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Establishment and evaluation of a mouse model of bronchial asthma with Yin deficiency syndrome 被引量:1
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作者 Zhi-wang WANG Rong-ke LI +3 位作者 Yuan REN Xue-feng LIU Xiao-li CHENG Hai-yan TUO 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2015年第6期556-560,共5页
Objective: To establish and evaluate a mouse model of bronchial asthma with Yin deficiency syndrome. Methods: The mouse model of bronchial asthma with Yin deficiency syndrome was established by the treatment with inje... Objective: To establish and evaluate a mouse model of bronchial asthma with Yin deficiency syndrome. Methods: The mouse model of bronchial asthma with Yin deficiency syndrome was established by the treatment with injecting ovalbumin(OVA) two times to sensitize, inhaling OVA 14 times to stimulate, and using thyroxin through lavage during late stimulation. This model was evaluated through body weight, asthmatic behaviors, respiratory function, autonomous activity, lung pathology, and pulmonary fluid clearance. Results: OVA combined with thyroxin was an appropriate method to induce the mouse model with increased food and water intake, autonomous activity, asthmatic behaviors score, and respiratory rate, decreased body weight, tidal volume, and wet/dry ratio of lung, and changed with pathology of lung tissue. The changes of the above mentioned parameters indicated that the model was the bronchial asthma with Yin deficiency syndrome. Conclusion: The OVA combined with thyroxin is a good pattern to establish a mouse model of bronchial asthma with Yin deficiency syndrome successfully, which can highly simulate the clinical symptoms of this disease. 展开更多
关键词 支气管哮喘 小鼠模型 评价 组织病理学 甲状腺素 卵清蛋白 呼吸功能 呼吸频率
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Inhibition of Bcl-6 Expression Ameliorates Asthmatic Characteristics in Mice
2
作者 Chang-zhi ZHOU Xiong XIONG +8 位作者 Wei-jun TAN Ya-fei WANG Zhen YANG Xue-ying LI Xiu-wen YANG Xiao-fan LIU Sun-feng YU Liang-chao WANG Shuang GENG 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2024年第1期110-120,共11页
Objective The function of Bcl-6 in T follicular helper(Tfh)cell maturation is indispensable,and Tfh cells play a pivotal role in asthma.This study investigated the impact of Bcl-6 on asthmatic traits.Methods The micro... Objective The function of Bcl-6 in T follicular helper(Tfh)cell maturation is indispensable,and Tfh cells play a pivotal role in asthma.This study investigated the impact of Bcl-6 on asthmatic traits.Methods The microscopic pathological alterations,airway resistance(AR),and lung compliance(LC)were determined in asthmatic mice and Bcl-6 interference mice.The surface molecular markers of Tfh cells and the Bcl-6 mRNA and protein expression were determined by flow cytometry,RT-qPCR,and Western blotting,respectively.The relationships between the Tfh cell ratio and the IgE and IgG1 concentrations in peripheral blood mononuclear cells(PBMCs)and bronchoalveolar lavage fluid(BALF)were determined.Results Asthmatic