血清抑瘤素M联合组蛋白H4在脓毒症诊断及预后评估中的意义

目的探讨血清抑瘤素M(OSM)联合组蛋白H4在脓毒症诊断及预后评估中的意义。方法选择2020年9月至2021年8月合肥市第一人民医院41例脓毒症病人为研究对象,使用酶联免疫吸附(ELISA)法测定脓毒症病人血清中抑瘤素M及组蛋白H4水平,选取年龄、性别相似的健康者40例为健康对照组;依据脓毒症病人28 d预后分为生存组和死亡组,使用统计学软件分析临床资料,比较两组血清抑瘤素M及组蛋白H4的差异。结果脓毒症组、脓毒性休克组病人血清OSM[55.49(41.96,63.09)ng/L、108.03(58.22,86.44)ng/L比40.85(27.92,51.26)ng/L]及H4[29.93(25.09,31.74)μg/L、34.81(28.03,36.16)μg/L比25.85(22.50,28.23)μg/L]水平均高于健康对照组(P<0.05)。与脓毒症组相比,脓毒性休克组中血清OSM及H4水平更高(P<0.05);ROC曲线分析,H4、OSM及二者联合对脓毒症的诊断的AUC为0.79、0.76、0.83,两者联合效能高于两者单独检测;与存活组相比,死亡组病人血清OSM[108.98(53.59,103.32)ng/L比52.01(42.26,62.05)ng/L]和H4[36.94(29.96,40.58)μg/L比27.45(25.37,28.59)μg/L]水平更高(P<0.05)。OSM、H4及联合分别绘制ROC曲线计算AUC分别为0.76(0.61.0.92)、0.82(0.69,0.95)和0.89(0.79,0.99)。结论抑瘤素M和组蛋白H4能用于对脓毒症早期诊断和预后评估,两者联合对脓毒症病人诊断效能及近期预后评估的能力有所提升。

基于生物信息学探究NR1H4在慢性萎缩性胃炎及药物预测中的作用

目的通过生物信息学方法获得慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)的差异基因,预测治疗CAG的小分子药物。方法通过基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库获取2份CAG芯片(GSE27411、GSE116312)基因表达样本,利用R语言筛选出CAG差异表达基因,获得CAG免疫相关基因进行基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析。利用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,筛选出核心基因,进一步研究核心基因的免疫浸润,预测其小分子化合物,通过MOE2022进行分子对接,通过GEPIA2网站进行生存分析。结果基于GEO数据库筛选出差异基因517个。GO富集分析发现主要涉及粒细胞趋化性、白细胞趋化性、中性粒细胞趋化性等生物过程。KEGG富集分析显示主要富集于细胞因子-细胞因子受体相互作用通路、核因子κB信号通路、白细胞介素-17信号通路。PPI网络筛选前6个核心基因即NR1H4、CCK、CCL20、CXCL1、LCN2、SAA1,通过相关验证,NR1H4作为核心基因。免疫细胞浸润分析结果显示中央记忆CD8 T细胞、效应记忆CD4 T细胞、γδT细胞、自然杀伤细胞、中性粒细胞等免疫细胞可能参与CAG的发生发展,而中性粒细胞与NR1H4呈正相关。分子对接显示柯里拉京、豆甾醇、栀子苷、桔皮素、鹅去氧胆酸、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯6种小分子药物与NR1H4有较好的结合力。结论本研究初步探讨CAG的潜在机制,NR1H4作为关键基因与中性粒细胞可能在CAG“炎-癌转化”进程中具有重要意义,可为CAG的“炎–癌转化”机制研究提供一定的参考依据。

