体外评估hDPCs-PRF复合体内hDPCs的迁移行为

目的:在前期成功构建人牙髓细胞(hDPCs)—富血小板纤维蛋白(PRF)复合体基础上,观察hDPCs在复合体中的迁移能力。方法:采用组织块法分离培养hDPCs,制备hDPCs-PRF复合体,培养7 d、14 d、21 d后行苏木精—伊红(HE)染色,观察hDPCs的形态及迁移行为。结果:初期hDPCs-PRF复合体中,白细胞、牙髓细胞主要存在于白膜层中;随着培养时间的延长,白膜层逐渐溶解消失,白细胞及牙髓细胞沿着复合体边缘游走,hDPCs由原来的椭圆形变成长梭形。培养21 d后,显微镜下可见hDPCs-PRF复合体培养基中大量hDPCs的存在,大部分细胞生长状况良好。结论:hDPC-PRF复合体可缓慢降解并同步释放复合体内的牙髓细胞;hDPCs-PRF复合体中释放的牙髓细胞仍具有继续增殖分化的潜力。

HDPC攻略 完美建议

注：本章献给那些追求完美的用户，前提是你们的钱包够鼓。其他的朋友，请把本文作为消遣来看看吧。

HDPC攻略 快乐聆听

AC3音频格式定义了5个普通声道和1个重低音声道，也就是说需要六组扬声器才能营造出完整的声场定位来(DTS更是要求最高7．1，即八组扬声器)!就像视频需要合适的显卡才能得到最动人的画面一样，只有配备了合适的声卡才能得到最动听的声音。

HDPC攻略 视觉诱惑

也许你要问，什么是HDPC？众所周知．高清的英文名是High Delinision TV简称HDTV。笔者忧化普通配置的电脑．让其能济运行HDTV片源．姑且将其称之为HDPC。不知这样的比喻可形象否？

透明质酸锌的抗炎和控油功效

透明质酸锌(Zinc hyaluronate,HA-Zn)是一种新型的透明质酸衍生物原料,具有促进创伤愈合、抗微生物、抗氧化等功效。本文使用2种细胞人皮脂腺细胞SZ95和人真皮乳头细胞HDPC,通过体外实验证明了透明质酸锌具有抗炎和控油的功效,是一种有潜力的皮肤护理活性成分。在二氢睾酮DHT刺激模型实验中,HA-Zn对DHT刺激炎症因子IL-8、IL-6的释放具有显著抑制效果,抑制率能达到55.5%、32.8%。HA-Zn对SZ95细胞脂质分泌的抑制率能达到31%。

神经生长因子对人牙髓细胞增殖与分化作用的研究

目的研究神经生长因子对体外培养的人牙髓细胞增殖和分化作用的影响.方法组织块法行人牙髓细胞的原代培养后,采用四唑盐比色法和酶动力学方法,测定不同浓度(1、10、100 U/mL)的神经生长因子对体外培养的第5～8代人牙髓细胞增殖及碱性磷酸酶活性的作用.结果与对照组相比,10 U/mL的神经生长因子可显著促进人牙髓细胞的增殖(P＜0.05);100 U/mL的神经生长因子可显著促进碱性磷酸酶的活性(P＜0.01).结论不同浓度的神经生长因子可显著促进人牙髓细胞的增殖与分化.

双向电泳分析重组人白细胞介素-1β对人牙髓细胞的影响

目的:观察rhIL-1β对培养的HDPCs产生蛋白质的影响,揭示rhIL-1β与牙髓炎的关系。方法:在HD-PCs的培养液中加入rhIL-1β,用2-DE分离HDPCs全蛋白,获得对照组和诱导组HDPCs蛋白质图谱,ImageMaster2DElit 5.0软件分析确认差异表达蛋白。结果:比较对照组和诱导组蛋白质图谱,发现了39个蛋白质点差异明显。其中15个蛋白质点在诱导组高表达,新增13个蛋白质点,7个蛋白质点低表达,4个蛋白质点仅在对照组中表达。结论:HDPCs对rhIL-1β的应答反应是一个非常复杂的过程,多种蛋白质分子涉及其中。

