溶胶-凝胶-HBsAb膜免疫传感器的研制与应用

采用溶胶-凝胶(Sol-gel)技术,成功地将乙肝表面抗体(HBsAb)包埋于Sol-gel中,再滴涂于铂盘电极表面,制成溶胶-凝胶-HBsAb膜非标记免疫传感器.根据抗原与抗体特异性结合形成的免疫复合物使敏感膜有效扩散截面积减小的特性,提出了利用铁氰化钾作为氧化还原探针间接检测乙肝表面抗原(HBsAg)的新方法.用循环伏安法(CV)对电极逐层修饰过程进行了表征,并探讨了对HBsAg定量检测的可行性及其响应机理.采用差示脉冲伏安法(DPV)检测人体血清中的 HBsAg.线性范围5～320μg/L,线性相关系数r=0.997.该传感器响应迅速,灵敏度高,稳定性好.于4℃干态保存14d,其响应信号基本不变.将其用于108例临床血清检验,与酶联免疫吸附法(ELISA)的符合率为87.5％.

HBV血清标志物HBsAg与HBsAb共存的特殊模式分析

目的 探讨、分析乙型肝炎病毒血清标志物乙型肝炎表面抗原与抗体 (HBsAg与HBsAb)共存的特殊模式特点。方法 运用酶联免疫吸附法检测服务从业人员、健康体检人员、门诊及住院患者的血清。结果 从 896份HBsAg阳性血清标本中收集HBsAg与HBsAb共存标本 6 8份 (7.5 9% ) ;其中乙型肝炎 5项指标组合模式有 5类 ,以单纯HBsAg与HBsAb同时阳性为主 ,占5 2 .9%。结论 血清HBsAg与HBsAb共存以单纯HBsAg与HBsAb同时阳性为主 ,也有其他模式存在。同时进行聚合酶链反应检测有助于评价其意义。

高效价HBsAb原料血浆的获得及人乙型肝炎免疫球蛋白的制备

目的 探讨免疫献血员获得高效价HBsAb的免疫程序和免疫剂量,制备人乙型肝炎免疫球蛋白。方法 对适龄健康献血员按HBsAb效价进行分组,分别采用不同剂量乙型肝炎疫苗和不同的免疫程序进行接种,用ELISA定量检测其HBsAb效价;效价>8IU/ml的原料血浆合并,采用低温乙醇法制备人乙型肝炎免疫球蛋白。结果 乙型肝炎抗体阴性献血员组内不同免疫程序和不同抗原剂量产生高效价HBsAb的比率差异无显著意义;抗体阳性献血员组内高剂量免疫产生高效价HBsAb的比率明显高于低剂量免疫的结果;制备的人乙型肝炎免疫球蛋白质量指标均符合中国生物制品规程标准。结论 采用0、1、2的免疫程序、20μg乙型肝炎疫苗免疫HBsAb阳性的献血员可获得高效价原料血浆,用于乙肝免疫球蛋白的制备。

昆山民工子弟HBsAg、抗HBsAb状况分析

目的:了解外来民工子弟HBsAg的携带情况与现有乙型肝炎特异性抗体水平,供有关部门防治乙型肝炎提供依据。方法:用ELISA法检测3675名民工子弟学校学生的HBsAg、HBsAb。结果:3675名民工子弟HBsAg阳性134人,阳性率为3.65%,HBsAb阳性为1012人,阳性率为27.54%。结论:民工子弟,乙型肝炎现有特异性抗体水平处于偏低状态,应加强对民工子弟学校学生的疫苗接种。

乙型肝炎HBsAg、HBsAb共存的血清学模式与HBV DNA相关性探讨

乙型肝炎病毒血清学标志物是乙型肝炎临床诊断和治疗的重要依据,不同的血清标志物模式具有不同的临床意义[1]。在HBV感染者血清标志物中,HBsAg和HBsAb是对应的一组抗原抗体。通常HBsAg消失后HBsAb产生,

乙型肝炎表面抗体(HBsAb)胶体金诊断试剂生产工艺优化

目的:改进HBsAb胶体金诊断试剂的生产工艺,使其发展成一种简便、快速、灵敏度高和特异性好的HBsAb检测技术。方法:通过对HBsAb胶体金诊断试剂制备的几个重要环节进行优化,使其获得高灵敏度诊断试剂。结果:胶体金诊断试剂的优化工艺为选用B孔径的硝酸纤维素膜,包被浓度为0.5mg/ml;NaHCO_3缓冲系统,pH值为7.0;2#聚脂膜,金标-重组乙肝表面抗原OD值为30,喷量为3.0ul/cm。结论:工艺优化后的乙肝表面抗体胶体金诊断试纸条在灵敏度上从原来的97.33%上升到99.33%。

