黄芪建中汤对脾胃虚寒证胃溃疡大鼠炎症因子及HGF/c-Met信号通路的影响

目的观察黄芪建中汤对脾胃虚寒证胃溃疡大鼠炎症因子及HGF/c-Met信号通路的影响。方法将60只大鼠随机分为4组,即正常组、模型组、黄芪建中汤组[黄芪建中汤6.8 g/(kg·d)]、奥美拉唑组[奥美拉唑肠溶胶囊4.2 mg/(kg·d)],每组15只大鼠。正常组除外,其他组采用耗气破气法结合饥饱失常法进行大鼠脾胃虚寒证模型造模,再采用冰醋酸法建立大鼠胃溃疡模型。比较各组大鼠体质量、溃疡指数;HE染色观察大鼠胃组织病理学变化;采用酶联免疫吸附法检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;免疫组化法检测胃组织中肝细胞生长因子(HGF)、肝细胞生长因子受体(c-Met)表达;荧光定量PCR检测胃组织HGF、c-Met m RNA水平。结果与正常组相比,模型组大鼠体质量降低,溃疡指数升高,IL-6、IL-1β、TNF-α含量升高,HGF升高,HGF、c-Met m RNA升高(P<0.05);与模型组相比,黄芪建中汤组和奥美拉唑组大鼠体质量升高,溃疡指数降低,IL-6、IL-1β、TNF-α降低,HGF升高,HGF、c-Met mRNA升高(P<0.05)。结论黄芪建中汤可以通过抑制炎症因子、调节HGF/c-Met通路的表达促进胃黏膜修复。

M2型巨噬细胞来源外泌体调控HGF/c-Met通路参与多发性骨髓瘤细胞转移的作用研究

目的探究M2型巨噬细胞来源的外泌体对人多发性骨髓瘤细胞转移的影响及机制。方法在体外将THP-1细胞诱导分化成M0型和M2型巨噬细胞,实时荧光定量聚合酶反应(RT-qPCR)检测诱导后M2型巨噬细胞标志物血红蛋白清道夫受体(CD163)、白细胞介素-10(IL-10)、精氨酸酶-1(Arg-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达水平,分离M2型巨噬细胞来源的外泌体;将RPMI-8226细胞分为对照组、M0-Exos组、M2-Exos组,Transwell小室法检测细胞迁移数目与侵袭数目,蛋白质印迹检测细胞中N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)及转录因子Snail的表达水平,并检测肝细胞生长因子(HGF)/c-Met相关蛋白的表达水平;接着将RPMI-8226细胞分为对照组、M2-Exos组、SU11274组、SU11274+M2-Exos组,Transwell小室法检测细胞迁移数目与侵袭数目,蛋白质印迹检测细胞中N-cadherin、Vimentin、E-cadherin及Snail表达水平。结果与M0型巨噬细胞比较,M2型巨噬细胞中CD163、IL-10、Arg-1、TGF-β1的mRNA表达水平均显著上调(P<0.05);从M2型巨噬细胞中分离的颗粒物中有CD9、CD63、TSG101、ALIX蛋白表达,由此判定该颗粒物为外泌体。与对照组比较,M2-Exos组细胞迁移与侵袭数目均显著增加(P<0.05),N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达显著增加(P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著减少(P<0.05),HGF蛋白表达及p-c-Met/c-Met比值也显著增加(P<0.05)。与M2-Exos组比较,SU11274+M2-Exos组细胞迁移与侵袭数目显著减少(P<0.05),N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达显著减少(P<0.05),且E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论M2型巨噬细胞来源的外泌体能够促进人多发性骨髓瘤细胞迁移、侵袭及EMT,加剧肿瘤细胞转移,该作用与调控HGF/c-Met通路有关。

HGF/c-Met与胃癌靶向治疗的研究进展

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,大部分患者在诊断时已属晚期。近年来,尽管胃癌诊治技术得到了较好的发展,但肿瘤的局部浸润和转移等问题仍阻碍了胃癌的预后,晚期胃癌的5年存活率仍然很低。随着分子生物学的发展,许多新的靶向治疗药物成为研究热点,部分药物已进入临床研究中。肝细胞生长因子及其受体(HGF/c-Met)信号通路与胃癌的发生、发展、转移及预后有密切的关系,是胃癌靶向治疗极具潜力的靶点。该文就该信号通路的结构和功能、对胃癌发生发展的影响以及靶向该信号通路的胃癌治疗药物的研究进展进行综述。