HIST1H4F基因甲基化在三阴性乳腺癌中的预后价值

目的探讨HIST1H4F基因甲基化在三阴性乳腺癌中的意义。方法收集31例乳腺癌新鲜的癌组织标本及正常乳腺组织标本,提取DNA后使用亚硫酸盐进行甲基化转化处理,荧光定量PCR进行HIST1H4F基因甲基化检测,分析癌组织标本和正常乳腺组织中的HIST1H4F基因甲基化差异情况,并分析三阴性乳腺癌的HIST1H4F基因甲基化情况。同时收集37例三阴性乳腺癌的石蜡标本,提取DNA后同样方法处理再进行HIST1H4F基因甲基化检测,分析HIST1H4F基因甲基化与三阴性乳腺癌预后的关系。结果新鲜组织标本中周围正常乳腺组织和癌组织中HIST1H4F甲基化阳性率均为74.2%(23/31),两者的HIST1H4F甲基化阳性率无明显区别(χ^(2)=0000,P=1.000),分析发现三阴性乳腺癌组织中HIST1H4F甲基化阳性率高于非三阴性乳腺癌(93.8%vs.53.3%,P=0.015),HIST1H4F甲基化阳性乳腺癌的组织学分级Ⅲ级和ER阴性的乳腺癌中比率高于HIST1H4F甲基化阴性乳腺癌(60.9%vs.12.5%,P=0.037;69.6%vs.25.0%,P=0.043)。在三阴性乳腺癌的石蜡组织标本进行HIST1H4F甲基化检测,发现HIST1H4F甲基化阳性率为27.0%,且HIST1H4F甲基化阳性组和阴性组的DFS(50.0%vs.66.7%,χ^(2)=1.141,P=0.285)和OS(90.0%vs.96.3%,χ^(2)=1.635,P=0.201)在统计学上均无明显区别。结论在新鲜组织标本中三阴性乳腺癌中检测HIST1H4F基因甲基化阳性率高,HIST1H4F基因甲基化阳性乳腺癌的组织学Ⅲ级和ER阴性比率高,而在三阴乳腺癌石蜡组织标本中检测的HIST1H4F甲基化阳性率较低,尚不能确定HIST1H4F甲基化与三阴性乳腺癌预后是否相关,仍有待于进一步研究。

血清lncRNA CBSLR及ITIH4检测在老年早期胃癌诊断中的临床价值

目的探究血清长链非编码RNA(lncRNA)CBSLR、α胰蛋白酶H4重链(ITIH4)对老年早期胃癌的诊断价值。方法选取2020-2022年该院诊治的90例老年早期胃癌患者为早期胃癌组,选取同期诊治的45例慢性萎缩性胃炎患者作为萎缩性胃炎组,同期健康体检的45例健康人群为健康对照组。采用荧光定量PCR及酶联免疫吸附试验检测各组血清lncRNA CBSLR、ITIH4水平。采用Pearson相关分析血清lncRNA CBSLR、ITIH4水平与肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA)19-9的相关性。比较不同临床病理特征血清lncRNA CBSLR、ITIH4水平差异。采用受试者工作特征曲线分析血清lncRNA CBSLR、ITIH4对老年早期胃癌的诊断价值。结果早期胃癌组血清lncRNA CBSLR、ITIH4、CEA、CA19-9水平均高于萎缩性胃炎组及健康对照组(均P<0.05)。早期胃癌患者血清lncRNA CBSLR、ITIH4与CEA、CA19-9水平均呈正相关(r=0.601~0.751,均P<0.05)。早期胃癌患者血清lncRNA CBSLR、ITIH4水平与肿瘤最大径、浸润深度、分化类型及淋巴结转移有关(均P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤位置、大体类型无关(均P>0.05)。血清lncRNA CBSLR、ITIH4、CEA、CA19-94项联合检测诊断早期胃癌的曲线下面积(0.912,95%CI:0.858~0.949)高于血清lncRNA CBSLR(0.833,95%CI:0.784~0.879),ITIH4(0.806,95%CI:0.760~0.847),CEA(0.791,95%CI:0.742~0.830),CA19-9(0.766,95%CI:0.710~0.815)单项指标检测(Z=4.482、5.130、5.231、6.117,均P<0.05)。结论老年早期胃癌患者血清lncRNA CBSLR、ITIH4水平升高,与胃癌不良临床病理特征有关,血清lncRNA CBSLR、ITIH4、CEA、CA19-94项联合对老年早期胃癌具有较高的诊断价值。

