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姜黄素加重结肠癌细胞株HCT-116线粒体损伤和促进细胞凋亡的作用研究
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作者 徐明亮 康清梅 +3 位作者 张顺涛 张雄 高敏娜 曾波 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期270-275,共6页
目的:观察姜黄素对结肠癌细胞株HCT-116细胞增殖和凋亡的影响以及对细胞线粒体形态和功能的改变,并探讨其可能的机制。方法:体外培养结肠癌细胞株HCT-116,给与不同浓度的姜黄素(5、10、20、30μmol/L)处理,细胞计数试剂盒CCK-8观察细胞... 目的:观察姜黄素对结肠癌细胞株HCT-116细胞增殖和凋亡的影响以及对细胞线粒体形态和功能的改变,并探讨其可能的机制。方法:体外培养结肠癌细胞株HCT-116,给与不同浓度的姜黄素(5、10、20、30μmol/L)处理,细胞计数试剂盒CCK-8观察细胞增殖的变化并筛选出最佳作用浓度。流式细胞术检测细胞凋亡的改变。线粒体膜电位检测试剂盒JC-1检测细胞内线粒体膜电位的变化。电镜和Mito Tracker Deep Red染色观察细胞内线粒体形态结构的变化。三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测细胞ATP和ROS的变化。分光光度计检测与凋亡密切相关的casppase-3和caspase-9活性变化。最后,Western blot检测结肠癌细胞内caspase-3和caspase-9蛋白水平的变化。结果:姜黄素处理细胞株HCT-116细胞后,细胞的增殖水平受到抑制,且呈浓度-时间依赖性,其半数最大抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为13μmol/L。姜黄素不仅增加早期凋亡的结肠癌细胞的比例,还使细胞内线粒体膜电位水平下降,且呈浓度依赖性。电镜结果显示姜黄素处理后,细胞内线粒体出现明显的线粒体肿胀,线粒体嵴肿胀、消失、膜破裂和空泡等。Mito Tracker Deep Red染色后显示线粒体数量减少且呈碎片状。细胞内的ATP生产明显下降。另外,姜黄素还增加细胞内caspase-3和caspase-9酶活性和蛋白水平的表达。结论:姜黄素抑制结肠癌HCT-116细胞的增殖,并促进细胞的凋亡,其机制与姜黄素加重线粒体形态和功能的损伤有关。 展开更多
关键词 hct-116细胞株 姜黄素 凋亡 线粒体
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槐果碱对人肠癌细胞HCT-116生长抑制作用
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作者 颜勋 刘成宸 +2 位作者 张明 陆峰 周广军 《徐州医科大学学报》 CAS 2023年第5期367-372,共6页
目的探讨槐果碱对人肠癌细胞HCT-116生长的影响。方法选取人肠癌细胞HCT-116,用不同浓度梯度槐果碱作用48 h后,通过细胞毒性试验检测增殖能力,根据IC_(50)选择3个浓度进一步实验。通过平板克隆形成实验检测细胞克隆能力,流式细胞术检测... 目的探讨槐果碱对人肠癌细胞HCT-116生长的影响。方法选取人肠癌细胞HCT-116,用不同浓度梯度槐果碱作用48 h后,通过细胞毒性试验检测增殖能力,根据IC_(50)选择3个浓度进一步实验。通过平板克隆形成实验检测细胞克隆能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,线粒体膜电位检测线粒体膜电位水平,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白及生存素(survivin)的表达水平。结果细胞毒性试验显示,槐果碱可抑制HCT-116肿瘤细胞增殖,且随着槐果碱浓度的升高抑制作用增强。IC_(50)为2.134 mmol/L,并选择1、2和4 mmol/L进行进一步相关实验;在槐果碱作用后HCT-116细胞克隆能力、线粒体膜电位水平均明显下降,细胞凋亡率明显升高(P<0.05);槐果碱作用后,HCT-116细胞内Bcl-xL、Bcl-2、survivin表达显著下调,而Bax、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9显著上调。结论槐果碱可抑制肠癌细胞HCT-116增殖并通过线粒体途径促进凋亡。 展开更多
关键词 槐果碱 肠癌细胞hct-116 线粒体途径 凋亡 SURVIVIN
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Scutellarin induces apoptosis of colorectal cancer HCT116 cells via Hippo signaling pathway
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作者 YANG Han SUN Qiang +7 位作者 ZENG Sha CHEN Li ZHAO Hui LIU Mao-lun REN Shan MING Tian-qi LU Jin-jian XU Hai-bo 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2021年第10期775-776,共2页