电化学发光法和ELISA法检测HBsAb的结果分析

目的探讨电化学发光法(ECLIA)和酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测乙肝表面抗体的结果差异。方法选取沈阳医学院奉天医院2011年8～11月门诊和住院部送检的HBsAb为阳性的血液标本536份,分别进行ECLIA法和ELISA法进行检测,并对结果进行分析。结果 ECLIA检测HBsAb在10～50IU/L时,ELISA的阳性率只有6.62%,说明ELISA方法的灵敏度不如电化学发光法高。与电化学发光法比较,ELISA方法的敏感性为41.24%,特异性为98.04%,符合率为46.64%,阳性预测值为99.50%,阴性预测值为12.99%。结论在临床常规检测标本中,电化学发光法和ELISA法检测结果相似,但电化学发光法的灵敏度高于ELISA法。电化学发光法检测HBsAb对乙肝疫苗接种是否成功是非常有意义的。

探讨利用HBsAb免疫保护特性降低HBV输血传染风险

在现有的技术条件下,依据HBsAb免疫保护特性原理,从理论上探讨对供血者和受血者开展HBsAb检测,并按照供受双方HBsAb检测结果配合互补的原则,进行血液输注,以便有效中和漏检的HBV感染血液中的病毒颗粒,达到降低HBV输血传染风险的目的。

HBsAg与HBsAb中和比的研究及应用探讨

目的明确 HBsAb 与 HBsAg 中和作用不同时间两者之间的消耗比,为 HBsAg/HBsAb 确认试验的标准化奠定基础。方法将卫生部临床检验中心提供的质控血清用电化学发光法测定;并将5ng/ml HBsAg 与30mIU/mlHBsAB 质控血清不同比例37℃作用不同时间后,用电化学发光法测定 HBsAg、HBsAb 浓度的变化;留取日常工作中酶联免疫吸附试验测定病人血清,结果为 HBsAg(+)、HBsAB(-)、HBeAg(-)、HBeAb(+)、HBcAb(+)的标本30份;结果为 HBsAg(-)HBsAB(+)、HBeAg(-)、HBeAb(-)、HBcAb(-)的标本30份,将两种血清不同比例混合37℃作用不同时间用 ELISA、电化学发光法测定 HBsAg、HBsAb 浓度的变化。结果 5ng/ml、2ng/ml、0.5ng/ml HBsAg、30mIU/ml HBsAb 质控血清电化学发光法测定结果分别为116.2 COI、42.43 COI、14.02 COI、62.54 mIU/ml;ELISA 的中和比,以 HBsAg 完全被 HBsAb 中和计算即有223/774=0.283 ng HBsAg/mIU HBsAb,如果以 HBsAb 完全被 HBsAg 中和计算即有570/757=0.753 ng HBsAg/mIU HBsAb。而 ECLIA 的中和比,以 HBsAg 完全被 HBsAb 中和计算即有2304/1664=1.38 COI HBsAg/mIU HBsAb,如果以 HBsAb 完全被 HBsAg 中和计算即有13106/1577=8.31COIHBsAg/mIU HBsAb。5ng/ml HBsAg 与30mIU/mlHBsAB 质控血清37℃水浴作用1h 中和比在3.00～4.25COI HBsAg/mIU HBsAb 之间;2h 中和比在2.31～3.47COI HBsAg/mIU HBsAb 之间;24h 中和比在2.03～2.43COI HBsAg/mIUHBsAb 之间。结论 ELISA 完全中和比在0.283～0.753 ng HBsAg/mIU HBsAb;ECLIA 完全中和比在1.38～8.31 COI HBsAg/mIUHBsAb。

小剂量HB疫苗注射次数对产生HBsAb的研究

本文进行小剂量HB疫苗注射次数对诱导机体产生HBsAb的研究结果发现 ,注射第 5针后 ,HBsAb阳转率为 83 5 6 % ,与大剂量 (10 μg) 3针免疫法的HBsAb阳转率 86 6 7%相接近。男性HBsAb阳转率为 82 0 5 % ,女性阳转率为 85 2 9%。注射 3针后 ,再继续注射第 4针及第 5针时 ,HBsAb阳转率均有所提高 ,但注射第 6针后 ,HBsAb阳转率仍与第 5针相似 ,由此可见 ,小剂量HB疫苗免疫预防注射 ,以注射到第 5针为宜。