ASP、ITIH4在急性失代偿性心力衰竭患者中的表达及其与炎症因子的相关性

目的探讨急性失代偿性心力衰竭患者白脂素(ASP)、α胰蛋白酶抑制剂重链H4(ITIH4)的表达及其与炎症因子的相关性。方法选取2023年1-5月于定州市人民医院就诊的72例急性失代偿性心力衰竭患者为研究对象,根据患者是否存在主要不良心血管事件(MACE),分为MACE组(34例)和非MACE组(38例)。收集所有研究对象性别、年龄、体重指数、体温等临床资料;全自动生化分析仪分析测定血常规指标,酶联免疫吸附试验测定患者ASP、ITIH4水平及炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平。比较MACE组和非MACE组临床资料及ITIH4、ASP、炎症因子水平。Pearson相关分析急性失代偿性心力衰竭患者ITIH4、ASP水平与炎症因子的相关性。多因素Logistic回归分析急性失代偿性心力衰竭患者发生MACE的影响因素。结果非MACE组LVEDD及ASP水平低于MACE组(P<0.05),ITIH4水平明显高于MACE组(P<0.05)。MACE组炎症因子IL-6、TNF-α、hs-CRP水平均高于非MACE组(均P<0.05)。急性失代偿性心力衰竭患者血清ITIH4水平与炎症因子IL-6、TNF-α、hs-CRP均呈负相关(均P<0.05),ASP水平与炎症因子IL-6、TNF-α、CRP均呈正相关(均P<0.05)。ITIH4、ASP为急性失代偿性心力衰竭患者发生MACE的影响因素(均P<0.05)。结论急性失代偿性心力衰竭并发MACE患者ASP水平升高,ITIH4水平降低,二者均与炎症因子相关且为MACE发生的影响因素。

嗜碱芽孢杆菌H4对再生骨料性能的改性研究

随着再生骨料性能改性研究的深入,以及微生物诱导碳酸盐沉积研究的进展,研究者提出可将微生物用于再生骨料强化处理中。试验研究好氧型嗜碱芽孢杆菌H4矿化活性的最优条件为细菌浓度108个/m L、环境温度25℃、钙离子浓度10 g/L、pH值为10、矿化沉积时间15 d。根据最优条件配制H4细菌矿化液对再生骨料进行浸泡和喷淋处理,通过处理前后再生骨料的吸水率、压碎指标、表观密度、孔隙结构及微观形貌的变化得出喷淋处理对骨料的改性效果优于浸泡处理,喷淋改性后不同粒径再生吸水率降低幅度介于21.9%~32.8%之间,粗骨料压碎指标降低15.9%,孔隙率降低26.1%,SEM-EDS分析可知矿化后再生骨料表面产生大量碳酸钙。

基于H4C6甲基化水平和cfDNA浓度构建多癌种癌症风险预测模型

目的 探究H4聚簇组蛋白6(H4C6)甲基化水平和循环游离DNA(cfDNA)浓度在正常组与肿瘤组之间的差异;基于H4C6甲基化水平和cfDNA浓度构建癌症风险预测模型并评估模型的预测性能。方法 使用磁珠法提取血液样本中的cfDNA;使用Qubit 4.0荧光定量仪检测cfDNA浓度;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测cfDNA的H4C6甲基化水平;使用Logistic回归算法构建H4C6甲基化水平联合cfDNA浓度的癌症风险预测模型;使用受试者工作特征(ROC)曲线和校准曲线评估模型的准确性;使用决策曲线分析(DCA)评估模型的临床效益。结果 联合H4C6甲基化水平与cfDNA浓度构建的模型区分肺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌、泛癌与健康组的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.769、0.988、0.934、0.922、0.830;校准曲线的平均绝对误差小于0.05;DCA曲线的净收益大于0。结论 基于H4C6甲基化水平和cfDNA浓度构建的癌症风险预测模型有较好的预测性能,有助于给临床前决策提供合理且有效的建议,最终可能给患者提供有针对性的、个性化的癌症检测与诊断方案。