inflammatory changes were observed in the lung tissue and were attenuated by Bcl-6 siRNA and dexamethasone(DXM).Asthmatic mice exhibited an increased AR and a decreased LC,while Bcl-6 siRNA or DXM mitigated these changes.The percentages of Tfh cells and eosinophils were significantly increased in the asthmatic mice,and they significantly decreased after Bcl-6 inhibition or DXM treatment.RT-qPCR and Western blotting analyses revealed that the Bcl-6 expression level in PBMCs was significantly higher in asthmatic mice,and it decreased following Bcl-6 inhibition or DXM treatment.The IgE expression in the serum and BALF and the B cell expression in PBMCs exhibited a similar trend.In asthmatic mice,the ratio of Tfh cells in the peripheral blood showed a strong positive correlation with the IgE levels in the serum and BALF,but not with the IgG1 levels.Conclusion The amelioration of airway inflammation and airway hyper-responsiveness is achieved through Bcl-6 suppression,which effectively hinders Tfh cell differentiation,ultimately resulting in a concurrent reduction in IgE production. 展开更多
关键词 BCL-6 TFH asthma airway hyper-responsiveness mouse model
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鸢尾黄素对哮喘幼鼠气道炎症、气道重塑及HMGB1/TLR4/NF-κB通路的影响
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作者 李月云 王晓芳 +1 位作者 付艳 王艳蕊 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期639-645,共7页
目的 探究鸢尾黄素对哮喘幼鼠气道炎症、气道重塑及高迁移率族蛋白B1 (high mobility group box1 protein,HMGB1)/Toll样受体4 (Toll-like receptor4,TLR4)/核因子κB (nuclear factor-κB,NF-κB)通路的影响。方法 将60只雄性BALB/c幼... 目的 探究鸢尾黄素对哮喘幼鼠气道炎症、气道重塑及高迁移率族蛋白B1 (high mobility group box1 protein,HMGB1)/Toll样受体4 (Toll-like receptor4,TLR4)/核因子κB (nuclear factor-κB,NF-κB)通路的影响。方法 将60只雄性BALB/c幼鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组,以及鸢尾黄素低、中、高剂量组,每组10只。采用腹腔注射致敏剂[卵清蛋白(ovalbumin,OVA) 20μg+氢氧化铝凝胶2 mg]+4%OVA雾化吸入激发建立幼鼠哮喘模型。肺功能检测仪检测幼鼠肺容积(lung volume,LV)、每分钟静息通气量(resting ventilation per minute,VE)及气道反应性(Penh值);苏木精-伊红染色观察并分析气道重塑情况;ELISA法检测肺泡灌洗液中白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor alpha,TNF-α)含量;实时定量逆转录聚合酶链反应及Western blot法检测肺组织中HMGB1/TLR4/NF-κB通路相关mRNA及蛋白表达。结果 与模型组比较,地塞米松组及鸢尾黄素低、中、高剂量组LV、VE均显著升高(P<0.05),其中鸢尾黄素各剂量组随剂量增加LV、VE升高(P<0.05);地塞米松组及鸢尾黄素低、中、高剂量组Penh值、IL-1β、IL-6、TNF-α、气道重塑指标,以及HMGB1、TLR4、NF-κB p65 mRNA和HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达水平均降低(P<0.05),其中鸢尾黄素各剂量组随剂量增加上述指标降低(P<0.05)。与地塞米松组比较,鸢尾黄素低、中剂量组LV、VE均降低(P<0.05),Penh值、IL-1β、IL-6、TNF-α、气道重塑指标,以及HMGB1、TLR4、NF-κB p65 mRNA和HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达水平均升高(P<0.05);鸢尾黄素高剂量组上述指标与地塞米松组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 鸢尾黄素能有效减轻哮喘幼鼠气道炎症,抑制气道重塑,可能与抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路有关。 展开更多
关键词 鸢尾黄素 哮喘 气道炎症 气道重塑 HMGB1/TLR4/NF-κB通路 幼鼠
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柴朴汤对哮喘小鼠支气管上皮细胞炎症因子及HMGB1/TLR4/NF-κB的影响
4
作者 欧阳洁媛 肖琳琳 +4 位作者 刘姿琴 彭果然 薛晓 周春吉 刘鑫 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第3期329-332,共4页
