感性。 展开更多
关键词 黄芪多糖 SIHA细胞 DNA损伤 γh2aX 放疗敏感性
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组蛋白变体H2A.Z的转录调控功能与动态作用机制
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作者 孙朝冉 吴旭东 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期279-289,共11页
H2A.Z是组蛋白H2A常见的组蛋白变体。近年来,人们通过多学科手段探究了H2A.Z对于基因转录的激活或抑制作用。本文在概述组蛋白变体和H2A.Z发展史的基础上,重点阐述了H2A.Z不同亚型、不同翻译后修饰和基因组分布在转录调控过程中的作用,... H2A.Z是组蛋白H2A常见的组蛋白变体。近年来,人们通过多学科手段探究了H2A.Z对于基因转录的激活或抑制作用。本文在概述组蛋白变体和H2A.Z发展史的基础上,重点阐述了H2A.Z不同亚型、不同翻译后修饰和基因组分布在转录调控过程中的作用,明确了其生物学意义和在肿瘤发生发展、神经系统分化发育过程中的病理生理学意义,并总结了H2A.Z在染色质沉积或者移除的动态调控机制方面的研究进展,以期为深入了解组蛋白变体的多样性,并为寻找相关疾病诊疗的新靶点提供参考。 展开更多
关键词 表观遗传调控 核小体 基因转录 组蛋白变体 h2a.Z
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Meiotic nuclear divisions 1 suppresses the proliferation and invasion of pancreatic cancer cells via regulating H2A.X variant histone
4
作者 DONGQIN WANG YAN SHI +8 位作者 ZHIQIANG WANG JING ZHANG LUYAO WANG HONGYU MA SHUHUA SHI XIAOFU LIAN HUA HUANG XIAOJING WANG CHAOQUN LIAN 《BIOCELL》 SCIE 2024年第1期111-122,共12页
Introduction:Among all malignant tumors of the digestive system,pancreatic carcinoma exhibits the highest mortality rate.Currently,prevention and effective treatment are urgent issues that need to be addressed.Methods... Introduction:Among all malignant tumors of the digestive system,pancreatic carcinoma exhibits the highest mortality rate.Currently,prevention and effective treatment are urgent issues that need to be addressed.Methods:The study focused on meiotic nuclear divisions 1(MND1),integrating data from the Gene Expression Profiling Interactive Analysis(GEPIA)database with prognostic survival analysis.Simultaneously,experiments at cellular level were employed to demonstrate the effect of MND1 on the proliferation and migration of PC.The small-molecule inhibitor of MND1 was used to suppress the migration of PC cells by knocking down MND1 using small interfering RNA(siRNA)in Patu-8988 and Panc1 cell lines.Results:The results of Cell Counting Kit-8 indicated that the suppression of MND1 resulted in a decrease in cell proliferation.Wound healing and Transwell assays revealed that MND1 knockdown reduced cell migration and invasion.Flow cytometry