OBJECTIVE To investigate the effect of scutellarin on the apoptosis of human colorectal cancer cells via the Hippo signaling pathway in vitro.METHODS MTT colorimetric method was used to detect the influence of scutell... OBJECTIVE To investigate the effect of scutellarin on the apoptosis of human colorectal cancer cells via the Hippo signaling pathway in vitro.METHODS MTT colorimetric method was used to detect the influence of scutellarin on the survival rate of HCT116 cells.And the effect of scutellarin at various concentrations on cell morphology was observed by microscopy.Cell scratch experiment was used to detect the influence of scutellarin on the migration of HCT116 cells.Hoechst33342/PI double staining method was used to detect the effect of scutellarin on the apoptosis of HCT116 cells.Western blotting method was used to assess the action of scutellarin on the expressions of Hippo signaling pathway-related proteins Mst1,Lats1,YAP1,p-YAP(Ser127),TAZ,and its downstream effector proteins c-Myc and cyclin D1,as well as apoptosis-related proteins Bcl-2 and Bax in HCT116 cells.RESULTS Scutellarin significantly affected the morphology of HCT116 cells and reduced the survival rate of HCT116 cells.Hoechst33342/PI double staining showed that scutellarin effectively induced the apoptosis of HCT116 cells.Western blotting analysis showed that the expression levels of Hippo signaling pathway-related proteins Mst1,Lats1,YAP1,TAZ and its downstream effector proteins c-Myc,cyclin D1 were down-regulated in a concentration-dependent manner by scutellarin,and the expression of p-YAP(ser127)was up-regulated.Moreover,scutellarin substantially lessened the expression level of apoptosis-related protein Bcl-2,and promoted the protein level of Bax.CONCLUSION Scutellarin may inhibit the proliferation and migration of HCT116 cells,while induce its apoptosis,potentially by activation of Hippo signaling pathway. 展开更多
关键词 SCUTELLARIN colorectal cancer hct116 cells Hippo signaling pathway
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甲磺酸阿帕替尼对结肠癌HCT-116细胞增殖的抑制作用及其机制 被引量:30
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作者 殷亮 王荩 +5 位作者 黄凤昌 张云飞 许宁 文政琦 李文亮 董坚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期367-372,共6页
目的检测阿帕替尼对结肠癌HCT-116细胞的抑制作用,探讨其可能的作用机制及其影响的信号通路。方法 MTT方法检测不同浓度(0、0.5、1、1.5、2μmol/L)的阿帕替尼对结肠癌HCT-116细胞的毒性作用,并设置卡培他滨阳性对照组;Annexin VFITC/P... 目的检测阿帕替尼对结肠癌HCT-116细胞的抑制作用,探讨其可能的作用机制及其影响的信号通路。方法 MTT方法检测不同浓度(0、0.5、1、1.5、2μmol/L)的阿帕替尼对结肠癌HCT-116细胞的毒性作用,并设置卡培他滨阳性对照组;Annexin VFITC/PI双染法检测上述不同浓度的阿帕替尼处理后结肠癌HCT-116细胞的凋亡情况,实时荧光定量PCR及Western Blotting技术检测其对凋亡相关基因及蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3的影响,Western blotting技术检测其对Akt、p-Akt、Erk1/2和p-Erk1/2蛋白表达的影响。结果 MTT细胞毒性检测结果表明,阿帕替尼在体外能有效抑制HCT-116细胞的增殖,IC50为1.335μmol/L。Annexin-V/PI双染法细胞凋亡检测结果表明,阿帕替尼能显著的诱导HCT-116细胞凋亡,并且呈浓度依赖性。实时荧光定量PCR和Western blotting结果表明,阿帕替尼可以诱导促凋亡基因Bax和Caspase-3的表达,并抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达。Western blotting检测信号通路蛋白的结果表明,在阿帕替尼处理后p-Akt和p-Erk1/2的表达显著降低,而Akt和Erk总蛋白水平没有变化。结论阿帕替尼可通过抑制MAPK/Erk、PI3K/Akt信号转导通路来实现诱导细胞凋亡,从而达到抑制HCT-116细胞增殖的目的。 展开更多