目的探讨柴朴汤对哮喘小鼠支气管上皮细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)及下游炎症介质单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法将小鼠支气管上皮细胞分为对照组(Con组,空白血清... 目的探讨柴朴汤对哮喘小鼠支气管上皮细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)及下游炎症介质单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法将小鼠支气管上皮细胞分为对照组(Con组,空白血清培养)、Model组(哮喘小鼠血清培养)和Chaipu组(柴朴汤药血清培养)。采用qRT-PCR和Western blotting检测小鼠支气管上皮细胞中HMGB1、TLR4、NF-κB、MCP-1、IL-6的mRNA及蛋白表达情况,ELISA法测定细胞培养液中MCP-1和IL-6的水平。结果与Con组相比,Model组小鼠支气管上皮细胞HMGB1、TLR4、NF-κB、MCP-1、IL-6表达均明显升高(P<0.05);Model组细胞培养液中MCP-1、IL-6也显著升高(P<0.05)。与Model组相比,Chaipu组小鼠支气管上皮细胞HMGB1、TLR4、MCP-1、IL-6 mRNA和蛋白表达降低,NF-κB m RNA表达亦降低(P<0.05);Chaipu组细胞培养液中MCP-1、IL-6也显著降低(P<0.05)。结论柴朴汤可下调哮喘血清诱导的炎症因子的表达,可能与其抑制HMGB1/TLR4/NF-κB炎症通路有关。 展开更多
关键词 柴朴汤 炎症因子 HMGB1 TLR4 NF-ΚB 小鼠支气管上皮细胞 哮喘
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灯盏花素调节lncRNA NEAT1/miR-9-5p/SLC26A2轴抑制哮喘模型小鼠气道炎症
5
作者 王香英 魏金凤 +2 位作者 田小辉 盛美玲 许如菊 《浙江中西医结合杂志》 2024年第2期112-117,134,共7页
目的探究灯盏花素通过长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1/microRNA(miR)-9-5p/SLC26A2轴对哮喘模型小鼠气道炎症的抑制作用及分子机制。方法15只6~8周雄性C57BL/6J小鼠,按照随机数字表法分为三组,即对照组、哮喘模型组和灯盏花素组。灯盏花素... 目的探究灯盏花素通过长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1/microRNA(miR)-9-5p/SLC26A2轴对哮喘模型小鼠气道炎症的抑制作用及分子机制。方法15只6~8周雄性C57BL/6J小鼠,按照随机数字表法分为三组,即对照组、哮喘模型组和灯盏花素组。灯盏花素组小鼠在哮喘模型构建完成后每天1次灌胃10 mg/kg灯盏花素,连续7 d;对照组及哮喘模型组则使用等体积0.9%生理盐水进行灌胃处理。采用苏木素-伊红(HE)染色和过碘酸雪夫(PAS)染色对小鼠肺组织进行组织病理学观察。采用Wright-Giemsa对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行染色及细胞学检测。酶联免疫吸附实验检测BALF及血清中炎性因子的水平。荧光原位杂交检测NEAT1的表达。实时荧光定量PCR检测lncRNA-NEAT1、miR-9-5p和SLC26A2 mRNA的表达。蛋白免疫印迹检测SLC26A2的蛋白表达。结果与对照组比较,哮喘模型组小鼠的BALF炎性细胞总数[(68.32±7.25)×10^(4)/mL比(17.71±3.14)×10^(4)/mL,P<0.01]、中性粒细胞数[(5.50±0.58)×10^(4)/mL比(0.72±0.15)×10^(4)/mL,P<0.01]、巨噬细胞数[(13.02±1.04)×10^(4)/mL比(2.70±0.61)×10^(4)/mL,P<0.01]、淋巴细胞数[(23.07±2.90)×10^(4)/mL比(4.13±0.53)×10^(4)/mL,P<0.01]、嗜酸性粒细胞数[(22.13±2.21)×10^(4)/mL比(1.63±0.22)×10^(4)/mL,P<0.01]增加;肺组织炎性细胞浸润水平增加[(2.49±0.25)分比(0.26±0.04)分,P<0.01],PAS评分升高[(2.24±0.16)分比(0.26±0.08)分,P<0.01];血清IgE[(3.52±0.32)IU/mL比(1.02±0.08)IU/mL,P<0.01]及BALF中白细胞介素-5(IL-5)[(154.48±9.27)pg/mL比(54.56±3.35)pg/mL,P<0.01]、白细胞介素-13(IL-13)[(96.86±6.45)pg/mL比(79.18±3.34)pg/mL,P<0.05]、白细胞介素-17(IL-17)[(185.24±7.24)pg/mL比(73.32±4.15)pg/mL,P<0.01]表达上升,干扰素-γ(INF-γ)表达下降[(48.46±3.81)pg/mL比(84.76±2.91)pg/mL,P<0.01]。与哮喘模型组比较,灯盏花素组小鼠BALF炎性细胞总数[(52.10±7.59)×10^(4)/mL比(68.32±7.25)×10^(4)/mL,P<0.05]、中性粒细胞数[(4.21±0.54)×10^(4)/mL比(5.50±0.58)×10^(4)/mL,P<0.05]、巨噬细胞数[(3.61±0.28)×10^(4)/mL比(13.02±1.04)×10^(4)/mL,P<0.01]、淋巴细胞数[(9.52±1.23)×10^(4)/mL比(23.07±2.90)×10^(4)/mL,P<0.01]、嗜酸性粒细胞数[(8.87±1.33)×10^(4)/mL比(22.13±2.21)×10^(4)/mL,P<0.01]降低;肺组织炎性细胞浸润水平[(1.46±0.15)分比(2.49±0.25)分,P<0.01]及PAS评分降低[(0.58±0.07)分比(2.24±0.16)分,P<0.01];血清IgE[(1.83±0.14)IU/mL比(3.52±0.32)IU/mL,P<0.01]及BALF中IL-5[(78.25±4.44)pg/mL比(154.48±9.27)pg/mL,P<0.01]、IL-13[(59.34±5.32)pg/mL比(96.86±6.45)pg/mL,P<0.01]、IL-17[(125.60±5.88)pg/mL比(185.24±7.24)pg/mL,P<0.01]表达下降,INF-γ[(65.48±4.49)pg/mL比(48.46±3.81)pg/mL,P<0.05]表达上升。与对照组比较,哮喘模型组小鼠肺组织中NEAT1[(3.96±0.32)比(1.00±0.15),P<0.01]、SLC26A2相对表达上升[(3.91±0.32)比(1.00±0.08),P<0.01],miR-9-5p相对表达量显著下降[(0.48±0.07)比(1.00±0.09),P<0.01]。与哮喘模型组比较,灯盏花素组小鼠NEAT1[(1.82±0.28)比(3.96±0.32),P<0.01]、SLC26A2相对表达降低[(2.00±0.23)比(3.91±0.32),P<0.01],miR-9-5p相对表达增加[(0.67±0.06)比(0.48±0.07),P<0.05]。结论灯盏花素可能通过调节lncRNA NEAT1/miR-9-5p/SLC26A2轴抑制哮喘小鼠的气道炎症。 展开更多