依托应用化学专业虚拟教研室建设探索C4H4创新型人才培养

虚拟教研室作为信息化时代新型基层教学组织建设的重要探索,通过资源共享共建、多校协同合作,在高校专业建设与人才培养中起到助推作用。依托民族院校应用化学专业虚拟教研室,建设应用化学国家级一流本科专业,探索基于中南民族大学校训“笃信好学,自然宽和”精神的“C4H4”(Clean Heart,Cautious Habit,Comparative Haecceity和Clever Hands)的创新型人才培养模式,通过教学研讨、经验交流、示范教学、教研立项、成果推广、教师培训等教研形式,使用虚拟教研室APP等在线平台,合作共享教学案例、虚拟仿真项目、题库和试卷库、知识图谱、教学视频、电子课件和数据采集等共建资源,分别在学生专业素养提升、学习习惯养成、专业思维模式培养和实践动手能力等方面进行尝试,为民族地区培养专业素养良好、学习态度严谨、专业思维敏锐及实践动手能力出色的复合型高素质创新型人才。

H4亚型禽流感病毒的流行与进化

禽流感是一种主要感染禽类且部分具有感染哺乳动物能力的传染病。禽流感病毒亚型众多,流行广泛,给人类生产生活带来极大影响。随着低致病性禽流感感染人事件的增多,低致病性禽流感病毒逐渐引起公众的关注。H4禽流感病毒作为低致病性禽流感的优势亚型,毒株数量众多且分布地区广泛,但受到的关注以及研究较少,相关研究多为进化和分子生物学特征分析,公众对其认知有限。为了更好的了解H4亚型AIV的流行与进化,探讨其致病、跨种传播潜力,明确H4亚型AIV的潜在公共卫生风险。本文论述了H4亚型AIV的流行、宿主感染分布、病毒的进化与变异,围绕其变异潜力和致病力增强现状进行归纳分析,以期提高公众对LPAIV的认知,为H4亚型AIV综合防控提供科学依据。

血清可溶性髓样细胞触发受体-1、组蛋白H4与脓毒症患者病情严重程度的相关性及其对预后的评估价值

目的探究血清可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)、组蛋白H4与脓毒症患者病情严重程度的相关性及其对预后的评估价值。方法选取2020年3月至2022年9月福州市第一总医院重症医学科收治的96例脓毒症患者作为研究对象,按照病情严重程度分为脓毒症组(32例)、严重脓毒症组(45例)、脓毒症休克组(19例),入院24 h内行sTREM-1、组蛋白H4、降钙素原(PCT)检测,并进行急性生理和慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分评分及序贯器官衰竭评估(SOFA)评分评价,分析sTREM-1、组蛋白H4与病情严重程度的相关性。根据28 d生存情况分为存活组(n=71)和死亡组(n=25),比较存活组与死亡组的sTREM-1、组蛋白H4、PCT、APACHEⅡ评分、SOFA评分差异,并绘制受试者工作特征曲线(ROC)评价sTREM-1、组蛋白H4预测脓毒症患者预后的价值。结果脓毒症组、严重脓毒症组及脓毒症休克组的sTREM-1、组蛋白H4、PCT、APACHEⅡ评分、SOFA评分及28 d病死率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。血清sTREM-1、组蛋白H4与APACHEⅡ评分、PCT水平、SOFA评分均呈正相关(P<0.05)。死亡组的血清sTREM-1、组蛋白H4、APACHEⅡ评分、PCT、SOFA评分均高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。sTREM-1、组蛋白H4诊断脓毒症患者预后的AUC分别为0.792、0.837。结论脓毒症患者入院24 h内的血清sTREM-1、组蛋白H4水平与病情严重程度呈正相关性,可用于早期评估脓毒症患者的病情及预后,指导临床治疗。