revealed that inhibiting MND1 hindered the cell cycle.Furthermore,MND1 could stimulate the proliferation,migration,and invasion of Patu-8988 and Panc1 cells by increasing the expression of MND1.Notably,MND1 had a positive effect on H2AFX expression in PC cells.Elevated MND1 expression suggests the low overall survival rate of individuals diagnosed with PC.Conclusion:These findings suggest that MND1 has the potential to be a gene with the ability to accurately diagnose and treat PC. 展开更多
关键词 Pancreatic carcinoma MND1 h2aFX Cell cycle
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青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼组蛋白H2A N-端基因克隆及其衍生抗菌肽 被引量:4
5
作者 武向敏 赵燕静 +4 位作者 孔祥会 江红霞 李莉 聂国兴 李学军 《水产科学》 CAS 北大核心 2014年第5期311-316,共6页
采用RT-PCR方法,以青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼肌肉提取总 RNA 为模板,运用 GenBank中BLAST 同源性搜索,寻找亲缘关系相近的鱼类基因序列,采用Primer5设计简并引物,进行 H2A N-端序列扩增,通过胶回收和连接,然后转化到载体中进行克... 采用RT-PCR方法,以青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼肌肉提取总 RNA 为模板,运用 GenBank中BLAST 同源性搜索,寻找亲缘关系相近的鱼类基因序列,采用Primer5设计简并引物,进行 H2A N-端序列扩增,通过胶回收和连接,然后转化到载体中进行克隆测序,分别获得青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼组蛋白 H2A N-端基因序列,长为364 bp ,分析发现均属于不稳定蛋白质,等电点为10.48~11.02,平均亲水性为0.179~0.264。序列同源性比对结果显示,青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼同狭孔金线鲃和斑马鱼基因H2A编码蛋白质同源性极高,达到85%以上,与其他物种同源性较低,其中狭孔金线鲃与青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼的亲缘关系比斑马鱼更近,分子系统学分析也支持这一结果。青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼H2A衍生抗菌肽与庸鲽 Hipposin抗菌肽同源性极高,不仅存在碱性氨基酸,还存在酸性氨基酸。组蛋白 H2A N-端可衍生 Hipposin类抗菌肽,均为阳离子α螺旋结构抗菌肽。 展开更多
关键词 组蛋白 基因克隆 h2a衍生抗菌肽 青鱼 草鱼 鲢鱼 鳙鱼
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与细胞周期G_2/M期进程相关的H2AX磷酸化 被引量:7
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作者 涂文志 尚增甫 +5 位作者 李兵 刘晓丹 王豫 徐勤枝 让蔚清 周平坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期339-345,共7页