关键词 甲磺酸阿帕替尼 结肠癌hct-116细胞 凋亡 MAPK/ERK信号通路 PI3K/AKT信号通路
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火炭母提取物抑制人结肠癌HCT-116细胞体外增殖研究 被引量:6
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作者 黄桥华 刘小云 +2 位作者 潘静 曾琪 胡海波 《环球中医药》 CAS 2018年第2期203-206,共4页
目的研究火炭母提取物对人结肠癌HCT-116细胞的体外增殖抑制作用和诱导凋亡作用。方法 MTT法筛选火炭母各部分提取物对HCT-116细胞的增殖抑制作用及活性作用部位;于荧光显微镜下采用Hoechst 33258凋亡染色法检测细胞凋亡形态变化;通过An... 目的研究火炭母提取物对人结肠癌HCT-116细胞的体外增殖抑制作用和诱导凋亡作用。方法 MTT法筛选火炭母各部分提取物对HCT-116细胞的增殖抑制作用及活性作用部位;于荧光显微镜下采用Hoechst 33258凋亡染色法检测细胞凋亡形态变化;通过AnnexinⅤ-FITC/PI双标记法于流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果火炭母乙酸乙酯供试液对HCT-116的细胞增殖抑制作用较强且呈剂量和时间依赖关系,作用48小时后其IC50值为120.04 mg/L;凋亡染色显示有细胞凋亡形态变化;流式细胞仪检测火炭母乙酸乙酯供试液能诱导HCT-116细胞凋亡并呈剂量依赖关系。结论火炭母乙酸乙酯供试液能抑制人结肠癌HCT-116细胞增殖并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 火炭母 抗肿瘤活性 细胞凋亡 人结肠癌hct-116细胞
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FBXW7基因点突变对结直肠癌HCT-116细胞的增殖、迁移、侵袭和抗凋亡能力的影响 被引量:3
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作者 张百川 程勇 +2 位作者 王祥峰 唐康 王五艺 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期263-269,共7页
目的:探讨FBXW7基因点突变对结直肠癌细胞株HCT-116增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:通过构建FBXW7基因野生型及突变型过表达的重组载体,并将其转染HCT-116细胞,应用Western blotting检测转染后FBXW7蛋白表达情况。CCK-8检测细胞增... 目的:探讨FBXW7基因点突变对结直肠癌细胞株HCT-116增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:通过构建FBXW7基因野生型及突变型过表达的重组载体,并将其转染HCT-116细胞,应用Western blotting检测转染后FBXW7蛋白表达情况。CCK-8检测细胞增殖能力,平板细胞克隆形成实验(HTCA)检测肿瘤细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕及Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果:转染野生型FBXW7基因的HCT-116细胞中FBXW7蛋白表达水平高于对照组(转染突变型FBXW7基因的HCT-116细胞)、阴性对照组(转染空质粒载体p EZ-M90的HCT-116细胞)及空白对照组(未进行任何特殊处理的HCT-116细胞)(均P<0.05)。转染野生型FBXW7的HCT-116细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力相较于其余各组均显著下降(均P<0.05),且细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。结论:FBXW7基因点突变可使其蛋白表达水平降低,从而促进结直肠癌HCT-116细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制其凋亡。 展开更多
关键词 FBXW7基因 基因突变 结直肠癌 hct-116细胞 泛素蛋白酶体系统
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竹节香附素A对人结肠癌细胞HCT-116增殖、凋亡、迁移及侵袭活性的影响 被引量:11
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作者 王宇 姜修博 +6 位作者 韩豆 朱志铭 宋长琴 赵昂 张琪 刘昌辉 马博 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期123-130,共8页
