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人新基因hbrp的染色体定位及其对TPK活性的抑制作用(简报) 被引量:2
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作者 张杰 冯晨 +6 位作者 刘莹 姜淼 杨嘉宁 陈菲 宋宇彤 王格 于秉治 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期177-182,共6页
hbrp(Human BSP-Related Protein)是我们实验室最近在睾丸组织中克隆的一个人与BSP(bovine seminal plasma)蛋白相关的新基因.为了将有关该新基因信息与现有人类基因组转录图相整合,我们应用荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridiza... hbrp(Human BSP-Related Protein)是我们实验室最近在睾丸组织中克隆的一个人与BSP(bovine seminal plasma)蛋白相关的新基因.为了将有关该新基因信息与现有人类基因组转录图相整合,我们应用荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization-FISH)法进行了该基因的人染色体基因定位,结果成功地将hbrp基因定位在人19号染色体长臂1区3带上.hbrp基因是在对BSP蛋白功能的研究过程中发现并克隆的,其同源性分析发现,与其序列最相近的是BSP蛋白家族.hbrp基因编码的蛋白质氨基酸序列中含有四个纤连蛋白Ⅱ型结构域,而BSP蛋白结构中含有两个前后排列的纤连蛋白Ⅱ型结构域,表明该蛋白可能是一种与BSP蛋白相关的结合蛋白.以前的研究中,我们发现BSP不仅能抑制PKC的活性,还能抑制酪氨酸蛋白激酶(TPK)的活性,根据BSP的这一功能,对HBRP蛋白与TPK的关系进行了研究,结果证明HBRP蛋白对TPK活性有明显的抑制作用.现将实验方法及所观察结果报道如下: 展开更多
关键词 hbrp 新基因 染色体定位 抑制作用 TPK 活性 荧光原位杂交 19号染色体 基因定位 人类基因组 同源性分析 睾丸组织 基因信息 人染色体 研究过程 BSP 实验室 克隆 蛋白 转录
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人新基因HBRP基因工程细胞系的建立 被引量:1
2
作者 张杰 刘莹 +3 位作者 惠答美 宿文辉 宗志红 于秉治 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第5期52-55,60,共5页
在研究牛精浆蛋白 (bovineseminalplasmaproteins ,BSPproteins)及其相关蛋白在受精卵发育过程中的重要作用时 ,在人睾丸组织中发现并克隆了一个与BSP蛋白相关新基因的序列 ,其开放阅读框架 (openreadingframe ,ORF)编码了一个含 2 2 3... 在研究牛精浆蛋白 (bovineseminalplasmaproteins ,BSPproteins)及其相关蛋白在受精卵发育过程中的重要作用时 ,在人睾丸组织中发现并克隆了一个与BSP蛋白相关新基因的序列 ,其开放阅读框架 (openreadingframe ,ORF)编码了一个含 2 2 3个氨基酸残基的蛋白质 ,氨基酸序列中含有4个纤连蛋白Ⅱ型结构域 ,与BSP蛋白在结构上有一定的相似性 ,称其为人BSP相关蛋白 (humanBSP relatedprotein ,HBRP) ,并在GenBank注册 ,登录号为AF2 791 4。预测该蛋白是与BSP蛋白功能相关的结合蛋白 ,并已成功地将该基因定位在 1 9号染色体 1区 3带上。为进一步研究该新基因的生物学功能 ,利用重组质粒pEGFP C2 HBRP转染人胚肾HEK2 93细胞 ,通过G41 8筛选出药物抗性克隆 ,建立了稳定的基因工程细胞系 ,为该基因功能的研究奠定了基础 。 展开更多
关键词 hbrp基因 基因工程 细胞系 19号染色体
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人新的精子结合蛋白HBRP新功能的研究 被引量:1
3
作者 张杰 刘莹 +3 位作者 宗志宏 惠答美 刘奕 于秉治 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期74-77,T003,共5页
目的:探讨新发现的人睾丸组织中与精浆蛋白BSP相关的新基因的生物学功能。方法:利用真核重组表达质粒pcDNA3/HBRP转染人胚肾HEK293细胞,建立稳定的真核表达细胞系,并用放射自显影检测该细胞系的PKC活性。结果:HBRP蛋白对PKC活性有明显... 目的:探讨新发现的人睾丸组织中与精浆蛋白BSP相关的新基因的生物学功能。方法:利用真核重组表达质粒pcDNA3/HBRP转染人胚肾HEK293细胞,建立稳定的真核表达细胞系,并用放射自显影检测该细胞系的PKC活性。结果:HBRP蛋白对PKC活性有明显的抑制作用。结论:确定了人新的精子结合蛋白HBRP的功能之一是抑制PKC活性。 展开更多
关键词 hbrp 真核表达 PKC活性
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人新的精子结合蛋白HBRP真核表达体系的建立