γH2AX焦点(foci)被普遍当做DNA双链断裂(DSB)损伤的分子标志物.为探讨细胞周期进程相关的H2AX磷酸化规律特征,采用胸腺嘧啶双阻滞结合噻氨酯哒唑(nocodazole)的后续处理,将HeLa细胞同步于有丝分裂的前中期.然后,用流式细胞仪检测细胞... γH2AX焦点(foci)被普遍当做DNA双链断裂(DSB)损伤的分子标志物.为探讨细胞周期进程相关的H2AX磷酸化规律特征,采用胸腺嘧啶双阻滞结合噻氨酯哒唑(nocodazole)的后续处理,将HeLa细胞同步于有丝分裂的前中期.然后,用流式细胞仪检测细胞周期、Western印迹和免疫荧光法,观察γH2AX表达和γH2AX焦点的形成.结果显示,细胞进入G2/M期和有丝分裂过程中,γH2AX水平显著增加;在无DNA DSB发生的情况下,部分M期细胞中也存在大量的γH2AX焦点.随着细胞完成有丝分裂从M期退出再进入G1期,γH2AX的表达水平逐渐降低.这种γH2AX表达变化特征与G2/M期密切关联的PLK1和Cyclin B1的表达规律相类似.在4 Gy大剂量照射下,HeLa细胞于照后8到12 h出现明显的G2/M期阻滞.γH2AX焦点数在照后1 h达高峰,随后降低,照后8 h又上升,出现了第2个峰值.与之不同的是,在1 Gy低剂量照射下,细胞的G2/M期阻滞微弱,γH2AX焦点数在照后0.5 h最高,随后下降,且无反弹,符合DNA DSB的修复动力学特征.因此,将γH2AX当做DNA DSB分子标志物时,还需要考虑细胞周期变化的影响.γH2AX适合作为1 Gy以下照射的DNA双链断裂损伤的分子标志. 展开更多
关键词 γh2aX 细胞周期 G2/M阻滞 DNA双链断裂 分子标志物
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小鼠原始生殖细胞迁移过程中H2A.Z的表达 被引量:5
7
作者 时小艳 吴宝江 +2 位作者 于建宁 马雪山 刘红林 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期422-425,共4页
小鼠原始生殖细胞(PGCs)迁移、增殖、性别分化都受着基因组和DNA表观遗传修饰的调控,H2A.Z与转录激活有关,可能与表观遗传修饰存在联系,通过PGCs单细胞及组织石蜡切片的免疫荧光方法进行研究。结果表明,PGCs在迁移过程中,8.5 dpc时PGCs... 小鼠原始生殖细胞(PGCs)迁移、增殖、性别分化都受着基因组和DNA表观遗传修饰的调控,H2A.Z与转录激活有关,可能与表观遗传修饰存在联系,通过PGCs单细胞及组织石蜡切片的免疫荧光方法进行研究。结果表明,PGCs在迁移过程中,8.5 dpc时PGCs中不存在H2A.Z;迁移至生殖嵴时H2A.Z主要集中于细胞核,11.5dpc整个PGCs细胞核和细胞质都存在;13.5 dpc雌性的卵母细胞中H2A.Z主要集中于细胞质,而精原细胞中H2A.Z偏向集中于细胞核。综合基因组和DNA表观遗传修饰分析,H2A.Z的表达与其有密不可分的联系。 展开更多
关键词 小鼠原始生殖细胞(PGCs) 单细胞 石蜡切片 h2a.Z 免疫荧光
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2-乙酰氨基芴诱导γH2AX焦点的形成 被引量:7
8
作者 刁汇玲 周春仙 +1 位作者 余艳柯 杨军 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期131-137,共7页
目的探讨DNA损伤剂2-乙酰氨基芴(2-AAF)是否可诱导γH2AX焦点的形成及γH2AX作为检测DNA损伤的一个新的特异指标的可能性。方法用2-AAF处理中国仓鼠CHL细胞,应用免疫荧光方法检测γH2AX焦点的形成,并通过中性彗星实验验证DNA损伤的程度... 目的探讨DNA损伤剂2-乙酰氨基芴(2-AAF)是否可诱导γH2AX焦点的形成及γH2AX作为检测DNA损伤的一个新的特异指标的可能性。方法用2-AAF处理中国仓鼠CHL细胞,应用免疫荧光方法检测γH2AX焦点的形成,并通过中性彗星实验验证DNA损伤的程度。结果0.1,1,5和20mg·L-1的2-AAF都可使细胞核内γH2AX焦点数量及有γH2AX焦点生成的细胞数量增加,但只有20mg·L-12-AAF处理的细胞才出现明显的彗尾增长及有彗尾的细胞数量增加。另外,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)家族抑制物渥曼青霉素可抑制2-AAF诱导的γH2AX焦点形成。结论2-AAF可通过激活PI3K家族成员使H2AX磷酸化,进而诱导γH2AX焦点的形成。γH2AX检测DNA损伤的敏感性优于彗星实验,因此,γH2AX有可能成为衡量DNA损伤程度的良好指标。 展开更多
关键词 γh2aX 2-乙酰氨基芴 DNA损伤
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冬凌草甲素诱导人胰腺癌SW1900细胞DNA损伤及对H2AX蛋白表达的影响 被引量:4
9
作者 罗兰 侯杰 +2 位作者 邱冰 曹惠君 魏凤香 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期3881-3883,共3页