目的研究竹节香附素A(Raddeanin A,RA)对人结肠癌细胞HCT-116增殖、凋亡、迁移及侵袭活性的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用不同浓度的RA(0.125~50.0μmol·L^(-1))处理HCT-116细胞24,48 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增... 目的研究竹节香附素A(Raddeanin A,RA)对人结肠癌细胞HCT-116增殖、凋亡、迁移及侵袭活性的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用不同浓度的RA(0.125~50.0μmol·L^(-1))处理HCT-116细胞24,48 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力。RA(1.0,2.0,4.0μmol·L^(-1))干预后,采用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;JC-1染色法检测线粒体膜电位变化;DCFH-DA法检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;采用Western Blot法检测细胞中Cleaved caspase-3蛋白表达。选择低于凋亡浓度的RA(0.25,0.5,1.0μmol·L^(-1))作用于HCT-116细胞,采用细胞划痕实验和Transwell穿膜实验观察不同浓度RA对HCT-116细胞迁移的影响;采用铺有Matrigel胶的Transwell实验检测RA对HCT-116细胞侵袭能力的影响;采用RT-PCR法和Western Blot法检测RA对HCT-116细胞中MMP-2、MMP-9 m RNA及蛋白表达的影响。结果 RA干预24,48 h后的IC50值分别为5.967μmol·L^(-1)和4.797μmol·L^(-1),且呈现浓度与时间依赖性。与空白对照组比较,RA1.0,2.0,4.0μmol·L^(-1)浓度组凋亡、坏死的HCT-116细胞明显增多(P<0.05,P<0.01);线粒体膜电位坍塌率分别为70.2%,74.4%和91.6%,差异均有统计学意义(P<0.01);细胞内ROS含量均显著增加(P<0.01),且呈现浓度依赖性;Cleaved caspase-3蛋白的表达水平随RA浓度的增加而显著提高(P<0.01)。RA干预后与空白对照组比较,0.5,1.0μmol·L^(-1)浓度组的细胞愈合率显著降低(P<0.01);RA 0.25,0.5,1.0μmol·L^(-1)浓度组均能显著抑制HCT-116细胞的迁徙能力(P<0.01),均能显著抑制HCT-116细胞体外侵袭能力(P<0.05,P<0.01);RA 0.5,1.0μmol·L^(-1)浓度组MMP-2、MMP-9 m RNA及蛋白相对表达水平均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论 RA既能够有效抑制人结肠癌HCT-116细胞增殖,又能诱导该细胞的凋亡,可能与诱导细胞内ROS产生,导致线粒体膜电位坍塌,激活caspase信号通路有关。低于凋亡浓度的RA(0.25,0.5,1.0μmol·L^(-1))能明显抑制HCT-116细胞的迁移与侵袭活性,可能与通过下调HCT-116细胞MMP-2、MMP-9m RNA及蛋白表达有关。 展开更多
关键词 竹节香附素A 结肠癌细胞hct-116 细胞凋亡 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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结肠癌组织中SLP-2蛋白的表达及SLP-2基因对HCT-116细胞侵袭、迁移力的影响 被引量:2
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作者 张剑 吴敏 +7 位作者 张自森 王利娟 张红巧 师广勇 巴楠 闫琳 郑晓珂 邢鑫 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第4期513-516,共4页
目的:探讨结肠癌组织中SLP-2蛋白的表达情况及SLP-2基因对结肠癌细胞HCT-116侵袭、迁移力的影响。方法:采用免疫组化法检测50对结肠癌及正常结肠黏膜组织中SLP-2蛋白的表达,分析患者临床病理特征与SLP-2蛋白表达的关系。设计合成SLP-2 s... 目的:探讨结肠癌组织中SLP-2蛋白的表达情况及SLP-2基因对结肠癌细胞HCT-116侵袭、迁移力的影响。方法:采用免疫组化法检测50对结肠癌及正常结肠黏膜组织中SLP-2蛋白的表达,分析患者临床病理特征与SLP-2蛋白表达的关系。设计合成SLP-2 siRNA,转染结肠癌HCT-116细胞,Transwell法及Matrigel基质实验检测转染SLP-2 siRNA对HCT-116细胞侵袭、迁移力的影响,RT-PCR及Western blot检测转染48 h后HCT-116细胞中SLP-2 mRNA及蛋白的表达情况。结果:正常结肠及结肠癌组织中SLP-2蛋白的高表达率比较,差异有统计学意义(χ2配对=23.188,P<0.001)。SLP-2蛋白表达与结肠癌TNM分期(χ2=10.474,P=0.001)及淋巴结转移(χ2=19.647,P<0.001)有关。SLP-2 siRNA转染组细胞迁移力、侵袭力、SLP-2 mRNA及蛋白表达水平均低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05)。结论:结肠癌组织中SLP-2高表达;SLP-2可能通过促进结肠癌细胞的侵袭、迁移能力,参与结肠癌的转移。 展开更多
关键词 结肠癌 SLP-2 SIRNA hct-116细胞
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低氧环境地高辛通过抑制HIF-1α下调结肠癌HCT 116细胞VEGF表达的实验研究 被引量:3
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作者 尹鹏 胡君 +5 位作者 霍中华 储著凌 侯乐伟 吕盛 栾荣刚 胡国强 《西部医学》 2015年第3期335-337,343,共4页
