HBV DNA与preS1抗原均阳性患者HBeAg阴性的原因探讨

目的探讨导致HBVDNA阳性、preS1抗原阳性标本ELISA检测HBeAg阴性的原因。方法筛选76例HBeAg阴性而preS1及HBVDNA阳性的血清分别进行(1)血清1∶100稀释后重新用ELISA测定HBeAg;(2)用单克隆抗-HBe固相ELISA检测血清HBeAg/IC;(3)用寡核苷酸探针斑点杂交法测定HBV前C区的基因突变。结果76份血清稀释后重测5例HBeAg阳性;38例HBeAg/IC阳性;24例HBV前C区存在基因突变。结论后带效应、HBeAg/IC、前C区基因突变是HBVDNA阳性血清HBeAg阴性的主要原因;HBVDNA阳性、HBeAg阴性标本多为野生型毒株感染,只是由于形成了HBeAg/IC使常规ELISA检测不出HBeAg。

100例HBV血清标志物、HBV-DNA、HBVpreS_1-Ag对比监测与临床分析

探讨临床监测HBVpreS1-Ag对乙肝患者诊断和预后的意义。对 10 0例乙型病毒性肝炎患者HBV血清标志物、HBV -DNA及preS1-Ag进行定量、定性跟踪监测并加以临床分析。 10 0例患者中HBsAg阳性者 91例 ,preS1-Ag阳性者 5 7例 ,HBeAg阳性者 4 3例 ,HBV -DNA阳性者 5 6例 ,preS1-Ag阳性率与HBV -DNA相似且略高于HBeAg。preS1-Ag比HBeAg更为精确地反映了HBV在人体内感染和复制的情况 ,动态监测

PreS1抗原与HBeAg联合检测用于预测HBV-DNA的水平

目的:联合检测慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者的血清前S1(PreS1)抗原和乙肝e抗原(HBeAg)两项指标,判断其与HBV-DNA定量的相互关系。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附分析(ELISA)法(两步法)检测PreS1抗原,双抗体夹心ELISA法(一步法)检测HBeAg,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测HBV-DNA。结果:在335例慢性HBV携带者患者中,PreS1抗原阳性率为42.7%,HBeAg阳性率为36.4%,HBV-DNA阳性率为53.4%。在179例HBV-DNA阳性患者中,HBeAg阳性109例(60.9%);156例HBV-DNA阴性患者中,HBeAg阴性143例(91.7%)。在179例HBV-DNA阳性患者中,PreS1抗原阳性89例(49.7%);在156例HBV-DNA阴性患者中,PreS1抗原阴性102例(65.4%)。PreS1和HBeAg双阳性的感染者HBV-DNA阳性率为93.8%(45/48);在PreS1和HBeAg双阴性的感染者中,HBV-DNA阳性率仅为22.0%(26/118)。结论:HBeAg与HBV-DNA的相关性比PreS1抗原与HBV-DNA的相关性高。PreS1和HBeAg双阳性的感染者HBV的复制程度高,而双阴性的感染者复制程度较低。因此,PreS1抗原与HBeAg联合检测可用于预测HBV-DNA的水平。

可捕获HBV的preS1单克隆抗体的制备及性质初探

用天然乙型肝炎病毒（HBV）颗粒（Dane颗粒和管状颗粒）和HBV前S1（preS1）区基因工程重组蛋白GST-preS1联合免疫Balb/c小鼠，经杂交瘤技术制备了7株单克隆抗体（mAb），采用ELISA、免疫捕获PCR等方式鉴定其有关特性.各株mAb分别为IgG1和IgG2a，轻链均为κ型.腹水mAb的滴度为1×10^7-1×10^9.用间接法ELISA显示，所有7株preS1 mAb均可以识别HBV天然抗原，其中mAb 4D11与HBV天然抗原的结合能力最强.通过竞争抑制法ELISA检测推断preS1（21-47）上至少含有两个B细胞表位，mAb 4D11、1G5、7B6和7H11具有共同的B细胞抗原识别位点；mAb 3H5、6F1和2A6识别另外一个位点.本研究获得的可与HBV天然抗原结合的preS1单抗为HBV preS1检测试剂的研制提供了重要工具，对HBV preS1具有中和免疫活性抗原的设计及相关研究有重要帮助.