目的研究冬凌草甲素(ORI)诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤对磷酸化组蛋白(H2AX)表达的影响。方法彗星实验检测ORI诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤的程度。Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后H2AX蛋白的磷酸化。免疫荧光实验检... 目的研究冬凌草甲素(ORI)诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤对磷酸化组蛋白(H2AX)表达的影响。方法彗星实验检测ORI诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤的程度。Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后H2AX蛋白的磷酸化。免疫荧光实验检测Phos-S1981ATM和γ-H2AX焦点。结果彗星实验结果表明不同浓度的ORI(20,40,80μmol/L)处理SW1900细胞48 h后,可发生DNA损伤,并且随浓度增加,DNA损伤加重。Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后,H2AX蛋白发生磷酸化,γ-H2AX随着浓度增加表达增大。免疫荧光实验发现Phos-S1981ATM和γ-H2AX焦点随着浓度增加表达量增加。结论 ORI可以诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤;H2AX蛋白发生磷酸化,具体DNA损伤信号通路有待进一步研究。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 胰腺癌SW1900 DNA损伤 h2aX蛋白
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γH2AX磷酸化/去磷酸化的分子机制及检测技术进展 被引量:3
10
作者 张森 刘鲁娟 +2 位作者 陈欢 侯宏卫 胡清源 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1291-1299,共9页
自从γH2AX在1998年首次发现以来,迅速成为多个学科领域的研究热点和研究工具。针对γH2AX建立的多种先进检测方法在生命科学和医学等多个领域内的应用展现了发展潜力。本文从其磷酸化和去磷酸化机制,各种检测分析技术的发展和建立,以... 自从γH2AX在1998年首次发现以来,迅速成为多个学科领域的研究热点和研究工具。针对γH2AX建立的多种先进检测方法在生命科学和医学等多个领域内的应用展现了发展潜力。本文从其磷酸化和去磷酸化机制,各种检测分析技术的发展和建立,以及在相关领域里的应用进展等三个方面进行了综述。 展开更多
关键词 γh2aX 磷酸化 免疫荧光技术 毒理学评价 综述
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不同方式加热联合甲基莲心碱对耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞γH2AX及mdr-1/P-gp表达的影响 被引量:3
11
作者 黄程辉 曹培国 +1 位作者 谢兆霞 朱红 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期317-322,共6页
目的:检测不同模式加热联合甲基莲心碱(neferine,Nef)对耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞的增殖抑制及γH2AX和mdr-1/P-gp表达的影响。方法:采用MTT法检测金属模块加热、培养基加热、烤箱加热及水浴加热等不同模式加热联合10μg/mL Nef对经阿霉... 目的:检测不同模式加热联合甲基莲心碱(neferine,Nef)对耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞的增殖抑制及γH2AX和mdr-1/P-gp表达的影响。方法:采用MTT法检测金属模块加热、培养基加热、烤箱加热及水浴加热等不同模式加热联合10μg/mL Nef对经阿霉素培养的MCF-7/Adr细胞的增殖抑制,实时定量PCR检测mdr-1mRNA的表达,Western印迹法检测γH2AX及P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达。结果:42℃及45℃不同模式加热组较37℃培养组MCF-7/Adr细胞吸光度值明显下降,mdr-1/P-gp表达下降,γH2AX表达上调(均P<0.01)。加热联合10μg/mLNef组较单纯热疗组及单纯10μg/mLNef组MCF-7/Adr细胞吸光度值明显下降(均P<0.01),mdr-1/P-gp表达下降,γH2AX表达上调(均P<0.05)。42℃及45℃不同模式加热组比较,水浴加热组P-gp表达下降及γH2AX表达上调最为明显(P<0.05)。结论:加热能增加阿霉素对MCF-7/Adr细胞的细胞毒性反应,能明显增加MCF-7/Adr细胞DNA损伤且随温度升高而加剧;MCF-7/Adr细胞对不同模式的加热反应可能不同;热疗联合Nef能增敏阿霉素的化学治疗效果。 展开更多