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作者 张杰 刘莹 +3 位作者 惠答美 宿文辉 李雪莲 于秉治 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期388-390,共3页
目的:为进一步研究人牛精浆蛋白(bovine sem inal p lasm a,BSP)相关蛋白(hum an BSP-related prote in,HBRP)的生物学功能,建立稳定表达的细胞系。方法:利用重组质粒pEGFP-C2/HBRP转染人胚肾HEK293细胞,通过G418筛选出药物抗性克隆,并... 目的:为进一步研究人牛精浆蛋白(bovine sem inal p lasm a,BSP)相关蛋白(hum an BSP-related prote in,HBRP)的生物学功能,建立稳定表达的细胞系。方法:利用重组质粒pEGFP-C2/HBRP转染人胚肾HEK293细胞,通过G418筛选出药物抗性克隆,并进一步进行培养、传代。结果:建立了新基因HBRP稳定表达的基因工程细胞系。结论:实现了利用真核细胞系表达HBRP蛋白,为该蛋白功能的研究奠定了基础,对该基因功能的进一步研究有重要的意义。 展开更多
关键词 hbrp基因 基因工程 细胞系
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一种新的精子结合蛋白HBRP在原核表达及其活性研究
5
作者 罗阳 宗志宏 于秉治 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2003年第4期246-250,共5页
为了发现和研究牛精浆(bovine seminal plasma,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用,我们克隆了人类生殖相关新基因HBRP(Human BSP-Related Proteins),本文通过基因重组技术,构建了GST-HBRP融合蛋白表达质粒,在大肠杆... 为了发现和研究牛精浆(bovine seminal plasma,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用,我们克隆了人类生殖相关新基因HBRP(Human BSP-Related Proteins),本文通过基因重组技术,构建了GST-HBRP融合蛋白表达质粒,在大肠杆菌中获得大量表达,并检测了该蛋白对PKC活性的影响。 展开更多
关键词 精子结合蛋白 hbrp 原核表达 活性
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巴西橡胶树HbRPS6-2基因的克隆与生物信息学分析
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作者 涂敏 蔡海滨 +1 位作者 华玉伟 黄华孙 《热带作物学报》 CSCD 2011年第11期2048-2053,共6页
从巴西橡胶树甲基化过滤文库中筛选到一个与RPS6同源性较高的基因片段,根据该基因片段序列信息,设计特异引物,利用RACE进行特异片段的5'和3'扩增,获得长度为1 327 bp的HbRPS6-2基因克隆。生物信息学分析表明,该基因包含483 bp... 从巴西橡胶树甲基化过滤文库中筛选到一个与RPS6同源性较高的基因片段,根据该基因片段序列信息,设计特异引物,利用RACE进行特异片段的5'和3'扩增,获得长度为1 327 bp的HbRPS6-2基因克隆。生物信息学分析表明,该基因包含483 bp的开放阅读框,5'非翻译区为357 bp,3'非翻译区为475 bp,编码161个氨基酸。在HbRPS6-2氨基酸序列中没有预测到信号肽和跨膜区,二级结构分析表明其属于混合型蛋白。HbRPS6-2在N端前18个氨基酸区域内有一个较强的疏水区,但整条多肽链表现为亲水性。对15个RPS6系统进化分析发现,巴西橡胶树的RPS6-2基因与多杀性巴氏杆菌的RPS6基因亲缘关系最近,而与拟南芥和玉米等亲缘关系相对较远。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 hbrpS6—2 基因克隆 序列分析
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Investigation of Function of Novel Sperm Binding Protein HBRP in Human
7
作者 Jie ZHANG Ying LIU Wen-hui SU Guo-li WANG Zhi-hong ZONG Bing-zhi YU 《Journal of Reproduction and Contraception》 CAS 2007年第3期173-180,共8页