基于Raptor-like的喷泉码改进算法

由于5G信道中传输的信息呈爆炸式增长,Raptor在应用层纠错中存在复杂的外码,所以在编码译码时会消耗大量的计算时间。针对上面的问题本文提出了一种基于Raptor-like的喷泉码改进算法。算法通过改变Raptor结构,在去掉了HDPC部分的同时将LDPC转移到GF(256)上,使得本文的算法复杂度得到大幅降低。本文提出的纠删码在性能不弱于Raptor Q的前提下,其译码复杂度远低于Raptor Q。

钙黏蛋白在地塞米松诱导的人牙髓细胞成牙本质向分化中的表达研究

目的:探讨钙黏蛋白(cadherins)在地塞米松诱导的人牙髓细胞(HDPCs)成牙本质向分化过程中的作用。方法:酶消化法分离培养HDPCs,RT-PCR检测N-cadherin、OB-cadherin、R-cadherin在HDPCs中的表达;采用10-7mol/L地塞米松对第3代HDPCs进行处理,qRT-PCR检测成牙本质相关基因碱性磷酸酶(ALP)、牙本质基质蛋白-1(DMP-1)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)和N-cadherin、OB-cadherin、R-cadherin表达水平的变化;茜素红染色观察矿化结节形成情况。结果:N-cadherin、OB-cadherin、R-cadherin均表达于HDPCs。地塞米松显著上调ALP、DMP-1、DSPP、R-cadherin的表达水平,同时显著下调N-cadherin、OB-cadherin,矿化结节形成情况则无明显差异。结论:地塞米松可诱导HDPCs向成牙本质细胞分化,同时调节钙黏蛋白的表达,提示钙黏蛋白可能参与调控地塞米松对HDPCs成牙本质向分化的诱导过程。

五倍子水提取物对人牙髓细胞碱性磷酸酶及矿化的影响

目的:观察不同浓度的五倍子水提取物对人牙髓细胞碱性磷酸酶(ALP)活性及矿化能力的影响。方法:组织块酶消化法体外培养人牙髓细胞,并分别与不同浓度的五倍子水提取物(2.5、5、10、20、40μg/m L)共同培养;于培养48 h后,采用酶组织化学法检测各组细胞的ALP活性。并根据ALP实验结果筛选出(10、20μg/m L)五倍子水提取物浓度组,与牙髓细胞共同培养30 d后,用Von Kossa染色法观察各组细胞的生长及矿化结节形成情况。结果:与对照组相比,2.5、5μg/m L的五倍子水提取物对人牙髓细胞的ALP活性无显著性影响(P>0.05),而浓度为10、20、40μg/m L的五倍子水提取物均可明显抑制牙髓细胞的ALP活性(P<0.05);Von Kossa染色结果显示,五倍子水提取物与人牙髓细胞共同培养30 d后,可促进其矿化结节的形成。结论:五倍子水提取物可在一定程度上改变人牙髓细胞的碱性磷酸酶活性及矿化程度。

变形链球菌提取物对人牙髓细胞TOLL样受体2表达的影响

目的:探讨变形链球菌提取物对人牙髓细胞(hDPCs)TOLL样受体2(TLR2)表达的影响。方法:超声破碎法提取变形链球菌的提取物,应用体外培养技术培养hDPCs,将变形链球菌提取物按10mg/L和100mg/L浓度分组,以等体积的培养基作为空白对照组,分别作用于hDPCs 0h、24h、48h。免疫组化法检测hDPCs TLR2的表达和分布情况,实时荧光定量PCR(qPCR)检测TLR2mRNA的表达水平。结果:免疫组化结果显示,10mg/L和100mg/L组各时间点均有TLR2蛋白表达,均明显高于空白对照组(P<0.05),10mg/L组与100mg/L组各作用时间点比较,差异无统计学意义(P>0.05)。qPCR结果显示,10mg/L和100mg/L组刺激24h、48h后,TLR2 mRNA相对表达量明显升高,并且随刺激时间的延长表达量逐渐增加,均高于空白对照组(P<0.05)。结论:变形链球菌提取物可促使hDPCs TLR2表达上调,提示TLR2可能参与了牙髓的天然免疫反应。