目的研究低氧环境下地高辛能否通过抑制HIF-1α下调结肠癌HCT 116细胞VEGF的表达。方法将HCT 116细胞分为常氧组(Normoxia组)、低氧组(Hypoxia组)和低氧+地高辛组(Hypoxia+Digoxin组)。在低氧环境下对结肠癌HCT 116细胞使用地高辛干预,... 目的研究低氧环境下地高辛能否通过抑制HIF-1α下调结肠癌HCT 116细胞VEGF的表达。方法将HCT 116细胞分为常氧组(Normoxia组)、低氧组(Hypoxia组)和低氧+地高辛组(Hypoxia+Digoxin组)。在低氧环境下对结肠癌HCT 116细胞使用地高辛干预,在3个不同时间点(0、24和72h)使用MTT法对HCT 116细胞活性进行检测;同时在干预24小时后分别采用RT-PCR法和western blotting法对HCT 116细胞VEGF和HIF-1α的mRNA和蛋白水平进行检测。结果低氧环境下HCT 116细胞活性呈时间依赖性下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);且在各时间点低氧+地高辛组细胞活性较低氧组细胞下降更加明显,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在干预24小时后,HCT 116细胞VEGF和HIF-1αmRNA和蛋白的表达水平较未干预细胞明显降低(均P<0.05)。结论在低氧环境下,地高辛可以通过抑制HIF-1α的合成下调结肠癌HCT 116细胞VEGF的表达,抑制肿瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 地高辛 hct 116细胞 缺氧诱导因子-1α 血管生成因子
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吴茱萸碱抑制荷瘤小鼠结肠癌HCT-116细胞增殖 被引量:2
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作者 石雪萍 李晓朋 +5 位作者 熊伟 李海星 郭珮 王芬 陈地龙 李静 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第10期1373-1377,共5页
目的研究吴茱萸碱(Evo)对人结肠癌荷瘤Balb/c裸鼠HCT-116细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法用HCT-116细胞接种到4周龄的Balb/c裸小鼠右下腋部,待荷瘤直径约0.5 cm后用灌胃针灌入Evo(3 mg/kg)进行治疗,每3 d测瘤体直径及小鼠质量,... 目的研究吴茱萸碱(Evo)对人结肠癌荷瘤Balb/c裸鼠HCT-116细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法用HCT-116细胞接种到4周龄的Balb/c裸小鼠右下腋部,待荷瘤直径约0.5 cm后用灌胃针灌入Evo(3 mg/kg)进行治疗,每3 d测瘤体直径及小鼠质量,绘制质量曲线及瘤体体积曲线,灌喂22 d后处死,取瘤体组织;HE染色法验证Balb/c裸鼠瘤体的成瘤情况;免疫组化检测瘤体HDAC3、NF-κB、p53的表达;Westernblot检测瘤体组蛋白去乙酰化酶HDAC3、NF-κB、p53的变化。结果 Evo灌喂组小鼠的瘤体体积和瘤体质量明显小于对照组,质量较对照组重;Evo灌喂组肿瘤细胞皱缩,胞核深染,较对照组核分裂像明显减少;经吴茱萸碱处理的裸鼠的瘤体中NF-κB、p53表达量较对照组增高,HDAC3则反之(P<0.05)。结论吴茱萸碱可以通过下调HDAC3来影响NF-κB及p53蛋白的表达,抑制人结肠细胞系HCT-116的体内增殖。 展开更多
关键词 吴茱萸碱 hct-116细胞系 BALB/C裸鼠 增殖
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阿托伐他汀对人NK细胞杀伤HCT-116细胞的影响及其机制研究 被引量:2
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作者 姬会春 周燏 +3 位作者 刘军权 陈复兴 李昳 费素娟 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2016年第3期304-307,共4页
目的探讨阿托伐他汀对人自然杀伤细胞(natural killer,NK)杀伤HCT-116细胞的影响及其机制。方法 CCK-8法测定不同浓度的阿托伐他汀对HCT-116细胞生长抑制率的影响。自动生化分析仪测NK细胞对HCT-116细胞的杀伤活性;流式细胞仪(FCM)... 目的探讨阿托伐他汀对人自然杀伤细胞(natural killer,NK)杀伤HCT-116细胞的影响及其机制。方法 CCK-8法测定不同浓度的阿托伐他汀对HCT-116细胞生长抑制率的影响。自动生化分析仪测NK细胞对HCT-116细胞的杀伤活性;流式细胞仪(FCM)检测HCT-116细胞MICA/B的表达率。结果不同浓度的阿托伐他汀作用于HCT-116细胞48 h后在浓度为5~40μmol/L及作用96 h后在浓度为1.25~40μmol/L时,对HCT-116细胞的生长抑制率与对照组相比差异有统计学意义(P〈0.05)。阿托伐他汀浓度相同时,HCT-116细胞的生长抑制率在48 h组与96 h组相比,除5μmol/L浓度组外差异均有统计学意义(P〈0.05)。阿托伐他汀的浓度与HCT-116细胞的生长抑制率呈正相关(r[48 h]=0.13,r[96 h]=0.22,P〈0.05)。NK细胞对HCT-116细胞的杀伤活性在阿托伐他汀浓度为2.5~10μmol/L各组中均显著高于对照组(P〈0.05)。2.5μmol/L浓度组及5μmol/L浓度组,HCT-116细胞MICA/B的表达率与对照组比较显著升高(P〈0.05)。结论阿托伐他汀呈剂量依赖性抑制HCT-116细胞的生长,且延长作用时间可以增强阿托伐他汀对HCT-116细胞生长的抑制作用;还能够增强NK细胞对HCT-116杀伤活性;以及上调HCT-116细胞MICA/B的表达率,提高其免疫原性。 展开更多
关键词 阿托伐他汀 hct-116细胞 自然杀伤细胞 MICA/B
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阿西替尼对结肠癌HCT-116细胞增殖、凋亡及自噬的影响研究 被引量:1
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作者 潘晟 梅文超 +4 位作者 黄林飞 夏甘霖 陶艳娥 徐竞 李俊 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2020年第5期407-411,共5页