胃癌组蛋白H3第4位赖氨酸的三甲基化修饰相关长链非编码RNA预后模型的构建与验证

目的 探索胃癌组蛋白H3第4位赖氨酸的三甲基化(trimethylation of lysine 4 on histone H3,H3K4me3)修饰相关长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)特征,构建相关预后模型并预测胃癌免疫治疗疗效。方法 从癌症基因组图谱数据库下载胃癌相关转录组测序数据和对应的患者临床资料,通过构建H3K4me3相关调节因子基因与LncRNA的共表达网络识别H3K4me3修饰相关LncRNA,并将癌症基因组图谱数据库中370例符合筛选标准的胃癌患者样本(整体组)按1:1随机抽样划分为训练组(n=185)和验证组(n=185)。随后基于单因素Cox回归、Lasoo回归分析构建H3K4me3相关LncRNA预后风险评分模型并进行内部验证。Kaplan-Meier生存分析和受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)被用于验证模型的预测性能。通过单因素和多因素Cox回归分析评估风险评分等临床指标的预后预测价值。结合风险评分、年龄和肿瘤TNM分期构建预测胃癌患者总生存率的列线图模型,ROC曲线与校准图被用于评估列线图的预测准确性。借助共识聚类识别异质性聚类亚群并进行免疫治疗疗效预测。结果 基于共表达网络关系识别了14个具有预后价值的H3K4me3相关LncRNA并构建了相关风险模型及评价体系。根据训练组预后风险评分模型获得的中位风险评分将训练组、验证组和整体组胃癌患者划分为高、低风险,Kaplan-Meier生存曲线显示低风险患者的总体生存情况要优于高风险患者(P<0.05)。此外,该模型在训练组中预测胃癌患者1、3、5年总生存率的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.708、0.730、0.770,在验证组中分别为0.690、0.648、0.713,而在整体组中分别为0.697、0.670、0.724。多因素Cox回归分析显示基于H3K4me3相关LncRNA构建的风险评分模型是预测胃癌患者预后的独立因素(P<0.001)。构建的列线图预测胃癌患者1、2、3年总生存率的AUC分别为0.727、0.780、0.717,且其校准曲线与理想曲线相接近。基于共识聚类算法进一步识别了2种具有异质性免疫特征的H3K4me3-LncRNA亚群,其中亚组Ⅱ具有更高的免疫细胞浸润水平和更强的免疫应答潜力,并对5-氟尿嘧啶、奥沙利铂等显示出更高的药物敏感性,而亚组Ⅰ则可能对磷脂酰肌醇3-激酶特异性抑制剂具有更高的敏感性。结论 本研究构建了一个H3K4me3-LncRNA风险评分模型以预测胃癌患者的预后,并揭示了其异质性微观特征及在预测免疫治疗疗效方面的潜在价值。

H4三维绕障阶梯式水平井钻井技术

介绍了新疆宝浪油田 H4三维绕障阶梯式水平井的设计和施工情况 ,重点分析了该井侧钻后的增斜段、两水平段井眼轨迹控制的工艺技术和钻井液体系 ,并针对该井水平段钻井过程中钻具摩阻和扭矩过大、钻压传递困难等难点 ,提出了相应的技术措施 。

EH4时频数据联合处理及其在煤矿采空区的应用

煤矿采空区对地面建设工程和人民生命财产构成巨大潜在危害,利用EH4连续电导率剖面仪能对其进行有效识别.目前,EH4数据处理基本依赖于系统自带软件IMAGEM,所得结果一般很难满足资料解释的精度要求,故掌握EH4数据的再处理具有重要意义.对EH4数据进行时频联合处理能够最大化利用地电响应信息:时域数据处理是对原始资料的再认识过程,其基本流程包括时间序列读取、时频转换、功率谱分析和阻抗估算;频域数据处理则是在时域数据处理的基础上,选择合适的反演方案,将所得的高质量频域数据进行反演成图.本文通过对某煤田相关矿区进行大地电磁探测及EH4数据处理,对这些区域的大地电磁响应进行分析,得到高质量频域数据,并利用基于阻尼高斯-牛顿法的正则化反演进行频域数据反演成图及解释,最后得出了合理可靠的地球物理解释,成功圈闭出三处采空区,并在实际回填过程中得到验证,处理结果真实可信.