HGF/c-met传导通路在子宫内膜癌发生发展中的作用及意义

目的检测HGF/c-met传导通路对Survivin、XIAP表达的影响,探讨HGF/c-met通路在子宫内膜癌发生发展中的作用机制。方法培养ER表达水平不同的子宫内膜癌细胞系HEC-1B(ER低表达)和Ishikawa(ER高表达),通过MTT法检测不同浓度HGF对两种细胞增殖率的影响;AnnexinV-FITC法检测不同浓度HGF对细胞凋亡率的影响。Westem Blot检测Survivin及XIAP蛋白的表达水平。结果 HGF可促进子宫内膜癌细胞的增殖,在80 n咖L内具有剂量依赖性,在72 h内具有时间依赖性(P<0.05);当HIGF浓度为40 ng/mI时,HEC-1B细胞24 h增值率达到(87.0±0.02)%,为最适诱导浓度。Survivin、XIAP mRNA及蛋白的表达随着HGF浓度的增高而上调,上调作用具有剂量效应关系。HGF在ER低表达的HEC-1B细胞中作用明显高于Ishikawa细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HGF/c-met传导通路的激活可促进子宫内膜细胞增殖,抑制细胞凋亡,HGF/c-met可能是调控子宫内膜癌发生发展的分子靶点。

HGF/c-met信号通路对乳腺癌上皮-间充质转化的影响研究

目的检测乳腺组织中肝细胞生长因子(HGF)、c-met、上皮钙黏素(E-cadherin)、β-联蛋白(β-catenin)、Vimentin、Snail等上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达量,探讨HGF/c-met信号通路与乳腺癌EMT的关系。方法选取80例乳腺癌患者和80例纤维腺瘤患者的手术标本进行研究,分别作为乳腺癌组及纤维腺瘤组,另选取乳腺癌组患者对应的正常组织(肿瘤边缘>5 cm区域)作为正常乳腺组(80例)。采用免疫组化法检测并比较3组标本中HGF、c-met、E-cadherin、β-catenin、Vimentin、Snail表达量,再比较c-met含量与患者临床特征及EMT相关蛋白表达量的关系。结果乳腺癌组组织中HGF、c-met、Vimentin、Snail表达量均高于纤维腺瘤组及正常乳腺组,E-cadherin、β-catenin表达量均低于纤维腺瘤组及正常乳腺组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);正常乳腺组HGF表达量高于纤维腺瘤组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。c-met高表达患者发生淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、组织学分级为低分化的比例均高于c-met低表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。c-met高表达患者E-cadherin和β-catenin表达量均明显低于c-met低表达患者,Vimentin和Snail表达量均明显高于c-met低表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论HGF/c-met信号通路可能通过下调上皮黏附分子、上调间充质分子标志物的表达,促进乳腺癌细胞EMT。

舌鳞癌微环境中HGF/C-Met信号通路对CD1a^+DC的抑制作用

目的:通过对肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、C-Met、CD1a在舌鳞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)、舌癌前病变及舌正常组织中表达的研究,探讨在舌鳞癌中HGF/C-Met信号通路对CD1a阳性树突状细胞(dendritic cells,DC)的影响。方法:随机选取30例舌鳞癌、10例舌癌前病变及10例舌正常组织的石蜡标本,应用免疫组织化学SP法检测舌鳞癌、舌癌前病变及舌正常组织中HGF、C-Met及DC标志物CD1a的表达并分析其相互关系。采用SPSS 13.0软件包对数据进行秩转换的非参数检验以及Spearman等级相关分析。结果:HGF、CMet和CD1a在舌鳞癌中的表达水平较舌癌前病变和舌正常组织高(P均<0.01);在舌鳞癌中,C-Met的表达水平与CD1a的表达水平呈负相关(rs=-3.769)。结论 :舌鳞癌患者局部微环境中存在一定的免疫反应,HGF/C-Met信号通路可抑制DC对舌鳞癌组织的浸润。

HGF/C-Met系统与头颈部肿瘤研究进展

干细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一种多功能的细胞因子,其生物学活性由C-Met蛋白所介导。人类许多肿瘤的生长、侵袭和转移与HGF/C-Met系统密切相关。头颈部肿瘤的转移是患者死亡的主要原因。研究HGF/C-Met系统与头颈部肿瘤侵袭与转移的关系,将对临床肿瘤的诊断及预后有重要意义,也可为临床肿瘤治疗提供新的方向和新的策略。

