芦荟大黄素对人胃癌细胞HGC-27增殖周期及凋亡的影响

目的:探讨芦荟大黄素对人胃癌细胞HGC-27细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法:采用甲基噻唑(MTT)比色法和生长曲线测定不同浓度芦荟大黄素在不同作用时间内对在体外培养HGC-27细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果:芦荟大黄素可在G0/G1期阻滞人胃癌细胞HGC-27的增殖,使S期细胞比率降低;在一定范围内,芦荟大黄素的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高。结论:芦荟大黄素能抑制人胃癌细胞HGC-27细胞生长,并诱导细胞凋亡而阻止细胞周期。

人胃癌HGC-27裸鼠皮下移植瘤模型的建立

目的 建立人胃癌细胞株HGC-27裸小鼠皮下移植瘤模型,为胃癌的研究提供简单实用的载体。方法 培养HGC-27人胃癌细胞,达106~107个活细胞/瓶,以0.9%氯化钠无菌水溶液为溶剂制成单细胞悬液,随机注射到裸小鼠左腋下或右腋下,观察肿块的形成,并进行组织学观察。结果 注射后8 d触及米粒般大小的肿块,14 d可见肿块明显隆起。组织学观察癌细胞无腺体样结构形成,呈片状、巢状或条索状排列,细胞形状不规则,呈圆形、梭形或不规则形,核大深染,核质比增高,可见核分裂象。结论 人胃癌细胞株HGC-27裸小鼠皮下移植瘤模型的建立,操作简便,肿块表浅,可直接观测肿瘤,为进一步的研究能提供简单有效的模型。

人胃癌细胞系HGC-27肿瘤球细胞干样特性研究

目的:探讨体外培养条件下人胃癌细胞系HGC-27肿瘤球细胞的干样特性。方法:SFM培养人胃癌细胞系HGC-27的肿瘤球,细胞计数绘制HGC-27细胞和肿瘤球细胞的生长曲线,96孔培养板接种计算细胞的克隆形成能力。结果:成功培养出HGC-27细胞的肿瘤球。生长曲线和克隆形成实验显示,肿瘤球细胞的增殖和克隆形成能力高于HGC-27细胞。结论:HGC-27细胞可以培养成肿瘤球细胞,肿瘤球细胞比HGC-27细胞更具有干样特性。

全反式维甲酸对人胃癌细胞株HGC-27生长抑制作用的研究

研究全反式维甲酸(ATRA)抑制HGC-27人胃癌细胞系生长的作用.利用cck-8法分别在24h、36h、48h检测ATRA对人胃癌细胞株HGC-27的抑制率,并检测瘦素水平.不同浓度组间的生长抑制率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),各ATRA剂量组之间差异也存在显著性差异(P<0.05).各个ATRA剂量组的细胞抑制率和ATRA浓度之间呈正相关.抑制作用与剂量和时间呈依赖关系,ATRA的最佳抑制浓度和时间分别是400μmol/L和48h,最大抑制率达92.27%,800μmol/L ATRA可下调瘦素水平.利用光学显微镜观察不同浓度ATRA作用于HGC-27细胞的形态结构改变,显微镜观察显示ATRA使HGC-27人胃癌细胞生长受抑制,细胞出现皱缩变小、细胞核固缩等异常现象,细胞凋亡呈典型形态学改变;得出结论:ATRA对人胃癌细胞HGC-27生长有抑制作用,并与ATRA的浓度及作用时间密切相关,其机理可能与瘦素有关.

Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶抑制VEGFR2介导的人胃癌HGC-27细胞增殖

目的:探讨Ⅱ型c GMP依赖性蛋白激酶(typeⅡc GMP-dependent protein kinase,PKGⅡ)对血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)介导的人胃癌HGC-27细胞增殖的影响及其作用机制。方法:应用编码PKGⅡc DNA的腺病毒(Ad-PKGⅡ)感染HGC-27细胞,使其高表达PKGⅡ,并以特异性激动剂8-p CPTc GMP激活PKGⅡ。应用血管内皮生长因子-A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)激活VEGFR2。MTT法检测细胞增殖;蛋白质印迹法检测p-VEGFR2、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated-protein kinase B,p-PKB/p-Akt)和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylated-extracellular signal-regulated kinase,p-ERK1/2)表达;免疫共沉淀法检测PKGⅡ与VEGFR2的结合;免疫沉淀法联合蛋白质印迹法检测PKGⅡ对VEGFR2丝氨酸/苏氨酸(Serine/Threonine,Ser/Thr)的磷酸化作用。结果:VEGF-A可促进HGC-27细胞增殖,并诱导胞内p-VEGFR2、p-Akt和p-ERK1/2表达水平明显升高;以Ad-PKGⅡ感染HGC-27细胞使其高表达PKGⅡ并激活后,VEGF-A引起的细胞增殖受到明显抑制,pVEGFR2、p-Akt和p-ERK1/2表达水平显著降低;PKGⅡ可与VEGFR2相互作用,使后者丝氨酸/苏氨酸磷酸化。结论:激活的PKGⅡ可通过使VEGFR2发生丝氨酸/苏氨酸磷酸化抑制人胃癌HGC-27细胞的VEGFR2酪氨酸磷酸化,进而抑制其下游的增殖相关信号转导,最终抑制该细胞的增殖。

鸦胆子油乳剂对人胃癌细胞株HGC-27细胞迁移和侵袭的体外实验研究

目的:探讨鸦胆子油乳剂对人胃癌细胞株HGC-27细胞迁移和侵袭能力的影响及其机制。方法:采用MTT法检测鸦胆子油乳剂对HGC-27细胞增殖的影响。分别采用Transwell迁移和侵袭实验法检测鸦胆子油乳剂对HGC-27细胞迁移和侵袭的影响及其机制。结果:鸦胆子油乳剂能够明显抑制HGC-27细胞的增殖(P<0.05);鸦胆子油乳剂体外能够显著抑制HGC-27细胞的迁移和侵袭,且呈现剂量依赖关系,25üg·ml^(-1)剂量时迁移和侵袭抑制率分别为53.73%和54.41%。结论:鸦胆子油乳剂对HGC-27细胞增殖有明显抑制作用,并可有效抑制人胃癌细胞株HGC-27的迁移和侵袭能力。

姜黄素对胃癌细胞系HGC-27增殖及侵袭力的影响

目的:探讨姜黄素(curcumin,Cur)对胃癌细胞系HGC-27细胞增殖及侵袭力的影响以阐明Cur的抗瘤机制。方法:采用MTT法检测不同剂量(0、10、20、30、40?mol/L)及不同处理时间(24、48、72h)的姜黄素对HGC-27细胞增殖活性的影响;Transwell侵袭实验检测姜黄素对HGC-27细胞侵袭力的抑制作用。结果:1.MTT法显示姜黄素显著抑制HGC-27细胞增殖,20μmol/L,30μmol/L,40μmol/L姜黄素处理72小时其生长抑制率分别为24.63%,32.42%,76.43%,有明显的剂量及时间依赖性,不同剂量组之间及不同处理时间组之间比较有差异显著性(P<0.05)。2.Transwell侵袭实验显示姜黄素显著抑制HGC-27细胞的侵袭力,呈剂量和时间依赖性,各剂量组与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:姜黄素通过抑制HGC-27细胞增殖和侵袭行为起到抗肿瘤作用。