目的研究阿西替尼(AXI)对结肠癌HCT-116细胞增殖、凋亡及自噬的影响。方法体外培养结肠癌HCT-116细胞,分为AXI 1组(15.0μmol/L)、AXI 2组(30.0μmol/L)、AXI 3组(60.0μmol/L)及无任何添加的正常对照组(NC组)。四甲基偶氮唑蓝法(MTT)... 目的研究阿西替尼(AXI)对结肠癌HCT-116细胞增殖、凋亡及自噬的影响。方法体外培养结肠癌HCT-116细胞,分为AXI 1组(15.0μmol/L)、AXI 2组(30.0μmol/L)、AXI 3组(60.0μmol/L)及无任何添加的正常对照组(NC组)。四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测各组结肠癌HCT-116细胞增殖情况;AnnexinV-FITC/PI法检测各组结肠癌HCT-116细胞凋亡情况;Western Blot检测结肠癌HCT-116细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ、beclin1,雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路中p-mTOR、p-P70S6K蛋白水平、增殖相关蛋白CyclinD1、c-Myc,以及凋亡相关cleaved-caspase3、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bax蛋白表达水平。结果与NC组比较,AXI 1组和AXI 2组结肠癌HCT-116细胞增殖抑制率、凋亡率、LC3Ⅱ、beclin1、Bax、cleaved-Caspase3蛋白表达水平依次增加(P<0.05),p-mTOR、p-P70S6K、Cyclin D1、c-Myc、Bcl-2蛋白表达水平依次减少(P<0.05)。AXI 2组和AXI 3组结肠癌HCT-116细胞增殖抑制率、凋亡率、LC3Ⅱ、beclin1、p-mTOR、p-P70S6K、CyclinD1、c-Myc、cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论AXI可通过抑制mTOR通路激活,诱导结肠癌HCT-116细胞自噬,抑制其增殖,促进其凋亡,初步揭示了AXI对结肠癌细胞的作用机制,为结肠癌的靶向治疗提供了新思路。 展开更多
关键词 结肠癌 阿西替尼 hct-116细胞 增殖 自噬 凋亡
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姜黄素对结肠癌HCT-116细胞生长的抑制作用 被引量:5
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作者 王倩 赵刚 《湖北中医药大学学报》 2012年第1期18-20,共3页
目的观察姜黄素对人结肠癌HCT-116细胞的生长抑制作用。方法以不同浓度(10-80μmol/L)的姜黄素作用于体外培养的HCT-116细胞48h,利用光镜观察各实验组癌细胞的密度与形态改变;应用MTT方法检测细胞的生长抑制率。结果经过姜黄素48h的处理... 目的观察姜黄素对人结肠癌HCT-116细胞的生长抑制作用。方法以不同浓度(10-80μmol/L)的姜黄素作用于体外培养的HCT-116细胞48h,利用光镜观察各实验组癌细胞的密度与形态改变;应用MTT方法检测细胞的生长抑制率。结果经过姜黄素48h的处理后,HCT-116细胞出现了明显的生长抑制现象,随着姜黄素剂量的增加,贴壁细胞数量减少,死亡脱落细胞增多。20μmol/L、40μmol/L和80μmol/L姜黄素组与阴性对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论姜黄素能显著抑制HCT-116细胞的生长,并呈现剂量依赖关系。 展开更多
关键词 hct-116细胞 姜黄素 生长抑制
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人结肠癌HCT-116细胞传代培养的简易方法 被引量:1
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作者 王倩 徐云丹 赵刚 《亚太传统医药》 2013年第2期35-36,共2页
目的:针对人结肠癌HCT-116细胞在体外培养时常出现部分细胞聚团生长的特性,建立一种简易的细胞传代培养方法———水平震荡法。方法:采用简单高效的水平震荡方法替代胰酶消化法对HCT-116细胞进行传代培养。结果:利用水平震荡方法传代后... 目的:针对人结肠癌HCT-116细胞在体外培养时常出现部分细胞聚团生长的特性,建立一种简易的细胞传代培养方法———水平震荡法。方法:采用简单高效的水平震荡方法替代胰酶消化法对HCT-116细胞进行传代培养。结果:利用水平震荡方法传代后的细胞在新瓶中可以正常贴壁。24h和48h观察到胰酶消化法传代的细胞生长情况与水平震荡法传代的细胞未见明显差异。结论:该方法无需使用胰蛋白酶,避免了胰酶对细胞的损伤作用,而且操作简便,降低了实验成本和污染的风险。水平震荡传代法可以替代胰酶消化法作为HCT-116细胞的简易传代方法。 展开更多
关键词 hct-116细胞 传代培养 水平震荡法
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吴茱萸碱调控人结肠癌HCT-116细胞中JAK2/STAT3信号通路的机制研究 被引量:19
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作者 赵绿翠 廖科 +1 位作者 李科琼 李静 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1394-1398,共5页
