聚乙二醇干扰素α-2b对慢性乙型肝炎患者血清标志物HBsAg、HBV-pgRNA、HBV-RNA的影响

目的观察聚乙二醇干扰素α-2b(Peg-IFNα-2b)对慢性乙型肝炎(CHB)患者血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)表达水平的影响,并探究其与新型血清标志物乙型肝炎病毒前基因组(HBV-pgRNA)、HBV-RNA的关系。方法收集该院2018年2月至2021年12月初次确诊的36例接受Peg-IFNα-2b治疗6个月的CHB患者血清;使用化学发光法HBsAg测定试剂盒检测血清HBsAg水平;聚合酶链式反应(PCR)荧光探针法检测血清HBV-DNA、HBV-pgRNA、HBV-RNA水平;使用Pearson相关性分析HBV-pgRNA、HBV-RNA与HBsAg之间的相关性。结果与治疗前相比,治疗后CHB患者血清HBsAg、HBV-DNA发生明显降低,HBV-pgRNA、HBV-RNA也明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前血清HBV-pgRNA、HBV-RNA均与HBsAg呈显著的正相关(r=0.751、0.702,均P<0.05);治疗后血清HBV-pgRNA、HBV-RNA与HBsAg也呈正相关(r=0.420、0.625,均P<0.05)。与治疗前相比,治疗后HBV-pgRNA、HBV-RNA与HBsAg的相关系数均明显的降低。结论Peg-IFNα-2b可抑制CHB患者血清HBV-HBsAg,且HBV-pgRNA、HBV-RNA与HBV-HBsAg表达水平呈正相关。

慢性乙型肝炎患者血清HBsAg与单个核细胞乙型肝炎病毒RNA水平对聚乙二醇干扰素治疗效果的预测价值

目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血清HBsAg、乙型肝炎病毒(HBV)DNA与血清HBV RNA及单个核细胞(PBMC)HBV RNA的关系。方法50例慢性乙型肝炎患者,给予Peg-IFNα-2b 180μg皮下注射,每周一次,分别在初始治疗、24周和48周,检测患者血清HBV五项、肝功能、HBV DNA、HBV RNA及PBMC中HBV RNA的变化。结果患者三个时间段的生化指标ALT、AST、TBIL、AKP及GGT比较差异无统计学意义(P>0.05);免疫学标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb差异有统计学意义(P<0.05);血清HBV DNA及HBV RNA与PBMC HBV RNA差异有显著统计学意义(P<0.001)。结论Peg-IFNα-2b抗病毒治疗各时间段,肝功能转氨酶无显著变化;治疗24周,血HBsAg、HBV DNA与HBV RNA及PBMC HBV RNA快速下降,有显著相关性;治疗48周,血清HBsAg、HBV DNA与HBV RNA及PBMC HBV RNA相关性减弱。因此,24周HBV RNA下降幅度优于48周,更能预测临床治愈。

ALT水平正常的慢性乙型肝炎患者的血清学特征及肝组织病理学分析

目的分析ALT水平正常的慢性乙型肝炎(CHB)患者的肝组织病理学特点及与血清学指标间的关系。方法收集2018年4月—2021年6月无锡市第五人民医院137例ALT水平正常CHB患者的临床资料,分析肝组织病理与血清学指标间的差异及相关性。计数资料组间比较采用χ^(2)检验。采用Speraman秩相关进行相关性分析。采用Logistic回归进行多因素分析。结果ALT水平<20 U/L、20~29 U/L、30~40 U/L患者中分别有57.4%、53.4%、75%具有显著炎症坏死(≥G2),63.8%、62.1%、75%具有显著纤维化(≥S2)。HBeAg阳性/阴性、不同水平的血清HBV DNA、不同水平的血清HBV RNA在炎症活动程度分级上差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为10.008、6.911、7.946,P值均<0.05);HBeAg阳性/阴性、不同水平的血清HBV RNA在纤维化分期上差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为7.996、10.874,P值均<0.05)。肝脏炎症程度及纤维化分期与血清HBV DNA无明显相关性(r_(s)=0.024,P=0.785;r_(s)=0.039,P=0.652),与血清HBV RNA存在显著相关性(r_(s)=0.222,P=0.009;r_(s)=0.187,P=0.029)。多因素分析提示HBeAg阳性是CHB患者肝脏发生炎症坏死(OR=−0.302,95%CI:−1.160~0.386,P=0.002)及纤维化(OR=−0.387,95%CI:−1.160~0.386,P=0.011)的独立危险因素。结论ALT水平正常的CHB患者的肝脏组织存在不同程度的显著炎症坏死及纤维化,HBeAg阳性是这类患者肝脏组织出现显著炎症坏死及纤维化的独立危险因素。