ADAM28反义核酸对人牙乳头细胞增殖、分化和凋亡的影响

目的研究金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸(AS-ODN)对人牙乳头细胞(HDPC)增殖、分化、凋亡等生物学特性的影响并分析可能的作用机制。方法采用细胞培养、基因转染、四唑盐(MTT)比色法、酶动力学法和流式细胞术(FCM)检测ADAM28反义核酸转染HDPC后对细胞生物学特性的影响。结果ADAM28AS-ODN组HDPC的增殖活性、增殖指数、碱性磷酸酶(ALP)分泌活性显著降低,凋亡细胞百分比明显上升。结论ADAM28反义核酸可显著抑制HDPC的增殖和ALP的活性,显著诱导HDPC的凋亡并影响细胞周期的变化。

人牙髓细胞在可注射PLGA微球支架上的粘附生长

目的:探讨不同密度的人牙髓细胞(HDPCs)在可注射聚乳酸/羟基乙酸(PLGA)微球支架上的粘附生长情况。方法:取第4代HDPCs,以3种不同密度(2×10~5/mL、1×10~5/mL、5×10~4/mL)接种于PLGA微球(A、B、C组),于不同时间点倒置显微镜下观察细胞粘附生长情况;检测各组细胞双链脱氧核糖核酸(dsDNA)含量及碱性磷酸酶(ALP)活性。体外培养8周后,扫描电镜观察HDPCs和PLGA微球材料的形貌结构。结果:倒置显微镜下可见细胞粘附于微球材料,随着时间延长,细胞增殖情况良好,与材料融合生长。培养1周,3组细胞dsDNA含量及ALP活性均无显著差异;培养2周,A、B两组细胞dsDNA含量显著高于C组,B组ALP活性水平最高。培养8周,扫描电镜可见细胞与微球完全融合,表面有基质样物质沉积,局部有凹陷形成。结论:1×10~5/mLHDPCs接种于PLGA微球,细胞dsDNA含量及ALP活性水平较高。PLGA微球作为一种可注射支架材料,有利于HDPCs粘附生长,可望用于构建组织工程化牙髓。

卵黄高磷蛋白对人牙髓细胞增殖的影响

目的研究卵黄高磷蛋白对体外培养的人牙髓细胞增殖的影响。方法 4个实验组分别采用1、10、100、1000ng/mL的卵黄高磷蛋白,对照组采用10%胎牛血清,分别作用于体外培养的第6代人牙髓细胞,每组8个标本,培养3、6day后分别对每组作MTT法检测,OD值进行t检验。实验组用100ng/mL卵黄高磷蛋白,对照组用10%胎牛血清作用上述人牙髓细胞,培养48h,常规消化,固定,经DNA荧光染色后,用流式细胞仪测定DNA含量。结果 1～100ng/mL卵黄高磷蛋白作用3、6day均促进人牙髓细胞增殖。10、100ng/mL卵黄高磷蛋白作用6day,对人牙髓细胞增殖的促进作用与对照组相比有显著差异(P<0.05)。1000ng/mL卵黄高磷蛋白作用3、6day均抑制人牙髓细胞增殖。100ng/mL卵黄高磷蛋白作用人牙髓细胞,与对照组相比DNA合成前期细胞比例明显降低,而DNA合成期细胞比例和细胞增殖指数均显著增高。结论卵黄高磷蛋白具有促进人牙髓细胞增殖和DNA合成的作用,可能主要通过促进处于合成前期的细胞进入合成期来实现的。

紫草素通过TLR4/NF-κB信号通路抑制由LPS诱导的人牙髓细胞炎症研究

目的:探讨紫草素对脂多糖(LPS)诱导的人牙髓细胞(HDPCs)细胞炎症的影响。方法:用MTT法检测不同浓度紫草素和LPS对HDPCs的细胞毒性;给药24 h后,通过MTT法检测细胞存活率;用ELISA法测定细胞液中IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-10水平;通过Western blot法检测TLR4/NF-κB信号通路蛋白的表达情况。结果:紫草素可以抑制由LPS引起的细胞存活率的改变;与模型组相比,紫草素组中IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著降低,IL-10水平显著升高;并且TLR4和p-NF-κB蛋白表达显著降低。结论:紫草素可以缓解LPS引起HDPCs细胞炎症,并且能够抑制TLR4/NF-κB信号通路蛋白的表达。

