血清HBV-DNA定量检测与凝血指标对乙肝患者病情诊断的研究

目的研究乙型肝炎患者凝血功能、临床分型及血清乙肝病毒核糖核酸（HBV-DNA）含量之间的关系。方法收集乙型肝炎患者472例为研究组，健康人群55例作为健康对照组，分别检测凝血功能指标及血清HBV—DNA含量，比较临床分型各组的PT、INR、APTT、TT和FIB的关系以及不同血清HBV—DNA含量组中PT、INR、APTT、TT和FIB的关系。结果男性的FIB（2．31±0．90）明显小于女性FIB（2．67±1．50）（P〈0．05）。慢性乙肝（轻型）组和慢性乙肝（中型）组的PT、APTT、TT均明显低于l陧性乙肝（重型）、肝炎肝硬化（未失代偿）、肝硬化失代偿期组的PT（P〈0．01）。男性与女性对照组的FIB均明显高于急性肝炎组以及慢性乙肝（重型）、肝炎肝硬化（未失代偿）、肝硬化失代偿期组（P〈0．01）。按血清HBV-DNA定量分组患者APTT、TT、FIB值与正常对照组和乙肝患者HBV—DNA含量〈103copy／mL组比较均有显著性差异（P〈0．01）。当103copy／mL〈HBV—DNA〈10scopy／mL时，PT值与正常对照组比较具有显著性差异，血清中HBV—DNA含量分组与PT有正相关性（r=0．159，P=0．000），HBV—DNA含量与FIB呈负相关（r=-0．144，P=O．001）。结论乙肝患者凝血功能异常程度随临床分型的加重而加重，凝血功能的异常随着血清HBV—DNA含量的增加有降低的趋势，PT值的检测是反映乙肝患者凝血功能的灵敏指标。对于HBV—DNA含量在10^5-10^6copy／mL的患者，应该随时监测凝血功能，把握抗病毒治疗的时机。

乙肝患者血清IL-2、sIL-2R水平与肝损程度、HBV DNA含量的变化

目的探讨乙型肝炎患者血清IL-2、sIL-2R含量与肝损程度和HBV DNA含量的相关性及临床意义。方法收集急、慢、重型乙肝患者血清标本共93例,28例健康人血清标本作为对照组,采用ELISA法检测各型乙型肝炎患者血清中IL-2、sIL-2R。HBV DNA定量采用荧光定量PCR法。结果各型乙肝患者血清中IL-2均有所下降,sIL-2R均高于正常对照组(P<0.05),并随肝损伤程度加重,含量随之增加。慢性肝炎患者血清sIL-2R水平与HBV DNA含量呈正相关系。结论乙型肝炎患者血清IL-2、sIL-2R水平及HBV DNA含量可作为判断感染乙肝病毒后机体免疫水平和细胞受损程度的参考指标。

孕妇HBV-DNA定量对监测母婴HBV传播价值的探讨

目的:对患乙肝母亲和新生儿血清中HBV-DNA定量检测,探讨HBV-DNA定量检测在母婴乙型肝炎病毒宫内传播的价值,指导临床,降低乙肝病毒母婴传播率.方法:采用荧光定量PCR技术对95例乙肝血清标志阳性的孕妇及其婴儿血清进行HBV-DNA定量检测,分析母婴血清中HBV-DNA含量的相关性.结果:'大三阳'组孕妇37例,血清HBV-DNA含量范围为6.00～9.90,均值为7.57±1.27,母婴传播率为91.9%;'小三阳'组孕妇44例,血清HBV-DNA含量范围为＜2.00～6.25,均值为4.13 ±1.64,母婴传播率为52.3%;单一HBcAb阳性组孕妇14例,血清HBV-DNA含量范围为＜2.00～4.71,均值为3.17±1.54,母婴传播率为14.3%,HBV母婴宫内传播率随孕妇血清HBV-DNA含量的增高而增加.结论:母婴乙型肝炎病毒宫内传播率与孕妇血清中HBV-DNA含量呈正相关性(r=0.351,P＜0.01),当孕妇血清中HBV-DNA含量＞6.00时,乙型肝炎病毒母婴宫内传播率显著增加(增加39.3%),提示有效控制患乙肝孕妇血清中HBV-DNA含量,可明显减少宫内母婴乙肝病毒传播率.