妊娠合并慢性乙型肝炎血清HBV pgRNA、PreS1抗原表达与肝内胆汁淤积症的相关性分析

目的 探究妊娠合并慢性乙型肝炎病人血清乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(HBV pgRNA)、前S1抗原(PreS1Ag)水平变化及与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发生的相关性。方法 选取2017年6月至2020年6月在雅安市人民医院进行孕期检查的慢性乙型肝炎孕妇279例作为研究对象,根据入组病人是否患有ICP分为合并ICP组43例、未合并ICP组236例。比较两组病人血清中HBV pgRNA、PreS1 Ag水平,并分析两组血清HBV pgRNA、PreS1 Ag表达与HBV DNA表达水平相关性;比较两组病人妊娠结局,并分析合并ICP组病人血清HBV pgRNA表达水平及PreS1 Ag阳性表达率与妊娠结局的关系。受试者操作特征(ROC)曲线分析血清HBV pgRNA、PreS1 Ag光密度[D(λ)]值诊断慢性乙型肝炎孕妇合并ICP的效能。结果 合并ICP组慢性乙型肝炎病人血清HBV表面抗原(HbsAg)水平[(3.71±0.92)log IU/mL]、HBV e抗原(HbeAg)阳性率[65.12%(28/43)]、HBV DNA含量[(8.03±1.69)log copies/mL]、天冬氨酸转氨酶(AST)[(79.68±15.73)U/L]、丙氨酸转氨酶(ALT)[(72.08±16.95)U/L]、PreS1 Ag阳性表达率[88.37%(38/43)]、PreS1 Ag D(λ)值水平(1.24±0.25)及HBV pgRNA表达水平[(5.17±1.25)log copies/mL]明显高于未合并ICP组[(2.26±0.74)log IU/mL、24.15%(57/236)、(5.19±1.07)logcopies/mL、(23.01±12.47)U/L、(21.76±10.51)U/L、67.80%(160/236)、(0.92±0.23)、(3.02±0.98)logcopies/mL](P<0.05)。血清HBV pgRNA诊断慢性乙型肝炎孕妇合并ICP的曲线下面积(AUC)为0.89,灵敏度为81.40%,特异度为80.50%。PreS1 Ag D(λ)值诊断慢性乙型肝炎孕妇合并ICP的AUC为0.83,灵敏度为76.70%,特异度为79.20%。二者联合诊断的AUC为0.91,灵敏度为93.00%,特异度为78.40%。合并ICP组、未合并ICP组血清PreS1 Ag阳性的慢性乙型肝炎病人血清HBV DNA、HBV pgRNA表达水平均明显高于PreS1 Ag阴性表达病人(P<0.05)。合并ICP组、未合并ICP组血清HBV pgRNA、PreS1 Ag D(λ)值均与HBV DNA表达水平呈正相关(P<0.05)。合并ICP组产后出血、早产的发生率明显高于未合并ICP组(P<0.05)。发生不良妊娠结局的慢性乙型肝炎合并ICP病人血清PreS1 Ag阳性表达率、PreS1 Ag D(λ)值、HBV pgRNA表达水平均明显高于未发生不良妊娠结局病人(P<0.05)。结论 合并ICP的慢性乙型肝炎病人血清HBV pgRNA表达水平、PreS1 Ag阳性表达率及D(λ)值水平均明显升高,对ICP有一定诊断价值,且两者水平变化均与HBV DNA含量有关,并可能预示病人不良妊娠结局的发生。