荧光定量PCR检测HBV DNA与血清HBV标志物和preS1相互关系研究

目的探讨荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA与HBV血清免疫学标志(HBVM)模式,preS1之间的相互关系及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测801例血清的HBVDNA,用ELISA方法对其免疫学标志,preS1同时进行检测。结果HBVDNA的总检出率为67·0%,preS1的总检出率为74·9%。其中,在模式HBsAg(+),HBeAg(+),HBcAb(+)中血清HBVDNA含量明显高于HBsAg(+),HBeAb(+),HcAb(+)及HBsAg(+),HBcAb(+)组。在HBsAg(-)模式中HBVDNA亦有检出。在HBsAg(+),HBeAb(+),HcAb(+)组,HBVDNA的检出率为55·8%,而preS1的检出率为69·8%,两者有显著差异(P<0·01),其余HBVM模式,无显著差异(P>0·05)。结论HBVM和preS1提供了HBV感染的间接证据,荧光定量PCR法检测HBVDNA准确灵敏,是HBV感染及复制的直接证据,HBVM,preS1和HBVDNA的检测各有其独特的临床检测意义,在乙型肝炎的诊断治疗中均具有重要的临床指导价值。

不同HBV基因型慢性乙型肝炎患者的血清HBV DNA、PreS1、HBeAg检测结果分析

目的调查安徽安庆地区慢性乙型病毒性肝炎患者所感染的乙型肝炎病毒(HBV)的基因型构成,并探讨不同HBV基因型患者的血清HBV DNA、PreS1、HBeAg检测结果及临床价值,为乙型病毒性肝炎患者的个体化医疗提供依据。方法选取慢性乙肝患者共226例,采用巢式PCR技术对其进行基因分型检测,采用实时荧光定量聚合酶链反应法(RT PCR)检测患者血清HBV DNA,用酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测血清PreSl抗原与HBeAg。结果在调查的乙型病毒性肝炎患者中,以B基因型(占58.0%)与C基因型(占41.1%)HBV感染为主。B基因型患者血液中HBV DNA阳性率(57.2%)与C型患者(63.4%)没有统计学差异;B基因型患者血液中PreS1抗原阳性率(48.1%)与C型患者(48.4%)也没有明显差异;C基因型HBV感染的患者血液HBeAg阳性率(46.2%)高于B基因型患者(32.1%)。结论安徽安庆地区在慢性乙肝的卫生防治策略上,应重点关注B、C型基因型HBV感染的防治。而C基因型HBV感染患者具有高HBeAg阳性率,应采取更积极、有效干预措施。

HBsAg阴性preS1Ag阳性的HBV携带者血清学标志物及其HBVDNA动态观察

目的探讨HBsAg(-)/HBeAg(+)/HBcAb(+)/preS1Ag(+)少见血清学模式形成的原因,了解该少见模式乙肝病毒携带者体内血清学标志物及其HBVDNA变化情况。方法采用ELISA、电化学发光免疫分析法(ECLIA)、巢式PCR和实时荧光定量PCR,对该少见模式乙肝病毒携带者HBV血清学标志物和HBVDNA进行检测,每隔3个月复查一次,持续15个月。结果在研究的时间内,国产ELISA试剂盒检测结果均为HBsAg(-)/HBeAg(+)/HBcAb(+)/preS1Ag(+);电化学发光免疫分析法检测HBsAg均为阳性,并随时间延续HBsAg水平逐渐下降;巢式PCR与实时荧光定量PCR检测HBVDNA为阳性,病毒载量上下波动。结论该乙肝病毒携带者血清学少见模式HBsAg为假阴性,动态观察HBsAg与HBVDNA水平,了解HBV复制情况,可为临床诊治提供可靠的依据。