Objective To investigate the biology function of novel protein related to bovine seminal plasma protein in human testis. Methods Recombination pcDNA3/HBRP was constructed and transfected to HEK293 cell and permanently... Objective To investigate the biology function of novel protein related to bovine seminal plasma protein in human testis. Methods Recombination pcDNA3/HBRP was constructed and transfected to HEK293 cell and permanently expression cell line was established. The activity of protein kinase C (PKC) of the cell line was detected by autoradiography method. Results The stable expression cell line of HBRP was obtained. The HBRP inhibited the activity of PKC significantly. Conclusion One of the new functions of novel sperm binding protein in human is the inhibitor action on activity of PKC. It may be involved in the sperm capacitation and acrosome reaction. 展开更多
关键词 hbrp eukaryotic expression PKC activity
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人精子结合蛋白HBRP的抗体制备及定位
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作者 张杰 许琳 +3 位作者 王国丽 宿文辉 戴维亚 于秉治 《解剖科学进展》 CAS 2011年第3期255-258,共4页
目的制备人类新的精子结合蛋白HBRP的单克隆抗体,确定其在精子的定位及其与精子功能相关的作用。方法分别利用PCR、Western blot、动物免疫、血清纯化等方法得到HBRP单克隆抗体,用ELISA方法检测抗体滴度;利用间接免疫荧光方法观察HBRP... 目的制备人类新的精子结合蛋白HBRP的单克隆抗体,确定其在精子的定位及其与精子功能相关的作用。方法分别利用PCR、Western blot、动物免疫、血清纯化等方法得到HBRP单克隆抗体,用ELISA方法检测抗体滴度;利用间接免疫荧光方法观察HBRP在精子的定位。结果经纯化鉴定获得HBRP融合表达蛋白;首次获得HBRP单克隆抗体;应用制备的单克隆抗体,确定HBRP主要结合在精子尾部的中段和主段。结论 HBRP结合在人成熟精子尾部的中段和主段,提示其参与精子运动功能的调控。 展开更多
关键词 hbrp 人精子结合蛋白 细胞定位 抗体
原文传递
人类生殖相关新基因的定位和组织表达 被引量:2
9
作者 罗阳 于秉治 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期633-636,共4页
基因定位对研究基因之间以及基因与疾病之间的相互关系具有重要意义。应用辐射杂种细胞系技术(RH)对我们克隆的人类新基因HBRP(HumanBSP RelatedProtein)进行了染色体定位,结果将该基因定位于19q13.2~13.3,同时应用生物信息学方法在人... 基因定位对研究基因之间以及基因与疾病之间的相互关系具有重要意义。应用辐射杂种细胞系技术(RH)对我们克隆的人类新基因HBRP(HumanBSP RelatedProtein)进行了染色体定位,结果将该基因定位于19q13.2~13.3,同时应用生物信息学方法在人类基因组重叠片段数据库进行该基因的定位,结果相吻合。研究证明,RH技术具有快速、精确、简便等优点,是基因定位研究中一强有力的技术。同时通过RT PCR方法研究了HBRP基因在人体各组织中的表达分布,结果显示该基因在睾丸、肠、肾、肝、脾、胃、胰腺组织有较高的表达,而在检测的脑、肺、骨骼肌、心肌组织中表达较弱。 展开更多
关键词 辐射杂种细胞系 染色体定位 hbrp RT-PCR 生物信息学 人类 生殖基因 组织表达
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人牛精浆相关蛋白的亚细胞定位及生物活性
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作者 张杰 刘莹 +2 位作者 宗志红 宿文辉 于秉治 《细胞生物学杂志》 CSCD 2006年第2期243-247,共5页
利用红色荧光蛋白表达载体pDsRed1-N1与人睾丸中牛精浆相关蛋白基因(hbrp)重组为pDsRed1-N1/hbrp,真核表达载体pcDNA3.1-myc-his与hbrp重组为pcDNA3.1-myc-his/hbrp,分别转染HEK293细胞,建立稳定的真核表达细胞系。在荧光显微镜下观察H... 利用红色荧光蛋白表达载体pDsRed1-N1与人睾丸中牛精浆相关蛋白基因(hbrp)重组为pDsRed1-N1/hbrp,真核表达载体pcDNA3.1-myc-his与hbrp重组为pcDNA3.1-myc-his/hbrp,分别转染HEK293细胞,建立稳定的真核表达细胞系。在荧光显微镜下观察HBRP的亚细胞定位,并用放射自显影检测该细胞系的蛋白激酶C(PKC)活性。HBRP定位在细胞膜及胞浆近膜处;HBRP对PKC活性有明显的抑制作用。从而确定了人新的精子结合蛋白HBRP在细胞内的定位,并认定了HBRP为有生物活性的功能蛋白。 展开更多
关键词 人牛精浆相关蛋白 牛精浆蛋白 亚细胞定位 蛋白激酶C活性
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