模板合成H4PMo11VO40／聚苯胺纳米线列阵及其聚合机理探讨

在氧化铝模板中制备了HPA/PANI纳米线列阵,SEM、TEM表明列阵中纳米线直径约为80 nm;XRD与FT-IR证明形成了有效掺杂;单根纳米线的导电率为16.2 S.cm-1;材料的TG-DTA表明PANI纳米线材料有三步失重过程,失去吸附水过程,多酸失去结晶水和PANI结构持续分解过程,多酸结构分解过程;在氧化聚合过程中H4PMo11VO40即为质子酸又为氧化剂和掺杂剂;聚合反应采用自由基机理进行,掺杂反应发生在形成醌二亚胺式自由基正离子和双苯胺式自由基正离子和醌二亚胺式自由基正离子偶联聚合成链结构时.

西南喀斯特地区灌丛林土壤CO2、CH4通量研究

灌丛林生态系统是西南喀斯特地区广泛分布的生态系统类型,在区域生态系统碳循环和碳平衡中有重要作用。为估算亚热带喀斯特地区CO2和CH4源汇现状,评价灌丛林生态系统对温室效应的影响,以贵阳市开阳县灌丛林为研究对象,采用静态箱-气相色谱法观测CO2和CH4通量的季节变化。对2010年12月到2012年1月的观测结果分析表明,灌丛林地土壤表现为CO2的释放源和CH4的吸收汇,CO2通量的变化范围为33.20～1106.75 mg/(m2.h),年平均通量为342.98 mg/(m2.h);CH4通量的变化范围为–206.14～–59.85μg/(m2.h),年平均通量为–103.22μg/(m2.h)。CO2排放通量和CH4吸收通量均表现出明显的季节变化规律,两者最高值均出现在夏季,不同的是CO2排放通量最低值出现在12月,而CH4吸收通量最高值则出现在11月。土壤温度和土壤湿度是影响灌丛林土壤CO2通量的主要因子,双因素模型(F=αeβTWγ)较好拟合了土壤温度和土壤湿度对土壤呼吸的影响,两者共同解释了CO2通量变化的81.4%。土壤CH4吸收通量与温度存在显著正相关关系,其中5 cm土壤温度同CH4吸收通量相关性最好,但温度超过一定阈值时,两者相关性降低。土壤CH4吸收通量与土壤湿度呈显著负相关关系表明,水分是土壤氧化CH4的重要限制因子。

H4亚型家养水禽流感病毒分离株的表面膜蛋白基因的序列测定和遗传进化分析

采用常规的血清学试验和特异性RT-PCR方法对华东地区家养水禽中流感病毒的带毒状况进行4年多的监测,分离鉴定出多株H4亚型禽流感病毒。对其中的A/Duck/Yangzhou/216/2002(简称Dk/YZ/216/02)、A/Duck/Yangzhou/526/2003(简称Dk/YZ/526/03)、A/Duck/Yangzhou/36/2004(简称Dk/YZ/36/04)的血凝素基因和Dk/YZ/526/03、Dk/YZ/36/04的神经氨酸酶基因进行了克隆测序,并与GenBank中收录的其它序列进行了比较,遗传进化结果表明Dk/YZ/216/02的血凝素基因(HA)与毒株Tk/Minnesota/833/80(H4N2)同源性最高,而Dk/YZ/526/03和Dk/YZ/36/04的血凝素基因(HA)均与Budgerigar/Hokkaido/1/77(H4N6)同源性最高;而神经氨酸酶基因(NA)遗传进化分析结果表明Dk/YZ/36/04(H4N6)的NA基因与毒株Pigeon/Nanchang/8-142/2000(H3N6)同源性最高,而Dk/YZ/526/03(H4N2)的NA基因与Dk/Hokkaido/13/00(H9N2)同源性最高,3株禽流感病毒的HA推导的氨基酸剪切位点序列均为P-E-K-A-S-R,为典型低致病性禽流感病毒的特征序列,与对SPF鸡的致病力试验相吻合。