HBV pgRNA联合HBcrAg对慢性乙型肝炎患者停药后复发的预测价值

目的分析乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)前基因组RNA(pregenomic RNA,pgRNA)水平联合HBV核心相关抗原(hepatitis B virus core-related antigen,HBcrAg)定量对慢性乙型肝炎(chronic viral hepatitis B,CHB)患者停药后复发风险的预测价值。方法选取中国人民解放军联勤保障部队第926医院2020年6月至2021年6月收治的113例CHB患者为研究对象,所有患者均已给予足疗程的正规抗病毒治疗,停药前均检测批pgRNA与HBcrAg。根据患者停药1年内复发情况分为复发组(38例)和未复发组(70例),比较两组患者的一般资料、肝功能、肾功能、甲胎蛋白(alphafetoprotein,AFP)、pgRNA及HBcAg水平等指标。应用多因素Logistic回归分析CHB患者停药后复发的影响因素。应用受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线分析pgRNA联合HBcrAg对CHB患者停药后复发风险的预测价值。结果复发组患者饮酒史比例[47.37%(18/38)比22.86%(16/70)]、AFP[(29.64±7.18)μg/L比(20.38±6.46)μg/L]、pgRNA[(7.97±1.99)lg拷贝/ml比(4.97±1.24)lg拷贝/ml]和HBcrAg[(7.04±1.76)lg IU/ml比(5.11±1.28)lg IU/ml]水平均显著高于未复发组(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析表明,饮酒史(OR=5.354,95%CI:1.055~68.858,P=0.046)、AFP(OR=1.189,95%CI:1.036~1.468,P=0.015)、pgRNA(OR=1.047,95%CI:1.117~8.109,P=0.007)和HBcrAg(OR=2.152,95%CI:1.154~4.308,P=0.021)是CHB患者停药后复发的独立危险因素。pgRNA与HBcrAg联合预测CHB患者停药后复发的ROC曲线下面积为0.954,最佳截点为>0.128,此时敏感度为98.9%,特异度为97.1%。结论pgRNA和HBcrAg与CHB患者停药后复发风险密切相关,早期监测两者水平有助于发现停药后复发高风险的患者,早期调整治疗方案。

不同抗病毒方案对慢性乙型肝炎患者的影响

目的探讨不同抗病毒方案治疗慢性乙型肝炎的临床效果。方法选取2020年9月至2022年9月在医院接受抗病毒治疗的70例慢性乙型肝炎患者作为研究对象,按照抗病毒治疗方案的不同分为对照组与观察组,各35例。对照组给予阿德福韦酯治疗,观察组给予恩替卡韦治疗。比较两组临床疗效及治疗前后肝功能[天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)]、致炎因子指标[白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)]、乙型肝炎病毒、核糖核酸(HBV-RNA)水平。结果治疗后,两组TBil、AST、ALT水平均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组HBV-RNA水平均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组IFN-γ水平均高于治疗前,IL-10水平均低于治疗前,且观察组IFN-γ水平高于对照组,IL-10水平低于对照组(P<0.05);观察组治疗总有效率为94.29%,高于对照组的74.29%(P<0.05)。结论恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎可有效改善患者HBV-RNA、肝功能指标及致炎因子水平,提高临床疗效。

慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒RNA对核苷(酸)类似物治疗后HBeAg清除和血清转化的预测价值

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清乙型肝炎病毒(HBV)RNA对核苷(酸)类似物(NA)治疗后乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)清除和血清转化的预测价值。方法收集2017年2月12日至2019年2月21日在山东中医药大学附属威海医院首次接受NA单药治疗的178例CHB患者的血清样本。采用实时荧光定量PCR法定量检测基线和NA治疗后血清HBV RNA水平。结果HBeAg清除组和血清转化组患者基线、治疗6个月时和12个月时的血清HBV RNA水平分别显著低于未清除组和未转化组(P<0.001)。随访期间,基线HBV RNA水平较低的患者累积HBeAg清除率(Log Rankχ^(2)=11.282,P=0.001)或血清转化率(Log Rankχ^(2)=10.739,P=0.001)高于较高水平的患者。经Cox回归模型分析,基线、治疗6个月和12个月时的血清HBV RNA是CHB患者HBeAg清除和血清转化的独立影响因素(P<0.05)。基线血清HBV RNA水平预测HBeAg清除和血清转化的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.808(95%CI:0.743~0.872)和0.824(95%CI:0.763~0.885);治疗6个月时的AUC分别为0.830(95%CI:0.765~0.894)和0.732(95%CI:0.657~0.808);治疗12个月时的AUC分别为0.737(95%CI:0.641~0.833)和0.757(95%CI:0.671~0.842)。基线血清HBV RNA联合6个月时HBV RNA下降程度预测AUC分别为0.856(95%CI:0.795~0.917)和0.864(95%CI:0.802~0.926);联合12个月时HBV RNA下降程度预测AUC分别为0.881(95%CI:0.826~0.936)和0.848(95%CI:0.784~0.911)。结论CHB患者血清HBV RNA水平对NA治疗后HBeAg清除和血清转化具有较高的预测价值,提示HBV RNA水平可以帮助识别无反应者并促使考虑联合治疗。