目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对人结肠癌HCT-116细胞中JAK2/STAT3信号通路的影响。方法EVO诱导人结肠癌HCT-116细胞2、4、6 h后,Hoechst法检测细胞核凋亡的形态学改变;6μmol·L-1的EVO作用于HCT-116细胞2、4和6 h,不同浓度的A... 目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对人结肠癌HCT-116细胞中JAK2/STAT3信号通路的影响。方法EVO诱导人结肠癌HCT-116细胞2、4、6 h后,Hoechst法检测细胞核凋亡的形态学改变;6μmol·L-1的EVO作用于HCT-116细胞2、4和6 h,不同浓度的AG490作用于HCT-116细胞48 h,6μmol·L-1的EVO和50μmol·L-1的AG490分别诱导HCT-116细胞以及两药联合诱导HCT-116细胞6 h后,运用蛋白质印迹法检测各组细胞中JAK2、pJAK2、STAT3和p-STAT3的蛋白表达量。结果镜下观察EVO诱导后的细胞核浓缩聚集,染色质边缘化,并出现染色质碎裂成块,形成凋亡小体等形态学改变。Western blot结果显示:EVO可以明显下调HCT-116细胞内p-STAT3的表达;AG490可以抑制JAK2/STAT3信号通路的激活;EVO对JAK2/STAT3信号通路中p-STAT3蛋白的表达抑制效果较AG490更明显,且两药联合应用后抑制效果进一步增强。结论EVO对人结肠癌HCT-116细胞的抗肿瘤活性有可能是通过抑制JAK2/STAT3信号通路的激活来发挥的。 展开更多
关键词 吴茱萸碱 hct-116细胞 JAK2/STAT3信号通路 P-STAT3 AG490 抗肿瘤活性
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维药肉豆蔻提取物对人结肠癌HCT-116细胞的抑制作用 被引量:4
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作者 范磊 邓皖利 +1 位作者 张洪平 吕书勤 《现代中西医结合杂志》 CAS 2015年第10期1031-1034,共4页
目的探讨维吾尔药材肉豆蔻乙酸乙酯提取物对人结肠癌HCT-116细胞的生长及侵袭转移的影响。方法取对数生长期人结肠癌HCT-116细胞,实验分为6组,除对照组外,A、B、C、D、E组分别给予31.25,62.5,125,250,500 g/L肉豆蔻乙酸乙酯提取物干预。... 目的探讨维吾尔药材肉豆蔻乙酸乙酯提取物对人结肠癌HCT-116细胞的生长及侵袭转移的影响。方法取对数生长期人结肠癌HCT-116细胞,实验分为6组,除对照组外,A、B、C、D、E组分别给予31.25,62.5,125,250,500 g/L肉豆蔻乙酸乙酯提取物干预。MTT法检测HCT-116细胞增殖情况,流式细胞仪分析HCT-116细胞凋亡情况和细胞周期变化,酶联免疫吸附法检测HCT-116细胞分泌上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9情况。结果与对照组比较,肉豆蔻乙酸乙酯提取物对人结肠癌HCT116细胞的生长具有显著抑制作用,且随肉豆蔻乙酸乙酯提取物浓度的增加,细胞凋亡率逐渐升高;与对照组比较,肉豆蔻乙酸乙酯提取物各组G0/G1期的细胞比例明显增加,G2/M期的细胞比例明显减少,E-cadherin表达水平明显上调,MMP-2及MMP-2表达水平明显降低。结论肉豆蔻乙酸乙酯提取物能显著抑制人结肠癌HCT-116细胞的增殖,促进细胞凋亡,且呈剂量依赖性。该药通过上调E-cadherin、下调MMP-2及MMP-9的表达起到抗侵袭转移作用。 展开更多
关键词 肉豆蔻 hct-116细胞 细胞凋亡 E-CADHERIN MMP-2 MMP-9
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白藜芦醇通过上调SATB2促进HCT 116细胞Bax-Caspase3、9凋亡通路蛋白表达 被引量:4
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作者 都新新 张文琴 +3 位作者 任彩佩 张一楠 孙要军 崔香丽 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期1019-1025,共7页
目的探究白藜芦醇是否通过SATB2调控HCT 116细胞凋亡及其机制。方法用不同浓度白藜芦醇(resveratrol,Res)处理HCT 116细胞24 h,确定最佳Res给药量为8.33μg/mL。HCT 116细胞分为control组、si-SATB2组、si-SATB2+Res组、空质粒组、SATB... 目的探究白藜芦醇是否通过SATB2调控HCT 116细胞凋亡及其机制。方法用不同浓度白藜芦醇(resveratrol,Res)处理HCT 116细胞24 h,确定最佳Res给药量为8.33μg/mL。HCT 116细胞分为control组、si-SATB2组、si-SATB2+Res组、空质粒组、SATB2过表达组、Res组、SATB2过表达+Res组,处理结束后,收集细胞提取总蛋白,Western blot检测SATB2、Bax、Bcl-2,Caspase-3、Caspase-9,Cyt-C蛋白的表达。结果 (1)Res上调SATB2蛋白的表达。(2)抑制SATB2表达、开高Bcl-2/Bax比值,下调Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达;Res可逆转此作用。(3)过表达SATB2降低Bcl-2/Bax比值,上调Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达,Res加强此作用。结论抑制SATB2降低HCT 116细胞凋亡水平,Res能够通过上调SATB2促进HCT 116细胞Bax-Caspase3、9凋亡通路蛋白表达。 展开更多
关键词 白藜芦醇 hct 116细胞 SATB2 细胞凋亡
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奥沙利铂联合NK4基因对大肠癌HCT116细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 祖丹丹 李美宁 +3 位作者 张悦红 张栋 弓韬 常冰梅 《中国医药指南》 2013年第28期317-318,321,共3页