一株鸭源H4N8亚型禽流感病毒的全基因测序及遗传进化分析

【目的】禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)根据其表面糖蛋白血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸(neuraminidase,NA)的不同,可分为16种HA和9种NA亚型。根据其致病力的差异可分为高致病性禽流感病毒(highly pathogenic avian influenza virus,HPAIV)和低致病性禽流感病毒(low pathogenic avian influenza virus,LPAIV)。虽然H4亚型禽流感病毒为低致病性AIV,感染家禽表现为无症状感染,但其对禽类甚至是哺乳动物是一个潜在的威胁,因此必须要加强对H4亚型禽流感病毒的调查监控。【方法】为了探讨H4亚型禽流感病毒的分子特征及遗传演化规律,对2010年在中国华东地区某活禽市场进行流行病学监测时分离到的一株H4N8亚型禽流感病毒A/duck/Nanjing/1102/2010(简称DK/NJ/1102)进行了全基因组序列测定及遗传进化分析。通过常规的血清学试验确定其HA亚型,提取病毒总RNA,并通过RT-PCR方法分别扩增出其各基因片段,连接p GEM-Teasy载体上后进行序列测定。利用Gen Bank中的BLAST工具进行核苷酸序列的同源性分析,并与Gene Bank中的H4亚型流感病毒及其它相关序列进行遗传进化分析。【结果】DK/NJ/1102的HA基因与Mongolia分离株A/duck/Mongolia/274/2007(H4N3)的核苷酸同源性最高,为98.9%。推导的氨基酸剪切位点序列为"P-E-K-A-S-R-G",符合典型的低致病性禽流感病毒特征;NA基因与华东地区分离的鸭源毒株A/Duck/Eastern China/n91/2009(H3N8)核苷酸同源性最高,达99.4%;PB1、PA和NP基因均与H1亚型禽流感病毒亲缘关系最近;M基因与A/wild duck/Korea/CSM4-12/2009(H5N1)核苷酸同源性最高,高达99.9%;NS基因与韩国2009年分离的H7N7亚型流感病毒遗传距离最近。NS1蛋白的80-84处氨基酸没有发生氨基酸缺失。【结论】该H4N8亚型禽流感病毒基因组构成比较复杂,可能是一株多基因重组病毒。

MicroRNA-155在碘致NOD.H-2h4小鼠自身免疫性甲状腺炎发病中的变化研究

目的:观察高碘诱发NOD.H-2 h4小鼠发生自发性自身免疫性甲状腺炎(SAT)动物模型中Th1及Th2细胞的动态变化及甲状腺、脾脏、肝脏、肾脏中mi R-155的动态改变,探讨mi R-155对碘致自身免疫性甲状腺炎(AIT)的可能影响及作用机制。方法:4周龄NOD.H-2 h4雌性小鼠随机分为对照组及高碘饮水组。高碘组饲以含0.05%碘化钠的无菌水,对照组饲以无菌双蒸水,于实验开始后第0、2、4、6、8、10、12周麻醉处死。留取甲状腺,制备石蜡切片行HE染色;酶联免疫吸附试验测定血清甲状腺球蛋白抗体(Tg Ab)水平;流式细胞仪检测脾脏单个核细胞悬液Th1、Th2细胞表达水平;实时定量RT-PCR检测脾细胞中Th1和Th2细胞转录因子T-bet及GATA-3,细胞因子IFN-γ及IL-4的m RNA表达水平及甲状腺、脾脏、肝脏、肾脏mi RNA-155表达水平。结果:发生SAT的小鼠血清Tg Ab滴度较对照组升高(P<0.05)。脾细胞中Th1细胞比例及T-bet,IFN-γm RNA表达量自6周后较对照组升高(P<0.05)。脾脏、甲状腺miR-155表达量分别自8周及10周后较对照组升高(P<0.05)。脾脏mi R-155水平与Tg Ab滴度显著正相关(r=0.825,P<0.01),与Th1细胞比例显著正相关(r=0.872,P<0.01);甲状腺mi R-155水平与TgAb滴度显著正相关(r=0.575,P<0.01);与Th1细胞比例显著正相关(r=0.642,P<0.01)。结论:发生SAT的NOD.H-2 h4小鼠脾脏Th1细胞比例显著升高,提示Th1细胞可能参与该模型AIT的发生发展,占免疫优势地位。脾脏及甲状腺mi R-155水平与Tg Ab滴度及Th1细胞比例显著正相关,提示mi R-155可能通过影响Th1细胞在AIT的发生发展中发挥作用。