HBeAg/HBeAb双阳性慢性乙型肝炎患者血清HBV RNA的变化及临床转归分析

目的探讨HBeAg/HBeAb双阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV RNA的变化及临床转归分析。方法选取2020年6月至2022年8月诊治的102例HBeAg/HBeAb双阳性CHB患者作为研究对象,设立为双阳组,同期选取51例HBeAg阳性、HBeAb阴性的CHB患者和52例HBeAg阴性、HBeAb阳性的CHB患者设立为对照1组和对照2组,对比血清HBV RNA变化。根据治疗方法不同将双阳组分为干扰素组(予以干扰素治疗,n=52)和恩替卡韦组(予以恩替卡韦治疗,n=50),对比HBeAg、HBeAb浓度及HBeAg转阴,HBeAb仍阳性、HBeAg和HBeAb同时转阴、HBeAg未转阴,HBeAb仍阳性占比。结果双阳组的HBV RNA水平均高于对照1、2组(P<0.05)。治疗前,干扰素组和恩替卡韦组的HBeAg、HBeAb、HBV RNA比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,干扰素组的HBeAg、HBeAb、HBV RNA低于恩替卡韦组(P<0.05)。干扰素组的HBeAg转阴,HBeAb仍阳性占比高于恩替卡韦组,而HBeAg未转阴,HBeAb仍阳性占比低于恩替卡韦组(P<0.05)。2组HBeAg和HBeAb同时转阴占比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析显示,HBV RNA预测CHB患者HBeAg/HBeAb双阳性和临床转归不良的AUC值分别为(0.936、0.954,P<0.05);敏感度分别为100.00%、93.10%;特异度分别为88.70%、76.70%。结论HBV RNA在HBeAg/HBeAb双阳性CHB患者中呈高表达趋势,观察其水平变化有助于为预测临床转归提供指导。

HBeAg阳性妊娠慢性HBV携带者母婴阻断停药后肝炎活动的危险因素研究

目的观察HBeAg阳性妊娠慢性HBV携带者启动以母婴阻断为目的的抗病毒治疗基线至产后96周内HBV RNA、HBV DNA、qHBsAg、qHBeAg、ALT等指标的动态变化,分析产后96周内肝炎活动的危险因素。方法回顾性纳入接受预防性抗病毒治疗并于产后12周内停药、且完成产后96周随访的妊娠HBeAg阳性患者,观察抗病毒治疗基线、妊娠36周、产后停药时和/或产后24周、产后96周HBV RNA、HBV DNA、qHBsAg、qHBeAg以及生化学指标的动态变化。结果共纳入146例中位治疗时间为16.4周的HBeAg阳性妊娠慢性HBV携带者。抗病毒治疗期间HBV DNA水平及qHBeAg逐渐下降,HBV RNA逐渐增高,qHBsAg水平在孕36周时较基线降低,停药时升高超过基线水平。产后24周上述指标均反弹接近或超过基线水平。产后96周随访,共5例患者发生HBeAg血清学转换,无一例发生HBsAg清除。产后停药时与产后24周肝炎活动比例最高(30.1%vs.30.8%),但随访至产后96周,仅14例(9.59%)患者因肝炎活动需抗病毒干预。根据是否再次启动抗病毒治疗将患者分为复发组(n=14)与未复发组(n=132)。10例患者在停药6个月以后复发,中位复发时间13.5月。两组间抗病毒治疗药物类型、基线至孕36周HBeAg降幅的差异具有统计学意义。结论HBeAg阳性妊娠慢性HBV携带者预防性抗病毒治疗期间及停药后均有不同比例肝炎活动,停药时、产后24周达高峰,但仅少数患者需再次抗病毒干预,且与HBV活动相关的肝炎发作多发生在停药6个月以后,应加强停药后的长期规律随访。抗病毒基线至孕36周HBeAg降幅是预测产后停药肝炎活动的独立危险因素。