HBV包膜-核心蛋白融合基因DNA疫苗诱导小鼠持久的细胞免疫应答

构建编码HBV包膜 核心蛋白融合基因的DNA疫苗pSC、pSS1S2C和编码HBV包膜蛋白或核心蛋白基因的DNA疫苗 pHBs、pHBc ,分别肌肉注射免疫BALB/c小鼠 ,检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞反应 ,比较融合基因DNA疫苗与单基因DNA疫苗诱生免疫应答的强度 ,发现融合基因DNA疫苗诱生抗体的效率明显不及单基因DNA疫苗 ,但其能诱导更强、更持久的细胞免疫应答 ,表明HBV包膜 核心蛋白融合基因DNA疫苗对于治疗慢性乙型肝炎可能比单基因DNA疫苗更为有效 .

乙型肝炎患者凝血功能与血清HBV-DNA含量的相关性

目的研究乙型肝炎患者凝血功能与血清HBV—DNA含量之间的关系与意义。方法收集乙型肝炎患者486例，健康人群50例作为正常对照，分别检测其凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）等三项凝血功能指标及血清HBV DNA含量。分析PT、APTT、FIB等指标在不同血清HBV—DNA含量组中的变化及意义。结果除HBV—DNA〈10^3copy／ml含量组的PT值与正常对照无差异外，其它各组PT值与正常对照组比较均有差异，特别是10^3copy／ml〈HBV—DNA〈10^7copy／ml时，与正常对照组比较具有具有显著性差异，乙型肝炎患者APTT值与正常对照组和乙肝患者HBV—DNA含量〈10^3copy／ml组比较均有显著性差异，特别是当HBV—DNA〉10^3copy／ml时，与正常对熙组比较差异具有显著性，不同HBV—DNA含量分组之间PT、APTT、FIB差异也有显著性。结论乙型肝炎病人凝血功能的异常随着病人体内HBV—DNA含量的增加有降低的趋势，特别是对于HBV—DNA含量在10^4～10^6copy／ml病人，应该随时监测病人的凝血功能，以防止出现严重的出血和把握抗病毒治疗的时机。

乙肝肝硬化患者HBVDNA水平与细胞毒性T淋巴细胞表面程序性死亡受体-1表达及肝功能的关系

目的：探讨乙型肝炎肝硬化患者血清HBV DNA水平与外周血HBV特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表面程序性死亡受体-1（PD-1）表达及肝功能的关系。方法：将109例HBV DNA阳性、HBe Ag阳性和人白细胞抗原（HLA）-A2阳性的乙型肝炎肝硬化患者根据HBV DNA水平分为2组,甲组52例,HBV DNA 2~4 log10拷贝/m L,乙组57例,HBV DNA 5~7 log10拷贝/m L,比较2组患者的HBV特异性CTL表面PD-1表达、HBV特异性CTL水平和肝功能的差异。结果：甲组HBV特异性CTL表面PD-1表达低于乙组（t=11.101,P〈0.01）,HBV特异性CTL水平高于乙组（t=24.424,P〈0.01）,丙氨酸氨基转移酶低于乙组（t=2.652,P〈0.01）,血清白蛋白高于乙组（t=2.347,P〈0.05）。Child-pugh分级,甲组C级低于乙组（χ2=4.262,P〈0.05）。结论 ：乙型肝炎肝硬化患者血清HBV DNA水平高者,HBV特异性CTL表面PD-1表达水平高,因此,HBV特异性CTL水平低,进一步导致HBV DNA水平升高,导致肝功能损害较重,HBV DNA水平低者,HBV特异性CTL表面PD-1表达水平低,HBV特异性CTL水平高,预示抗病毒疗效相对较好。