关键词 小鼠 哮喘 气道炎症 灯盏花素 lncRNA NEAT1 miR-9-5p SLC26A2
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一种改良型小鼠哮喘模型方法的建立及评价 被引量:27
6
作者 田代印 符州 +5 位作者 张燕 王莉佳 迟磊 李睿 戴继宏 罗晓菊 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第4期601-603,共3页
目的:改良建立小鼠哮喘模型的方法并评价其效果.方法:清洁级BALB/c小鼠20只,随机分为模型组和对照组,模型组于第0和14d注射OVA(卵清蛋白)致敏,第21~25天雾化吸入5%OVA激发,对照组用生理盐水替代.结果:模型组在激发过程中出现明显头面... 目的:改良建立小鼠哮喘模型的方法并评价其效果.方法:清洁级BALB/c小鼠20只,随机分为模型组和对照组,模型组于第0和14d注射OVA(卵清蛋白)致敏,第21~25天雾化吸入5%OVA激发,对照组用生理盐水替代.结果:模型组在激发过程中出现明显头面部瘙痒,呼吸加深加快,安静少动,弓背,前肢缩抬等哮喘急性发作表现.BALF(支气管肺泡灌洗液)中白细胞总数及嗜酸性粒细胞分类明显增多.血清及BALF中IL-4明显增高,INF-γ下降,OVA特异性IgE增高.肺组织病理切片见小支气管及伴行血管周围有较多炎症细胞浸润,可见大量嗜酸性粒细胞,杯状细胞增生,平滑肌增厚,部分肺泡间隔融合形成肺气肿.结论:通过对小鼠哮喘模型建立方法的改良,成功复制出小鼠哮喘发作的动物模型. 展开更多
关键词 哮喘 小鼠 动物模型
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不同浓度卵蛋白变应原对小鼠哮喘模型建立的影响 被引量:23
7
作者 湛孝东 姜玉新 +1 位作者 李良怿 李朝品 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第4期16-20,I0004,共6页
目的研究不同浓度卵蛋白(ovalbumin,OVA)变应原对小鼠的哮喘造模影响。方法 96只6~8周龄SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为8组,分别为PBS组(对照组)、10μg组(A组)、20μg组(B组)、50μg组(C组)、100μg组(D组)、200μg组(E组)、500μg组(F... 目的研究不同浓度卵蛋白(ovalbumin,OVA)变应原对小鼠的哮喘造模影响。方法 96只6~8周龄SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为8组,分别为PBS组(对照组)、10μg组(A组)、20μg组(B组)、50μg组(C组)、100μg组(D组)、200μg组(E组)、500μg组(F组)、1000μg组(G组)。A~G组分别用含1%明矾的PBS配制相应浓度的OVA于第0、7和第14天对小鼠进行腹腔注射。于第21~27天连续7 d用含1%的OVA的PBS溶液雾化吸入激发各组小鼠。正常对照组使用PBS溶液致敏和激发。最后一次雾化吸入激发后24 h内,计数各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BLAF)中嗜酸性粒细胞的含量,ELISA法检测IL-4、IL-5的分泌量及其血清IgG2a、IgE抗体的水平;肺组织病理切片观察各组小鼠哮喘模型的效果,评价最优哮喘造模的OVA浓度。结果 A~G组小鼠肺泡灌洗液中IL-4、IL-5含量均高于正常对照组(P<0.01),细胞因子水平随着OVA浓度的增高而逐渐下降;A~G组小鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数均高于正常对照组(P<0.01),从低浓度组至高浓度组嗜酸性粒细胞数从高向低变化;A~G组小鼠血清中总抗体IgE的水平均显著高于正常对照组(P<0.01),且随着OVA浓度的增高IgE水平逐渐下降。血清中IgG2a的水平则随OVA给药浓度的增高而逐渐增高;低浓度OVA致敏组小鼠肺组织标本可观察到明显的炎症浸润性病理表现,而高浓度组肺部组织病理变化不明显。结论低浓度的OVA连续致敏小鼠造成过敏性哮喘病理改变较为明显,随着OVA浓度的增高,造模效果逐渐降低,而高浓度的OVA则会导致模型小鼠发生免疫耐受。 展开更多
关键词 过敏性哮喘 小鼠模型 卵蛋白
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芍药苷对哮喘模型小鼠气道炎症趋化因子及受体的干预作用 被引量:30
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作者 刘家齐 赵正晓 +6 位作者 魏颖 徐飞 张红英 李密辉 陆林玮 魏凯 董竞成 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期460-464,共5页
目的观察芍药苷给药后对小鼠哮喘模型气道炎症趋化因子及受体的影响。方法用卵蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠哮喘模型;ELISA法检测血清IL-6、TNF-α水平及支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中卵蛋白特异性Ig E(OVA-Ig... 目的观察芍药苷给药后对小鼠哮喘模型气道炎症趋化因子及受体的影响。方法用卵蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠哮喘模型;ELISA法检测血清IL-6、TNF-α水平及支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中卵蛋白特异性Ig E(OVA-Ig E)和趋化因子CCL19、CCL21水平;RT-PCR法检测肺组织中趋化因子受体CCR7mRNA表达;Western blot检测肺组织CCR7及核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白表达。结果芍药苷干预组小鼠血清IL-6、TNF-α水平显著下降;BALF中OVA-Ig E和CCL19、CCL21水平显著降低;肺组织CCR7mRNA、CCR7及NF-κB蛋白表达明显减少。结论芍药苷对哮喘模型小鼠气道炎症趋化因子CCL19/CCL21及其受体CCR7具有显著的抑制作用。 展开更多
关键词 支气管哮喘 气道炎症 趋化因子 NF-κB 芍药苷 小鼠