乙肝患者外周血单个核细胞中乙肝病毒复制中间体RNA与乙肝病毒DNA相关性的研究

采用逆转录 -多聚酶链反应 (RT -PCR)技术检测乙肝患者外周血单个核细胞 (PBMCs)乙肝病毒复制中间体RNA(HBVRNA) ,6 0例乙肝患者 5例PBMCs中HBVRNA阳性 ,2 6例PBMCs中HBVDNA阳性 ,2 7例血清HBVDNA阳性 ;PBMCsHBVDNA阳性患者中有 4例PBMCsHBVRNA阳性 ,血清HBVDNA阳性患者中有3例PBMCsHBVRNA阳性 ;17例血清HBeAg阳性患者中有 4例PBMCsHBVRNA阳性。血清HBeAg、HBVDNA及PBMCs中HBVDNA阴性患者 ,其PBMCsHBVRNA仍可能阳性 。

血清HBV RNA定量检测在慢性乙肝患者抗病毒治疗中临床研究

目的检测并探讨HBV RNA与高敏HBV DNA水平在慢性乙肝(CHB)患者接受核苷(酸)药物(NAs)抗病毒治疗停药前后的相关性,以此寻找NAs疗效预测及安全停药生物学标志。方法选择两型慢性乙肝患者接受规范的NAs抗病毒治疗,按不同时间节点(治疗前、治疗24周、治疗48周、治疗72周)检测血清丙氨酸转氨酶(Alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)、乙肝五项(定量)、HBV RNA、高敏HBV DNA指标,分析各指标的相关性。结果随着NAs抗病毒治疗进行,HBV RNA和高敏HBV DNA水平均呈现下降趋势,但与HBV RNA相比,高敏HBV DNA下降水平更快,转阴率更高。其中在HBeAg阳性组,HBV RNA与HBeAg转阴较同步,HBV RNA预测HBeAg转阴价值更高,AUC=0.878。结论血清HBV RNA水平更能够反映和监测慢乙肝患者NAs抗病毒疗效,可用于抗病毒安全停药的评估。

207例乙肝患者血清HDV RNA和HBV DNA检测及其意义探讨

对２０７例急性、慢性、亚急重型乙型肝炎患者的外周血进行了丁肝病毒（ＨＤＶ）ＲＮＡ和乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ的检测。结果检出ＨＤＶＲＮＡ阳性２８例（１３５％）。其中，在抗－ＨＢｅ阳性者中ＨＤＶＲＮＡ检出率较高，为１８９％；ＨＢｅＡｇ阳性者中ＨＤＶＲＮＡ检出率较低，为７９％。在本文２８例ＨＤＶＲＮＡ阳性的患者中，６例（２１４％）检出ＨＢＶＤＮＡ；而在其余１７９例ＨＤＶＲＮＡ阴性病例中，则有６５例（３６３％）血中检出ＨＢＶＤＮＡ，表明ＨＤＶＲＮＡ阳性组存在ＨＢＶ活跃复制的比率低于ＨＤＶＲＮＡ阴性组（ｐ＜００５），提示乙肝患者在合并ＨＤＶ感染后抑制了ＨＢＶ的复制。本文资料中，不论ＨＤＶＲＮＡ，或是ＨＢＶＤＮＡ，在各型乙肝患者中的检出率均无显著性差异（ｐ＜０１～００５），故ＨＤＶ的致病性及其与ＨＢＶ致病性的关系尚有待进一步阐明。此外，在上述２０７例血清标本中，７１例（３４４％）为ＨＢＶＤＮＡ阳性。其中，以ＨＢｅＡｇ阳性者中ＨＢＶＤＮＡ检出率最高，为５４４％；抗ＨＢＣ－ＩｇＭ阳性者次之，为４４０％；但是，在抗－ＨＢｅ阳性者中ＨＢＶＤＮＡ检出率也达１１３％，提示用核酸分子杂交技术检测血清ＨＢＶＤＮ?

