HIC-1基因在肿瘤发生发展中的作用

HIC-1（hyperlnethylatedincancer1）基因定位于染色体17p13．3位点、肿瘤抑制基因p53远端，能编码一种转录抑制因子．该转录抑制因子识别的靶基因与细胞增殖、肿瘤生长、血管生成及侵犯等作用有关。研究表明，HIC-1基因的甲基化与乳腺癌的发生过程相关．且乳腺癌细胞中HIC-1表达缺失与p53的失活有协同作用。目前，应用甲基化酶抑制剂等恢复HIC-1基因的活性．作为治疗肿瘤的策略引起人们的广泛关注．对其作用机制以及调控分子网络的深入探讨将为肿瘤的治疗提供新的途径。

HIC-1基因在乳腺癌的表达及其对细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨癌高甲基化1(hypermethylated in cancer 1,HIC-1)基因在乳腺癌组织中的表达,以及恢复HIC-1基因表达对乳腺癌细胞增殖活力和凋亡的影响。方法:应用免疫组化方法测定乳腺癌组织芯片中80例癌组织的HIC-1蛋白表达,并分析其与临床病理的关系。应用甲基化特异性PCR法检测乳腺癌MDA-MB-231细胞中HIC-1基因启动子区域甲基化与基因表达的关系,5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-CdR)抑制甲基化后细胞HIC-1的表达水平变化。应用CCK-8方法和流式细胞仪测定恢复细胞HIC-1表达对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响。结果:正常乳腺上皮组织HIC-1免疫组化染色呈强阳性,平均染色积分9.00±0,乳腺癌组织HIC-1染色明显降低,平均染色积分为4.58±1.22(P<0.001)。HIC-1的蛋白表达与病人年龄、发生部位以及是否出现淋巴结转移无关,但与肿瘤的组织学类型相关(P<0.05)。MDA-MB-231细胞HIC-1基因启动子区域呈完全甲基化,用5μM的5-aza-CdR处理后可抑制HIC-1基因启动子甲基化、恢复HIC-1表达,并呈现浓度依赖性。恢复HIC-1基因表达抑制MDA-MB-231细胞增殖活性,促进MDA-MB-231细胞凋亡(P<0.05)。结论:乳腺癌组织HIC蛋白表达和癌细胞HIC-1基因表达明显降低,去甲基化药物可恢复肿瘤细胞内HIC-1基因表达,从而达到抑制肿瘤细胞增殖并促进细胞凋亡的目的。

抑癌基因HIC-1甲基化状态在宫颈癌Hela细胞中的研究

目的:观察特异性甲基转移酶抑制剂5-氮脱氧胞苷(5-Aza-deoxycytidine)对宫颈癌Hela细胞株中HIC-1、P53启动子的去甲基化作用,对细胞增殖的影响,探讨P53与HIC-1之间的关系,以及HIC-1基因甲基化状态在宫颈肿瘤中的作用。方法:分别使用5、10、20μmol/L的5-Aza-CdR作用Hela细胞株1、3、5d,采用半定量RT-PCR检测P53、HPV、HIC-1表达的改变;用四甲基偶氮唑蓝法和直接计数法检测细胞生长与增殖状况。结果:Hela细胞株经三种不同浓度的5-Aza-CdR作用5d后Hela细胞形态上无明显改变;经药物处理后,细胞生长活力(A490值)受到不同程度的抑制,其作用在所检测的浓度范围内随5-Aza-CdR浓度的增加而增加,呈量效关系;5-Aza-CdR可有效上调HIC-1、P53基因在Hela细胞中的表达,并随浓度递增;而5-Aza-CdR干预前后,HPV18E6mRNA表达无明显改变。结论:HIC-1可能作为抑癌基因在宫颈癌的发生、发展中发挥重要作用,甲基化是调控其表达下调的重要机制,通过去甲基化有可能抑制宫颈癌病程进展。

HIC-1基因及其甲基化在肿瘤中的研究

肿瘤高甲基化-1(HIC-1)基因是一种转录抑制因子,研究发现HIC-1基因具有转录抑制、诱导细胞凋亡、阻滞细胞生长等多种功能。HIC-1基因在大部分正常组织中表达,在多种肿瘤细胞中由于其高甲基化而表达低下,并且其甲基化在某些肿瘤的早期阶段,大部分肿瘤的发展及预后中起重要作用。通过逆转基因的甲基化可能为癌症治疗提供一种新的途径。深入研究HIC-1基因及其作用,将为肿瘤的早期诊断和治疗提供帮助。

17p13染色体上抑癌基因的研究进展

抑癌基因(tumor suppressor gene)也称抗癌基因(antloneogenes)，是一类可以抑制细胞增殖并能潜在抑制癌变的基因。但由于抑癌基因属于隐性癌基因，所以它的发现与分离难度较大。至今被确认的癌基因只有10多个。近年来，随着肿瘤的发生率日趋增高，人们对于抑癌基因的研究越来越重视，有关抑癌基因的定位、克隆。

血浆游离DNA中抑癌基因肿瘤高甲基化基因1甲基化检测方法的建立及其在乳腺疾病诊断中的意义

目的:通过建立血浆游离DNA中肿瘤高甲基化基因1(hypermethylated in cancer 1, HIC-1)甲基化检测技术,评估其作为体液活检诊断方法在乳腺良恶性疾病鉴别中的价值。方法:收集35份乳腺疾病患者(其25例乳腺癌,10例乳腺良性疾病)及10份健康志愿者的血液样本,分离、提取血浆中的游离DNA。采用亚硫酸氢盐测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)法,检测HIC-1基因启动子区域-636～-424 bp中16个CpG位点的甲基化水平。结果:在检测的16个CpG位点中,以-636～-617 bp中的4个位点甲基化最为明显。其中,乳腺癌组的这4个位点平均甲基化率为22.6%,而良性乳腺疾病组为8.5%,健康对照组为8.3%,3组间的差异有统计学意义(P<0.05)。进一步绘制受试者工作特征曲线(receiver operator characteristic curve, ROC曲线)进行分析,发现以这4个位点的平均甲基化率诊断乳腺癌时,其曲线下面积(area under the cure AUC)为0.794,证实其对乳腺癌具有一定的诊断价值。结论:检测血浆游离DNA中抑癌基因HIC-1启动子区甲基化水平,在乳腺癌诊断中有一定参考价值。

p15、p16和HIC—1基因启动子区甲基化在葡萄胎发生及恶变中的作用

葡萄胎是由于胎盘绒毛滋养细胞过度增殖而形成的一种病理变化，易发生恶变而形成侵蚀性葡萄胎或绒毛膜癌，后两者属于妊娠滋养细胞肿瘤（gestational trophoblastic neoplasm，GTN）。葡萄胎在我国发病率较高，其恶变机制尚不清楚。p15、p16基因是细胞周期的负性调节因子，可抑制细胞增殖，呈现抑癌基因的作用；HIC-1基因是重要的生长调节基因，其缺失或失活与多种肿瘤的发生有密切关系。目前，国内外关于葡萄胎中p15、p16和HIC-1基因启动子区甲基化状态的研究报道较少。