过表达DDIT3对人牙髓干细胞增殖和分化能力影响的研究

目的:通过构建DDIT3过表达质粒,进一步验证过表达DDIT3对人牙髓干细胞(human dental pulp cells,HDPCs)增殖和分化能力的影响。方法:构建带有绿色荧光标记的DDIT3慢病毒载体,分为3组:空白(A组)对照组,绿色荧光对照组(B组),DDIT3过表达组(C组);荧光显微镜观察病毒感染效率;qRT-PCR和Westernblot检测过表达效果;MTT检测三组细胞的增殖能力;ALP、茜素红、vonKossa染色和qRT-PCR检测DDIT3对HDPCs成骨/成牙本质分化能力的影响。结果:荧光显微镜下观察C组绿色荧光表达面积>90%,qRT-PCR和Westernblot结果表明,C组DDIT3mRNA和蛋白表达明显升高;MTT结果显示,与对照组相比,过表达DDIT3在72h和96h可明显抑制HDPCs的增殖;qRT-PCR结果表明,DDIT3过表达可明显增加矿化相关基因OSX,DSPP,DMP1和OCNmRNA表达水平,同时增加DSPP蛋白表达;ALP染色结果表明,3组细胞在成骨/成牙本质分化第7天,均可见明显的ALP染色阳性细胞,但染色面积无明显差异。然而,在成骨/成牙本质分化第14天,茜素红染色和vonKossa染色结果表明,过表达DDIT3可明显增加钙沉积。结论:DDIT3可促进HDPCs晚期的成骨/成牙本质分化。

磷酸化cAMP反应元件结合蛋白对发育期人牙乳头细胞增殖和分化的影响

目的构建CBP抑制表达慢病毒载体,探讨CBP有效表达沉默后对体外培养人牙乳头细胞(human dental papilla cells,HDPC)的增殖及分化影响。方法利用基因重组技术构建重组慢病毒建立牙乳头细胞沉默稳转细胞,采用CCK-8检测细胞增殖的变化,采用检测分化相关蛋白的表达评价CBP对HDPC分化能力的影响。结果测序结果提示成功构建四组人CBP基因的重组慢病毒;转染HDPC后,通过RT-PCR和蛋白质印迹法筛选获得有效靶点的重组慢病毒;CCK-8检测结果表明HDPC在CBP表达下调后增殖活性受到抑制;慢病毒介导CBP沉默后影响了HDPCs相关分化蛋白ColI、OCN、OPN的表达,较对照组显著下调(P<0.05);牙乳头细胞的ALP活性在转染重组慢病毒后5,7,14d后显著降低(P<0.05);结论成功构建了高效CBP抑制表达载体,CBP沉默可抑制HDPCs的增殖和分化。

马甲子对LPS刺激下人牙髓细胞炎性因子表达影响的初探

目的:研究马甲子提取物对体外培养HDPCs生长及对P.g-LPS诱导HDPCs合成分泌的炎症相关细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α的影响。方法:体外培养人牙髓细胞,建立炎症状态的体外HDPCs,检测不同浓度梯度马甲子提取物对HDPCs生长的影响,以及对炎症状态下的HDPCs各炎性因子mRNA表达及蛋白表达的影响。结果:经P.g-LPS刺激HDPCs 3 h,可成功形成体外HDPCs的炎症状态。在本实验条件下,125μg·mL^(-1)的马甲子提取物溶液可以保证HDPCs的生长,同时可以下调炎症环境下HDPCs的各炎性因子的表达。结论:马甲子提取物能对牙髓细胞炎症反应产生一定抑制作用,为马甲子在牙髓炎症治疗中的应用提供了实验依据。

牙齿发育相关基因ADAM28在人牙乳头细胞中的定位分布研究

目的探讨牙齿发育相关基因金属蛋白酶解离素28(a disintegrin and metalloproteinase28,ADAM28)在人牙乳头细胞(human dental papilla cells,HDPC)中的定位分布及作用。方法应用基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-ADAM28,通过细胞培养、基因转染HDPC后,采用免疫荧光、RT-PCR及Western blot检测ADAM28在HDPC中的表达分布。结果成功构建并鉴定ADAM28真核质粒,瞬时转染HDPC72h后,HDPC的胞质和胞膜上均表达ADAM28蛋白,而两对照组均无表达。结论ADAM28在HDPC内能被正确地翻译、表达,可能作为一种胞质蛋白调控着牙源性间充质细胞的增殖和分化。

给HDTV一个精彩的舞台：玩转HTPC——不玩游戏也高端 HTPC组建点点谈

毫无疑问，HTPC是PC家电化历程上的一个重要的里程碑，它有以下几大要素可胜任家电化需求：