768例乙型肝炎血清标志物和HBV-DNA载量相关性分析

目的:探讨HBV-DNA载量与乙型肝炎血清标志物之间的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量,化学发光法检测HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc五项乙型肝炎血清标志物。结果:在768份血清标本中,HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性组HBV-DNA阳性率为98.70%,HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性组HBV-DNA阳性率为66.02%,HBsAg阳性组HBV-DNA阳性率为43.75%,抗HBs、抗HBe、抗HBc阳性组HBV-DNA阳性率为10.00%,抗HBs、抗HBc阳性组、抗HBs阳性组及五项乙型肝炎血清标志物全阴组HBV-DNA阳性率为0。结论:不同组的乙型肝炎患者HBV-DNA载量阳性率不同,HBV-DNA载量与乙型肝炎血清标志物之间存在相关性。采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量是反映HBV复制的可靠指标,结合乙型肝炎血清标志物可以帮助临床了解HBV在体内复制的状况,并为临床评价抗HBV治疗效果提供可靠依据。

HBV肝细胞内靶向转录调控研究进展

本文就近年有关反式调控

应用逆转录-环介导等温扩增技术检测乙型肝炎病毒RNA方法的建立

目的建立逆转录-环介导等温扩增(reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification,RTLAMP)方法检测乙型肝炎病毒(HBV) RNA,为乙型肝炎抗病毒治疗安全停药的研究提供技术支持。方法从NCBI数据库下载HBV A～D型,通过序列对比选出S区保守序列设计LAMP引物;提取HBV血清样本RNA与DNA,用RT-LAMP、LAMP进行检测;通过对非特异模板扩增实验验证扩增特异性;通过倍比稀释的HBV-RNA模板,用RTPCR法与RT-LAMP法检测以评价灵敏性。结果经过特异性实验证明LAMP特异性高,未检测到非特异性扩增。RT-LAMP的灵敏性为5×103IU/ml,RT-PCR的灵敏性为5×101IU/ml。用RT-LAMP与LAMP检测RNA与DNA证明了HBV-DNA检测不到后,HBV-RNA仍存在。结论本研究针对HBV S区保守序列,设计了针对我国主要的4种HBV基因型(A、B、C、D) LAMP通用引物,从而建立了检测HBV-RNA的RT-LAMP新技术,有助于为应用核苷类似物的乙型肝炎患者安全停药标志物的研究提供技术支持。

血清HBV RNA预测恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎患者疗效的价值

目的探讨HBV RNA在乙肝抗病毒治疗过程中可能存在的预测价值。方法研究59例恩替卡韦(ETV)治疗96月(或108月)的慢性乙型肝炎(CHB)患者的血清样本。在基线、3月、6月、9月、12月、36月、72月和96月(或108月)时检测HBV RNA水平、HBV DNA水平和血清学指标(HBeAg)。结果在接受ETV抗病毒治疗12月、36月后,HBV RNA虽然有所下降,但HBV RNA转阴率变化无统计学意义(P>0.05),治疗72月后,甚至96(或108)月时,有33例患者的HBV RNA水平低于100 copies/mL,其中29例患者的HBV RNA低于检测下限,HBV RNA转阴率差异有统计学意义(P<0.05)。HBV RNA水平越低,HBeAg转阴率越高(P<0.05),年龄、HBV RNA与HBeAg转阴率呈正相关(P<0.05)。结论随着ETV抗病毒治疗时间延长,HBV RNA的清除越彻底,其转阴率越高。本研究证实抗病毒时间、年龄与HBV RNA转阴率呈正相关,越早抗病毒治疗效果越好。HBV RNA可作为ETV治疗预测HBeAg是否转阴的指标。

母婴间乙型肝炎与丙型肝炎双重感染的研究

从流行病角度，利用分子生物学技术及免疫学方法，对２１０例产妇血清及新生儿 脐带血清，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ） 及丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）标志物，其结果为：ＨＢｓＡｇ阳性产妇的新生儿阳性率为６５．５％，ＨＢｅＡｇ阳 性产妇的新生儿阳性率为８１．８％，抗－ＨＣＶ阳性产妇的新生儿阳性率为７５．０％，ＨＢＶ－ＤＮＡ及 ＨＣＶ－ＲＮＡ双重阳性产妇的新生儿阳性率为１００．０％，说明母婴间存在乙型肝炎（ＨＢ）、丙型肝炎 （ＨＣ）及双重感染，其垂直传播可发生于宫内及围产期，是婴幼儿患病毒性肝炎的主要感染途径。 由于乙型肝炎及丙型肝炎的临床表现无特异性，不能从临床症状和体征中得以诊断，所以建立敏 感、特异的实验检测方法，为临床提供早期诊断依据，建立围产期保健制度，分娩过程中对婴儿加 强保护，阻断传播途径，是目前可行的有效措施。控制和降低病毒性肝炎的母婴间传播，有利优生 优育，提高人口素质的基本国策。”