HGF/c-Met信号转导通路在结直肠癌肝转移中的作用

肝转移发生是导致结直肠癌患者预后不良的最重要的原因。近年来,结直肠癌肝转移治疗的治疗效果获得了令人鼓舞的进展。HGF/c-Met信号转导通路在人体内正常细胞向恶性细胞转化、细胞运动、侵袭转移、上皮间质转化和组织再生等过程中发挥重要的作用。目前,通过对HGF/c-Met信号通路系统在结直肠癌肝转移中的作用机制的深入研究,发现HGF/c-Met信号转导通路系统在结直肠癌肝转移发生发展过程中发挥着重要的作用,并为研发有效的HGF/c-Met抑制剂提供了新的依据,一系列HGF/c-Met信号通路抑制剂的相继出现,为结直肠癌肝转移患者的治疗提供了新的思路。

HGF/C-Met系统与头颈鳞癌相关性研究的进展

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一种多功能的细胞因子,其生物活性由C-Met蛋白所介导。人类许多肿瘤的生长,侵袭和转移与HGF/C-Met系统密切相关。头颈鳞癌的转移是患者死亡的主要原因。研究HGF/C-Met系统与头颈鳞癌侵袭与转移关系,将对临床肿瘤的诊断及预后有重要意义,也可为临床肿瘤治疗提供新的方向和新的策略。

HGF/c-Met信号通路及其与口腔鳞癌关系研究进展

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是目前所知生物活性最广泛的细胞因子。研究表明,肝细胞生长因子受体(hepatocyte growth factor receptor,c-Met)在多种肿瘤细胞中均有过度表达,在肿瘤发生发展中具有促增殖、侵袭和转移的生物学效应。近年HGF及其受体c-Met已成为基础及临床研究的新热点,本文就HGF/c-Met信号通路及其与口腔鳞癌关系的最新研究进展作一综述。

HGF/c-Met系统在肿瘤发生和发展中的作用

多种肿瘤的生长、侵袭和转移与HGF/c Met信号系统传递途径的异常有关。本文综述了HGF/c Met系统的结构特点、表达与调节、生理功能及其在肿瘤生长、侵袭和转移中的作用。

HGF/c-Met信号通路在克唑替尼诱导不同肺癌细胞株凋亡中的作用

目的:观察克唑替尼(crizotinib)诱导不同肺癌细胞株凋亡中HGF/c-Met信号通路的变化并探讨其调控机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测克唑替尼对H1993(c-Met扩增的肺腺癌细胞)、H2228(含有EML4-ALK融合基因的肺癌细胞)和A549细胞的活力抑制情况;采用流式细胞术检测3种细胞在克唑替尼作用后24 h、48 h和72 h的凋亡率;采用Western blot检测细胞在克唑替尼作用前后HGF/c-Met信号通路中MET蛋白及其磷酸化形式p-MET的水平,同时观察其下游通路关键蛋白AKT、ERK、p-AKT和p-ERK的变化情况。结果:MTT结果表明克唑替尼作用72 h后,H1993、H2228和A549细胞株的细胞活力抑制率均呈剂量依赖性升高。流式细胞术检测发现随着克唑替尼作用时间的延长,细胞凋亡率呈时间依赖性增加(P<0.05)。Western blot检测结果提示在H1993细胞株和H2228细胞株中,p-MET、p-AKT和p-ERK随着时间的延长蛋白水平呈现下降趋势。而在A549细胞株中p-AKT、p-ERK和p-MET在药物作用72 h后的变化趋势不明显。结论:初步证实HGF/c-Met信号通路与克唑替尼诱导肺癌细胞株H1993和H2228凋亡相关。

MACC-1通过HGF/c-Met信号通路调节上皮间质转化及其对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的探讨结肠癌转移相关基因-1(MACC1)通过调控HGF/c-Met信号通路对上皮间质转化(EMT)的调节作用,以及对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法构建针对MACC1、c-Met的shRNA质粒载体(MACC1-shRNA、c-Met-shRNA)和阴性对照质粒(shNC),脂质体法转染人胃癌MKN28细胞株。采用Western blotting及Real-Time PCR技术检测转染前后MACC1、c-Met、EMT相关标志物(E-cadherin、N-cadherin)蛋白和mRNA表达变化。通过伤口愈合实验、Transwell侵袭实验检测MKN28细胞迁移和侵袭能力的变化。结果与空白对照组相比,MACC1-shRNA组MACC1、c-Met蛋白及mRNA表达均明显下调(P<0.01),E-cadherin蛋白及mRNA表达水平均显著上调(P<0.01),N-cadherin蛋白及mRNA表达水平则显著下调(P<0.01);c-Met-shRNA组MACC1蛋白和mRNA表达无明显变化(P>0.05),EMT相关标志物表达水平与MACC1-shRNA组的变化一致。伤口愈合实验和Transwell侵袭实验结果显示:与空白对照组相比,MACC1-shRNA组和c-Met-shRNA组MKN28细胞的迁移及侵袭能力均明显被抑制(P<0.01)。结论 MACC1可能通过调控HGF/c-Met信号通路调节EMT过程,增强胃癌细胞的迁移和侵袭能力。