关键词 乳腺癌 多药耐药 P-糖蛋白 甲基莲心碱 加热疗法 磷酸化h2aX
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^(60)Co γ-射线诱导人膀胱癌EJ细胞中磷酸化组蛋白H2AX焦点形成 被引量:4
12
作者 田梅 潘艳 +1 位作者 阮健磊 苏旭 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2008年第3期187-190,共4页
目的探讨60Co γ-射线是否可在人膀胱癌EJ细胞中诱导磷酸化组蛋白H2AX焦点形成以及形成的焦点数量与照射剂量及照射后时间的关系。方法免疫印迹法和流式细胞分析法用于检测不同剂量60Co γ-射线照射后EJ细胞中γH2AX蛋白表达的变化;免... 目的探讨60Co γ-射线是否可在人膀胱癌EJ细胞中诱导磷酸化组蛋白H2AX焦点形成以及形成的焦点数量与照射剂量及照射后时间的关系。方法免疫印迹法和流式细胞分析法用于检测不同剂量60Co γ-射线照射后EJ细胞中γH2AX蛋白表达的变化;免疫荧光法检测不同剂量照射后以及2 Gy照射后不同时间EJ细胞中γH2AX焦点的数量。结果γ-射线照射后γH2AX蛋白表达明显增加,但量效关系不明显;免疫荧光法可检测γH2AX焦点形成的数量和大小,并且存在剂量-效应关系及有时间依赖性,随着照射剂量的增加,γH2AX焦点数目及大小均明显增加,照射的剂量范围从0.1~4.0 Gy均可检测,照射后24 h仍可检测到γH2AX焦点,但焦点数随时间延长而减少、减弱。结论免疫荧光法检测照射后γH2AX焦点数目可敏感、直观地反映DNA损伤及修复情况,有望成为辐射检测及辐射致癌的好的生物指标。 展开更多
关键词 γ-射线照射 γh2aX焦点 EJ细胞 DNA损伤
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应用γH2AX评估丝裂霉素致胃癌细胞DNA损伤 被引量:3
13
作者 贾金海 李勇 +1 位作者 张晓琳 何英辉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期16-20,共5页
目的通过检测γH2AX,评估丝裂霉素对体外胃癌细胞DNA的损伤;同时,观察丝裂霉素对体外胃癌细胞增殖的影响。方法体外培养胃癌细胞株SGC-7901细胞,选用丝裂霉素处理,利用免疫荧光和Western-Blotting技术,分别检测γH2AX的焦点形成和蛋白... 目的通过检测γH2AX,评估丝裂霉素对体外胃癌细胞DNA的损伤;同时,观察丝裂霉素对体外胃癌细胞增殖的影响。方法体外培养胃癌细胞株SGC-7901细胞,选用丝裂霉素处理,利用免疫荧光和Western-Blotting技术,分别检测γH2AX的焦点形成和蛋白水平变化;采用MTT法检测SGC-7901细胞的增殖情况。结果与对照组相比,实验组在每个时间点的γH2AX细胞百分数和平均焦点数都呈增加趋势,200μg/mL组和400μg/mL组的增加尤为明显,与对照组的差异有显著性(P<0.01)。用400μg/mL的丝裂霉素孵育SGC-7901细胞,γH2AX蛋白的水平变化呈先升后降趋势,差异有显著性(P<0.05)。MTT结果显示,丝裂霉素对SGC-7901细胞的增殖抑制明显(P<0.05)。结论γH2AX可敏感反应丝裂霉素对胃癌细胞DNA的损伤,潜在的临床应用价值极高;丝裂霉素对体外胃癌细胞增殖抑制明显。 展开更多
关键词 丝裂霉素 胃癌SGC-7901细胞 γh2aX DNA双链断裂 增殖抑制
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γH2AX与男性不育患者精子DNA损伤的关系及意义 被引量:3
14
作者 钟慧芝 吕福通 +2 位作者 谢丹尼 莫毅 林发全 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第8期1044-1047,1051,共5页
目的研究γH2AX在男性不育患者精液中的表达水平,探讨γH2AX用于评价男性不育患者精子DNA双链断裂(DSBs)损伤程度的可行性。方法选取就诊于广西医科大学第一附属医院生殖医学研究中心、男性科门诊并确诊为男性不育患者27例(男性不育组)... 目的研究γH2AX在男性不育患者精液中的表达水平,探讨γH2AX用于评价男性不育患者精子DNA双链断裂(DSBs)损伤程度的可行性。方法选取就诊于广西医科大学第一附属医院生殖医学研究中心、男性科门诊并确诊为男性不育患者27例(男性不育组),另外选取23例确认有生育能力的健康男性的精液样本作为对照组。通过PureSperm密度梯度离心法(DGC)优选精子,运用单向凝胶电泳技术(SCGE)和流式细胞术方法对健康男性、男性不育组患者的精液进行精子双链DNA损伤和γH2AX含量的测定和比较。结果男性不育组患者精子DSBs损伤程度和γH2AX表达含量均高于对照组(P<0.01),而经密度梯度离心法优选精子后,两组男性精子的DSBs损伤程度和γH2AX表达含量均显著下降(P<0.01)。结论γH2AX在男性不育患者精子中的含量明显高于健康男性,可作为检测精子DNA双链断裂损伤程度的一个新的标志物。 展开更多