四川地区HBsAg阳性孕妇HBV血清免疫模式与PreS1-Ag、HBV DNA相关性分析

目的探讨四川地区HBsAg阳性孕妇HBV血清免疫模式与PreS1-Ag、HBV DNA之间的相关性。方法分别用时间分辨免疫荧光法、ELISA法对512例HBsAg阳性孕妇的血清进行HBV血清免疫模式、PreS1-Ag检测,同时采用实时荧光定量PCR检测HBV DNA。结果 512例标本中:A组(HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性)有178例,其血清中HBV DNA、PreS1-Ag阳性率分别为98.31%、96.62%;B组(HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性)有255例,其血清中HBV DNA、PreS1-Ag阳性率分别为41.17%、37.25%;C组(HBsAg、HBcAb阳性)有68例,其血清中HBV DNA、PreS1-Ag阳性率分别为35.29%、29.41%;D组(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb阳性)有8例,其血清中HBV DNA、PreS1-Ag阳性率分别为87.50%、75.0%;E组(HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性)3例,其血清中HBV DNA、PreS1-Ag阳性率分别为66.67%、66.67%。结论 HBV DNA、PreS1-Ag符合率较高,联合检测HBV血清免疫模式、HBV DNA、PreS1-Ag,能更正确反映乙型肝炎病毒的复制状态和活跃程度。

338例慢肝患者HBV PreS1-Ag、PreS2-Ag及PreS2-Ab与其血清标志物的相关性研究

目的探讨HBV感染者血清中PreS1-Ag、PreS2-Ag、PreS2-Ab与HBVM(HBsAg、HBeAg、HBaAb、HBcAb检测编号分别为1、3、4、5)三种主要模式(135阳性、145阳性、15阳性)之间的相关性。方法采用ELISA法同时检测338例HBV感染者血清中PreS1-Ag、PreS2-Ag、PreS2-Ab,并以20例两对半全阴性的健康体检者血清作为对照,对其结果进行分析。结果HBVPreS1-Ag、PreS2-Ag在135阳性组中检出率为94.7％,81.6％;在145阳性组中检出率为69.3％,57.7％;在15阳性组中检出率为69.6％,57.1％。二者在338例HBsAg阳性标本中总检出率为75.1％,59.8％,明显高于HBeAg的阳性率22.5％。PreS2-Ab在三种模式中的检出率均较低,但在145阳性组中检出率明显高于135和15阳性组。20例HBVM全阴模式的标本中均未检出阳性结果。结论HBVPreS1-Ag、PreS2-Ag在HBV感染者的血清中均具有较高的检出率,可作为HBV感染和复制的敏感指标,且优于HBeAg。HBsAg阳性的三组模式中PreS2-Ab的检出率均较低,结果表明:HBsAg阳性慢肝患者体内绝大部分均存在病毒复制的倾向,如将三者与两对半联合检测,对全面判断HBV感染的病毒复制、疗效观察及判断预后具有一定的指导意义,对无条件开展HBV-DNA测定的实验室可推广使用。

乙型肝炎PreS1抗原、HBV DNA、HBeAg的相关性分析及临床应用

目的分析乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒PreS1抗原、HBV DNA和HBeAg的临床意义。方法采用双抗体夹心法检测前S1蛋白,采用荧光PCR法检测HBV DNA,采用ELISA法检测HBeAg。结果在1258例乙型肝炎患者中PreS1抗原阳性率为26.39%,HBV DNA阳性率为83.39%;在1049例血清HBV DNA阳性患者中,PreS1抗原阳性299例(23.94%),HBeAg阳性447例(42.61%);在PreS1抗原阳性患者中,HBV DNA阳性率为92.57%(299/332)。结论本组资料显示,PreS1抗原的检测无更多的临床意义。

乙肝preS_1抗原与HBV-DNA拷贝数的对比研究

目的进一步探讨乙肝preS1抗原与HBV-DNA的关系及临床意义.方法乙肝preS1抗原采用双抗体夹心ELISA法检测,HBV-DNA采用荧光定量PCR法检测.结果 110例急、慢性乙型肝炎及携带者preS1抗原阳性63例,HBV-DNA≥103(拷贝数/m1)有62例.其中DNA≥103中,preS1抗原阳性55例(P＜0.01);59例HBeAg阳性中48例preS1抗原阳性(P＜0.01).结论乙肝preS1抗原与HBV-DNA的复制密切相关,它可作为乙肝早期诊断、疗效评估等的新指标.

