不同负荷低氧训练对大鼠腓肠肌HIF-1α基因表达的影响

目的:探讨不同负荷低氧训练对大鼠腓肠肌HIF-1α基因表达的影响。方法:选用6周龄雄性SD大鼠90只,经2周适应性训练后,筛选出60只,随机分为6组,每组10只:恒定负荷低住低练组(S-LoLo)、恒定负荷高住高练组(S-HiHi)、恒定负荷高住低练组(S-HiLo)和递增负荷低住低练组(P-LoLo)、递增负荷高住高练组(P-HiHi)、递增负荷高住低练组(P-HiLo)。采用水平动物跑台进行耐力训练。恒定负荷常氧训练强度为35m/min,恒定负荷低氧训练强度为30m/min。递增负荷常氧训练以35m/min训练1周后,在第2周内分2次递增负荷强度到39m/min,然后以此强度进行训练。递增负荷低氧训练以30m/min训练1周后,在第2周内分2次递增负荷强度到34m/min,然后以此强度进行训练,持续4周,每周训练5 d。各组均在4周末最后一次训练结束恢复24h后取材。采用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)技术检测腓肠肌HIF-1αmRNA水平。结果:S-HiLo组大鼠腓肠肌HIF-1αmRNA表达显著高于S-LoLo组和S-HiHi组(P<0.05,P<0.05);P-HiLo组大鼠腓肠肌HIF-1αmRNA显著低于S-HiLo组(P<0.05),P-HiHi组较S-HiHi组有所增加(+24%,P>0.05)。结论:恒定负荷高住低练比递增负荷高住低练更能促进大鼠腓肠肌HIF-1αmRNA表达;与恒定负荷高住高练相比,递增负荷高住高练对大鼠腓肠肌HIF-1αmRNA表达有一定的促进作用。

胃癌组织HIF-1α、Glut1及PCNA蛋白的表达及其临床意义

目的探讨胃癌组织中HIF-1α、Glut1及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色法检测HIF-1α、Glut1及PCNA在52例胃癌组织及20例正常胃黏膜的表达水平,并分析其与胃癌生物学行为的关系。结果HIF-1α、Glut1在正常胃黏膜均无表达,胃癌组织中的阳性率分别为69.2℅和75℅,与正常组织比较差异有统计学意义(P<0.01)。HIF-1α蛋白阳性表达率与TNM分期和淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.01);Glut1蛋白阳性表达率与分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.01);HIF-1α与Glut1表达呈正相关(r1=0.580,P<0.01);PCNA在胃癌中的表达(65.19%±20.82%)显著高于正常组织中的表达(15.50%±9.72%)(P<0.01)。HIF-1α、Glut1蛋白的异常表达与PCNA呈正相关(r2=0.723,P<0.01;r3=0.527,P<0.01)。结论胃癌组织HIF-1α、Glut1、PCNA蛋白过度表达在胃癌的发生、发展过程中可能具有协同作用,对于胃癌的诊断及预后判断有一定的指导意义。

缺氧对人乳腺癌MCF-7细胞miRNA-21表达的影响及与细胞增殖和凋亡的关系

[目的]观察缺氧环境下人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的情况,初步探讨缺氧对miRNA-21表达的影响及其与细胞增殖、凋亡的关系。[方法]CoCl2人工模拟缺氧环境,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测缺氧环境下细胞增殖状况,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)测定不同缺氧程度下HIF-1α和miRNA-21表达水平的变化。[结果]与常氧对照组相比较,CoCl2处理组的细胞明显受到抑制,但100、200μmol/L CoCl2处理组的细胞在一定时间内仍增殖,抑制率随缺氧时间和药物浓度增加而上升。流式细胞仪检测结果显示,CoCl2处理组细胞凋亡率高于对照组(P<0.05)。RT-PCR检测显示,200、400μmol/L的CoCl2处理组培养24h后细胞的HIF-1α和miRNA-21表达高于对照组(P<0.05)。[结论]人乳腺癌MCF-7细胞可在一定缺氧程度和时间内生长,缺氧诱导细胞凋亡率增加,缺氧能上调HIF-1α、miRNA-21的表达,使之进一步耐受缺氧,其机制可能是上调的miRNA-21通过多个信号通路调控靶基因进而影响癌细胞的增殖及凋亡。