FQ-PCR检测乙型肝炎患者血清HBV DNA

目的评价荧光定量聚合酶链反应 (FQ- PCR)检测 HBV DNA的临床应用价值。方法用 FQ- PCR和酶联免疫吸附试验 (EL ISA)分别检测乙型肝炎患者血清 2 5 1份和健康体检者血清 116份的 HBV DNA和 HBV血清标志物。结果 HBs Ag、HBe Ag和抗 - HBc3项阳性、HBs Ag、抗 - HBe和抗 - HBc3项阳性以及抗 - HBs、抗 - HBe、抗- HBc同时或分别阳性的样品 ,HBV DNA阳性率分别为 96 .5 %、5 6 .6 %和 12 .3% ,HBV DNA拷贝数分别为 1.12× 10 8/ ml、1.45× 10 6/ m l和 6 .6 1× 10 4/ m l。用 EL ISA检测 HBe Ag阳性率仅为 FQ- PCR检测 HBV DNA阳性率的5 5 .4%。结论 FQ- PCR对乙型肝炎早期诊断 。

血清HBV DNA和丙氨酸氨基转移酶水平与干扰素-α1b治疗慢性乙型肝炎疗效的关系

目的探讨血清HBV DNA定量和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平与干扰素-α1b治疗慢性乙型肝炎疗效之间的关系。方法86例慢性乙型肝炎患者接受干扰素-α1b治疗48周。结果在治疗结束时,完全应答组患者治疗前血清HBV DNA水平为5.8±0.4log copies/ml,显著低于部分应答组(6.9±1.2log copies/ml)和无应答组(7.7±1.4log copies/ml,P<0.05);在完全应答患者,血清HBV DNA水平于治疗第4和第12周时较治疗前下降大于2log;完全应答组患者治疗前血清ALT水平(175.3±39.2IU/L)高于部分应答组(115.4±22.3IU/L)和无应答组(88.4±21.2IU/L),有显著性差异(P<0.05);治疗4周时,完全应答组血清ALT水平较治疗前上升(185.2±35.20IU/L),明显高于部分应答组(89.5±15.7IU/L)和无应答组(75.6±18.4IU/L),差异显著(P<0.01)。结论慢性乙型肝炎患者在接受干扰素-α1b治疗前和治疗开始后4周至12周时,血清HBV DNA水平低和ALT水平高预示疗效较好。

艾滋病合并乙型肝炎患者HBV-DNA定量检测与血清免疫学指标的关系

目的探讨艾滋病合并乙型肝炎患者HBV-DNA定量检测与血清免疫学指标的关系。方法前瞻性选取青海省中医院2016年1月至2017年12月71例艾滋病合并乙型肝炎患者,对HBeAg阴性和阳性患者中HBV-DNA、HBsAg和ALT进行比较,观察HBV-DNA与HBeAg结果之间的关系;不同HBV-DNA组别(<3 copies/ml组、3~5 copies/ml组、>5 copies/ml组)中HBeAg、HBsAg和ALT比较进行分析;研究HBV-DNA与HBeAg、HBsAg和丙氨酸氨基转移酶(ALT)的相关性。结果 HBeAg阴性组的HBV-DNA、HBsAg和ALT均显著低于阳性组,具有统计学差异(P<0.05),HBV-DNA的阳性率显著高于HBeAg的阳性率(P<0.05)。在不同水平的HBV-DNA组别发现,在>5 copies/ml组和3~5 copies/ml组的HBeAg和ALT均显著高于<3 copies/ml组(P<0.05)。3~5组的HBsAg与<3 copies/ml组的HBsAg无显著差异(P>0.05),>5 copies/ml组HBsAg显著高于<3 copies/ml组(P<0.05)。对HBV-DNA与HBeAg、HBsAg和ALT进行相关性分析,发现HBV-DNA与上述指标均呈正相关。结论 HBV-DNA与血清中的HBeAg、HBsAg和ALT均为正相关,上述3种指标可以作为HBV复制的重要因子,具有较高的诊断价值。