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氧化苦参碱对哮喘小鼠的抗炎作用及对ICAM-1 mRNA表达的影响 被引量:14
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作者 焦霞 沈其昀 +2 位作者 王利民 许以平 张黎明 《首都医科大学学报》 CAS 2006年第1期28-31,共4页
目的探讨氧化苦参碱治疗哮喘的抗炎作用机制及其对细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA表达的影响。方法建立小鼠哮喘模型,观察氧化苦参碱对哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液中细胞总数、肺组织病理的影响,并应用半定量反转录-聚合酶链反应法检测肺... 目的探讨氧化苦参碱治疗哮喘的抗炎作用机制及其对细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA表达的影响。方法建立小鼠哮喘模型,观察氧化苦参碱对哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液中细胞总数、肺组织病理的影响,并应用半定量反转录-聚合酶链反应法检测肺组织中ICAM-1 mRNA表达的变化。结果1)氧化苦参碱可显著减轻哮喘小鼠气道及肺组织中炎性细胞的浸润;2)氧化苦参碱显著抑制哮喘小鼠肺组织中ICAM-1 mRNA表达,此作用与其降低气道炎性细胞的浸润有关。结论氧化苦参碱对哮喘小鼠有明显的抗炎及抑制其ICAM-1 mRNA表达的作用。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 哮喘 抗炎 黏附分子
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羌活提取物对哮喘小鼠Thl/Th2细胞平衡的影响及其对p38信号通路的作用 被引量:11
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作者 李良昌 朴红梅 +2 位作者 秦向征 延光海 李光昭 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期819-823,共5页
目的探讨羌活提取物(EN)对哮喘小鼠Thl/Th2细胞平衡的影响,以及p38信号通路在其中的作用。方法 60只雄性清洁级BABL/c小鼠,随机分为6组,每组10只,分别为正常对照组;卵蛋白(OVA)哮喘组;羌活低剂量组;羌活高剂量组、SB203580组和地塞米松... 目的探讨羌活提取物(EN)对哮喘小鼠Thl/Th2细胞平衡的影响,以及p38信号通路在其中的作用。方法 60只雄性清洁级BABL/c小鼠,随机分为6组,每组10只,分别为正常对照组;卵蛋白(OVA)哮喘组;羌活低剂量组;羌活高剂量组、SB203580组和地塞米松组。在末次激发24 h后小鼠肺组织行HE染色。分别用ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13和γ-干扰素(IFN-γ)含量以及Western blotting检测肺组织IL-4、IFN-γ、P38蛋白表达。结果哮喘组小鼠与对照组小鼠相比较,BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平增高,而IFN-γ的表达明显降低(P<0.05),肺部炎症浸润明显(P<0.05);肺组织IL-4和磷酸化P38蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05),而肺组织IFN-γ的表达明显低于对照组(P<0.05)。羌活低、高剂量组、SB203580组和地塞米松组与哮喘模型组相比较,BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13浓度以及肺组织IL-4和磷酸化P38蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);肺部炎症明显减轻(P<0.05);BALF和肺组织中IFN-γ明显升高(P<0.05)。结论羌活提取物具有明显的抗哮喘作用,其机制可能是通过抑制P38信号通路,影响Thl/Th2细胞平衡实现的。 展开更多
关键词 哮喘 羌活 P38丝裂原活化蛋白激酶 酶联免疫吸附法 免疫印迹法 小鼠
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β_2受体下调哮喘模型的构建研究 被引量:7
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作者 刘华 倪松石 +2 位作者 蔡和群 张桦 殷凯生 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS 2010年第2期122-127,共6页
目的构建β2受体(β2R)下调哮喘动物模型,以研究β2R下调及其激素保护作用的机制。方法32只BALB/c小鼠随机分成对照组、哮喘组、β2R下调组和地塞米松组,每组8只。哮喘组、β2R下调组和地塞米松组分别于实验的第0、14和21d腹腔注射卵白... 目的构建β2受体(β2R)下调哮喘动物模型,以研究β2R下调及其激素保护作用的机制。方法32只BALB/c小鼠随机分成对照组、哮喘组、β2R下调组和地塞米松组,每组8只。哮喘组、β2R下调组和地塞米松组分别于实验的第0、14和21d腹腔注射卵白蛋白(OVA)和氢氧化铝的混悬液200μL,第28d开始连续1周(30min/d)雾化吸入1%OVA(W/V)溶液;β2R下调组和地塞米松组在最后1周每天雾化吸入OVA之前腹腔注射60μg沙丁胺醇及雾化吸入0.01%沙丁胺醇30min;地塞米松组同时予以腹腔注射地塞米松5mg·kg-1.d-1,连续7d。对照组腹腔注射等量的磷酸盐缓冲液(PBS),以PBS雾化吸入。用体积描记箱测定各组小鼠气道阻力。测定BALF中白细胞总数和分类计数。ELISA法检测BALF中IL-4、IFN-γ以及血清总IgE浓度。提取小鼠肺组织总蛋白,免疫印迹实验测定β2R总量,放射配基结合实验测定β2膜受体数量。结果哮喘组、β2R下调组与对照组、地塞米松组比较,高剂量乙酰胆碱激发下的气道阻力明显增高(P<0.01),BALF中嗜酸粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞明显增多(P<0.01),BALF中IL-4和血清总IgE水平显著增高(P<0.01),BALF中IFN-γ水平显著降低(P<0.01)。β2R下调组肺组织β2R总量和β2膜受体数量均显著低于其余三组(P<0.01),对照组、哮喘组、地塞米松组之间无显著差异。结论在传统的OVA致敏激发哮喘动物模型基础上,采用腹腔注射结合雾化吸入沙丁胺醇的方法成功构建了β2R下调的哮喘动物模型。地塞米松对β2R下调具有保护作用。 展开更多
关键词 哮喘 小鼠 动物模型 Β2受体 下调
