流式细胞术分析HCMV—PP65抗原在外周血各有核细胞群上的表达及意义

目的研究分析人外周血有核细胞感染人类巨细胞病毒PP65抗原（Human Cytomegalovirus PP65 antigen，HCMV—PP65Ag）的阳性表达率及临床意义。方法应用流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）对广州军区广州总医院2007年1月～2008年12月共256例患者的外周血有核细胞HCMV—PP65Ag阳性表达百分率进行分析，其中移植组80例，肿瘤组48例，肾功能不全组86例，其它疾病组42例；设门诊健康体检者20例为正常对照组。对HCMV检出阳性患者根据并发细菌感染与否分为两组，观察两组间临床治疗方案的选择。另对26例HCMV现症感染患者进行连续四周检测，动态观察HCMV—PP65Ag的表达与临床症状的关联。结果256例患者共检出144例HCMV—PP65Ag阳性；HCMV-PP65Ag阳性患者中并发细菌感染与无细菌并发感染两组临床发热娃状及临床用药方案间比较差异均有统计学显著性意义（均P〈0．05）。动态观察组监测结果显示，持续HCMV—PP65Ag检测阳性患者，尤其是粒细胞群表达阳性时，临床多表现有发热症状及易并发细菌感染。结论运用FCM检测人外周血有核细胞表面HCMV—PP65Ag，能快速、准确、有效地提供HCMV感染依据；而对HCMV感染的各细胞群进行分析，有利于临床了解疾病情况和制订治疗方案。

外周血白细胞HCMV PP65抗原检测结果分析

目的分析外周血白细胞巨细胞病毒(HCMV)PP65抗原检测结果,总结儿科常见疾病的HCMV感染情况及HCMV感染所致临床疾病的分布情况。方法采用间接免疫荧光法检测了1016例儿童外周血白细胞HCMVPP65抗原,对检测结果及阳性病例进行分析。结果所有送检标本总阳性检出率为25.2%,以肝炎、婴儿肝炎综合征组患儿阳性检出率最高,分别为37.8%、32.4%。CMV感染可累及全身各个系统,引起疾病多样,但以婴儿肝炎综合征最多见(37.1%),其次为高胆红素血症(12.9%)、急性呼吸道感染(10.9%)、腹泻(9.4%)、发热待查(6.6%)、肝炎(5.5%)等。结论HCMV感染临床上常见,症状多样,临床医生对可疑病例应及早作相应的实验室检查,以助于早期临床诊断,并指导有效的治疗。

人巨细胞病毒激活感染与颈动脉粥样硬化斑块不稳定性的临床研究

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)激活感染与颈动脉粥样硬化的关系。方法采用免疫荧光法检测外周血白细HCMV-PP65抗原作为HCMV激活感染的指标,对212例颈动脉粥样硬化患者分别进行HCMV-PP65抗原、血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平检测和颈动脉超声检查。结果 HCMV-PP65抗原阳性组、阴性组血清MMP-9含量分别为(242.25±81.03)、(159.57±79.20)pg/mL,差异有统计学意义(P<0.01);两组TNF-α含量分别为(3.04±0.37)、(1.37±0.17)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.01);HCMV-PP65抗原阳性组44例(69.84%)存在不稳定性斑块,HCMV-PP65抗原阴性组72例(48.32%)存在不稳定性斑块,差异有统计学意义(χ2=8.82,P<0.01)。结论人巨细胞病毒激活感染可引起MMP-9、TNF-α水平增高,可能与颈动脉粥样硬化斑块不稳定性有关。

2项对诊断儿童人巨细胞病毒活动性感染的比较

目的比较血清人巨细胞病毒(HCMV)-IgM抗体(以下简称IgM抗体)与HCMV pp65抗原(以下简称pp65)两种方法对HCMV活动性感染诊断检测的实用意义。方法采集临床疑似HMCV活动性感染儿童血标本91份,分离血浆和多形白细胞,分别用于IgM抗体检测和pp65抗原检测,同时用聚合酶链反应(PCR)检测HCMV DNA,与pp65抗原作平行比较。结果 pp65抗原检测的结果与IgM抗体检测的符合率为70.3%,与HC-MV DNA检测相比,pp65抗原检测的符合率、特异性和敏感度分别为85.5%、70.6%和75.6%,而且高pp65抗原血症与患者临床症状密切相关。结论 pp65抗原血症反映该病毒活动状况,可监测HCMV活动性感染。

HCMVpp65抗原、HCMV mRNA和IgM抗体检测在诊断HCMV活动性感染中的比较

目的比较人巨细胞病毒(HCMV)pp65抗原、HCMV mRNA和血清HCMV-IgM抗体检测3种方法在诊断HCMV活动性感染中的实用意义。方法采集医院TORCH检查HCMV-IgM阳性的病人外周血(60份)。将标本分2份2ml和3ml,别用于HCMVmRNA和pp65检测。将三者结果进行比较。结果pp65抗原检测的结果与IgM抗体检测的阳性符合率为81.67%。与HCMV mRNA检测相比pp65抗原检测法的符合率、特异度和敏感度分别为81.67%,81.81%和81.63%。而且高pp65抗原血症与患者的临床症状密切相关。结论pp65抗原血症反映该病毒活动状况,可监测HCMV活动性感染,联合HCMV-IgM的检测可以提高临床的诊断率并可用于指导临床用药及监测药物疗效。

流式细胞术检测人巨细胞病毒活动性感染检测方法的建立及检测效果评价

探讨流式细胞术检测人巨细胞病毒活动性感染检测方法的可行性及效果评价。分离人外周血白细胞,以商品化的小鼠抗人巨细胞病毒pp65抗原单克隆抗体为一抗,FITC标记的羊抗小鼠IgG抗体为二抗,采用流式细胞术对外周血人巨细胞病毒pp65抗原进行检测。同时采用间接免疫荧光法对外周血人巨细胞病毒pp65抗原进行检测。采用配对χ2检验对两种方法的检测效果进行评价。临床送检的65份疑似为人巨细胞病毒感染病人外周血标本中,间接免疫荧光法检出阳性9份,流式细胞术检出阳性11份,两种方法阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05)。采用流式细胞术可定量检测外周血人巨细胞病毒pp65抗原,与间接免疫荧光法检测结果无统计学差异,可在临床推广使用。

人巨细胞病毒感染母婴传播与母乳喂养

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)母婴传播中的母乳喂养与婴儿HCMV感染的关系,进而指导感染人巨细胞病毒母乳对婴儿的合理喂养。方法应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法分别检测113对临床疑诊HCMV感染患儿及其母亲HCMV-DNA含量,用免疫荧光法检测患儿血HCMV-PP65抗原。结果母乳HCMV-DNA与配对患儿血HCMV-PP65抗原两者之间有关联(χ2=6.48,0.01<P<0.025),但关系不是非常密切,阳性母乳配对患儿与阴性母乳配对患儿的血HCMV-DNA之间差异无统计学意义(t=1.432,P>0.05)。结论母乳HCMV感染是婴儿获得HCMV感染的重要途径,但是二者关联性不强,故对已感染HCMV的患儿建议母乳喂养,对母亲HCMV阳性,而婴儿HCMV阴性的可将乳汁处理后喂养,更加安全。