乙肝患者血清HBV-DNA含量与性激素水平的相关关系

目的 :探讨性激素对乙肝患者病毒含量的影响及二者的相关关系。方法 :采用 PCR核酸扩增酶免定量技术进行血清 HBV- DNA含量 ,放射免疫法检测性激素含量。结果 :男性乙肝患者 HBV- DNA含量与血清睾酮 ( T)呈显著正相关 ( r=0 .5 2 ,P<0 .0 0 1 ) ,与雌二醇 ( E2 )、孕酮 ( P)呈显著负相关 ( r=- 0 .65 ,r=-0 .81 ,均 P<0 .0 0 1 ) ,女性患者 HBV- DNA含量与性激素无显著相关关系。结论 :性激素对男性患者 HBV-DNA含量有调节作用 ,可以通过调整性激素平衡来控制人体 HBV感染。

IL-2/IFN-γ融合蛋白质粒增强HBV DNA疫苗免疫原性的实验研究(英文)

目的评价IL-2/IFN-γ融合蛋白基因质粒(pFP)增强HBV DNA疫苗(pS2.S)免疫原性的佐剂作用。方法构建IL-2/IFN-γ融合蛋白和HBV包膜中蛋白(PreS2+S)编码基因的重组真核表达质粒,根据pFP编码的目的基因序列分子模拟IL-2/IFN-γ融合蛋白的空间结构,检测质粒体外转染细胞表达目的基因产物及其生物活性;体内实验采用提高质粒转染效率的在体电脉冲(EP)技术免疫健康BALB/c小鼠,分别以ELISA及免疫酶联斑点(ELISPOT)方法检测小鼠血清抗HBs及脾脏HBsAg特异性分泌IFN-γ的淋巴细胞应答水平。结果pFP能够以融合蛋白的形式正确表达IL-2和IFN-γ,其活性域保持相对独立,其分子模拟的结果得到了质粒体外细胞转染检定实验的证实。EP介导的HBV DNA免疫反应中,pS2.S+pFP组血清抗-HBs[(51.2±50.5)mIU/mL,89%]及HBsAg特异性分泌IFN-γ的淋巴细胞应答[(207±103)IFN-rT细胞SFCs/3×105脾细胞,78%]水平和阳性率均显著高于pS2.S+pcDNA3.1组[抗-HBs:(14.8±7.6)mIU/mL,64%;IFN-γT细胞:(84±70)SFCs/3×105脾细胞,28%](P<0.05)。结论实验结果提示Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ的融合蛋白基因表达质粒可提高HBV DNA疫苗的免疫效果,并促进初始T细胞向Th1方向分化。

补肾清毒方对HBV转基因小鼠HBV-DNA、IFN-γ、IL-17A的影响

目的观察补肾清毒方对HBV转基因小鼠外周血乙肝病毒DNA(HBV-DNA)、干扰素-γ(IFN-γ)及白介素-17A(IL-17A)的影响。方法将50只HBV转基因小鼠随机分为模型组,补肾清毒方高、中、低剂量组,拉米夫定组,另取10只非HBV转基因小鼠为正常对照组。采用荧光定量PCR方法检测药物干预前后小鼠外周血HBV-DNA水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测药物干预前后小鼠血清IL-17A及IFN-γ的水平。结果与正常对照组比较,模型组IL-17A显著升高(P<0.01),IFN-γ也明显升高(P<0.05)。与模型组比较,各药物干预组小鼠血清IL-17A水平不同程度降低(P<0.01),其中以补肾清毒方高剂量组和中剂量组降幅最为明显(P<0.01),并且随用药时间的延长IL-17A水平进一步降低;各药物干预组血清IFN-γ水平升高(P<0.05),其中以补肾清毒方高、中剂量组升高最为显著(P<0.01),且随用药时间延长有所提高。与模型组比较,各药物干预组小鼠外周血HBV-DNA变化不大(P>0.05)。结论补肾清毒方对乙肝有一定的治疗作用,其作用机理可能与升高IFN-γ水平、降低IL-17A表达有关。