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重度哮喘小鼠模型的建立 被引量:17
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作者 蒋雄斌 朱毅 殷凯生 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期733-736,F0003,共5页
目的评价用呼吸道合胞病毒(RSV)诱导致敏小鼠建立重度哮喘模型的方法。方法采用随机数字表法将30只Balb/C小鼠分为3组:磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、卵白蛋白(OVA)组和OVA/RSV组。采用OVA腹腔注射致敏、结合OVA持续雾化吸入及RSV(1.0×... 目的评价用呼吸道合胞病毒(RSV)诱导致敏小鼠建立重度哮喘模型的方法。方法采用随机数字表法将30只Balb/C小鼠分为3组:磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、卵白蛋白(OVA)组和OVA/RSV组。采用OVA腹腔注射致敏、结合OVA持续雾化吸入及RSV(1.0×109pfu/L,50μl)多次滴鼻激发的方法复制重度哮喘动物模型。观察小鼠哮喘发作症状;用动物体描箱法测定肺功能变化,包括用力最大呼气流速(PEF)、第0.4秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV0.4/FVC)及乙酰胆碱(Ach)激发条件下气道反应性以肺阻力(RL)表示;苏木素-伊红(HE)、过碘酸-希夫(PAS)、Masson染色观察动物肺组织大体变化、炎性细胞浸润、杯状细胞增生、黏液分泌及气道重塑变化,同时测定气道壁内径/外径比值及气道平滑肌层、网状基底膜层厚度。结果1以5.0、15.0和45.0g/LAch激发时,OVA组和OVA/RSV组RL、PEF和FEV0.4/FVC均较对照组差异有显著性(P均<0.01);与OVA组比较,OVA/RSV组小鼠喘息症状加重,RL明显升高,而PEF和FEV0.4/FVC则均明显下降(P均<0.01);气道黏膜下淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞浸润明显加重,气道黏膜上皮增生、黏液分泌及气道周围胶原沉积增加。2OVA/RSV组气道壁内径/外径比值、气道平滑肌层和网状基底膜层厚度分别为0.56±0.03、(45.12±2.08)μm和(36.15±1.88)μm,OVA组分别为0.75±0.06、(24.63±0.94)μm和(21.68±1.13)μm,两组间及两组与对照组比较差异均有显著性(P均<0.01)。结论用RSV诱导致敏小鼠建立重度哮喘模型是有效的方法。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 哮喘 重度 动物模型 小鼠
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哮喘小鼠肺内及内脏感觉传入系统SH2-Bβ的表达 被引量:9
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作者 齐金萍 曹德寿 +2 位作者 刘晓湘 张国斌 方秀斌 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期195-198,共4页
目的研究SH2-Bβ在哮喘小鼠肺及内脏感觉传入系统(C7~T5脊神经节及对应的脊髓后角)的表达,探讨SH2-Bβ在哮喘发病中的作用.方法 BALB/c小鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组,每组15只.利用免疫组织化学方法测定两组小鼠肺... 目的研究SH2-Bβ在哮喘小鼠肺及内脏感觉传入系统(C7~T5脊神经节及对应的脊髓后角)的表达,探讨SH2-Bβ在哮喘发病中的作用.方法 BALB/c小鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组,每组15只.利用免疫组织化学方法测定两组小鼠肺、C7~T5脊神经节及对应的脊髓后角SH2-Bβ的免疫反应变化;用免疫印迹法(Western blotting)检测肺及C7~T5节段脊髓SH2-Bβ及神经生长因子(NGF)的免疫反应变化;Metamoph图像分析系统对结果进行分析.结果免疫组织化学结果显示哮喘小鼠肺、C7~T5节段脊神经节及对应的脊髓后角SH2-Bβ免疫阳性产物平均光密度值分别为0.806±0.023、0.766±0.018、0.547±0.014,明显高于对照组(0.243±0.018、0.131±0.011、0.215±0.029)(P<0.01).Western blotting显示SH2-Bβ及NGF在哮喘小鼠的C7~T5节段脊髓及肺内表达明显强于对照组;正常对照组脊髓及肺内的平均相对光密度值分别为0.346±0.017和0.512±0.018,哮喘组为0.738±0.021和1.526±0.022.NGF在正常对照组脊髓及肺内的平均相对光密度值分别为0.357±0.021和0.734±0.013,哮喘组为1.445±0.015和1.265±0.018;且SH2-Bβ与NGF光密度值呈正相关(r=0.651,P<0.01).结论结果提示,SH2-Bβ在哮喘小鼠肺、C7~T5节段脊神经节及对应的脊髓后角过表达,可能是NGF参与哮喘发病的重要信号分子. 展开更多
关键词 SH2-BΒ 脊神经节 脊髓 哮喘 免疫组织化学法 免疫印迹法 小鼠
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小鼠哮喘模型的建立及其相关机理初步研究 被引量:13
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作者 黄莉 胡玉敏 +2 位作者 陈煦艳 施勤 季伟 《实验动物与比较医学》 CAS 2005年第3期140-142,146,192,共5页
目的通过制备BALB/c小鼠过敏性哮喘模型,研究共刺激分子OX40在哮喘中的表达。方法腹腔注射卵蛋白致敏小鼠,两周后雾化吸入卵蛋白激发哮喘发作,以生理盐水腹腔注射及雾化吸入为空白对照。比较支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及嗜酸性... 目的通过制备BALB/c小鼠过敏性哮喘模型,研究共刺激分子OX40在哮喘中的表达。方法腹腔注射卵蛋白致敏小鼠,两周后雾化吸入卵蛋白激发哮喘发作,以生理盐水腹腔注射及雾化吸入为空白对照。比较支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及嗜酸性粒细胞和淋巴细胞数百分数;肺组织HE及PAS染色以确定动物造模是否能模拟哮喘的病理状态;肺组织冰冻切片行免疫组化检测哮喘小鼠肺组织OX40的表达情况。结果卵蛋白激发后,小鼠的支气管肺泡灌洗液中的细胞总数及嗜酸性粒细胞和淋巴细胞百分数较对照组增高,且差异有统计学意义,哮喘小鼠肺组织中OX40的表达明显增多。结论 BALB/c小鼠是制备过敏性哮喘的理想模型,哮喘时小鼠肺组织中OX40的表达明显增多。 展开更多