关键词 男性不育 h2aX磷酸化 DNA双链损伤程度
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γH2AX的检测方法简介 被引量:5
15
作者 余艳柯 朱心强 杨军 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期408-410,共3页
关键词 γh2aX 免疫荧光 流式细胞技术 免疫印迹
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核心组蛋白H2A与乳腺癌预后相关因素的生存分析 被引量:3
16
作者 王蓓莉 应明真 +2 位作者 蒋马伟 陈光榆 王雅杰 《医学研究杂志》 2014年第9期17-21,共5页
目的 本研究探讨核心组蛋白(core histone H2A,H2A)在乳腺癌组织中的表达及相关乳腺癌病例术后生存数据预后因素的分析。方法 应用免疫组化Envision方法,检测97例乳腺癌组织中H2A的表达情况,回顾性分析患者的临床资料。分别采用Kaplan... 目的 本研究探讨核心组蛋白(core histone H2A,H2A)在乳腺癌组织中的表达及相关乳腺癌病例术后生存数据预后因素的分析。方法 应用免疫组化Envision方法,检测97例乳腺癌组织中H2A的表达情况,回顾性分析患者的临床资料。分别采用Kaplan-Meier法进行生存分析,log rank检验进行生存率比较。选择单因素分析(log rank检验)中有统计意义的变量,采用Cox比例风险回归模型分析患者术后生存数据,解析影响预后的多种因素,Spearmen相关分析解析其和H2A表达强度之间的相关性。结果 生存分析显示,H2A的表达强度对预后无明显影响(P>0.05)。但值得注意的是,H2A的表达生存分析在30个月左右后出现“有差异”的趋势。对TNM Ⅰ~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期的病例分别行H2A表达的亚组分析显示,两亚组中死亡病例均为H2A阴性患者,并且在TNM分期恶性程度更高的Ⅲ~Ⅳ期中,所有病例均为H2A阴性患者,无H2A阳性患者。Spearmen相关分析结果显示,H2A的表达强度与TNM分期呈负相关(r=-0.242,P=0.026)。结论 H2A的低表达则常常预示着TNM分期晚,更趋于恶性,并且在TNMⅢ~Ⅳ期中H2A的低表达预示着生存率更低。H2A蛋白的表达可能成为对乳腺癌恶性潜能甄别的指标。 展开更多
关键词 乳腺癌 免疫组化 h2a 预后
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基因组的监视器:组蛋白H2AX 被引量:3
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作者 于琳 孙青 石彦明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第2期156-158,共3页
组蛋白H2A变体H2AX在离其肽链C端4个氨基酸处存在一个高度保守的丝氨酸残基(Ser-139),DNA双链断裂(DSB)一经产生,该残基便能迅速被磷酸化,形成γ-H2AX。γ-H2AX识别抗体是探测DSB存在的金标准;H2AX在细胞周期关卡中起重要作用,H2AX(?)... 组蛋白H2A变体H2AX在离其肽链C端4个氨基酸处存在一个高度保守的丝氨酸残基(Ser-139),DNA双链断裂(DSB)一经产生,该残基便能迅速被磷酸化,形成γ-H2AX。γ-H2AX识别抗体是探测DSB存在的金标准;H2AX在细胞周期关卡中起重要作用,H2AX(?)细胞不能正确停止在G2期并进入有丝分裂期;H2AX的丧失不影响V(D)J重排,但有效的类型转换重组需要H2AX;H2AX还在细胞分裂中起重要作用。总之,H2AX是基因组的监视器,DNA损伤一旦发生,H2AX的磷酸化即会被启动,然后招募更多的修复因子共同修复DNA损伤;H2AX在抑制基因组不稳定和癌症放疗疗效预测方面具有一定的作用。 展开更多
关键词 h2aX DNA双链断裂 DNA修复 基因组不稳定 放射治疗
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γH2AX分析技术用于检测CT辐射剂量的初步研究 被引量:2
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作者 张博 龚建平 +4 位作者 张伟 俞泽阳 周丽英 张宏 傅晋祥 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期80-84,共5页