白扁豆多糖对人胃癌细胞凋亡的作用及其机制

目的:探讨白扁豆多糖对人胃癌细胞凋亡的作用及其相关机制。方法:胃癌细胞HGC-27和SGC-7901经终浓度为16、8、4、2、1和0μg/ml的白扁豆多糖作用24、48和72h,各设3个复孔。MTS法检测其增殖活性;分别取经4、0μg/ml白扁豆多糖作用24h的HGC-27和SGC-7901细胞(各3个复孔),JC-1染色观察线粒体膜电位,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率,QPCR法探讨Bcl-2、caspase-3和Bax基因的mRNA转录水平。结果:白扁豆多糖作用后,HGC-27和SGC-7901细胞线粒体膜电位降低;细胞增殖显著受抑制(P<0.01),且效果与药物作用浓度和时间有关;细胞凋亡率分别为53.15%和38.77%,均较PBS处理组(8.07%和6.03%)明显增加(P<0.01),而细胞周期无显著变化;同时,细胞内Bcl-2基因的转录水平明显受抑制,Bax和caspase-3基因的转录明显上调(P<0.01)。结论:白扁豆多糖可通过调节Bax-Bcl-2-caspase3通路,诱导胃癌细胞HGC-27和SGC-7901凋亡。

丝裂原活化蛋白激酶激酶1在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶激酶1(MAP2K1)在胃癌中的表达及其临床意义。方法免疫组织化学及Western blotting检测MAP2K1在胃癌组织和细胞中蛋白水平的表达;免疫荧光染色观察细胞形态及MAP2K1的表达位置;StarBase及Oncomine数据库对MAP2K1进行数据挖掘,分析MAP2K1 mRNA在胃癌组织中的表达情况;UALCAN数据库分析MAP2K1 mRNA的表达与临床病理特征的相关性;Kaplan Meier-Plotter在线分析工具进行生存分析;GEPIA2数据库挖掘MAP2K1与胃癌干细胞相关因子和耐药相关因子的关系。结果免疫组织化学、免疫荧光和Western blotting结果表明,在胃癌组织和细胞中MAP2K1蛋白为高表达,且MAP2K1表达在胃癌细胞质中。由多种数据库分析得出,MAP2K1 mRNA在胃癌组织的表达量高于正常胃组织,其表达量与胃癌分期、分级、淋巴结转移和患者性别密切相关,MAP2K1高表达组的胃癌患者总体生存率明显低于低表达组,其原因可能与胃癌干细胞特性和耐药性相关。结论MAP2K1在胃癌中高表达,其表达水平可能通过调控干细胞相关因子与耐药相关因子影响患者不良预后。MAP2K1或可成为判断胃癌患者预后的新型诊断标志物。

苎麻根石油醚部位体外抗肿瘤生物活性及其GC-MS分析

目的:明确苎麻根石油醚部位体外抗胃癌活性并揭示其发挥药效的物质基础,为苎麻根的开发利用奠定基础。方法:采用噻唑蓝(MTT)法考察不同给药剂量,不同给药时间下苎麻根石油醚部位对人胃癌HGC-27细胞的增殖抑制作用及其与时间、剂量的关系;采用流式细胞仪检测苎麻根石油醚部位作用于人胃癌HGC-27细胞后细胞凋亡率和细胞周期的变化;通过GC-MS对发挥药效的苎麻根石油醚部位进行成分解析。结果:不同质量浓度的苎麻根石油醚部位作用于人胃癌HGC-27细胞24,48,72 h后,均呈现出较好的细胞增殖抑制作用,并呈现一定的时间-剂量-效应关系,差异有统计学意义(P <0. 05);苎麻根石油醚部位作用人胃癌HGC-27细胞后可诱导细胞凋亡,影响细胞周期的正常变化,G0/G1期细胞比例明显减少,S期细胞比例明显增多;通过GC-MS鉴定出苎麻根石油醚部位中26种化学成分,主要包括谷甾醇、豆甾醇等。结论:苎麻根石油醚部位为其抗胃癌活性部位,其发挥药效的主要成分为甾醇类化合物,为苎麻根在临床上的合理应用及其在抗肿瘤方面的进一步研究奠定基础。