关键词 小鼠 过敏性哮喘 模型 OX40
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皮下注射大剂量卵白蛋白诱导小鼠哮喘免疫耐受模型的建立及机制初步研究 被引量:4
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作者 胡琦 钟世民 +4 位作者 汪金玉 范文婷 曾靖 吴雪婷 廖伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1404-1409,共6页
目的腹部皮下注射大剂量卵白蛋白(ovalbumin,OVA)建立小鼠哮喘免疫耐受模型并对机制进行初步研究。方法选择BALB/c小鼠18只为建模对象,按随机数字表法分为3组:哮喘免疫耐受模型组、哮喘对照组、正常对照组,每组6只。哮喘免疫耐受模... 目的腹部皮下注射大剂量卵白蛋白(ovalbumin,OVA)建立小鼠哮喘免疫耐受模型并对机制进行初步研究。方法选择BALB/c小鼠18只为建模对象,按随机数字表法分为3组:哮喘免疫耐受模型组、哮喘对照组、正常对照组,每组6只。哮喘免疫耐受模型组予10μg OVA于0、7 d腹腔注射致敏,21~25 d持续5 d予1 mg OVA腹部皮下注射诱导免疫耐受,35、36、37 d予1%OVA雾化激发;哮喘对照组除了省去21~25 d OVA皮下注射诱导免疫耐受外,其余同哮喘免疫耐受模型组;正常对照组使用等量生理盐水致敏及激发。末次激发24 h内检测气道反应性,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)计数细胞总数及细胞分类计数,ELISA法检测血清OVA特异性Ig E、BALF中IL-4、IFN-γ、IL-10的表达,HE染色观察肺组织病理改变,流式细胞仪检测各组小鼠外周血Treg细胞占CD4+T淋巴细胞百分率情况。结果哮喘免疫耐受模型组气道反应性、BALF中嗜酸性粒细胞计数、IL-4水平及血清OVA特异性Ig E水平明显低于哮喘对照组,差异有统计学意义(P〈0.05);BALF中IL-10明显高于哮喘对照组(P〈0.05);而BALF中IFN-γ水平与哮喘对照组差异无统计学意义;同时HE染色发现哮喘免疫耐受模型组肺组织炎症较哮喘对照组明显减轻;流式细胞技术检测发现外周血Treg细胞百分比明显高于哮喘对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论予致敏小鼠腹部皮下注射大剂量OVA可成功诱导小鼠哮喘免疫耐受形成,Treg及免疫抑制因子IL-10参与了免疫耐受的形成。 展开更多
关键词 卵白蛋白 小鼠模型 支气管哮喘 免疫耐受
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抗原特异性IgG在支气管哮喘中作用的初步研究 被引量:4
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作者 唐艳 胡素贤 +1 位作者 黄瑾 林树青 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期579-581,共3页
目的 :探讨抗原特异性IgG在支气管哮喘免疫学发病机制中的作用。方法 :复制采用通气功能作为判定指标的小鼠实验性支气管哮喘模型 ,用间接ELISA方法检测哮喘小鼠血清中特异性IgG、IgE ,通过IgG与通气功能指标—气道阻力等的相关性检验 ... 目的 :探讨抗原特异性IgG在支气管哮喘免疫学发病机制中的作用。方法 :复制采用通气功能作为判定指标的小鼠实验性支气管哮喘模型 ,用间接ELISA方法检测哮喘小鼠血清中特异性IgG、IgE ,通过IgG与通气功能指标—气道阻力等的相关性检验 ,初步分析IgG在支气管哮喘中的作用。结果 :支气管哮喘小鼠血清中特异性IgG增高 (t=4 5 37,P <0 0 5 ) ,IgG与气道阻力呈负相关 (r =- 0 70 8,0 0 2 <P <0 0 5 ) ,与IgE虽无明显相关 ,但有负相关倾向 (r =- 0 4 5 2 ,0 10 <P <0 2 0 )。结论 :初步分析认为抗原特异性IgG对支气管哮喘发作起抑制作用。 展开更多
关键词 抗原特异性IgG 支气管哮喘 作用 小鼠 肺功能 免疫学发病机制
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昆布多糖对哮喘小鼠呼吸道炎性反应的影响 被引量:5
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作者 曲政海 谢宁 +1 位作者 刘小梅 林荣军 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期274-276,共3页
目的探讨海洋药物昆布多糖对哮喘小鼠呼吸道炎性反应的影响。方法SPF级昆明系小鼠32只随机分为阳性对照组、布地奈德组、昆布多糖组和阴性对照组,每组8只,通过长期反复吸入卵清蛋白(OVA)建立小鼠哮喘模型。布地奈德组自第14天起,... 目的探讨海洋药物昆布多糖对哮喘小鼠呼吸道炎性反应的影响。方法SPF级昆明系小鼠32只随机分为阳性对照组、布地奈德组、昆布多糖组和阴性对照组,每组8只,通过长期反复吸入卵清蛋白(OVA)建立小鼠哮喘模型。布地奈德组自第14天起,每天雾化吸入布地奈德混悬液200μg加9g/L盐水共4mL干预;昆布多糖组以昆布多糖50mg/kg灌胃;阳性对照组自第14天起,以9g/L盐水0.3mL灌胃干预;阴性对照组在致敏激发和灌胃干预阶段采用9g/L盐水。所有动物在第42天灌胃雾化24~48h处死。HE染色观察各组呼吸道炎性反应并评分,光镜计数各组支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞数及分类计数,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组小鼠BALF中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平。结果阴性对照组小支气管无炎性细胞浸润;阳性对照组肺组织呈明显炎性浸润,渗出液堵塞呼吸道;布地奈德和昆布多糖组肺组织炎性浸润明显减轻,偶见肺泡内渗出液,小支气管上皮完整。昆布多糖组小鼠BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数、IL-4与阳性对照组比较均有降低(t=5.942,7.089,7.078P。〈0.01),IFN-γ升高(t=6.171P〈0.01),差异有显著性,肺病理评分降低(P〈0.01);与阴性对照组相比,细胞总数、EOS、IL-4均显著升高(t=2.150,3.977,2.593只〈0.05),IFN-γ降低(t=4.116P〈0.01),肺病理评分增高(P〈0.01);与布地奈德组比较,BALF细胞总数、EOS明显升高(t=4.984,6.195Pa〈0.01),IL-4无明显差异(t=1,424P〉0.05),IFN-γ显著降低(t=4.275P〈0.01),肺组织病理评分明显升高(P〈0.01)。结论海洋药物昆布多糖能在一定程度上减轻哮喘小鼠呼吸道炎性反应,可能是一种新的治疗哮喘的辅助药物。 展开更多