慢性乙型肝炎患者血清HBeAg模式与HBV-DNA负荷的相关性

近年来,随着定量PCR法和酶联免疫技术的建立,使定量观察乙型肝炎(乙肝)患者血清中HBV-DNA水平和乙肝病毒血清标志物(HBV-M)成为可能.为探讨慢性乙肝患者血清HBV-DNA负荷(单位体积血清内HBV-DNA颗粒数)与其血清HBeAg模式的相关性,我们于2002～2003年采用上述两种方法,进行了如下研究.

乙型肝炎病毒前S1抗原、HBV-DNA含量与HBeAg的相关性分析

目的分析乙型肝炎病毒前S1抗原、HBV-DNA含量与HBeAg在反映乙肝病毒复制方面的相关性。方法收集HBsAg阳性的血清标本524例,使用ELISA法检测HBV-M(包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb及前S1抗原)。采用核酸扩增荧光定量(FQ-PCR)检测HBV-DNA。结果HBeAg、前S1抗原及HBV-DNA的阳性率依次是30.5%、54.6%、75.2%,HBeAg阳性率最低,HBV-DNA阳性率最高。结论在反应病毒复制水平上,乙型肝炎病毒前S1抗原、HBeAg与HBV-DNA有一定的相关性,但其检出率并不一致,临床应正确认识三者的检测价值及临床意义,合理选择检测项目。

乙肝五项定性与HBV-DNA结果相关探讨

目的:探讨ELISA检测乙肝病毒血清标志物与荧光定量PCR检测HBV-DNA结果的相关性。方法:采用ELISA方法检测285例患者乙肝病毒血清标志物(HBV-M),同时用荧光定量PCR检测其HBV-DNA含量。结果:139例HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)患者中有124例患者阳性(血清HBV-DNA含量≥103copy/ml为阳性),阳性率为89.2%;92例HBsAg(+)、HBeAb(+)、抗-HBc(+)患者中有43例阳性,阳性率为46.7%;27例HBsAg(+)、抗-HBc(+)患者中有10例性,阳性率为37%;10例HBsAg(+)、HBeAg(+)患者中有9例阳性,阳性率为90%;11例HBsAg(+)、HBeAg(±)、抗-HBc(+)患者中有9例阳性,阳性率81.8%,6例单独HBsAg(+)患者中有0例阳性,阳性率为0。结论:所有分组中HBeAg(+)组病毒复制水平最高,其与HBV-DNA含量密切相关;抗-HBe(+)、抗-HBc(+)患者乙肝病毒复制并非完全停止,只是其复制水平明显降低,荧光定量PCR检测HBV-DNA含量可表达HBV感染和病毒复制水平。

考虑病毒DNA核衣壳和细胞间传播的一般HBV扩散模型

该文综合考虑了诱发HBV感染的两类途径、一般发生率函数和HBV病毒及其核衣壳的扩散效应,建立了一般性的HBV扩散模型.证明了模型解的适定性,两类平衡态的存在唯一性和模型的一致持久性,然后通过构造Lyapunov函数,得出模型的阈值动力学行为.最后结合数值模拟验证理论结果的同时,揭示了扩散对各状态变量的影响,结果显示:扩散影响HBV感染,且扩散系数越大,HBV感染的空间区域越大.