一株野鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005的全基因组克隆和序列分析

应用流感病毒通用引物对盐城珍禽自然保护区野鸭泄殖腔棉拭子分离株禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005(简称Mallard/YC/2005)(H4N6)进行全基因组序列扩增,结合GenBank中的相关序列进行遗传进化分析。结果表明,Mallard/YC/2005(H4N6)HA基因与A/duck/Siberia/1701/1996(H4N6)的核苷酸同源性最高(97.5%),推导的氨基酸剪切位点序列为PEKASR,为典型低致病性禽流感病毒的特征序列;神经氨酸酶(NA)、非结构蛋白(NS)均没有氨基酸缺失;基质蛋白2(M2)与宿主特异性有关的位点及碱性聚合酶2(PB2)的627位都是亲禽类细胞的氨基酸;M基因与家鸭分离株A/duck/Yangzhou/02/2005(H8N4)的核苷酸同源性为99.4%,PA基因与家鸭分离株A/duck/Jiangxi/1286/2005(H5N2)的核苷酸同源性达98.9%,说明这2个基因已经在家鸭体内存在并参与了基因重排。

参芪补肺汤对慢性阻塞性肺疾病肺气虚证大鼠气道平滑肌中乙酰化组蛋白H4、HDAC2和NF-μB p65表达的影响

目的观察参芪补肺汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺气虚证大鼠支气管平滑肌(ASM)中乙酰化组蛋白H4、组蛋白去乙酰化酶-2(HDAC2)和核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的影响。方法取SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、参芪补肺汤组、氨茶碱组,每组10只。运用气管内注射脂多糖加烟熏28 d的方法建立COPD肺气虚证大鼠模型。光镜下观察肺组织的病理形态学变化,运用图像分析法测量小气道管壁和ASM的厚度,采用免疫组化和Western blot方法检测大鼠ASM中乙酰化组蛋白H4、HDAC2和NF-κB p65的蛋白表达,实时荧光定量PCR方法检测大鼠ASM组织中HDAC2 m RNA和NF-κB p65 m RNA的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠气道管壁和ASM厚度明显增高(P<0.05);与模型组比较,参芪补肺汤组和氨茶碱组气道管壁和ASM厚度明显降低(P<0.05);参芪补肺汤组与氨茶碱组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,模型组乙酰化组蛋白H4的蛋白表达、NF-κB p65 m RNA和蛋白的表达明显增高(P<0.05);HDAC2m RNA和蛋白的表达均明显降低(P<0.05);与模型组比较,参芪补肺汤组和氨茶碱组乙酰化组蛋白H4的蛋白表达、NF-κB p65 m RNA和蛋白的表达明显增高(P<0.05);HDAC2 m RNA和蛋白的表达明显降低(P<0.05)。参芪补肺汤组与氨茶碱组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论参芪补肺汤可抑制COPD肺气虚证模型大鼠ASM增殖,其机制与其提高HDAC2的表达,使组蛋白H4去乙酰化,从而抑制NF-κB p65的表达有关。