乙型肝炎病毒标志物与PreS_1Ag及HBV-DNA的关系

目的:探讨乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)与PreS_1Ag及HBV-DNA之间的关系。方法:对339份乙型肝炎病毒携带者血清同时检测HBV-M、PreS_1Ag及HBV-DNA,并分析三者之间的关系。结果:PreS_1Ag与HBV-DNA的阳性率在HBeAg(+)模式中最高,与HBeAg(-)模式比较有显著性差异,PreS_1Ag与HBV-DNA检测交叉结果表明,二者之间有密切关系。结论:HBeAg、PreS_1Ag、HBV-DNA都是乙型肝炎病毒复制的重要指标,三者之间有密切关系。

HBV标记物、HBV-DNA和preS1-Ag检测的相关性分析与临床意义

目的:探讨HBV感染者血清中HBV标记物、HBV-DNA和pre S1-Ag的相关性及其临床意义,以及pre S1-Ag在临床诊断上的价值。方法:择取142例肝病患者和20例健康人,采用ELISA和PCR方法分别检测HBV标记物、pre S1-Ag和HBVDNA。结果:142例肝病患者pre S1-Ag和HBV-DNA检出率分别为46.5%和49.3%,差异无统计学意义(χ2=1.13,P>0.05),其阴/阳性符合率为94.5%,具有极显著联系(χ2=112.13,P<0.05)。pre S1-Ag的检出率在肝硬化患者中最高(63.2%),其次是急性乙肝患者(50.9%),慢性迁延型肝炎患者最低(29.4%),其中有肝硬化和慢性迁延型肝炎患者的检出率差异有统计学意义(χ2=8.74,P<0.05);此外急性肝炎与慢性迁延型肝炎患者的检出率差异有统计学意义(χ2=4.15,P<0.05);但急性肝炎与肝硬化患者的检出率差异无统计学意义(χ2=0.89,P>0.05)。结论:pre S1-Ag可作为HBV复制的重要指标,pre S1-Ag与HBV-DNA具有较好的相关性,但两者之间差异无统计学意义。动态监测pre S1-Ag的变化对临床判断乙肝治疗效果有重要价值。

PreS1与HBV血清学标志物的关系

目的探讨乙肝患者血清学标志物和PreS1之间的相关性。方法采用全自动酶免疫分析系统检测乙肝血清学标志物和PreS1,并进行比较分析。结果HBeAg阳性患者比HBeAg阴性患者PreS1阳性率极显著增高(P<0.001,χ2=121.118);HBeAg阳性的两组患者间PreS1阳性率无统计学差异(P=0.118,χ2=2.438);HBeAg阴性的两组患者间PreS1阳性率无统计学差异(P=0.725,χ2=0.124)。结论乙肝患者PreS1表达与HBeAg表达有很好的相关性,因PreS1操作简易,适合在基层医院开展。

慢乙肝治疗性疫苗IFN-γ-preS1表位分析及卡介苗重组穿梭质粒pMV261构建

目的运用生物信息学方法分析预测乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)的前S1(preS1)蛋白和重组IFN-γ-preS1蛋白的T、B细胞优势表位,构建卡介苗(Bacille calmette-guérin,BCG)重组pMV261穿梭质粒。方法NCBI数据库中获取γ干扰素(Interferonγ,IFN-γ)和preS1的氨基酸序列,应用I-TASSER构建三级结构并对重组蛋白进行免疫模拟。利用SnapGene软件将重组IFN-γ-preS1蛋白全长基因插入大肠埃希菌-BCG穿梭质粒pMV261中,构建BCG重组pMV261。结果preS1蛋白与重组IFN-γ-preS1蛋白分别由118和299个氨基酸组成。IFN-γ蛋白与特异性抗原preS1蛋白进行融合后,preS1蛋白的亲水性、稳定性均未发生改变,其二级结构和三级结构亦能正常表达。preS1蛋白经重组后,其B细胞抗原表位由preS1蛋白的4~18位、25~40位和41~59位氨基酸分别变为重组IFN-γ-preS1蛋白的185~199位、207~221和222~242位氨基酸,其余未发生改变;其Th细胞抗原表位、细胞毒性T(CTL)细胞抗原表位与重组IFN-γ-preS1蛋白的Th细胞抗原表位、CTL细胞抗原表位相比,仅位置改变,其余未发生改变。琼脂糖凝胶电泳模拟结果显示,重组IFN-γ-preS1蛋白大小为897 bp,空载质粒大小为4488 bp,构建的BCG重组pMV261穿梭质粒大小为5359 bp。免疫模拟结果表明,该重组疫苗可激活细胞免疫和体液免疫。结论BCG重组pMV261穿梭质粒的构建,为进一步研究慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)的BCG治疗性疫苗奠定了理论基础。