乙肝病毒RNA复制子疫苗与DNA疫苗对小鼠免疫效率的比较

为建立并获取更有效的乙肝疫苗,本实验通过将所构建的HBVRNA复制子疫苗和DNA疫苗分别免疫小鼠,检测细胞免疫与体液免疫的效果。结果表明,以pSFV为基础构建的疫苗载体免疫小鼠后采集的血清中抗体效价不随免疫剂量的增加而提高,在较低剂量免疫的时候,RNA复制子疫苗所产生的抗体效价优于DNA疫苗。并且RNA复制子疫苗在以较低剂量免疫后脾细胞CTL活性高于DNA疫苗。本研究证明HBVRNA疫苗比DNA疫苗表达效果更好,安全性更高,更具有应用前景。

不同浓度HBV DNA和HIV-1 RNA对多重PCR检测HCV RNA的干扰验证分析

目的探讨多重聚合酶链式反应(PCR)技术在献血者血液标本中不同浓度HBV DNA和(或)HIV-1 RNA对低浓度HCV RNA检测结果的影响。方法采用阴性血浆对HCV RNA标准物质、已定量的HBV DNA和HIV-1 RNA血浆进行稀释,配制成2种病毒或3种病毒的混合液,HCV RNA浓度稳定在20.4 IU/mL[该PCR检测系统95%平均检测下限(LoD)的3倍],HBV DNA浓度为20 IU/mL、200 IU/mL、2000 IU/mL和(或)HIV-1 RNA浓度为50 copies/mL、500 copies/mL、5000 copies/mL的混合液,同时设置对照组(只有3×LoD的HCV RNA溶液),模拟献血者血液样本,分别在Roche Cobas s201核酸检测系统进行单检模式和混样模式(与5个阴性标本混合)至少检测20次,统计分析不同浓度病毒核酸检测Ct值差异以及单检模式与混检模式的漏检率。结果不同浓度HIV-1 RNA和(或)HBV DNA在单检模式下对HCV RNA检测的Ct值差异无统计学意义(P>0.05);HCV RNA在单检模式下的Ct值中位数36.60(36.20,37.10)明显低于混检模式的Ct值39.30(38.60,40.00)(P<0.05),10个分组中HCV RNA在单检模式的漏检率均为0%,而在混检模式的平均漏检率为12.62%,差异有统计学意义(P<0.05);此外,浓度20 IU/mL的HBV DNA进行单检的漏检率为7.55%,进行混检的漏检率为81.4%;50 copies/mL的HIV-1 RNA和20.4 IU/mL的HCV RNA在单检时漏检率为0%,而混检漏检率分别为28.57%和12.62%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同浓度HBV DNA和HIV-1 RNA对多重PCR检测HCV RNA结果无影响,但弱阳性HCV RNA、HBV DNA和HIV-1 RNA标本在单检模式下的漏检率低于混检模式,为提高血液安全,血液核酸检测应尽可能采用单检模式。

逆转录病毒载体介导HBV前C/C反义RNA的体外抗HBV作用

目的 了解反义乙型肝炎病毒 (HBV)基因转移、表达的抗HBV作用。方法 BamHⅠ酶切HBV质粒获取 1 5 0 4bp前C/C基因片段 ,将其正、反向插入逆转录病毒载体pDOR构建了正、反义前C/C重组体。将重组体转染逆转录病毒包装细胞PA31 7,G4 1 8筛选获取抗性细胞及假逆转录病毒。RT PCR检测了反义HBV基因表达的反义RNA。将重组假逆转录病毒感染 2 2 1 5细胞 ,ELISA及斑点杂交法分别检测被感染细胞培养上清中HBsAg、HBeAg及HBVDNA。结果 反义前C/C重组逆转录病毒载体在细胞内能转录HBV反义RNA。反义前C/C重组假病毒感染的 2 2 1 5细胞HBsAg、HBeAg的合成分别降低了 5 5 5 %、78% ;HBVDNA水平也明显低于空白对照组。该抑制具有一定特异性。增加假病毒感染次数在一定范围内能提高抑制作用。正义假逆转录病毒感染对 2 2 1 5细胞HBVDNA水平及抗原合成无影响。结论 逆转录病毒载体介导反义HBV基因转移表达的反义RNA能抑制HBV复制及抗原合成 。