目的观察奥沙利铂联合NK4基因对HCT116细胞增殖、凋亡的影响。方法使用Effectene转染试剂,将pcDNA3.1-NK4质粒转染至大肠癌HCT116细胞中,常规条件下培养24h。不同奥沙利铂药物浓度处理HCT116细胞,CCK-8法测定细胞的OD值,分析在不同奥沙... 目的观察奥沙利铂联合NK4基因对HCT116细胞增殖、凋亡的影响。方法使用Effectene转染试剂,将pcDNA3.1-NK4质粒转染至大肠癌HCT116细胞中,常规条件下培养24h。不同奥沙利铂药物浓度处理HCT116细胞,CCK-8法测定细胞的OD值,分析在不同奥沙利铂药物浓度下对HCT116细胞毒性的影响;检测奥沙利铂最低药物浓度联合NK4基因对HCT116细胞凋亡的影响。结果当奥沙利铂药物浓度为12.5μg/mL时,显著抑制细胞的增殖;奥沙利铂(12.5μg/mL)联合NK4基因处理组与奥沙利铂处理组比较,显著诱导HCT116细胞的凋亡,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论与奥沙利铂组相比,奥沙利铂联合NK4基因后HCT116细胞的凋亡率显著升高。 展开更多
关键词 奥沙利铂 NK4基因 hct116细胞 凋亡
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辣木籽异硫氰酸酯衍生物抑制结肠癌HCT-116细胞的生长和迁移 被引量:1
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作者 杨茗茸 杨扬 +4 位作者 彭麟杰 毛家英 盛军 解静 田洋 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2021年第10期46-54,共9页
该研究旨在探讨辣木籽异硫氰酸酯衍生物(MITC-21)抑制结肠癌HCT-116细胞生长和迁移的作用。采用MTT实验、克隆形成实验、流式细胞术、细胞划痕实验和蛋白印迹法,检测经不同浓度MITC-21处理的HCT-116细胞增殖、凋亡、迁移和相关蛋白表达... 该研究旨在探讨辣木籽异硫氰酸酯衍生物(MITC-21)抑制结肠癌HCT-116细胞生长和迁移的作用。采用MTT实验、克隆形成实验、流式细胞术、细胞划痕实验和蛋白印迹法,检测经不同浓度MITC-21处理的HCT-116细胞增殖、凋亡、迁移和相关蛋白表达水平的变化情况。结果表明,MITC-21呈剂量依赖性和时间依赖性的方式显著降低HCT-116细胞的存活率,半致死剂量分别为6.79μmol/L(24 h)、3.71μmol/L(48 h)和1.13μmol/L(72 h);克隆形成实验表明,MITC-21(2和4μmol/L)显著抑制HCT-116细胞克隆形成,处理48 h后克隆形成率从100%降低到68.36%(p<0.05)和49.51%(p<0.01);当MITC-21浓度为4μmol/L时HCT-116发生明显的细胞形态变化;流式细胞术分析得出,HCT-116细胞的凋亡率随着MITC-21浓度和处理时间的增加而上升,处理48 h后,细胞凋亡率从14.97%增加到21.60%(p<0.001)和22.78%(p<0.001);细胞划痕实验表明,MITC-21显著降低细胞迁移率,迁移率从61.53%降低到32.89%(p<0.01)和24.30%(p<0.001);蛋白表达水平检测表明,MITC-21(4μmol/L)显著增加凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比率(p<0.01),降低迁移相关蛋白MMP2表达水平(p<0.05)。MITC-21能够抑制HCT-116细胞增殖、诱导细胞凋亡和抑制细胞迁移。 展开更多
关键词 辣木籽异硫氰酸酯衍生物 hct-116细胞 细胞生长 细胞迁移
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过表达核苷二磷酸X水解酶21(NUDT21)通过阻断P53/CDK2/Rb通路抑制HCT-116结肠癌细胞的增殖 被引量:2
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作者 罗珍 豆梁丁 +8 位作者 王蕾 刘榕 罗光平 林默 邓子峰 沈颖 傅芷宁 彭书海 张永兴 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期507-512,共6页
目的探讨过表达核苷二磷酸X水解酶21(NUDT21)对HCT-116结肠癌细胞增殖的影响及可能的机制。方法Gibson组装法构建NUDT21过表达质粒。克隆形成实验、CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot法检测P53、细胞周... 目的探讨过表达核苷二磷酸X水解酶21(NUDT21)对HCT-116结肠癌细胞增殖的影响及可能的机制。方法Gibson组装法构建NUDT21过表达质粒。克隆形成实验、CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot法检测P53、细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)的蛋白水平,以及第780位丝氨酸磷酸化的视网膜母细胞瘤蛋白(p-Rb-Ser780)和p-Rb-Ser608的蛋白水平。结果测序结果提示NUDT21过表达载体构建成功,HCT-116细胞转染NUDT21过表达质粒后,其mRNA和蛋白水平表达量明显升高。过表达NUDT21抑制结肠癌HCT-116细胞增殖,细胞周期阻滞于G0/G1期;过表达NUDT21后,CDK2、p-Rb-Ser608与p-Rb-Ser780蛋白表达量降低,P53蛋白水平增高。结论过表达NUDT21通过阻断P53/CDK2/Rb信号通路抑制结肠癌HCT-116细胞的增殖。 展开更多
关键词 核苷二磷酸X水解酶21(NUDT21) hct-116细胞 细胞增殖 细胞周期
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