应用DNA双链断裂的生物标记物——γH2AX(H2AX组蛋白异型的磷酸化形式)的荧光显像即γH2AX分析技术,通过体外实验研究,了解CT辐射剂量与外周血单个核细胞(PBMCs)中产生的γH2AX荧光点数目的相关性,初步探讨其在检测CT辐射剂量方面的应... 应用DNA双链断裂的生物标记物——γH2AX(H2AX组蛋白异型的磷酸化形式)的荧光显像即γH2AX分析技术,通过体外实验研究,了解CT辐射剂量与外周血单个核细胞(PBMCs)中产生的γH2AX荧光点数目的相关性,初步探讨其在检测CT辐射剂量方面的应用前景。观察结果表明,人外周血体外经CT扫描后DNA损伤诱发H2AX活化产生γH2AX,通过荧光显微镜检测到的γH2AX荧光点数目变化与CT扫描的照射剂量之间呈线性正相关,γH2AX分析具有直接作为检测CT辐射剂量的生物学标记的潜力。 展开更多
关键词 电离辐射 X射线CT γh2aX DNA双链断裂
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钴-60伽玛射线诱导淋巴细胞γH2AX表达的研究 被引量:2
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作者 潘艳 高刚 +3 位作者 刘澜涛 阮健磊 刘建香 苏旭 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2014年第2期9-12,共4页
采用流式细胞术检测60Coγ-射线照射后γH2AX表达的量效和时程关系,同时探讨紫外线联合60Coγ-射线照射后γH2AX的表达情况。结果表明,不同剂量60Coγ-射线照射后γH2AX表达量与照射剂量之间呈现明显的剂量效应关系。4 Gy 60Coγ-射线... 采用流式细胞术检测60Coγ-射线照射后γH2AX表达的量效和时程关系,同时探讨紫外线联合60Coγ-射线照射后γH2AX的表达情况。结果表明,不同剂量60Coγ-射线照射后γH2AX表达量与照射剂量之间呈现明显的剂量效应关系。4 Gy 60Coγ-射线照射后,γH2AX的表达在1 h达到峰值,随后逐渐减少。与假照组相比,单纯紫外线照射组γH2AX表达增加,一直稳定维持约6 h左右,随后开始减少。紫外线联合60Coγ-射线照射组与单纯60Coγ-射线照射比较,γH2AX的表达无显著性差异。结果提示采用流式细胞术检测γH2AX的表达估算受照剂量具有可行性,该法有望成为估算辐射剂量的新方法。 展开更多
关键词 ^60CO γ-射线 7h2aX 紫外线 DNA损伤 生物剂量计
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组蛋白H2A去泛素化酶MYSM1缺陷小鼠造血干细胞增殖加快且凋亡增加 被引量:2
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作者 刘莹 陈旭 +1 位作者 杨安钢 王涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期937-940,共4页
目的研究组蛋白H2A去泛素化酶MYSM1缺陷(MYSM1-/-)小鼠骨髓造血干细胞(HSC)的静息状态、增殖与凋亡情况。方法分离MYSM1-/-小鼠和野生对照(MYSM1+/+)小鼠的骨髓细胞,利用免疫磁珠和流式细胞仪分选获得表面标志为lin-Sca-1+c-kit+的HSC... 目的研究组蛋白H2A去泛素化酶MYSM1缺陷(MYSM1-/-)小鼠骨髓造血干细胞(HSC)的静息状态、增殖与凋亡情况。方法分离MYSM1-/-小鼠和野生对照(MYSM1+/+)小鼠的骨髓细胞,利用免疫磁珠和流式细胞仪分选获得表面标志为lin-Sca-1+c-kit+的HSC。采用腹腔注射溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)的方法检测HSC增殖与细胞周期、采用Hoechst 33342-派若宁(pyronin)Y双染色法检测静息态HSC的比例、采用异硫氰酸荧光素标记膜联素Ⅴ/7-氨基放线菌素D(annexinⅤ-FITC/7-AAD)双染色法检测HSC凋亡。比较MYSM1-/-小鼠和MYSM1+/+对照小鼠HSC数目、细胞周期、细胞增殖和细胞凋亡的变化情况。结果 MYSM1-/-小鼠的骨髓细胞、HSC总数与野生型小鼠相比明显降低;HSC的S期比例增加、增殖加快、静息期细胞减少但功能有缺陷的MYSM1-/-HSC凋亡率显著上升。结论 MYSM1对维持HSC的静息状态有非常重要的作用,其缺陷可引起静息态的HSC大量进入S期,异常增殖的HSC凋亡增加并最终引起HSC和骨髓细胞总数减少。 展开更多
关键词 组蛋白h2a去泛素化 MYSM1 造血干细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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