关键词 昆布多糖 哮喘 卵清蛋白 小鼠
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哮喘小鼠肺内CGRP免疫反应阳性神经纤维的变化 被引量:8
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作者 楚东岭 宋俊峰 +2 位作者 饶志仁 邱建勇 冯蕾 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第13期1169-1171,共3页
目的 探讨 BAL B/c小鼠哮喘后肺内 CGRP免疫阳性神经纤维分布及形态变化 .方法 成年雄性小鼠随机分为正常组和哮喘组 ,采用免疫组织化学法观察小鼠肺内 CGRP免疫反应神经纤维的变化 .结果 哮喘组肺内 CGRP免疫反应神经纤维数量及分... 目的 探讨 BAL B/c小鼠哮喘后肺内 CGRP免疫阳性神经纤维分布及形态变化 .方法 成年雄性小鼠随机分为正常组和哮喘组 ,采用免疫组织化学法观察小鼠肺内 CGRP免疫反应神经纤维的变化 .结果 哮喘组肺内 CGRP免疫反应神经纤维数量及分布发生了显著变化 ,从肺内支气管到终末细支气管均有较密集的 CGRP免疫反应阳性纤维分布 ,成束走行 ,以平滑肌外层和粘膜下层为主 .此外 ,粘膜表面可见裸露的阳性纤维 .哮喘组与正常对照组比较 CGRP免疫反应阳性纤维的数量显著增加 ( P<0 .0 1) .结论 肺内 CGRP免疫反应神经纤维增生与哮喘发病密切相关 ,并可能是导致哮喘持续和发展的原因之一 . 展开更多
关键词 哮喘 降钙素基因相关肽 神经纤维 免疫组织化学 小鼠
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哮喘易感基因ORMDL3在哮喘小鼠中的表达及地塞米松的干预作用 被引量:3
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作者 蒋莉 金蕊 +3 位作者 李悦 庄丽丽 王全 周国平 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期744-748,共5页
目的:探讨哮喘易感基因ORMDL3在支气管哮喘发病时的表达及地塞米松的干预作用。方法:将30只健康清洁级雌性Balb/c小鼠随机分为3组:对照组、哮喘组(卵蛋白致敏)、地塞米松组(卵蛋白致敏,激发前腹腔注射地塞米松1 mg/kg进行干预),每组10... 目的:探讨哮喘易感基因ORMDL3在支气管哮喘发病时的表达及地塞米松的干预作用。方法:将30只健康清洁级雌性Balb/c小鼠随机分为3组:对照组、哮喘组(卵蛋白致敏)、地塞米松组(卵蛋白致敏,激发前腹腔注射地塞米松1 mg/kg进行干预),每组10只。称量和观察小鼠的体重增长趋势,对小鼠肺组织进行HE染色评价浸润情况,计数3组小鼠的外周血嗜酸性粒细胞,ELISA法检测对比3组小鼠血清白介素4(IL-4)的浓度变化,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测小鼠肺组织ORMDL3 mRNA水平表达。结果:哮喘组小鼠体重增长显著落后于其他两组(P<0.05),地塞米松干预后能缓解生长迟滞,但仍低于对照组(P<0.05)。病理组织学显示哮喘组小鼠肺组织见大量嗜酸性粒细胞浸润,黏膜下层和平滑肌增厚,管腔狭窄,地塞米松组小鼠肺组织改变较哮喘组为轻。哮喘组外周血嗜酸性粒细胞计数显著高于对照组和地塞米松组(P<0.05),地塞米松组计数高于对照组(P<0.05)。哮喘组小鼠的IL-4水平显著高于对照组(P<0.05),经地塞米松干预后IL-4水平显著降低(P<0.05),但仍高于对照组。哮喘组小鼠ORMDL3 mRNA的表达水平较对照组显著升高,地塞米松组小鼠ORMDL3 mRNA水平较哮喘组下降,但未达统计学意义(P>0.05)。结论:卵清蛋白小鼠哮喘模型中ORMDL3的mRNA表达显著增高,地塞米松可下调ORMDL3的表达,但未达到统计学意义,其中的机制有待进一步的深入研究。 展开更多
关键词 哮喘 ORMDL3 地塞米松 小鼠
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芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的作用研究 被引量:6
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作者 运晨霞 杜军 +2 位作者 兰太进 邓家刚 郭宏伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1314-1319,共6页
目的探讨芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的作用及分子机制。方法运用OVA建立过敏性哮喘小鼠模型,观察小鼠哮喘发作时表现及给药1 h后小鼠自主活动变化;观察外周血白细胞分类并计数;HE染色观察肺组织炎症细胞浸润;ELISA法检测小鼠血清中... 目的探讨芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的作用及分子机制。方法运用OVA建立过敏性哮喘小鼠模型,观察小鼠哮喘发作时表现及给药1 h后小鼠自主活动变化;观察外周血白细胞分类并计数;HE染色观察肺组织炎症细胞浸润;ELISA法检测小鼠血清中OVA-sIgE和c AMP的含量;RT-PCR法检测小鼠肺组织中IFN-γ、IL-4、IL-5的mRNA表达。结果联合给药组和芒果苷组可明显减少由麻黄碱引起的小鼠自主活动力增强表现;各治疗组均可明显减轻小鼠哮喘发作表现,改善肺组织的病理学改变,减轻气道炎症,联合给药组效果优于芒果苷组;各治疗组均能明显减少全血中白细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)比例;降低血清中OVA-sIgE含量,联合给药组作用优于芒果苷组;麻黄碱组和联合给药组可升高血清中cAMP含量;联合给药组可降低肺组织中Th2型细胞因子IL-4和IL-5 mRNA表达水平,同时上调Th1型细胞因子IFN-γmRNA表达水平。结论联合用药组平喘效果优于芒果苷组,并能减轻单用麻黄碱所引起的不良反应。其作用机制可能与调节Th1/Th2型细胞因子的失衡及升高cAMP含量相关。 展开更多
关键词 哮喘 小鼠 芒果苷 麻黄碱 联合用药 分子机制
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