乙肝患者血清HBVPreS1-Ag、HBV-DNA、HBeAg之间的相关性分析及临床意义

目的分析乙肝患者血清HBVPreS1-Ag、HBV-DNA、HBeAg之间的相关性及临床意义。方法60例慢性乙肝患者均为HBsAg阳性，用全自动酶免仪检测HBVPreS1-Ag及HBeAg，用PCR法检测HBV-DNA。结果60例HBsAg阳性慢性乙肝患者中，HBVPreS1-Ag的检出率为58．3％，HBV-DNA的检出率为61．6％，HBeAg的检出率为35．0％。HBVPreS1-Ag的检出率明显高于HBeAg的检出率，它们之间的差异有统计学意义（P〈0.05）；HBV-DNA的检出率亦明显高于HBeAg的检出率，它们之间的差异有统计学意义（P〈0.05）；HBVPreS1-Ag和HBV-DNA的检出率相似，它们之间的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论HBVPreS1-Ag和HBV-DNA在乙肝患者血清中有相似的检出率，较HBeAg更加能反映乙肝患者血液中HBV的复制情况。

216例乙肝患者HBeAg、HBVDNA、PreS1-Ag相关性的临床分析

目的探讨HBeAg、HBV DNA、PreS1-Ag对乙肝患者的临床意义。方法对216例乙型病毒性肝炎患者HBeAg、HBV DNA、PreS1-Ag进行监测并加以临床分析。结果 PreS1-Ag、HBeAg与HBV DNA的阳性率分别为59.3%、42.6%、55.6%。PreS1-Ag阳性率高于HBeAg阳性率,PreS1-Ag、HBV DNA的阳性率两者经卡方检验比较差异无显著性。结论 PreS1-Ag是一个很好的反映HBV复制的指标。

HBV感染者血清HBV PreS1抗原检测与病毒复制的关系

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)PreS1抗原与HBV复制的关系。方法采用ELISA法检测HBV血清标志物和HBVPreS1抗原;采用荧光定量PCR方法检测HBV-DNA,对检测结果作分析。结果HBVPreS1抗原和HBV-DNA在HBeAg阳性标本组中的检出率明显高于其在HBeAg阴性标本组中的检出率(P<0.01);HBVPreS1抗原和HBV-DNA有较高相关性(P<0.01)。结论HBVPreS1抗原与具有病毒活动性复制意义的指标(HBeAg和HBV-DNA)有良好的相关性HBVPreS1抗原的检测结果可以较好地反映HBV的复制情况。

HBV感染血清学标志物少见模式病人血清中PreS1抗原的检测及分析

目的 检测HBsAg阳性的血清学少见模式PreS1抗原 ,观察各少见模式PreS1抗原检出情况 ,探讨各少见模式PreS1抗原与HBeAg和HBV -DNA的相关性。 方法 采用ELISA和荧光定量PCR等方法分别对 6种HBsAg阳性的血清学少见模式PreS1抗原及HBV -DNA进行检测。 结果 6种HBsAg阳性的血清学少见模式PreS1抗原检出率不同 ,HBeAg阳性的少见模式PreS1抗原检出率较高 ,阳性率介于 83 .3 %～ 90 .0 % ;而HBeAg阴性的少见模式PreS1抗原检出率较低 ,阳性率介于 2 1.4%～ 5 0 .0 %。各少见模式PreS1抗原检出率与HBeAg及HBV -DNA有较好的相关性。 结论 HBsAg阳性的血清学少见模式PreS1抗原检出率与HBeAg存在与否密切相关 ,PreS1抗原阳性提示少见模式血清存在HBV感染或活动性复制。