HGF/c-Met在肝细胞癌中作用的研究进展

肝细胞癌是世界上最具破坏力的癌症之一,其主要治疗方式为手术治疗,但大部分患者确诊时已失去手术机会,仅部分患者可行手术治疗,且术后的转移率及复发率较高,近期相关研究发现,肝细胞生长因子(HGF)/间充质-上皮转换受体(c-Met)轴的异常激活与HCC的转移潜力及预后不良相关,为肝细胞癌的靶向治疗提供新方向。目前针对HGF/c-Met信号传导途径的有效治疗药物仍处于研究重点,现就HGF/c-Met通路在肝细胞癌中的研究进展进行综述。

HGF/c-Met信号通路在少弱精子症模型中的作用

目的观察环磷酰胺(CTX)对雄性小鼠生殖功能的影响,探讨HGF/c-Met信号通路在少弱精子症模型保护作用及机制。方法昆明小鼠按随机数字表法分为:对照组、HGF组、模型组和HGF+模型组,每组20只。其中模型组和HGF+模型组每天腹腔注射环磷酰胺50 mg/kg,连续7d制备少弱精子症模型,但HGF+模型组第8天开始尾静脉注射HGF 1 mg/kg,隔日1次,连续7次;对照组和HGF组每天腹腔注射等量的等渗盐水,但HGF组从第8天开始尾静脉注射HGF 1 mg/kg,隔日1次,连续7次。给药结束后检测各组小鼠精子质量、生殖器指数变化,HE染色检测睾丸病理结构变化,Western blot检测睾丸组织中Met和p-Met蛋白表达情况;试剂盒检测血清性激素促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、血清睾酮(T)以及睾丸组织中丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH)水平等表达水平。结果与对照组比较,模型组中的p-c-Met蛋白表达水平均明显下降(P<0.01),而HGF组中的p-c-Met蛋白表达水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,HGF+模型组和HGF组中的p-c-Met蛋白表达显著升高(P<0.01);与HGF+模型组相比,HGF组中的p-c-Met蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。与对照组睾丸指数[(6.43±0.51)mg/g]和附睾指数[(1.83±0.25)mg/g]相比,模型组中的睾丸指数[(5.21±0.36)mg/g]和附睾指数[(1.67±0.31)mg/g]明显下降(P<0.05),HGF+模型组中的睾丸指数[(174±0.29)mg/g]降低(P<0.01)。与模型组比较,HGF+模型组中的睾丸指数[(5.97±0.54)mg/g]明显升高(P<0.05),附睾指数也在升高,但差异无统计学意义(P>0.05);与HGF+模型组相比,HGF组中的睾丸指数[(6.23±0.61)mg/g]明显升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠的精子浓度、精子活力均明显降低(P<0.01),而精子畸形率明显升高(P<0.01),HGF+模型组中精子浓度、精子活力液均下降(P<0.01),精子畸形率也升高(P<0.01);与模型组比较,HGF+模型组中小鼠精子浓度、活力升高(P<0.01)、精子畸形率下降(P<0.01),HGF组中小鼠精子浓度、活力也均升高(P<0.01)、精子畸形率下降(P<0.01);与HGF+模型组相比,HGF组中小鼠精子浓度、活力升高(P<0.05)、精子畸形率降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠睾丸组织严重损伤,结构层次混乱,精子细胞并且排列紊乱,曲细精管呈现空泡化,细胞间距增大,与模型组比较,HGF+模型组中小鼠睾丸生精细胞排列整齐、紧密、规则,生精细胞层数和数量明显增多,HGF组中小鼠睾丸组织小鼠生精小管管腔饱满,生精上皮外的界膜均匀、完整;与HGF+模型组相比,HGF组生精上皮厚度适中,可见密度适当的精子,各级细胞排列精密,层次分明。与对照组比较,模型组小鼠睾丸组织中丙二醛水平显著升高(P<0.01),抗氧化指标SOD、GSH水平显著降低(P<0.01),HGF+模型组中丙二醛水平升高(P<0.01);与模型组比较,HGF+模型组中小鼠睾丸组织中丙二醛水平显著降低(P<0.05),SOD、GSH水平水平显著升高(P<0.05);与HGF+模型组相比,HGF组中鼠睾丸组织中丙二醛水平降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠性激素LH和FSH水平显著升高(P<0.01)、T显著降低(P<0.01),HGF+模型组中LH和FSH水平升高(P<0.01)、T水平降低(P<0.01);与模型组比较,HGF+模型组中中T表达水平升高(P<0.05)、LH和FSH水平降低(P<0.05),HGF组中T表达水平明显升高(P<0.01),LH、FSH水平显著降低(P<0.01);与HGF+模型组相比,HGF组中T表达水平升高(P<0.05),LH和FSH水平降低(P<0.05)。结论HGF/c-Met信号通路对环磷酰胺引起的小鼠少弱精子症有一定保护作用,其机制与抗氧化保护作用、降低LH、FSH水平进而维持睾酮水平有关。