乙肝感染者血清HBsAg与HBsAb双阳性模式结果探析

目的:探讨HBs Ag和HBs Ab双阳性模式产生原因及其临床意义。方法:分析2017年我院90例HBs Ag和HBs Ab双阳性病例中的不同HBV-DNA拷贝数和ALT水平的样本数量的分布情况,并回顾1例HBs Ag与HBs Ab双阳性模式病例的动态变化。结果:1235模式血清HBV-DNA阴性率为33. 3%,HBV-DNA阳性病例其拷贝数分布在104～107之间; 1245模式血清HBV-DNA阴性率为82. 1%,HBV-DNA阳性病例其拷贝数分布在10~2～10~6之间;血清ALT水平与HBV-DNA拷贝数呈正相关; HBs Ag和HBs Ab双阳性病例回顾中,随着HBs Ab的出现,血清HBV-DNA拷贝数和ALT水平逐渐下降并趋于正常,血清HBs Ag水平也出现下降趋势。结论:HBs Ag和HBs Ab双阳性模式多为急性HBV病毒感染者向康复发展的过渡阶段(中间态),HBs Ag与HBs Ab双阳性的出现,更大概率是机体具有完全清除HBV-DNA病毒可能的信号。

HBsAb与其他4项血清学指标间的通路分析

目的解释HBsAb与其他指标间的关系。方法对常德市2004年高中毕业生进行健康体检,选乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBeAb、HBsAb5项指标中有1项以上阳性者865人为对象,以HBsAg、HBeAg为原因变量,HBcAb、HBeAb为中间应变量,HBsAb为应变量,构筑模型框架,用SPSS11.0软件进行道路分析。结果通路图模型框架可解读信息为67.3%,HBsAg对HBsAb的直接作用为-0.714,对两者相关系数(r=-0.787)的贡献比为94.2%。结论HBsAg与HBsAb高度负相关,HBsAg阳性时有HBsAb存在的可能性很小。

HbsAb阳性与MBL水平相关性分析

目的:检测河北地区大学一年级HbsAb阳性与HbsAb阴性新生血清甘露聚糖结合凝集素(MBL)的浓度,比较差异并评价其非特异性免疫功能。方法:空腹采血,采用ELISA法进行检测。结果:327名河北地区大学一年级HbsAb阳性新生,血清MBL的含量为(6.315±4.63)mg/L;男生126人,血清MBL的含量为(6.53±4.62)mg/L,女生201人,血清MBL的含量为(6.18±4.64)mg/L,男性略高于女性,但差异无统计学意义(t=0.117,P>0.05)。683名HbsAb阴性新生MBL含量(6.279±4.638)mg/L,男生251人,血清MBL的含量为(6.405±4.498)mg/L,女生432人,血清MBL的含量为(6.205±4.721)mg/L。结论:河北地区大学一年级新生HbsAb阳性者MBL水平与HbsAb阴性者MBL水平差异不显著。

南宁市中小学生血清HBsAg及HBsAb分布状态调查分析

目的 :了解南宁市自 1988年始实施新生儿接种乙肝疫苗后 ,不同年龄组中小学生血清 HBs Ag携带及 HBs Ab产生情况。方法 :对南宁市区 31所中小学三个不同年龄组 (小学一年级 6～ 7岁、初一年级 12～ 13岁和高一年级 15～ 16岁 )学生进行HBs Ag及 HBs Ab血清学检测。计数资料进行统计学处理。结果 :被调查的 70 6 3名中小学生中 ,血清 HBs Ag阳性数 187人 ,总阳性率 2 .6 5 % ,阳性率随年龄增加而上升 ,各年龄组间比较差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;HBs Ab阳性数 4 15 9人 ,总阳性率 5 8.88% ,阳性率随年龄增加而下降 ,各年龄组间比较差异有统计学意义 ,(P <0 .0 5 ) ,但初一年级组降低非常显著于高一年级组 (P <0 .0 1)。结论 :乙肝疫苗免疫效果明显 ,复种年龄考虑以 12～ 13岁年龄组为宜。