孕妇HBV-DNA定量与母婴垂直传播的临床观察

目的:探讨HBV-DNA定量与孕妇母婴阻断后的HBV宫内感染的临床观察。方法:将286例HBs Ag阳性孕妇分为研究组143例,其中乙肝大三阳46例,乙肝小三阳45例,HBs Ag阳性者52例,HBV-DNA定量均高于正常值或几倍不等;对照组143例,其中乙肝大三阳47例,乙肝小三阳50例,HBs Ag阳性者46例,HBV-DNA定量均在正常范围内。两组均于孕28、32、36周分别肌注HBIG 200 IU,采用酶联免疫吸附试验检测两组新生儿的五项指标。结果:研究组、对照组新生儿脐血检测结果 HBs Ag阳性率分别为34.2%、11.2%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);两组大三阳性率分别为10.9%、12.8%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HBV-DNA含量均在正常范围内,HBIG能够有效阻断HBs Ag阳性和乙肝小三阳的母婴传播,但不能阻断乙肝大三阳和HBV-DNA定量异常的乙肝小三阳和HBs Ag阳性患者的母婴传播。

考虑病毒DNA核衣壳和细胞-细胞感染的HBV感染模型的阈值动力学研究

为研究HBV DNA核衣壳和“细胞-细胞”感染对HBV感染过程的影响,建立了一类具有病毒DNA核衣壳和细胞-细胞感染的HBV感染模型,给出模型的基本再生数,并使用Routh-Hurwitz判据和Lyapunov稳定性理论得到基本再生数的阈值动力学性质.即如果基本再生数小于1,则无病毒感染平衡点是全局渐近稳定的;如果基本再生数大于1,则病毒感染平衡态是全局渐近稳定的.结合Matlab数值模拟验证了模型的理论结果,并揭示细胞-细胞感染将低估HBV感染过程中感染细胞和病毒载量的最终水平.

肝癌组织TGF-β1异常表达与HBV复制的病理学关系分析

目的分析转化生长因子(TGF)-β1在人肝细胞性肝癌(HCC)及非癌组织中的表达,并探讨其与肿瘤发生、发展及预后的关系。方法采用免疫组织化学方法,分别检测30例HCC癌灶组及其自身对照的非癌组TGF-β1的表达,并以生物素标记的HBV-DNA探针检测肝癌组织中HBV-DNA,并分析TGF-β1表达与HBV复制及其临床病理学特征的关系。结果无论是原发性肝癌还是转移性肝癌,TGF-β1均呈较高表达,且组间未见显著差异;TGF-β1在肝癌癌灶及非癌组表达存在显著差别,其阳性率分别为83.3%和43.3%,肝癌组明显高于非癌组(P<0.01)。HCC的癌灶组中TGF-β1阳性表达与肿瘤分化程度显著相关(P<0.05);而与肿瘤直径、数目无关(P>0.05);HBV-DNA阳性肝癌组织中TGF-β1表达显著高于HBVDNA阴性组。结论TGF-β1在肝细胞性肝癌中过度表达,且与HCC的分化程度有关,可作为肝癌早期诊断及预后判断的标志。

恩替卡韦和干扰素序贯作用对HepG2.2.15细胞HBV DNA复制的影响

目的探讨恩替卡韦(Entecavir,ETV)与干扰素(IFNα-2b)序贯作用对Hep G2.2.15细胞HBV DNA复制的影响。方法将培养Hep G2.2.15细胞分组,单独组中分别加入不同浓度ETV的配制液(1.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml)或IFNα-2b配制液(5 000 IU/ml、10 000 IU/ml、15 000 IU/ml);联合组中联合加入ETV和IFNα-2b配制液;序贯组中先后加入ETV和IFNα-2b序贯配制液。在不同时点,采用MTT法检测Hep G2.2.15细胞增殖情况,采用实时荧光定量法检测各组细胞培养上清液中HBV DNA水平,酶联免疫法(ELISA)检测上清液中HBs Ag与HBe Ag水平。结果随着时间延长,序贯组对Hep G2.2.15的HBV DNA复制抑制作用明显大于其他两组(P<0.05);对HBs Ag与HBe Ag的抑制作用随时间的延长而加强(P<0.05)。结论 ETV与IFNα-2b序贯作用于Hep G2.2.15细胞,对Hep G2.2.15细胞HBV DNA复制有明显的抑制作用,且作用强于单独或联合使用。