HGF/C-Met在舌部鳞状细胞癌的表达及其临床意义

目的:探讨肝细胞生长因子及其受体C-Met蛋白在舌鳞癌中的表达与其临床病理特征之间的关系。方法:通过免疫组化法检测10例正常舌组织、14例舌癌前病变及63例舌鳞癌中肝细胞生长因子、C-Met的表达,数据通过SPSS13.0统计软件非参数秩和检验统计。结果:肝细胞生长因子和C-Met在舌癌、舌癌前病变及正常舌组织的阳性表达率分别为84.1%、57.1%、40.0%和76.2%、35.7%、20.0%,其表达差异均具有统计学意义(P<0.05)。在中、低分化组(90.3%)及有淋巴结转移组(100%)舌鳞癌中肝细胞生长因子的阳性表达率显著高于高分化组(78.1%)及无转移淋巴结组(76.7%);在Ⅲ、Ⅳ期(82.1%)及有淋巴结转移组(85.0%)的舌鳞癌中C-Met阳性表达率显著高于Ⅰ、Ⅱ期(71.4%)及无转移淋巴结组(72.1%),表达差异均具有统计学意义(p<0.05);63例舌癌组织切片中46例HGF及C-Met都有阳性表达,其在舌鳞状细胞癌中的表达显著正相关(P<0.01)。结论:过度表达的HGF/C-Met可作为判断舌鳞状细胞癌生物学行为、恶性潜能和预测淋巴结转移趋势的参考指标。

HGF/c-met在小鼠毛囊生长周期中的表达

目的 HGF及其受体c-met是很多系统中间充质-上皮互相作用的主要的介导者,毛囊周期性生长是典型的间充质-上皮互作模型,为证实HGF/c-met信号在小鼠毛囊周期生长过程中是否发挥作用。方法本实验运用免疫组织化学的方法对HGF/c-met在ICR小鼠毛囊生长期、退化期和休止期进行组织定位。结果 HGF主要位于真毛乳头和皮脂腺,c-met主要位于毛基质、根鞘部和表皮。HGF及其受体在小鼠毛囊生长期表达量达到最高值,在退化期基本不表达,在休止期-生长期过渡时HGF及其受体表达量均上升。结论 HGF/c-met信号在ICR小鼠毛囊生长过程中起调控作用。

HGF/c-MET抑制剂治疗非小细胞肺癌的研究进展

分子靶向治疗在晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的治疗中起着越来越重要的作用。肝细胞生长因子/c-MET(hepatocyte growth factor/c-MET,HGF/c-MET)信号通路在NSCLC的发生、发展及NSCLC患者对表皮生长因子受体抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)的耐药方面都起着重要的作用,其已经成为NSCLC分子靶向治疗的又一热点。c-MET扩增或过表达被认为可能是继EGFR和间变淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合基因之后,NSCLC又一特征性的基因突变。HGF/c-MET抑制剂也在临床前的研究中取得良好的抗肿瘤效果。近期公布的一些II期/III期临床研究的数据显示,HGF/c-MET抑制剂可以使部分c-MET扩增或过表达的NSCLC患者生存获益。因此,本文就HGF/c-MET抑制剂治疗NSCLC的研究进展做一综述。

肺癌细胞中HGF/c-Met信号通路的异常调控及其靶向药物研究进展

c-MET是原癌基因c-MET编码的蛋白产物,是肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)受体,具有络氨酸激酶活性。c-Met的异常表达与肺癌的发生发展有着密切的关系。HGF与其c-Met受体结合后,活化c-Met酪氨酸激酶活性,能促进多种肿瘤细胞包括肺癌细胞的增殖、新生血管生成及肿瘤侵袭和迁移。针对HGF/c-Met信号转导通路的靶向治疗是目前肺癌治疗的新热点。本文将就HGF/c-Met信号转导通路在肺癌中异常调控及其靶向药物在肺癌中的研究进展进行综述。